8-оксихінолінію нітробензоати, що проявляють протизапальну та антимікробну активність

8-Оксихінолінію нітробензоати загальної формули: Корисна модель відноситься до хімікофармацевтичної промисловості, зокрема до індивідуальних хімічних сполук, а саме 8-оксихінолінію нітробензоатів, які проявляють протизапальну та антимікробну активність. У сучасній та світовій медицині існує велика кількість лікарських препаратів, які тим чи іншим шляхом впливають на мікроорганізми, серед яких певне місце належить сполукам на основі 8оксихіноліну. Але пошук нових протизапальних та антимікробних засобів залишається актуальною проблемою сучасної медицини через значну кількість медичних наслідків, викликаних інфекційними процесами різної етіології. В якості препаратів порівняння для заявленої групи нових сполук за фармакологічною активністю вибрані вольтарен, етакридину лактат та нітроксолін. Основною дією вольтарену є протизапальна, етакридину лактату та нітроксоліну антимікробна. (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Харьков: Торсинг, 1997. - T.1. - С. 172 Т.2. - С. 315, 420). Головними недоліками відомих препаратів є негативна побічна дія та висока токсичність. За прототип обраний 8-оксихінолінію галогенобензоат, а саме 8-оксихінолінію 2-аміно-5бромбензоат формули: Br C O O O 2N . + N OH R H NO NH2 H H OH H C O O (11) UA . (19) O 2N 58679 H , який виявляє протизапальну та антимікробну активність (Деклараційний патент на винахід 55263А, Україна МПК 7 C07D 63/08, C07D 215/02, заявл. 21.08.2002, опубл. 17.03.2003, Бюл. № 3). В основу корисної моделі поставлено завдання створення нових хімічних сполук, що проявляють високу протизапальну та антимікробну активність при низькій токсичності. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу нових хімічних сполук - 8-оксихінолінію нітробензоатів, загальної формули: + N (13) . + N OH C O O U 2 , де: R = NH2 або Сl, що проявляють протизапальну та антимікробну активність. R NO2 , де: R = NH2 або Сl. Речовини, які заявляються, утворені взаємодією 2-аміно-3,5-динітроабо 3,5-динітро-2хлорбензойної кислоти з 8-оксихіноліном у ацетоновому середовищі. 3 58679 Отримані сполуки - сірого кольору порошки, погано розчинні у гексані, добре розчинні у етанолі, діоксані, ДМСО, ДМФА. Структура сполук підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧ- спектроскопії. Запропоновані сполуки перевищують за зазначеними видами активності вольтарен, етакридину лактат та нітроксолін, крім того, описані сполуки значно менш токсичні препаратів порівняння. Корисна модель ілюструється наступними прикладами: Приклад 1. До 1,45 г (0,01 моль) 8оксихіноліну, розчиненому у 15 мл безводного ацетону, додали 2,27 г (0,01 моль) 2-аміно-3,5динітробензойної кислоти, також розчиненій у 15 мл безводного ацетону. Осад, що випав, відфільтровали та висушили. Одержано сполуку - 8-оксихінолінію 2-аміно3,5-динітробензоат (R=NH2). Вихід 3,57 г (96 %), Ттопл. 198-199° С, М.м. 372,30 Брутто-формула С16Н12Н4О7 Розраховано: С, % 51,62; Н,% 3,25; N,% 15,05. Знайдено: С, % 51,57; Н, % 3,20; N,% 15,02. ІЧ- спектр у КВг. см-1: 3463, 3205, 3103, 2926, 1631, 1596, 1532, 1403, 1325. Приклад 2. До 1,45 г (0,01 моль) 8оксихіноліну, розчиненому у 15 мл безводного ацетону, додали 2,23 г (0,01 моль) 2-хлор-3,5динітробензойної кислоти, також розчиненій у 15 мл безводного ацетону. Осад, що випав, відфільтровали та висушили. 4 Одержано сполуку - 8-оксихінолінію 2-хлор3,5-динітробензоат (R=Сl). Вихід 3,16 г (91 %), Ттопл. 130-131 °С, М.м. 346,73 Брутто-формула: С16Н11СlN2О7 Розраховано: С, % 55,43; Н,% 3,20; N,% 8,08. Знайдено: С, % 55,40, Н,% 3,18; N,% 8,05. ІЧ- спектр у КВг, см-1: 3120, 2963, 2931,1659, 1610, 1525, 730. Приклад 3. Вивчення протизапальної активності заявлених сполук проводилося на моделі карагенінового набряку у дослідах in vivo за наступною методикою: набряк визивали введенням 1 % розчину карагеніну ("Sigma", США) у об'ємі 0,05 мл субплантарно у ліву задню лапу щура. Досліджувані сполуки вводили перорально у вигляді водноолійної суспензії (розчинник твин-80, дистильована вода) у дозі 20 мг/кг. (Яковлева Л.В., Зупанец И.А. Использование модели каррагенинового стека у мышей при поиске противовоспалительных средств //Деп. в УкрНИИНТИ 07.07.87. -№ 1908. Ук. 87). Терапевтичний індекс (ТІ) розраховували по відношенню DL50 до DE50. Ступінь протизапальної активності і токсичності досліджених сполук визначали за критеріями: DE50, DL50, ТІ та відносний ТІ за вольтареном. Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 8-оксихінолінію 2-аміно-3,5динітробензоату (сполука № 1), 8-оксихінолінію 2хлор-3,5-динітробензоату (сполука № 2), вольтарену та сполуки за прототипом 8-оксихінолінію 2аміно-5-бромбензоату наведені у таблиці 1. Таблиця 1 Вивчення протизапальної активності та токсичність сполук № 1, № 2, вольтарену та сполуки за прототипом. >3000 >3200 360 Терапевтичний індекс (ТІ) 400 457,14 45 Відносний ТІ за вольтареном 8,88 10,16 1 2050 256,3 5,7 Сполука DE50,мг/кг DL50, мг/кг Сполука № 1 Сполука № 2 Вольтарен Сполука за пртотипом 7,5 7,0 8,0 8,0 За даними таблиці 1 сполуки № 1 та № 2 мають виражену протизапальну дію на рівні вольтарену, а за гострою токсичністю нижче за вольтарен у 8,88 та 10,16 рази відповідно. Приклад 4. Визначення антимікробної активності заявлених сполук проводилося за методом двократних серійних розведень у рідких харчових середовищах in vitro (Навашин СИ., Фомина И.П. Рациональная антибиотикотерапия. М.: Медицина, 1982. - С. 40-42). Для культивування бактерій використовувався амінопептид, попередньо розведений у два рази дистильованою водою, рН 7,2. Мікробне навантаження склало 105-106 мікробних тіл в 1 мл середовища. Для випробування використовувалися 8 штамів мікроорганізмів. Тест-культури мікробів вносили у пробірки з амінопептидом у кількості 5 млн. мікробних тіл у 1 мл розчину і додавали розчин досліджуваної сполуки, концентрацію якої поступово зменшували методом розведення. Вміст пробірок інкубували у термостаті протягом 18-20 годин при температурі 37 °С, після чого візуально визначали мінімальну пригнічуючу концентрацію (МПК) сполуки за інтенсивністю або відсутністю замутнення середовища у пробірках. Результати вивчення антимікробної активності 8-оксихінолінію 2-аміно-3,5-динітробензоату (сполука № 1), 8-оксихінолінію 2-хлор-3,5-динітробензоату (сполука № 2), етакридину лактату та сполуки за прототипом наведені у таблиці 2. 5 58679 6 Таблиця 2 Вивчення антимікробної активності сполук № 1, № 2, етакридину лактату та сполуки за прототипом. Сполука 1 0,8 0,75 №1 №2 Етакридину ла31,2 ктат Сполука за про0,9 тотипом * - Штами мікроорганізмів: 2 0,8 0,75 3 1,39 1,25 МПК (мкг/мл) * 4 5 1,39 12,5 1,25 12,5 6 12,5 12,5 7 6,0 6,0 8 6,0 5,0 15,6 31,2 62,5 125 250 125 250 0,9 1,8 1,8 15,6 15,6 7,8 7,8 1. Staphylococcus aureus, шт. АТСС 25923; 2. Bacillus subtilis, шт. АТСС 25922; 3. Echerichia coli, шт. АТСС 7241; 4. Pseudomonas aeruginosa, шт. АТСС 27853; За даними таблиці 2, сполуки №1 та №2 активніші етакридину лактату у відношенні до Staphylococcus aureus у 39-41,6 рази, Bacillus subtilis -у 19,5-20,8 рази, Echerichia coli у - 22,4524,96 рази, Pseudomonas aeruginosa - у 44,36-50 разів та у відношенні до мікроорганізмів роду Salmonella у 10-50 разів. Сполуки № 1 та № 2 також перевищують за антимікробною активністю сполуку за прототипом та етакридину лактат по відношенню до Echerichia coli, Bacillus subtilis та Pseudomonas aeruginosa. Комп’ютерна верстка І.Скворцова 5. Salmonella choleraesuis; 6. Salmonella thyphimurium; 7. Salmonella thyphisuis; 8. Salmonella dublin. Таким чином, заявлені сполуки 8-оксихінолінію 2-аміно-3,5-динітро-бензоат (сполука № 1) та 8оксихінолінію 2-хлор-3,5-динітробензоат (сполука № 2) виявляються малотоксичними сполуками, які мають виражену протизапальну та антимікробну активність. Заявлені сполуки можуть знайти застосування у медичній практиці в якості лікарських субстанцій у складі фармацевтичних препаратів для лікування інфекційних процесів різної етіології. Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601