Спосіб фунгіцидної і бактерицидної обробки ікри риб

Спосіб профілактичної обробки ікри риб шляхом обробки ікри риб насиченим комплексом 8-гідроксихіноліну, який відрізняється тим, що застосовують насичений комплекс 8-гідроксихіноліну з міддю в концентраціях 0,145-0,290 мг/л (0,001-0,002 мМ/л) 8-гідроксихіноліну та 0,39-0,78 мг/л CuSО4х5Н2О, ікру витримують в цьому розчині протягом 30-40 хвилин. (19) (21) 2000042246 (22) 19.04.2000 (24) 15.06.2001 (33) UA (46) 15.06.2001, Бюл. № 5, 2001 р. (72) Потрохов Олександр Спиридонович, Зіньковський Олег Георгійович, Євтушенко Микола Юрійович (73) Інститут гідробіології національної академії наук України 39332 0,002-0,001 мМ/л (0,145-0,290 мг/л) в запропонованому винаході. Через високий вміст 8гідроксихшоліну (1 мг/л) в прототипі його токсичний вплив на ікру спостерігався при експозиції 1560 хвилин. На відміну від прототипу в такому способі обробки ікри при дії насиченого комплексу ІІІ 8-гідроксихшоліну в концентраціях в 3,5 нижчих і експозиції від 30 хв. до трьох діб токсичного впливу не було виявлено. В основу винаходу поставлено задачу в створенні ефективного способу бактерицидної та фунгідної обробки ікри риб шляхом застосування насиченого комплексу 8-гідроксихіноліну з міддю або двовалентним залізом, для якого характерна висока токсичність по відношенню до бактерій та патогенних грибів при її відсутності до ембріонів риб. Використання запропонованих концентрацій насиченого комплексу 8-гідрохіноліну дозволяє забезпечити підвищення життєстійкості ікри риб. Причинно - наслідковий зв'язок між суттєвими ознаками винаходу та одержаним технічним результатом полягає в наступному: за рахунок внесення у воду комплексу 8-гідроксихіноліну з двовалентним залізом або міддю в еквімолярному співвідношенні досягається запобігання бактеріального та грибкового ураження ікри коропових риб та зростання їх життєздатності на 12-24%. Суттєвим є і те, що фунгіцидна активність та загальна токсичність 8-гідроксихінолину залежить від того, в якому комплексі з залізом чи міддю він знаходиться. N O Cu ІІІ ненасичений комплекс 8-гідроксихіноліну з двовалентною міддю в співвідношенні 1:1 Так, 8-гідроксихінолін не виявляє фунгіцидної активності і сам по собі в однаковій мірі слабо токсичний як для ембріонів риб, так і для грибів, завдяки тому, що, проникаючи в клітини міцелію сапролегнії або клітини ембріонів, активно зв’язує мідь, яка входить до складу багатьох ферментних комплексів окислювально-відновлювальних процесів. Комплекс ІІ, ненасичений двовалентними іонами, нетоксичний взагалі. Комплекс ІІІ виявляє високу фунгіцидну токсичність і нетоксичний для ембріонів риб. Витримування ікри навіть протягом 3 діб у розчині комплексу ІІІ не знижує життєздатність ембріонів при робочій експозиції в цьому розчині протягом 30 хв. Отже, ступінь насиченості комплексу двовалентними іонами визначає його фунгіцидні властивості і придатність до роботи з ікрою риб. Сутність винаходу полягає у вибірковій токсичності 8-гідроксихіноліну, яка досягається створенням насиченого комплексу з двовалентними іонами заліза або міді, який нетоксичний для ембріонів і виявляє високу фунгіцидну активність, завдяки якій поаереджається захворювання ембріонів сапролегніозом і суттєво підвищується їх життєздатність. При дослідженні фармакологічної активності насиченого комплексу 8-гідроксихіноліну було встановлено, що цей препарат виявляв високу фунгіцидну активність у незвичайно малих концентраціях 0,002-0,001 мМ/л (таблиця). Як свідчать наші дані, застосування препарату підвищувало життєздатність ікри при експозиції 30 хвилин на 12-24%, 3 діб - 2-11%. Незалежно від часу експозиції токсичної дії препарату при концентрації 0,001-0,002 мМ/л, яка виражалась би в зниженні життєздатності ікри не спостерігалась (таблиця). Найбільш результативним є застосування комплексу ІІІ при інкубуванні ікри низької якості та в несприятливих температурних та гідрохімічних умовах, які сприяють розвитку сапролегніозу ікри риб. При випробуванні запропонованого способу фунгіцидної і бактерицидної обробки ікри препарат застосовувався до різних видів риб: коропа, білого і строкатого товстолобика, білого та чорного амура. Ікра цих видів суттєво відрізняється багатьма важливими показниками: проникливості оболонки, терміну її інкубування, схильності до ураження сапролегнією та бактеріями. Позитивний ефект застосування препарату при обробці ікри фунгіцидна активність та відсутність помітної токсичності спостерігається незалежно від виду риб. Це свідчить про те, що запропонований препарат є малотоксичним і ефективним фунгіцидом, застосування якого при інкубуванні ікри значно підвищує життєздатність ембріонів. N OH 8-гідроксихінолін N O Cu O N ІІ ненасичений комплекс 8-гідроксихіноліну з двовалентною міддю в співвідношенні 2:1 2 39332 Приклад 1. Для бактерицидної і фунгіцидної обробки ікри коропа готується вихідний розчин 8-гідроксихіноліну (29 мг гідроксихіноліну, 78 мг CuSО4х5H2O - довести до 200 мл водою). Потім готують робочий розчин 8-гідрокснхіноліну, для цього в 10 л води вносять 10-20 мл вихідного розчину. Запліднену ікру коропа відмивають від клейкості протягом 40 хвилин в робочому розчині 8-гідроксихіноіліну з необхідною кількістю молока з розрахунку 1,0-1,5 кг ікри на 10 л розчину з концентрацією 0,145-0,290 мг 8-гідроксихіноліну/л. Потім продовжують інкубування ікри в апаратах Вейса. Приклад 2. Для бактерицидної і фунгіцидної обробки ікри чорного амура готується вихідний розчин 8-гідроксихіноліну (29 мг гідроксихіноліну, 78 мг CuSО4х5Н2О - довести до 200 мл водою). Потім готують робочий розчин 8-гідроксихіноліну, для цього в 10 л води вносять 10-20 мл вихідного розчину. Запліднену ікру чорного амура поміщають і обережно її перемішують пташиним пером протягом 30 хвилин в робочому розчині 8-гідроксихіноліну з розрахунку 1,0-1,5 кг ікри на 10 л розчину з концентрацією 0,145-0,290 мг 8-гідроксихіноліну/л. Потім ікру переносять в 100 л апарати ВНІПРГ або інші для подальшого її інкубування. Приклади наведені щодо використання препарату при інкубуванні ікри коропа та чорного амура як риб, що мають різні типи ікри (клейку і пелагофільну), суттєві відмінності в будові та проникливості оболонки ікри, часу інкубування, по різному уражуються грибами та бактеріями. Таблиця Впив 8-гідроксихіноліну (комплексу III) на життєздатність ікри коропових риб при короткочасній дії (протягом 30 хвилин) після запліднення ікри, в % до середнього контролю. Концент- Життєздатність ікри на стадії рухливого ембріону рація 8-гідрокс Білий товстоЧорний Короп ихінолілобик амур ну, мМ/л М m М m М m Контроль 100,0 1,9 100,0 1,8 100,0 4,2 0,1 96,4 2,5 97,4 1,8 93,2 3,2 0,05 101,7 4,9 98,3 1,2 98,3 1,8 0,01 102,7 3,4 102,2 3,2 104,5 5,8 0,05 111,7 2,4 106,8 1,7 106,8 1,7 0,002 116,8 4,7 112,7 2,1 118,4 2,3 0,001 124,7 5,2 112,5 1,9 119,7 2,4 0,0005 107,2 4,6 103,9 3,2 108,4 3,1 Спосіб втілюється наступним чином: в 200 мл мірну колбу вносять 29 мг 8-гідроксихіноліну і 78 мг сульфату міді (CuSО4x5Н2О, мідь подається в надлишку), розчиняють їх у воді, об'єм суміші доводять до 200 мл (співвідношення 8-гідроксихіноліну до міді 1,0:1,5, в мМ/л). Ікру (1-1,5 кг) обробляють 10 л розчину препарату в перерахунку на 8-гідроксихінолін в концентрації 0,145-0,290 мг/л, або ж 0,001-0,002 мМ/л (10-20 мл вихідного розчину на 10 л води) протягом 30 хвилин, потім ікру вміщують в інкубаційні апарати. Застосування способу пояснюється наступними прикладами: __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3