Спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої в рослинній сировині та біологічному матеріалі
Формула / Реферат
Спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині та біологічному матеріалі, що включає вилучення суми алкалоїдів із досліджуваного матеріалу, очищення, концентрування, видалення розчинника, розчинення сухого залишку і вимірювання оптичної густини, який відрізняється тим, що кількісне визначення суми алкалоїдів чемериці білої здійснюють у перерахунку на вератридин методом спектрофотометрії.
Текст
Спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині та біологічному матері 3 нагріванні і додають кольорореагенти. Одночасно готують компенсаційний розчин. Обидва розчини витримують на водяній бані, охолоджують і вимірюють оптичну густину при 570 нм. [Державна Фармакопея України.-1-е вид. - Доповнення 2. - Харків: Державне підприємство "Науково-експертний центр", 2008.-620 с.]. Цей спосіб має ряд недоліків: складність методики, використання токсичних розчинників, а також неспецифічність реагенту. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої в рослинній сировині та біологічному матеріалі шляхом вилучення алкалоїдів із досліджуваного матеріалу, очищення, концентрування, видалення розчинника, розчинення сухого залишку і вимірювання оптичної густини, при цьому кількісне визначення суми алкалоїдів чемериці білої здійснюють у перерахунку на вератридин методом спектрофотометрії, що дасть змогу підвищити чутливість та точність виконання аналізу. Поставлена задача вирішується тим, що вилучення суми алкалоїдів чемериці білої із досліджуваного матеріалу проводять хлороформом, а після видалення розчинника, сухий залишок розчиняють в 0,1 М розчині хлористоводневої кислоти і визначають оптичну густину досліджуваного розчину з подальшим розрахунком кількісного вмісту суми алкалоїдів у перерахунку на вератридин. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає в тому, що спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої у перерахунку на вератридин методом спектрофотометрії з подальшими математичними розрахунками за формулою є простішим у виконанні, чутливішим і дозволить більш точніше визначити вміст алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині та біологічному матеріалі. Порівняльний аналіз з прототипом дає змогу зробити висновок, що рішення, яке пропонується, відповідає критерію "новизна". Спосіб здійснюють таким чином: алкалоїди чемериці білої із досліджуваного матеріалу вилучають хлороформом, витяжку очищають, концентрують, органічний розчинник видаляють, сухий залишок розчиняють у 0,1 М розчині хлористоводневої кислоти і ретельно перемішують. Вимірюють оптичну густину досліджуваного розчину при довжині хвилі 292±2 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм. Розрахунок суми алкалоїдів чемериці білої здійснюють за формулою: A Co N X , де Ao m А - оптична густина досліджуваного зразка; Co - концентрація стандартного зразка, г/мл; N - розведення, мл; Ао - оптична густина стандартного зразка; m - наважка, г. Приготування розчину стандартного зразка. Точну наважку вератридину вносять у мірну колбу на 100 мл, розчиняють у 0,1 М розчині хлористоводневої кислоти, об'єм доводять до мітки і ретельно перемішують. Вимірюють оптичну густину 61723 4 при довжині хвилі 292±2 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм. Приклад 1. Кількісне визначення суми алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині. 4,0 г (точну наважку) сировини чемериці білої подрібнену до 0,5-1 мм вносять в колбу з пришліфованим корком ємкістю 250 мл, змочують 10 мл 25 % розчином аміаку і залишають на 5 хв. Додають 120 мл хлороформу, збовтують на вібраційному пристрої 2 год. Хлороформну витяжку фільтрують, відкинувши перші 10 мл фільтрату, упарюють до 1/10 об'єму, додають 10 % розчин хлористоводневої кислоти до рН=2,0 та відділяють водну фракцію. До отриманої водної фракції додають 25 % розчин аміаку до рН=8,0 і екстрагують хлороформом. Хлороформну фракцію фільтрують через паперовий фільтр з натрію сульфатом безводним, попередньо змоченим хлороформом, в мірну колбу ємністю 100 мл. Фільтр промивають 10 мл хлороформу, долучають фільтрат до витяжки, об'єм якої доводять до мітки. 1 мл хлороформної витяжки вносять у колбу на 50 мл і висушують. Сухий залишок розчиняють у 10 мл 0,1 М розчині хлористоводневої кислоти, кількісно переносять в мірну колбу на 25 мл і доводять до мітки тим же розчинником. Розчин ретельно перемішують і визначають оптичну густину при довжині хвилі 292±2 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм. Паралельно вимірюють оптичну густину розчину стандартного зразка. Кількісний вміст суми алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині розраховують за формулою: A Co N X , де Ao m А - оптична густина досліджуваного зразка; Со - концентрація стандартного зразка, г/мл; N - розведення; Ао - оптична густина стандартного зразка; m - наважка сировини, г. Приклад 2. Кількісне визначення суми алкалоїдів чемериці білої у біологічному матеріалі. Для кількісного визначеннясуми алкалоїдів у біологічному матеріалі готують модельні суміші крові, сечі та гомогенізату з витяжкою із кореневищ з коренями чемериці білої. Для цього до 10 мл відповідної біологічної рідини додають 2,00 мл розчину суми алкалоїдів в 0,1 М розчині кислоти хлористоводневої, ретельно перемішують і залишають на годину. Готують контрольні суміші біологічних рідин з розчинником (0,1 М розчин кислоти хлористоводневої), дослідження яких проводять паралельно з основними. До 10 мл модельної суміші з алкалоїдами чемериці білої додають 0,1 М розчин кислоти хлористоводневої до рН = 2 і тричі екстрагують діетиловим ефіром порціями по 5 мл. Ефірні витяжки відділяють та в подальшому не досліджують. До водного залишку додають 25 % розчин аміаку до рН=8 і тричі екстрагують хлороформом порціями по 10 мл (при утворенні стійких емульсій застосовують центрифугування (5 хв при 5000 об./хв)). Хлороформні витяжки об'єднують та фільтрують через паперовий фільтр з 1 г натрію сульфату 5 61723 безводного у колбу на 50,0 мл, і висушують. Сухий залишок розчиняють у 10 мл 0,1 М розчину хлористоводневої кислоти, кількісно переносять в мірну колбу на 25 мл і доводять до мітки тим же розчинником. Розчин ретельно перемішують і визначають оптичну густину при довжині хвилі 292±2 нм в кюветі з товщиною шару 10 мм. Паралельно вимірюють оптичну густину розчину стандартного зразка. Кількісний вміст суми алкалоїдів чемериці білої у рослинній сировині розраховують за формулою: A Co N X , де Ao m 6 Со - концентрація стандартного зразка, г/мл; N - розведення; Ао - оптична густина стандартного зразка; m - наважка сировини, г. Спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої в рослинній сировині та біологічному матеріалі методом спектрофотометрії, що пропонується, є простішим у виконанні, чутливішим і дозволить більш точніше визначити вміст алкалоїдів. Таким чином, запропонований спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої в рослинній сировині та біологічному матеріалі може знайти застосування у фармацевтичному та судовотоксикологічному аналізі. А - оптична густина досліджуваного зразка; Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійськоюMethod for determination of sum of alkaloids of white hellebore in herbal raw material and biological material
Автори англійськоюMelnyk Halyna Ivanivna
Назва патенту російськоюСпособ определения суммы алкалоидов чемерицы белой в растительном сырье и биологическом материале
Автори російськоюМельник Галина Ивановна
МПК / Мітки
МПК: A61K 31/56, G01N 33/00
Мітки: чемериці, суми, визначення, било, спосіб, алкалоїдів, рослинній, сировини, матеріали, біологічному
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/3-61723-sposib-viznachennya-sumi-alkalodiv-chemerici-bilo-v-roslinnijj-sirovini-ta-biologichnomu-materiali.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб визначення суми алкалоїдів чемериці білої в рослинній сировині та біологічному матеріалі</a>
Попередній патент: Пневматичний диференціатор
Наступний патент: Спосіб лікування мікозу стоп
Випадковий патент: Пристрій для фіксації, підйому та перенесення листових матеріалів