Спосіб одержання біомаси біфідобактерій

1. Спосіб одержання біомаси біфідобактерій, що включає внесення до живильного середовища інокуляту, культивування біомаси у живильному середовищі при температурі 38±1°С і коригуванні рН, який відрізняється тим, що як інокулят використовують культуру другої генерації маточної культури B.bifidum, як живильне середовище використовують біфідум-середовище, при цьому куль C2 1 3 75475 4 одержання біомаси бактерій В,bifidum, в якому проб, триває протягом 3-7хв. при 70-100 об./хв. В завдяки підбору елективного середовища та умов процесі культивування біомаси рН підтримують на вирощування скорочується тривалість процесу рівні 5-6,8. Коригування рН здійснюють 5-10%-им нарощування біомаси та зменшується кількість розчином аміаку. Кінець процесу культивування баластних речовин. встановлюють за оптичною щільністю. Поставлена задача вирішується запропоноваНарощування біомаси займає 7-10 годин. ним способом одержання біомаси бактерій Кількість біомаси після концентрування станоB.bifidum, що включає внесення до живильного вить 4-11 кг. Баластні речовини відсутні. середовища інокуляту, культивування біомаси у Приклад 1 живильному середовищу при температурі 38±1°С і Ліофілізований штам B.bifidum №1 з ампули коригуванні рН, в якому як інокулят використовурозводили біфідум-середовищем методом десятиють культуру другої генерації маточної культури кратних розведень. У флакон, заповнений на B.bifidum, як живильне середовище використовучверть біфідум-середовищем, вносили посіви у ють біфідум-середовище, при цьому культивуванвигляді окремих ізольованих колоній. Витримували ня біомаси проводять у атмосфері аргону при тиспротягом 42 годин при температурі близько 38°С. ку не більш ніж 0,3атм и при коригуванні рН Стороння мікрофлора в мазках і контрольних сездійснюють перемішування. Зазначене редовищах в колонії першої генерації маточної перемішування здійснюють протягом 3-7 хв. при культури B.bifidum відсутня. 70-100 об./хв. Типові колонії першої генерації пересівали у Для одержання інокуляту першу та другу другий флакон, наповнений на чверть біфідумгенерації маточної культури B.bifidum вирощують у середовищем. Посіви витримували при живильному середовищу, де як таке використовутемпературі близько 38°С протягом 38 годин. Стоють біфідум-середовище, причому для вирощуроння мікрофлора в мазках і контрольних середовання використовують скляну ємність. вищах в колонії другої генерації маточної культури Для коригування рН, яке підтримують на рівні B.bifidum відсутня. 5-6,8, використовують 5-10%-ий розчин аміаку. До біору у підготовлене біфідум-середовище Експериментально було виявлені умови, що є масою 100л і температурою близько 38°С вносили найбільш сприятливими для нарощування біомаси одержану культуру другої генерації маточної кульбактерій B.bifidum та використання живильного тури B.bifidum. Інокулят подавали за допомогою середовища. Було встановлено, що нарощування тиску, після чого у біору було створено тиск 0,3атм біомаси B.bifidum у біфідум-середовищі в інертній інертним газом аргоном. Культивування біомаси атмосфері при пониженому тиску і обмеженому проводили при температурі близько 38°С. Воднеперемішуванні проходить енергійно і продуктивно вий показник рН підтримували на рівні 5,5-6 за без утворення баластних речовин. допомогою 10 %-ого розчину аміаку. Під час кориСпосіб здійснюється таким чином. гування рН та відбору проб здійснювали Ліофілізований штам B.bifidum N 1 з ампули перемішування протягом 5хв. при 90 об./хв. Весь розводять біфідум-середовищем методом десятиінший процес вирощування біомаси проходив без кратних розведень. перемішування. Використане живильне середовище біфідумНарощування біомаси проходив 7 годин 20хв. середовище має такий склад, г/л: панкреатичний Одержану біомасу концентрували шляхом гідролізат казеїну - 30,0; екстракт пекарських центрифугування при 10 об./хв. дріжджів - 5,0; глюкоза - 7,5; лактоза - 2,5; цистеїн Кількість біомаси після концентрування - 9,5кг. - 0,5; натрій хлористий - 2,5; магній сірчанокислий Баластні речовини відсутні. 0,5; кислота аскорбінова - 0,5; натрій оцтовокислий Приклад 2 - 0,3; агар -0,75. Ліофілізований штам B.bifidum N 1 з ампули Посіви у вигляді окремих ізольованих колоній розводили біфідум-середовищем методом десятивитримують у скляній ємності, наповненій на кратних розведень. У флакон, заповнений на чверть, при температурі 38±1 °С протягом 36-48 чверть біфідум-середовищем, вносили посіви у годин. При відсутності сторонньої мікрофлори в вигляді окремих ізольованих колоній. Витримували мазках і контрольних середовищах, типові колонії протягом 37 годин при температурі близько першої генерації пересівають у іншу скляну 38,5°С. Стороння мікрофлора в мазках і контрольємність, наповнену на чверть біфідумних середовищах в колонії першої генерації середовищем. Посіви витримують при температурі маточної культури B.bifidum відсутня. 38±1°С протягом 36- 48 годин. При підтвердженні Типові колонії першої генерації пересівали у чистоти другу генерацію культури використовують другий флакон, наповнений на чверть біфідумяк інокулят. середовищем. Посіви витримували при До біору об'ємом 250 дм3 у підготовлене температурі близько 38°С протягом 36 годин. Стобіфідум-середовище (маса - 60-140 л, температуроння мікрофлора в мазках і контрольних середора 37-38°С) вносять інокулят - культуру другої вищах в колонії другої генерації маточної культури генерації маточної культури B.bifidum N 1. Інокулят B.bifidum N 1 відсутня. подається за допомогою тиску чи втягується за До біору у підготовлене біфідум-середовище допомогою вакууму, після чого у біору створюють масою 80 л і температурою близько 38,5°С вноситиск не більш ніж 0,3 атм інертним газом аргоном. ли одержану культуру другої генерації маточної Культивування біомаси проводять при температурі культури B.bifidum. Інокулят всмоктували за допо38+1°С і коригуванні рН. Перемішування, яке могою вакууму, після чого у біорі було створено здійснюють під час коригування рН та відбору тиск 0,3атм інертним газом аргоном. Культивуван 5 75475 6 ня біомаси проводили при температурі близько проходив без перемішування. 38,5°С. Водневий показник рН підтримували на Нарощування біомаси проходив 8 годин 25хв. рівні 6,0-6,5 за допомогою 10 %-ого розчину Одержану біомасу концентрували шляхом аміаку. Під час коригування рН та відбору проб центрифугування при 10 об./хв. здійснювали перемішування протягом 7 хв. при 90 Кількість біомаси після концентрування - 8,7кг. об./хв. Весь інший процес вирощування біомаси Баластні речовини відсутні. Комп’ютерна верстка М. Клюкін Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601