Застосовування способу визначення вмісту теофіліну як способу вимірювання концентрації сіднокарбу у водному розчині

Застосовування способу визначення вмісту теофіліну як способу вимірювання концентрації сіднокарбу у водному розчині. (19) (21) u201002472 (22) 05.03.2010 (24) 25.11.2010 (46) 25.11.2010, Бюл.№ 22, 2010 р. (72) БЕЛОНОЖКО МАКСИМ ВАСИЛЬОВИЧ, ВЯТКІН ОЛЕКСАНДР КОНСТЯНТИНОВИЧ, ДЗЯК ГЕОРГІЙ ВІКТОРОВИЧ, ДРОЗДОВ ОЛЕКСІЙ ЛЕОНІДОВИЧ, КАЧАНОВ СЕРГІЙ ОЛЕКСАНДРОВИЧ, КОШЕЛЕВ ОЛЕГ СТАНІСЛАВОВИЧ, АЛЬ НАСИР ЕЙЯД 3 му "Shimadzu LC-20AD", що складається з дегазатора "Shimadzu DGU-20A3", двох плунжерних насосів "Shimadzu LC-20AD", які забезпечують швидкість потоку елюенту 0,1-1,0 мл/хв., системи градієнту високого тиску і колонок "Маг-chereyNagel" 2 мм і довжиною 125 мм . Для їх роботи застосовують обернено-фазо-вий сорбент "Nucleosil 100-5 С18 HD", у вигляді гранул 5 мкм, передколонки 10 мм довжини й термостат "Shimadzu CTO-20A". Для забезпечення детекції використають спектрометричний діодноматричний детектор "Shimadzu SPD-M20A", що працює в діапазоні довжин хвиль 190-800 нм й елюент, приготовлений у вигляді суміші ацетонітрилу з водою при технологічно сприйнятливому співвідношенні їхніх масових частин. Для визначення концентрації проби сіднокарбу її піддають центрифугуванню у пластикових мікроконтейнерах "Епендорф". Надалі, не каламутячи осад, виділяють супернатант за допомогою піпеткового дозатора. Підготовлений таким чином водний розчин сіднокарбу вводять у хроматографічну систему та здійснюють хроматографування, з використанням як елюенту технологічно сприйнятливої водної суміші ацетонітрилу. Ідентифікацію хроматографічного піку сіднокарбу здійснюють за часом його утримання та ультрафіолетовим спектром, який має два максимуми на довжинах хвиль 194 і 207 нм, мінімум між ними на довжині хвилі 203 нм (див мал.) і характеризується середньостатистичним співвідношенням відгуків аналітичного сигналу 1200 од, на довжинах хвиль 194 і 207 нм. Застосування раніш відомого способу за новим призначення збільшує чутливість у 1,5-2,0 рази та розширює діапазон лінійних хроматографічних вимірювань. Його перспектива зв'язується з регуляцією терапевтичних навантажень на людину при використанні сіднокарбу. Центрифугування водного розчину в пластикових мікро-контейнерах типу "Епендорф" забезпечує видалення розчинених газоподібних речовин, осадження важких мінеральних компонентів та виділення супернатанту. Суміш ацетонітрилу з водою забезпечує спорідненість визначуваної субстанції та водного розчину з елюентом, утворює між періодами утримання виділених фракцій інтервали, достатні для вимірювання концентрацій сіднокарбу у пробі з 54648 4 реалізацією оптимальної чутливості та лінійності в широкому спектральному діапазоні, що вигідно відрізняє запропоноване застосування від наведеного аналога [1]. Зміна співвідношення компонентів елюенту в межах допуску допускає вплив на селективність, що сприяє збільшенню порогу чутливості і розширенню діапазону лінійних хроматографічних вимірювань концентрації сіднокарбу (Табл.). Приклад. Водний розчин сіднокарбу невідомої концентрації центрифугували у пластикових мікроконтейнерах "Епендорф" з кутовою швидкістю близько 6000 об/хв протягом 5 хв. Супернатант за допомогою мікродозатора переносили в інший мікро-контейнер "Епендорф", не каламутячи осад. Потім вводили 10 мкл супернатанту у хроматографічну систему "Shimadzu LC-20AD" і, під тиском потоку розчинників на вході у хроматографічну колонку до 10 МПа, здійснювали хроматографування, в ізократичному режимі, при співвідношенні води й ацетонітрилу 85:15 з об'ємною швидкістю 0,2мл/хвил. В діапазоні хвиль 190-360 нм фіксували спектр сіднокарбу. За хроматограмою піку сіднокарбу на довжині хвилі 194 нм вимірювали достовірну концентрацію останнього у пробі. Порівняння результатів вимірів за даними наведеного прикладу та відомого аналога [1] дозволило дійти висновку про збільшення чутливості процесу хроматографування у 1,5-2,0 рази та розширення діапазону лінійних вимірювань сіднокарбу. Наданий приклад використання відомого способу за новим призначенням доводить можливість повної екстракції складної лікарської форми сіднокарбу у водному розчині шляхом колоночної хроматографії за рахунок збільшення чутливості та розширення діапазону лінійних вимірювань. Його застосування у сфері контролювання якості медпрепаратів набуває значущості з-поза високої достовірності ідентифікації та вимірювань концентрації як параметра фармакологічної якості, що відповідає умові "промислова придатність". Характеристика застосування, яка зазначена у формулі, визначає межі його правового статусу та забезпечує відрізнення від об'єктів аналогічного призначення, а з урахуванням наведених тверджень, допускає можливість його кваліфікації як корисної моделі. Таблиця Технічна характеристика способу вимірювання концентрації сіднокарбу у водному розчині Показники вимірювання концентрації сіднокарбу Чутливість, мг/мл Лінійність діапазону, мг/мл Джерела інформації: 1. Способ определения состава лекарственной формы: Заяв. 97106926 России, МПК G01N 33/52 / Т.С.Малолеткина (Россия). -№97106926/14; заявл. 25.04.97; опубл. 20.04.99. На довжинах хвиль, нм 194 0,04 0,04-5,00 207 55,00 55-4500 2. Теофілін / http://ilch.vsmu.edu.ua /hplc/drug/l0002.htm (Сайт спільної медикобіологічної лабораторії Вінницького державного університету ім. М.І.Пирогова та Інституту поверхні НАН України); 10.09.2001. 5 Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська 54648 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601