Лікарські сполуки, що модулюють активність піруваткінази-м2, композиції на їх основі та застосування при лікуванні раку

Реферат: У винаході представлені сполуки загальної формули: (R3)n R 1 L N h N g W X Y D Z O O S D 1 A O , в якій А є хінолінілом, де вказані сполуки модулюють активність піруваткінази-М2 (ПКМ2). Крім того, описані композиції на їх основі та способи застосування цих сполук при лікуванні раку. UA 107667 C2 (12) UA 107667 C2 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 ЗАЯВКА ПРО ВСТАНОВЛЕННЯ ПРІОРИТЕТУ Дана заявка претендує на пріоритет за заявками U.S.S.N. 61/221,430, що подана 29 червня 2009 року й U.S.S.N. 61/292,360, що подана 5 січня 2010 року, кожна з яких включена в дану заявку у всій повноті за допомогою посилання. РІВЕНЬ ТЕХНІКИ Ракові клітини залежать насамперед від гліколізу, необхідного для вироблення клітинної енергії, і від біохімічних посередників, необхідних для біосинтезу ліпідів і нуклеотидів, тоді як більшість "нормальних" клітин тканин у дорослих використовують аеробне дихання. Це принципове розходження в метаболізмі ракових і нормальних клітин, назване ефектом Варбурга, було використано для цілей діагностики, однак дотепер не застосовувалося в терапії. Піруваткіназа (ПК) є метаболічним ферментом, що перетворює під час гліколізу фосфоенолпіруват у піруват. У ссавців існує чотири ізоформи ПК: L і R ізоформи експресуються в печінці й еритроцитах, ізоформа М1 експресується в більшості тканин дорослого, а ізоформа М2 є сплайс-варіантом М1, що експресується під час ембріонального розвитку. Всі пухлинні клітини експресують винятково ембріональну ізоформу М2. Добре відома відмінність ізоформ М1 і М2 полягає в тому, що М2 є низькоактивним ензимом, що залежить від аллостеричної активації гліколітичним посередником, фруктозою-1, 6-діфосфатом (ФДФ), тоді як М1 є конститутивно активним ферментом. Всі пухлинні клітини експресують винятково ембріональну ізоформу М2 піруваткінази, що наводить на припущення про ПКМ2 як про можливо цільове лікування раку. ПКМ2 також експресується жировою тканиною й активованими Т-клітинами. Таким чином, модуляція (наприклад, інгібування або активація) ПКМ2 може бути ефективною при лікуванні, наприклад, ожиріння, цукрового діабету, аутоімунних станів і проліферативних захворювань, зокрема, доброякісній гіперплазії передміхурової залози (ДГПЖ). Існучі інгібітори піруваткінази невиборчі, що затруднює лікування захворювань, пов'язаних з функцією піруваткінази. Крім того, зв'язування фосфотірозинпептиду із ПКМ2 приводить до відділення ФДФ від ПКМ2 і конформаційним змінам ПКМ2 з активної тетраметричної форми в неактивну. Сполуки, що зв'язують ПКМ2 і блокують фермент в активній конформації, приведуть до втрати аллостеричного контролю ПКМ2, необхідного для скидання біохімічних посередників від процесу гліколізу до процесу біосинтезу нуклеотидів і ліпідів. Таким чином, активація ПКМ2 (тобто активатори ПКМ2) також може інгібувати ріст і проліферацію ракових клітин, активованих імунних клітин і жирових клітин. Має місце безперестанна необхідність у нових способах лікування таких захворювань, як рак, цукровий діабет, ожиріння, аутоімунні порушення, проліферативні захворювання (наприклад, ДГПЖ) і інших захворювання, що мають відношення до функції піруваткінази (наприклад, ПКМ2). СУТНІСТЬ ВИНАХОДУ У цьому документі описані сполуки, що модулюють піруваткіназу М2 (ПКМ2), а також їх фармацевтично прийнятні солі, сольвати й гідрати, наприклад, сполуки, що активують ПКМ2. Також представлені фармацевтичні композиції, що включають запропоновані у винаході сполуки, і застосування таких композицій у складі способів лікування захворювань і станів, опосередкованих функцією піруваткінази (наприклад, функцією ПКМ2), включаючи злоякісні захворювання, цукровий діабет, ожиріння, аутоімунні порушення й доброякісну гіперплазію передміхурової залози (ДГПЖ). В одному з варіантів здійснення даного винаходу приводиться фармацевтична композиція, що включає сполуки або фармацевтично прийнятну сіль формули (I): (I) 50 55 де: W, X, Y і Z - кожний незалежно вибраний зі СН або N; 1 b D і D - незалежно вибраний зі зв'язку або NR ; А є не обов'язково заміщеним арилом або не обов'язково заміщеним гетероарилом; C C C C C C b L є зв'язком, -С(О)-, -(CR R )m-, -ОС(О)-, - (CR R )m-ОС(О)-, - (CR R )m-С(О)-, -NR C(S)- або b 1 -NR C(О)- (де місце зв'язку з R перебуває на лівій стороні); 1 UA 107667 C2 1 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 R вибраний з алкілу, циклоалкілу, арилу, гетероарилу й гетероциклілу; кожний з яких d заміщений 0-5 входженням R ; 3 а кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу, гідроксілу й - OR , або двох 3 сусідніх R , узятих разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково а заміщений гетероцикл; кожний R незалежно вибраний з алкілу, ацилу, гідроксіалкілу й галоалкілу; b кожний R незалежно вибраний з водню й алкілу; с с кожний R незалежно вибраний з водню, гало, алкілу, алкоксі й галоалкоксі; або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений циклоалкіл; d кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, галоалкоксі, алкілу, алкінілу, нітро, ціано, а a a a a b a d гідроксіл, -С(О)R , -ОС(О)R , -C(O)OR , -SR , -NR R й –OR , або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений гетероцикліл; n дорівнює 0, 1 або 2; m дорівнює 1, 2 або 3; h дорівнює 0, 1, 2; і g дорівнює 0, 1 або 2. В іншому варіанті здійснення даного винаходу приводиться спосіб лікування або профілактики захворювання, стани або порушення (наприклад, лікування), як описано в цьому документі, включаючи застосування представленої тут сполуки, її фармацевтично прийнятноїй солі або її фармацевтичної композиції. В інших варіантах здійснення даного винаходу приводиться спосіб модулювання (наприклад, підвищення або зниження) рівня активності ПКМ2 і/або гліколізи (наприклад, модулювання ендогенної здатності клітини пацієнта пригнічувати ПКМ2) у пацієнтів, що потребують у цьому. Спосіб включає етап застосування ефективної дози сполуки, описаної в цьому документі, у пацієнта, що потребує в неї, модулюючи, таким чином, (наприклад, підвищуючи або знижуючи) рівень активності ПКМ2 і/або гліколізи в пацієнта. У деяких варіантах сполуки або фармацевтичні композиції, описані в цьому документі, використовують для підтримки ПКМ2 в активній конформації або для активування піруваткінази в клітинах, що розмножуються, як спосіб напрямку метаболітів глюкози в пацієнта в катаболічні, а не анаболічні процеси. В іншому варіанті здійснення даного винаходу приводиться спосіб придушення клітинної проліферації в пацієнта, що потребує в цьому. Спосіб включає етап застосування ефективної дози сполуки, описаної в цьому документі, у нужденні в цьому пацієнта, ингибируя, таким чином, проліферацію клітин у пацієнта. Наприклад, за допомогою цього способу можна інгібувати ріст трансформованої клітини, наприклад, ракової клітини, або в загальному пригнічувати ріст ПКМ 2-залежної клітини, що перетерплює аеробний гліколіз. В іншому варіанті здійснення даного винаходу приводиться спосіб лікування у пацієнта, що потребує в неї, що страждає від або схильних до захворювань або порушень, асоційованих з функцією ПКМ2. Спосіб включає етап застосування ефективної дози сполуки, описаної в цьому документі, у пацієнта, що потребує в цьому, здійснюючи, таким чином, лікування, профілактику або поліпшуючи стан захворювання або порушення в пацієнта. У певному варіанті здійснення винаходу модулятор представлений у складі фармацевтичної композиції. У певному варіанті здійснення спосіб включає ідентифікацію або вибір пацієнта, що одержить користь від модулювання (наприклад, активації) ПКМ2. Наприклад, для лікування раку, асоційованого з функцією ПКМ2, пацієнт може бути встановлений на підставі рівня активності ПКМ2 у його клітинах. В іншому варіанті здійснення даного винаходу вибраний пацієнт страждає або сприйнятливий до порушень або захворювань, установлених у цьому документі, таких як порушення, що характеризуються небажаним клітинним ростом або проліферацією, наприклад, рак, ожиріння, цукровий діабет, атеросклероз, рестеноз і аутоімунні захворювання. В іншому варіанті здійснення даного винаходу сполуки, описані в цьому документі, застосовуються в дозуванні й із частотою, достатньою для посилення продукції лактату або окисного фосфорилювання. КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР На фігурі в таблиці представлені дані про типові сполуки й відповідну активність сполуки. ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ Докладна інформація про склад і розташування компонентів, викладена в наступному далі описі або проілюстрована на фігурах, не є обмежуючою. Варіанти здійснення даного винаходу можуть здійснюватися на практиці або виконуватися різними способами. До того ж, використовувані в цьому документі формулювання й термінологія мають на меті опис і не 2 UA 107667 C2 5 10 повинні розглядатися як обмежуючі. Використання слів "включати", "містити в собі" або "мати", "містити", "утягувати" і їхніх варіацій у цьому документі має на увазі охоплення перерахованих далі пунктів і еквівалентів, а також додаткових пунктів. Сполуки Описані в цьому документі сполуки й композиції модулюють ПКМ2, зокрема, активують ПКМ2. Сполуки, що модулюють ПКМ2, наприклад, що активують ПКМ2,можуть бути використані для лікування таких порушень, як новоутворення (наприклад, рак) або порушень із боку жирової клітковини (наприклад, ожиріння). В одному з варіантів здійснення даного винаходу приводиться сполука формули (I) або її фармацевтично прийнятна сіль, або фармацевтична композиція, що включає сполуку формули (I) або її фармацевтично прийнятну сіль: (I) 15 20 25 30 35 де: W, X, Y і Z - кожний незалежно вибраний зі СН або N; 1 b D і D - незалежно вибрані зі зв'язку або NR ; А є не обов'язково заміщеним арилом або не обов'язково заміщеним гетероарилом; с с с с с с b L є зв'язком, -С(О)-, -(CR R )m-, -ОС(О)-, -(CR R )m-ОС(О)-, - (CR R )m-С(О)-, -NR C(S)- або b 1 NR C(О)- (де точка сполуки з R перебуває на лівій стороні); 1 R вибраний з алкілу, циклоалкілу, арилу, гетероарилу й гетероциклілу; кожний з яких d заміщений 0-5 входженням R ; 3 а кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу, гідроксілу й - OR або двох 3 сусідніх R , що узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений гетероцикл; а кожний R незалежно вибраний з алкілу, ацилу, гідроксіалкілу й галоалкілу; b кожний R незалежно вибраний з водню й алкілу; с с кожний R незалежно вибраний з водню, гало, алкілу, алкоксі й галоалкоксі або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений циклоалкіл; d кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, галоалкоксі, алкілу, алкінілу, нітро, ціано, а a a a a b a d гідроксіл, -С(О)R , -ОС(О)R , -C(O)OR , -SR , -NR R й –OR , або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений гетероцикліл; n дорівнює 0, 1 або 2; m дорівнює 1, 2 або 3; h дорівнює 0, 1, 2; і g дорівнює 0, 1 або 2. У певних варіантах здійснення даного винаходу приводиться сполука формули (I) або її фармацевтично прийнятна сіль: 40 45 50 (I) де: W, X, Y і Z - кожний незалежно вибраний зі СН або N; 1 b D і D - незалежно вибрані зі зв'язку або NR ; А є не обов'язково заміщеним біциклічним гетероарилом; с с с с с с b L є зв'язком, -С(О)-, -(CR R )m-, -ОС(О)-, -(CR R )m-ОС(О)-, -(CR R )m-С(О)-, -NR C(S)- або b NR C(О)-; 1 R вибраний з алкілу, циклоалкілу, арилу, гетероарилу й гетероциклілу; кожний з яких d заміщений 0-5 входженням R ; 3 а кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу, гідроксілу й - OR або двох 3 сусідніх R , що узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не 3 UA 107667 C2 а 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 обов'язково заміщений гетероцикл; кожний R незалежно вибраний з алкілу, ацилу, гідроксіалкілу й галоалкілу; b кожний R незалежно вибраний з водню й алкілу; с с кожний R незалежно вибраний з водню, гало, алкілу, алкоксі й галоалкоксі або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений циклоалкіл; d кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, галоалкоксі, алкілу, алкінілу, нітро, ціано, а a a a a b a d гідроксіл, -С(О)R , -ОС(О)R , -C(O)OR , -SR , -NR R й –OR , або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений гетероцикліл; n дорівнює 0, 1 або 2; m дорівнює 1, 2 або 3; h дорівнює 0, 1, 2; і g дорівнює 0, 1 або 2. У деяких варіантах здійснення даного винаходу h дорівнює 1. У деяких варіантах здійснення даного винаходу h дорівнює 2. У деяких варіантах здійснення даного винаходу g дорівнює 1. У деяких варіантах здійснення даного винаходу g дорівнює 2. У деяких варіантах здійснення даного винаходу й h, і g рівні 1. У деяких варіантах здійснення даного винаходу h дорівнює 1, а g дорівнює 2. У деяких варіантах здійснення даного винаходу g дорівнює 1, а h дорівнює 2. У деяких варіантах здійснення даного винаходу W, X, Y і Z є СН. У деяких варіантах здійснення даного винаходу, принаймні, один з W, X, Y і Z є N. У деяких варіантах здійснення даного винаходу, принаймні, два з W, X, Y і Z є N. У деяких варіантах здійснення даного винаходу, принаймні, три з W, X, Y і Z є N. У деяких варіантах здійснення W, X, Y, Z і атоми вуглецю, до яких вони приєднані, формують кільце піриділу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу W, X, Y, Z і атоми вуглецю, до яких вони приєднані, формують кільце піримідилу. У деяких варіантах здійснення даного винаходу W, X, Y, Z і атоми вуглецю, до яких вони приєднані, формують кільце піридазину. У деяких варіантах здійснення даного винаходу W, X і Y є СН, а Z є N. У деяких варіантах здійснення даного винаходу X, Y і Z є СН, а W є N. b 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу D є NR , а D є зв'язком. У деяких варіантах 1 b здійснення даного винаходу D є зв'язком, а D є NR . У деяких варіантах здійснення даного 1 b b винаходу й D, і D є NR . У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є алкілом b (наприклад, метилом або етилом). У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є воднем (Н). У деяких варіантах здійснення даного винаходу А є 9-10-членним біциклічним гетероалкілом (наприклад, хіназолінил, хіноксалінил, циннолінил, ізохіноліл, індоліл, бензоксазоліл, пірролопіриділ, пірролопіримідил, бензімідозалил, бензтіазоліл або бензоксазоліл). У деяких варіантах здійснення даного винаходу А є N-утримуючим 9-10-членним біциклічним гетероарилом. У деяких варіантах А є не обов'язково заміщеним хіназолінилом (наприклад, 8хіназолінил або 4-хіназолінил), не обов'язково заміщеним хіноксалінилом (наприклад, 5хіноксалінил), не обов'язково заміщеним хінолінилом (наприклад, 4-хінолінил або 8-хінолінил), не обов'язково заміщеним циннолінилом (наприклад, 8-циннолінил), не обов'язково заміщеним ізохінолінилом, не обов'язково заміщеним індолілом (7-індоліл), не обов'язково заміщеним бензоксазолілом (наприклад, 7-банзоксазоліл), не обов'язково заміщеним пірролопіриділом (наприклад, 4-пірролопіриділ), не обов'язково заміщеним бензімідазолілом (наприклад, 7бензімідазоліл), не обов'язково заміщеним бензтіазолілом (наприклад, 4-бензтіазоліл, 2-метил4-бензтіазоліл або 7-бензтіазоліл) або не обов'язково заміщеним бензоксазолілом (наприклад, 4-бензоксазоліл). У деяких варіантах здійснення даного винаходу А не обов'язково заміщений на галоген. У деяких варіантах А є . У деяких варіантах А є . У деяких варіантах А в вибірково заміщений на . У деяких варіантах А є . У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є зв'язком. c c У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є –(CR R )m- і m дорівнює 1. У деяких с с аспектах цих варіантів кожний R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів один R є алкілом 4 UA 107667 C2 с 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 с (наприклад, метилом або етилом), а інший R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів один R с є галогеном (наприклад, фтором), а один R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів обидва c c R є галогенами (наприклад, фтором). У деяких аспектах цих варіантів один R є алкоксі c c (наприклад, метоксі або етоксі), а один R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів обидва R є c алкоксі (наприклад, метоксі або етоксі). У деяких аспектах цих варіантів два R , узяті разом з вуглецем, з яким вони зв'язані, формують циклоалкіл (наприклад, циклопропіл). c c У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є -(CR R )m-, і m дорівнює 2. У деяких с с аспектах цих варіантів кожний R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів один R є алкілом с (наприклад, метилом або етилом), а кожний інший R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів с два R узяті разом з вуглецем, з яким вони зв'язані, формують циклоалкіл (наприклад, с циклопропіл), а кожні з інших двох R є воднем. c c У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є -(CR R )m-, і m дорівнює 3. У деяких с аспектах цих варіантів кожний R є воднем. У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є -С(О)-. У деяких варіантах L є –О-С(О)-. b b b b У деяких варіантах L є NR C(O)-, а R є воднем. У деяких варіантах L є NR C(S)-, а R є воднем. c c У деяких варіантах L є -(CR R )m-C(O)-, а m дорівнює 1. У деяких аспектах цих варіантів с с кожний R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів один R є алкілом (наприклад, метилом с с або етилом), а один R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів обидва R є алкілами (наприклад, метил або етил). c c У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є -(CR R )m-C(O)-, а m дорівнює 2. У с деяких аспектах цих варіантів кожний R є воднем. c c У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є –(CR R )m-C(O)-, а m дорівнює 3. У с деяких аспектах цих варіантів кожний R є воднем. 1 d У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є алкілом, заміщеним 0-5 проявами R (наприклад, метил, етил, n-пропіл, i-пропіл або n-бутил). У деяких варіантах здійснення даного 1 винаходу R є метилом, етилом, n-пропілом, i-пропілом або n-бутилом. У деяких варіантах 1 здійснення даного винаходу R є етилом або пропілом (n-пропіл або i-пропіл). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або -О(СО)-. У деяких аспектах цих варіантів L є -О(СО). 1 d У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є алкілом, заміщеним одним R (наприклад, метил, етил, n-пропіл, i-пропіл або n-бутил). У деяких варіантах здійснення даного 1 d винаходу R є метилом, етилом або n-пропілом, заміщеним одним R . У деяких аспектах цих d d а варіантів R є гало (наприклад, фтор або хлор). У деяких аспектах цих варіантів R є –С(О)ОR . а У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих варіантів L є -NHC(O)-. 1 d В деяких варіантах здійснення даного винаходу R є алкілом, заміщеним двома R (наприклад, метил, етил, n-пропіл, i-пропіл або n-бутил). У деяких варіантах здійснення даного 1 d 1 винаходу R є метилом, етилом, n-пропілом, заміщеним двома R . У деяких варіантах R є nd d d пропілом, заміщеним двома R . У деяких аспектах цих варіантів один R є ціано, а інший R є – a a a b NR R . В даяких аспектах R і R є воднем. В деяких аспектах L является -CH2-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є гетероарилом, заміщеним 0-5 d входженням R (наприклад, S-утримуючий моноциклічний гетероарил, N-утримуючий моноциклічний гетероарил або N-утримуючий біциклічний гетероарил). У деяких варіантах 1 d здійснення даного винаходу R є піриділом, заміщеним 0-5 входженням R (наприклад, 2d піриділ, 3-піриділ або 4-піриділ), піриміділом, заміщеним 0-5 входженням R (наприклад, 2d піриміділ або 5-піриміділ) або піразинілом, заміщеним 0-5 входженням R (наприклад, 21 піразиніл). У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіазолілом, заміщеним 0-5 d входженням R (наприклад, 2-тіазоліл або 5-тіазоліл). У деяких варіантах здійснення даного 1 d винаходу R є піриміділом, заміщеним 0-5 входженням R (наприклад, 2-піриміділ). У деяких 1 d варіантах здійснення даного винаходу R є тіадіазолілом, заміщеним 0-5 входженням R 1 (наприклад, 4-тіадіазоліл). У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є пірролілом, d заміщеним 0-5 входженням R (наприклад, 2-пірроліл). У деяких аспектах цих варіантів L є 1 зв'язком, -СН2-, -С(О)- или –О(СО)-. У деяких аспектах цих варіантів R є піриділом (наприклад, 2-піриділ, 3-піриділ або 4-піриділ). 1 В деяких варіантах здійснення даного винаходу R є піриділом (наприклад, 2-піриділ, 3d d а піриділ або 4-піриділ), заміщеним одним R . У деяких аспектах цих варіантів R є - ОС(О)R . У d а d а деяких аспектах цих варіантів R є –OR . У деяких аспектах цих варіантів R є –C(O)OR . У d деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах 5 UA 107667 C2 d 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 d цих варіантів R є галоалкілом (наприклад, трифторметил). У деяких аспектах цих варіантів R є а гало (наприклад, фтор або хлор). У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах цих варіантів L є –CH2-. У деяких варіантах здійснення 1 даного винаходу R є піриділом (наприклад, 2-піриділ, 3-піриділ або 4-пириидил), заміщеним d d а d а двома R . У деяких аспектах цих варіантів один R є –C(O)OR , а інший R є OR . У деяких а аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах цих d варіантів обидва R є галогенами (наприклад, фтор або хлор). У деяких аспектах цих варіантів L є -СН2-. 1 В деяких варіантах здійснення даного винаходу R є піриміділом (наприклад, 2-піриміділ або 5-піриміділ). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є піриміділом (наприклад, 2-піриміділ або d d 5-піриміділ), заміщеним одним R . У деяких аспектах цих варіантів R є галогеном (наприклад, фтором або хлором). 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є піразинілом (наприклад, 2-піразиніл). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіазолілом (наприклад, 2-тіазоліл, 4тіазоліл або 5-тіазоліл). У деяких аспектах цих варіантів L є –С(О)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіазолілом (наприклад, 2-тіазоліл, 4d d тіазоліл або 5-тіазоліл), заміщеним одним R . У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах цих варіантів L є –С(О)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіофенілом, заміщеним 0-5 входженням d 1 R (наприклад, 2-тіофеніл). У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіофенілом. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тіадіазолілом (наприклад, 4тіадіазоліл). 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є пірролілом (наприклад, 2-пірроліл). 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є циклоалкілом, заміщеним 0-5 d 1 входженням R (наприклад, циклопропіл, циклопентил або циклогексил). У деяких варіантах R 1 1 є циклопроїлом. У деяких варіантах R є циклогексилом. У деяких варіантах R є 1 циклопентилом. У деяких аспектах цих варіантів L є –СН2-С(О)-. У деяких варіантах R є d арилом, заміщеним 0-5 входженням R . В деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є арилом (наприклад, фенілом). У деяких 1 варіантах здійснення даного винаходу R є фенілом. У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 d В деяких варіантах здійснення даного винаходу R є фенілом, заміщеним одним R . У d d деяких аспектах цих варіантів R є орто-заміщеним. У деяких аспектах цих варіантів R є метаd заміщеним. У деяких аспектах цих варіантів R є пара-заміщеним. У деяких аспектах цих d d варіантів R є галогеном (наприклад, фтор, бром або хлор). У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил, етил, ізопропіл, t-бутил, n-бутил або n-пентил). У деяких аспектах d d цих варіантів R є галоалкілом (наприклад, трифторметил). У деяких аспектах цих варіантів R є а d а d а –OR . У деяких аспектах цих варіантів R є –С(О)R . У деяких аспектах цих варіантів R є –SR . d а d У деяких аспектах цих варіантів R є –С(О)OR . У деяких аспектах цих варіантів R є d a b d ціаногрупою. У деяких аспектах цих варіантів R є –NR R . У деяких аспектах цих варіантів R є d галоалкоксі (наприклад, діфторметоксі або трифторметоксі). У деяких аспектах цих варіантів R d a є гідроксілом. У деяких аспектах цих варіантів R є –OC(O)R . У деяких аспектах цих варіантів d d R є алкінілом (наприклад, 1-гексинил). У деяких аспектах цих варіантів R є галоалкільною а групою (наприклад, трифторметил). У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил, етил, n-пропіл, ізопропіл, n-бутил, ізобутил, t-бутил або n-пентил). У деяких аспектах цих а а варіантів R є гідроксіалкілом (наприклад, 2-гідроксілетил). У деяких аспектах цих варіантів R й b R є алкільними групами (наприклад, метильною або етильною). У деяких аспектах цих а b варіантів R є ацильною групою (наприклад, ацетил), а R є воднем. У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 d У неяких варіантах здійснення даного винаходу R є фенілом, заміщеним двома R . У деяких d аспектах цих варіантів обидва R є галогенами (наприклад, фтор або хлор). У деяких аспектах d цих варіантів обидва R є алкільними групами (наприклад, метильною або етильною). У деяких d а аспектах цих варіантів один R є алкілом (наприклад, метилом або етилом), а інший є –OR . У d d деяких аспектах цих варіантів один R є галогеном (наприклад, фтором або хлором), а інший R а d а є –OR . У деяких аспектах цих варіантів обидва R є –OR . У деяких аспектах цих варіантів один d d R є галогеном (наприклад, фтором або хлором), а інший R є гідроксілом. У деяких аспектах d цих варіантів один R є галогеном (наприклад, фтором або хлором), а інший є галоалкілом 6 UA 107667 C2 d 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 а d (наприклад, трифторметил). У деяких аспектах цих варіантів один R є –OR , а інший R є – a d а d C(O)ОR . У деяких аспектах цих варіантів один R є –OR , а інший R є гідроксілом. У деяких d d аспектах цих варіантів один R є алкілом (наприклад, метил або етил), а інший R є гідроксілом. d У деяких аспектах цих варіантів обидва R є гідроксільними групами. У деяких аспектах цих d d варіантів один R є галогеном (наприклад, фтором), а інший R є галоалкілом (наприклад, d трифторметил). У деяких аспектах цих варіантів обидва R є гідроксільними групами. У деяких d d аспектах цих варіантів один R є галоалкілом (наприклад, трифторметил), а інший R є алкілом d (наприклад, метил). У деяких аспектах цих варіантів обидва R разом з атомами вуглецю, з якими вони зв'язані, формують не обов'язково заміщений гетероцикл. У деяких аспектах цих d варіантів обидва R разом з атомами вуглецю, з якими вони зв'язані, формують не обов'язково d заміщений 5-7-членний гетероцикл. У деяких аспектах цих варіантів R разом з фенільним кільцем, з яким вони зв'язані, формують наступну структуру: а У деяких аспектах цих варіантів R представлений алкільною групою (метильною або етильною). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 d В деяких варіантах здійснення даного винаходу R є фенілом, заміщеним трьома R . У d деяких аспектах цих варіантів три R є галогенами (наприклад, фтором або хлором). У деяких d d аспектах цих варіантів два R є галогенами (наприклад, фтором або хлором), а один R є d гідроксілом. У деяких аспектах цих варіантів один R є галогеном (наприклад, фтором або d d хлором), один R є алкілом (наприклад, метилом), а один R є гідроксілом. У деяких аспектах d цих варіантів три R є алкілами (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих d d варіантів два R є алкілами (наприклад, метилом або етилом), а один R є гідроксілом. У деяких d d а аспектах цих варіантів два R є галогенами (наприклад, фтором або хлором), а один R є –OR . а У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах d d а а цих варіантів один R є гідроксілом, а два R є –OR . У деяких аспектах цих варіантів R є d а алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах цих варіантів три R є –OR . У деяких d аспектах цих варіантів три R є галогенами (наприклад, фтором або хлором). У деяких аспектах а цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 d У деяких варіантах здійснення даного винаходу Rє фенілом, заміщеним чотирма R . У d d деяких аспектах цих варіантів один R є гідроксілом, один R є алкілом (наприклад, метил або d а етил), а два R є -ORа. У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метил або етил). У деяких аспектах цих варіантів L є зв'язком, -СН2-, -С(О)- або –О(СО)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є гетероциклом, заміщеним 0-5 d входженням R . 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є тетрагідрофуранілом, заміщеним 0-5 d входженням R (наприклад, 2-тетрагідрофураніл або 3-тетрагідрофураніл). У деяких аспектах 1 цих варіантів R є тетрагідрофуранілом (наприклад, 2-тетрагідрофуранілом або 3тетрагідрофуранілом). У деяких аспектах цих варіантів L є -С(О)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є азетидінилом, заміщеним 0-5 d 1 входженням R (наприклад, 3-азетидінил). У деяких варіантах R є азетидінилом (наприклад, 31 азетидінилом). У деяких варіантах R є азетидінилом (наприклад, 3-азетидінилом), заміщеним d d одним R . У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих варіантів L є -С(О)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу R є 10-14-членним біциклічним арилом, d 1 заміщеним 0-5 входженням R . У деяких варіантах R є нафтилом, заміщеним 0-5 входженням d 1 R . У деяких варіантах R є нафтилом. c c b c c У деяких варіантах L є зв'язком, –(CR R )m-, - NR C(O)-,–(CR R )m-C(O)-, -C(O)- або -O(CO)-. 1 У деяких варіантах здійснення даного винаходу L є зв'язком, а R є алкілом, арилом або d гетероарилом, заміщеним 0-5 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів алкіл, арил або 1 гетероарил R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. c c 1 У деяких варіантах L є –(CR R )m-, а R є циклоалкілом, арилом, гетероарилом або d гетероциклілом, заміщеним 0-5 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів циклоалкіл, 1 арил, гетероарил або гетероцикліл R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. 7 UA 107667 C2 b b 1 У деяких варіантах L є –NR C(O)-, а R є воднем, а R є арилом, заміщеним 0-5 входженням 1 R . У деяких аспектах цих варіантів арил R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. c c 1 У деяких аспектах цих варіантів L є –(CR R )m-C(O)-, а R є циклоалкілом, арилом або d гетероарилом, заміщеним 0-5 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів циклоалкіл, арил 1 або гетероарил R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. 1 У деяких варіантах L є -С(О)-, а R є арилом, алкілом або гетероарилом, заміщеним 0-5 d 1 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів арил, алкіл або гетероарил R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. 1 В деяких варіантах L є –ОС(О)-, а R є алкілом, арилом або гетероциклілом, заміщеним 0-5 d 1 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів алкіл, арил або гетероцикліл R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. c c 1 У деяких варіантах L є –(CR R )m-C(O)-, а R є гетероциклілом або циклоалкілом, заміщеним d 1 0-5 входженням R . У деяких аспектах цих варіантів гетероцикліл або циклоалкіл R відповідає опису в кожному з варіантів і аспектів вище. У деяких варіантах n дорівнює 0. У деяких варіантах n дорівнює 1. 3 3 У деяких варіантах R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких варіантах R є – а а 3 OR . У деяких варіантах R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких варіантах R є 3 галогеном (наприклад, фтором або хлором). У деяких варіантах R є гідроксілом. У деяких 3 варіантах R є галоалкілом (наприклад, трифторметилом). В деяких варіантах n дорівнює 2. 3 У деяких варіантах два суміжних R , узяті разом з атомами вуглецю, з якими вони зв'язані, 3 а формують кільце гетероциклу. У деяких варіантах обидва R є –OR . У деяких варіантах два d 5 10 15 20 3 25 суміжних R , узяті разом з атомами вуглецю, з якими вони зв'язані, формують . В певних варіантах сполуки має формулу (II) або фармацевтично прийнятну сіль такої: (II) 1 30 35 40 45 50 3 a b c d де L, R , R , R , R , R , R , Y, Z, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У певних варіантах А є арилом (наприклад, фенілом або нафтилом), не обов'язково 2 2 заміщеним одним або двома R , де кожний R незалежно вибраний з галогену, галоалкілу, а c c c 1 1 3 a b c d арилу, гетероарилу, алкілу, –OR , -COOR або –CONR R ; а D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, 1 описаних у цьому документі. У деяких аспектах цих варіантів D і D є N. У деяких аспектах цих варіантів, принаймні, один з W, X, Y і Z є N. У деяких аспектах цих варіантів один з W, Y і Z є N; h дорівнює 1 і g дорівнює 1. В певних варіантах А є гетероарилом (наприклад, N-утримуючим моноциклічним 1 1 3 a b c d гетероарилом або N-утримуючим біциклічним гетероарилом), а D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах А є 5-8-членним моноциклічним гетероарилом 1 1 3 a b c d (наприклад, піриділом, піриміділом або піразилом), а D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах А є 5-8-членним N-утримуючим моноциклічним 1 1 3 a b c d гетероарилом, а D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах А є не обов'язково заміщеним піриділом (наприклад, 2-піриділ, 3-піриділ або 4піриділ), не обов'язково заміщеним піриміділом (наприклад, 2-піриміділ або 5-піриміділ) або не 1 3 a b c d обов'язково заміщеним піразилом (наприклад, 2-піразил), а L, R , R , R , R , R , R , Y, Z, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або будь-якому з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. 8 UA 107667 C2 2 1 1 3 a У деяких варіантах здійснення даного винаходу А заміщений одним R , а D, D , L, R , R , R , c d R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів 2 або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких аспектах цих варіантів R є алкілом 2 (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих варіантів R є галогеном. У деяких 2 2 аспектах цих варіантів R є фтором (F). У деяких аспектах цих варіантів R є бромом (Br). У 2 2 а деяких аспектах цих варіантів R є хлором (Cl). У деяких аспектах цих варіантів R є –OR . У а деяких аспектах цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом). 2 1 1 3 a В деяких варіантах здійснення даного винаходу А заміщений двома R , а D, D , L, R , R , R , b c d R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів 2 або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких аспектах цих варіантів обидва R є алкілами 2 а (наприклад, метилом). У деяких аспектах цих варіантів обидва R є –OR . У деяких аспектах цих 2 а 2 варіантів один R є галогеном, а інший є –OR . У деяких аспектах цих варіантів один R є а 2 бромом (Br), а інший є –OR . У деяких аспектах цих варіантів один R є хлором (Cl), а інший є – а 2 а OR . У деяких аспектах цих варіантів один R є фтором (F), а інший є –OR . У деяких аспектах а цих варіантів R є алкілом (наприклад, метилом або етилом). У деяких аспектах цих варіантів 2 а а обидва R є -–OR . У деяких аспектах цих варіантів два –OR , узяті разом з атомами вуглецю, з якими вони зв'язані, формують гетероцикл. b 5 10 15 1 20 25 30 35 40 45 50 1 3 a b c d У деяких варіантах А є ; а D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають певним вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. В іншому варіанті здійснення даного винаходу представлена сполука формули (I) або його фармацевтично прийнятна сіль, або фармацевтична композиція, що включає сполуку формули (I) або її фармацевтично прийнятну сіль: (I) де: W, X, Y і Z - кожний незалежно вибраний зі СН або N; 1 b D і D - незалежно вибрані зі зв'язку або NR ; А не обов'язково заміщений арилом або не обов'язково заміщений гетероарилом; C C b L є зв'язком, -С(О)-, -(CR R )m-, -ОС(О)-, -С(О)NR -; 1 R незалежно вибраний з алкілу, циклоалкілу, арилу, гетероарилу й гетероциклілу; кожний з d яких заміщений 0-3 R ; 3 а кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу, гідроксілу й - OR ; або два сусідні 3 R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений цикліл; а кожний R незалежно вибраний з алкілу й галоалкілу; b кожний R незалежно вибраний з водню й алкілу; с с кожний R незалежно вибраний з водню, гало, алкілу, алкоксі й галоалкоксі, або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений циклоалкіл; d a d кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу, нітро, ціано й –OR , або два R , узяті разом з атомами вуглецю, до яких вони приєднані, формують не обов'язково заміщений гетероцикліл; n дорівнює 0, 1 або 2; m дорівнює 1, 2 або 3; h дорівнює 0, 1, 2; і 1 1 3 a b c d g дорівнює 0, 1 або 2. У деяких аспектах цих варіантів А, D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають визначенню в кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. В іншому варіанті здійснення даного винаходу представлене сполукою формули (I) або його фармацевтично прийнятною сіллю, або фармацевтичною композицією, що включає сполуку формули (I) або її фармацевтично прийнятну сіль: 9 UA 107667 C2 (I) 5 10 15 20 де: W, X, Y і Z - кожний незалежно вибраний зі СН або N; 1 c D і D - незалежно вибрані зі зв'язку або NR ; А не обов'язково заміщений арилом або не обов'язково заміщений гетероарилом; 1 R незалежно вибраний з алкілу, не обов'язково заміщеного арилу й не обов'язково заміщеного гетероарилу; 3 а кожний R незалежно вибраний з гало, галоалкілу, алкілу й –OR ; а кожний R незалежно вибраний з алкілу, галоалкілу й не обов'язково заміщеного гетероарилу; b кожний R незалежно є алкілом; с кожний R незалежно вибраний з водню або алкілу; n дорівнює 0, 1 або 2; h дорівнює 0, 1, 2; і 1 1 3 a b c d g дорівнює 0, 1 або 2. У деяких аспектах цих варіантів А, D, D , L, R , R , R , R , R , R , X, Y, Z, W, n, m, h і g відповідають визначенню в кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. В іншому варіанті здійснення даного винаходу представлені сполуки або фармацевтично прийнятна сіль формули (Ib), або фармацевтична композиція, що включає сполуку або фармацевтично прийнятну сіль формули (Ib): (Ib); 25 30 1 3 a b c d де А, L, R , R , R , R , R , R , W, X, Z, m, h і g відповідають визначенню, даному вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах X, W і Z є СН. У деяких варіантах один з X, W і Z є N, а інші два з X, W і Z є СН. В іншому варіанті представлена фармацевтична композиція, що включає сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль формули (Ic) або фармацевтична композиція, що включає сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль формули (Ic): (Ic); 35 40 1 3 a b c d де А, L, R , R , R , R , R , R , W, X, Y, m, h і g відповідають визначенню, даному вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах X, Y і W є СН. У деяких варіантах один з X, Y і W є N, а інші два з X, Y і W є СН. В іншому варіанті представлено сполуку або фармацевтично прийнятну сіль формули (Id) або фармацевтична композиція, що включає сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль формули (Id): 10 UA 107667 C2 (Id); 1 5 3 a b c d де А, L, R , R , R , R , R , R , Y, Z, m, h і g відповідають визначенню, даному вище у формулі (I) або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У деяких варіантах Y і Z є СН. У деяких варіантах один з Y і Z є N, а один з Y і Z є СН. В іншому варіанті представлено сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль формули (Iе) або фармацевтичну композицію, що включає сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль формули (Iе): 10 (Ie); 1 15 20 25 30 35 40 45 50 3 a b c d де А, L, R , R , R , R , R , R , W, X, Y, Z, m, h і g відповідають визначенню, даному вище у формулі (I), або кожному з варіантів або аспектів, описаних у цьому документі. У певних варіантах типові сполуки формули I включають сполуки, описані на фігурі і в прикладах. У деяких варіантах сполука, описана в цьому документі, модулює ПКМ2 за допомогою взаємодії (наприклад, зв'язування) із ФДФ-єднальною кишенею. Наприклад, сполука, описана в цьому документі, може змагатися із ФДФ, що зв'язує ПКМ2. У деяких варіантах сполука, описана в цьому документі, володіє одним або більше властивостями, описаними в цьому документі, зокрема, одним або більше наступних властивостей: є аллостеричним модулятором (зокрема, активатором); модулює викид ФДФ (зокрема, активує); є модулятором (зокрема, агоністом) ФДФ, наприклад, агоністом, що утворює зв'язок з більше низкою, приблизно такою самою же або більш високою афінністю, чим ФДФ; модулює (зокрема, активує) розчинення тетраметричної ПКМ2; модулює (зокрема, активує) складання тетраметричної ПКМ2; селективно модулює (зокрема, активує) ПКМ2, принаймні, більше однієї іншої ізоформи ПК, наприклад, виборчий для ПКМ2, більше чим для ПК, ПКМ1 або ПК; володіє афінністю до ПКМ2, що перевищує афінність принаймні до однієї з інших ізоформ ПК, наприклад, ПК, ПКМ1 або ПК. В іншому варіанті активатор ПКМ2, використовуваний у способах і композиціях, описаних у цьому документі, діє за допомогою або володіє одним або більше з наведених далі механізмів або властивостей: а. є аллостеричним активатором ПКМ2; б. модулює (зокрема, стабілізує) зв'язування ФДФ із єднальним пакетом ПКМ2; в. модулює (зокрема, активує) викид ФДФ із єднальної кишені ПКМ2; г. є модулятором (зокрема, агоністом), наприклад, аналогом ФДФ, наприклад, агоністом, що зв'язує ПКМ2 з більш низкою, приблизно однаковою або більше високою афінністю, чим ФДФ; д. модулює (зокрема, активує) розчинення тетраметричної ПКМ2; е. модулює (зокрема, активує) складання тетраметричної ПКМ2; є. модулює (зокрема, стабілізує)тетраметричну конформацію ПКМ2; ж. модулює (зокрема, активує) зв'язування фосфотірозину, що містить поліпептид, із ПКМ2; з. модулює (зокрема, активує) здатність фосфотірозину, що містить поліпептид, індукувати викид ФДФ із ПКМ2, наприклад, шляхом індукування зміни конформації ПКМ2, зокрема, у позиції Lys 433, таким чином, перешкоджаючи викиду ФДФ; і. зв'язує або міняє позицію Lys 433 стосовно єднальної кишені ФДФ; к. вибірково модулює (зокрема, активує) ПКМ2 більше, принаймні, однієї іншої ізоформи ПК, наприклад, виборчий для ПКМ2 більш ніж для однієї або більше ПК, ПКМ1 або ПК; л. володіє афінністю до ПКМ2, що перевищує афінність, принаймні, до однієї іншої ізоформи ПК, наприклад, ПК, ПКМ1 або ПК. Здатність сполуки, описаної в цьому документі, активувати ПКМ2 може бути випробувана. Для простоти інтенсивність активації цих сполук представлений як АС 50 на фігурі 1 і за всією заявкою. Типові сполуки представлені на фігурі 1. Як показано на фігурі 1, "А" відповідає активатору ПКМ2 з ЄС50 < 100 нмоль. "В" відповідає активатору ПКМ2 з ЄС50 від 100 нмоль до 11 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 500 нмоль. "С" відповідає активатору ПКМ2 з ЄС 50 від 500 нмоль до 1000 нмоль. "D" відповідає активатору ПКМ2 з ЄС50 від 1 мкМ до 10 мкМ. Дані для "Е" відсутні. Сполуки, описані в цьому документі, можуть бути отримані за допомогою різноманітних способів синтезу. Схема 1. Представлена вище схема 1 є типовою схемою, що зображує типовий синтез певних сполук, описаних у цьому документі. Сульфонілхлорид 1 взаємодіє з аміном 2 при стандартних умовах сполучення з утворенням ефіру 3. Гідроліз ефіру 3 при використанні гідроксіду літію приводить до утворення карбонової кислоти 4. Піперазин (5) з відповідним бромідом при стандартних умовах сполучення в присутності палладію дає сполуку 7. На карбонову кислоту 4 потім діє похідне піперазину 7 з утворенням кінцевої сполуки 8. Як може бути оцінено фахівцем, способи синтезу сполук із формулами, наведеними в цьому документі, ясні фахівцям у даній області. Крім того, різні етапи синтезу можуть бути виконані в альтернативній послідовності або порядку одержання бажаних сполук. Хімічні зміни при синтезі й способології захисних груп (захист і зняття захисту), використовувані при синтезі сполук, описаних у цьому документі, відомі фахівцям і включають, зокрема, такі, описані в роботах Р. Ларок "Загальні органічні перетворення", ВСХ Паблішерс (1989); Т.У. Грін і Р.Дж.М. Уутс "Захисні групи в органічному синтезі", 2-е вид., Джон Уилей і сини (1991); Л. Фізер і М. Фізер "Физер і реагенти Фізера для органічного синтезу", Джон Уілей і сини (1994) і Л. Пакетт, вид. "Енциклопедія реагентів для органічного синтезу", Джон Уілей і сини (1995) і наступні видання таких. Сполуки, представлені в цьому документі, можуть містити один або більше асиметричних центрів і, таким чином, з'являтися як рацемати й рацемічних сумішей, одиночних енантіомерів, окремих діастереомерів і діастереомічних сумішей. Всі такі ізомерні форми цих сполук беззастережно включені в область дії. Якщо не зазначено особливо, якщо сполуці дається назва або зображується структура без уточнення стереохімії й сполука має один або більше хиральних центрів, мається на увазі подання всіх можливих стереоізомерів сполуки. Сполуки, представлені в цьому документі, також можуть містити зв'язки (наприклад, вуглець-вуглецеві зв'язки) або групи заступників, які можуть обмежувати обертання зв'язків, зокрема, обмеження в результаті наявності кільця або подвійного зв'язку. Відповідно, всі цис/транс і E/Z ізомери беззастережно включені. Сполуки, представлені в цьому документі (наприклад, формула I) також можуть містити одне й більше ізотопних заміщень. Наприклад, Н може перебувати в будь-якій ізотопній формі, 1 2 3 включаючи Н, Н (D або дейтерій) і Н (Т або тритій); С може перебувати в будь-якій ізотопній 12 13 14 16 18 формі, включаючи С, С й С; О перебувати в будь-якій ізотопній формі, включаючи О й О; і так далі. Сполуки, представлені в цьому документі, також можуть бути представлені в множинних таутомірних формах, у таких випадках беззастережно включаються всі таутомірні форми сполук, описаних у цьому документі, навіть якщо може бути представлена тільки єдина таутомірна форма (наприклад, алкілірування кільця може привести до алкілірування в декількох місцях; всі продукти реакції беззастережно включаються). Всі такі ізомерні форми сполук беззастережно включаються. Всі кристалічні форми сполук, описаних у цьому документі, беззастережно включені. 12 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Сполуки, представлені в цьому документі, включають самі сполуки, а також, якщо застосовно, їхні солі і їх проліки. Сіль, наприклад, може бути сформована між аніоном і позитивно зарядженим заступником (наприклад, аміногрупа) сполуки, описаної в цьому документі. Підходящими аніонами є хлорид, бромід, йодид, сульфат, нітрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат і ацетат. Аналогічно сіль може бути сформована між катіономі негативно зарядженим заступником (наприклад, карбоксілат) сполуки, описаної в цьому документі. Підходящими катіонами є іон натрію, іон калію, іон магнію, іон кальцію й катіон амонію, такий як іон тетраметиламмонію. До прикладів проліків відносять ефіри й інші фармацевтично прийнятні похідні, які, при застосуванні в суб'єкта, у стані надати активні сполуки. Сполуки, представлені в цьому документі, можуть бути модифіковані за допомогою доповнення відповідних функціональностей для посилення вибраних біологічних властивостей, наприклад, націленість на певну тканину. Такі модифікації відомі фахівцям і включають ті, які збільшують біологічне проникнення в задані біологічні простори (наприклад, кров, лімфатична система, центральна нервова система), збільшують пероральну доступність, збільшують розчинність для можливості ін'єкційного застосування, міняють метаболізм і міняють швидкість виведення. В альтернативному варіанті здійснення сполуки, описані в цьому документі, можуть бути використані як платформи або площадки, які можуть бути використані в способах комбінаторної хімії для одержання похідних і/або хімічних бібліотек сполук. Такі похідні й бібліотеки сполук мають біологічну активність і придатні для визначення й розробки сполук, що володіють специфічною активністю. Способи комбінаторної хімії придатні для використання сполук, описаних у цьому документі, відомі фахівцям, що виходить з видання Обрехт, Д. і Виллалгродо, Дж.М. "Комбінаторний із твердою підложкою і паралельний синтез бібліотек сполук із маленькою молекулярною масою", Пергамон-Елсевьер Сайнс Лімітед (1998), і включають такі способи як "змішання-поділ" або техніки "паралельного" синтезу, способи синтезу із твердою підложкою і синтезу в рідкому середовищі й способи кодування (наприклад, Цзарник, А.У., Заг. Мнен. Хім. Біо., (1997) 1,60. Таким чином, один варіант пов'язаний зі способом використання сполук, описаних у цьому документі, для розробки похідних або хімічних бібліотек, що включають: 1) забезпечення основи, що охоплює безліч лунок; 2) забезпечення одної або більш сполук, ідентифікованих по способах, описаних у цьому документі в кожній лунці; 3) забезпечення одного або більше додаткового хімічного продукту в кожній лунці; 4) ізолювання одного й більше кінцевого продукту з кожної лунки. Альтернативний варіант пов'язаний зі способом використання сполук, описаних у цьому документі, для одержання похідних або хімічних бібліотек, що включають: 1) забезпечення одної й більше сполук, описаних у цьому документі, пов'язаних із твердою підложкою; 2) обробку одної й більше сполук, що ідентифіковані способами, описаними в даному документі, пов'язаних із твердою підложкою, одним і більше додатковими хімічними сполуками; 3) ізолювання одного й більше кінцевого продукту від твердої підложки. У способах, описаних вище, "мітки", або ідентифікатор, або агенти, що маркірують, можуть бути приєднані до і/або відокремлені від сполук, описаних у цьому документі, або їхніх похідних для полегшення спостереження, визначення дійсності або ізоляції бажаних продуктів або їхніх проміжних продуктів. Такі хімічні сполуки відомі фахівцям. Хімічні сполуки, використовувані у вищевказаних способах, можуть включати, зокрема, розчинники, реагенти, каталізатори, реагенти захисної групи й реагенти групи зняття захисту тощо. Приклади таких хімічних сполук існуть у різних текстах, присвячених хімії синтетичних і захисних груп, а також у монографіях, що згадуються в цьому документі. Визначення Термін "гало" або "галоген" відповідає будь-якому радикалові фтору, хлору, брому або йоду. Термін "алкіл" відповідає вуглеводневому ланцюжку, що може бути прямим або розгалуженим, утримуючим зазначене число атомів вуглецю. Наприклад, алкіл С 1-С12 вказує, що група може містити від 1 до 12 (включно) атомів вуглецю. Термін "галоалкіл" відповідає алкілу, у якому один або більше атомів водню заміщені галогеном, і включає алкільні молекули, у яких всі атоми водню були заміщені галогенами (наприклад, перфторалкіл). Терміни "арилалкіл" або "аралкіл" відповідає алкільній молекулі, у якій алкільний атом водню заміщений на арильну групу. Аралкіл включає групи, у яких більш ніж один атом водню був заміщений на арильну групу. До прикладів "арилалкілу" або "аралкілу" включають бензильну, 2-фенілетильну, 3- фенілпропільну, 9-фторенільну, бензгідрильну й трітильну групи. Термін "алкілен" відповідає бівалентному алкілу, наприклад -СН2-, -СН2СН2- і -СН2СН2СН2-. Термін "алкеніл" відповідає прямій або розгалуженій вуглеводневому ланцюжку, що містить 2-12 атомів вуглецю й має одну або більше подвійних зв'язків. Приклади алкенільних груп 13 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 включають, але не обмежуються ними, аллільну, пропенільну, 2-бутенільну, 3-гексенільну й 3октенільну групи. Один з подвійних вуглецевих зв'язків може не обов'язково бути місцем зв'язування алкенільного заступника. Термін "алкеніл" відповідає прямій або розгалуженій вуглеводневому ланцюжку, що містить 2-12 атомів вуглецю й має один або більше потрійних зв'язків. Приклади алкінільних груп включають, але не обмежуються ними, етинільну, пропаргілову й 3-гексінільну групу. Один з потрійних зв'язків може не обов'язково бути місцем зв'язування алкінільного заступника. Терміни "алкіламіно" і "діалкіламіно" відповідають радикалам –NH(алкіл) і –NH(алкіл)2 відповідно. Термін "аралкіламіно" відповідає радикалові –NH(аралкіл). Термін алкіламіноалкіл відповідає радикалові (алкіл) NH-алкіл-; термін діалкіламіноалкіл відповідає радикалові (алкил)2N-алкил-. Термін "алкоксі" відповідає радикалові О-алкіл. Термін "меркапто" відповідає радикалові SH. Термін "тіоалкоксі" відповідає -S-алкільному радикалові. Термін тіоарилоксі відповідає -S-арильному радикалові. Термін "арил" відповідає моноциклічному, біциклічному або трициклічному ароматичному вуглеводневому кільцю, у якому будь-який атом кільця здатний до заміщення, може бути заміщений (наприклад, одним або більше заступником). Приклади арильних молекул включають феніл, нафтил і антраценіл, але не обмежуються ними. Термін "циклоалкіл", застосований у цьому документі, включає циклічні, біциклічні, трициклічні або поліциклічні неароматичні вуглеводневі групи, що мають від 3 до 12 атомів вуглецю. Будь-який атом кільця, що заміщують, може бути заміщений (наприклад, одним і більше заступником). Циклоалкільні групи можуть містити зчленовані або з'єднані одним загальним атомом кільця. Зчленовані кільця - це кільця, що ділять загальний атом вуглецю. Приклади циклоалкільних молекул включають циклопропіл, циклогексил, метилциклогексил, адамантіл і норборніл, але не обмежуються ними. Термін "гетероцикліл" або "гетероциклічна група" відповідає 3-14-членним неароматичним кільцям (наприклад, 3-14-членні кільця, переважно 3-7-членні кільця), структура кілець яких включає від одного до чотирьох гетероатомів, незалежно вибраних із О, N або S. Гетероцикл або гетероциклічна група може містити зчленовані або з'єднані одним загальним атомом кільця. Гетероцикли також можуть бути поліциклами, при цьому кожна група має, наприклад, 5-7 атомів у гетероциклі. Термін "гетероцикліл" або "гетероциклічна група" включає граничні або частково насичені гетероциклічні структури. Термін "гетероарил" відповідає 5-14-членному (наприклад, 58-членному моноциклічному, 8-12 членному біциклічному або 11-14-членному трициклічному) ароматичному кільцю, що володіє 1-3 гетероатомами в моноциклічному кільці, 1-6 гетероатомами в біциклічному кільця або 1-9 гетероатомами в трициклічному кільці, зазначені гетероатоми кільця незалежно вибрані із О, N і S (наприклад, 1-3, 1-6 або 1-9 гетероатомів моноциклічного, біциклічного й трициклічного кільця відповідно). Будь-який атом кільця, що заміщують, може бути заміщений (наприклад, одним або більше заступником). Гетероциклічні й гетероарильні групи включають, зокрема, тіофен, тіантрен, фуран, піран, ізобензофуран, хромен, ксантен, феноксантін, піррол, імідазол, піразол, ізотіазол, ізоксазол, піридин, піразин, піримідин, піридазин, індолізин, ізоіндол, індол, індазол, пурин, хінолізин, ізохінолин, хінолін, фталазин, нафтирідин, хіноксалін, хіназолін, циннолін, птерідин, карбазол, карболін, фенантридін, акридін, піримідін, фенантролін, феназин, фенарсазин, фенотіазін, фуразан, феноксазин, пірролідин, оксолан, тіолан, оксазол, піперідин, піперазин, морфолін, лактони, лактами, такі як азетидінони й пірролідінони, сультами, сультони й тому подібні. Гетероциклічне або гетероарильне кільце може бути заміщене в одній або більше позиціях такими заступниками, описаними в цьому документі, як галоген, алкіл, аралкіл, алкеніл, алкіл, циклоалкіл, гідроксіл, аміно, нітро, сульфгідрил, іміно, амідо, фосфат, фосфонат, фосфінат, карбоніл, карбоксіл, силіл, алкілтіо, сульфонил, кетон, альдегід, ефір, гетероцикл, ароматична або гетероароматична молекула, -CF3, -CN або тому подібне. Термін "гетероциклілалкіл", використаний у цьому документі, відповідає алкільній групі, заміщеної гетероциклічною групою. Термін "циклоалкеніл" відповідає частково ненасиченим неароматичним моноциклічним, біциклічним або трициклічним вуглеводневим групам, що мають від 5 до 12 атомів вуглецю, переважно від 5 до 8. Ненасичений вуглець може не обов'язково бути місцем зв'язку із циклоалкенільним заступником. Будь-який атом кільця, що заміщують, може бути заміщений (наприклад, одним або більше заступником). Циклоалкенільні групи можуть містити зчленовані або з'єднані одним загальним атомом кільця. Зчленовані кільця - це кільця, що ділять загальний атом вуглецю. Приклади циклоалкенільних молекул включають циклогексеніл, циклогексадіеніл або норборненіл, але не обмежуються ними. 14 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Термін "гетероциклоалкеніл" відповідає частково насиченому неароматичному 5-10членному моноциклічному, 8-12-членному біциклічному або 14-членному трициклічному кільцю, що володіє 1-3 гетероатомами в моноциклі, 1-6 гетероатомами в біциклі або 1-9 гетероатомами в трициклі, зазначені гетероатоми вибрані незалежно із О, N і S (наприклад, 1-3, 1-6 або 1-9 гетероатомів N, O або S у моноциклічному, біциклічному або трициклічному кільці відповідно). Ненасичений вуглець або гетероатом можуть не обов'язково бути точкою зв'язку з гетероциклоалкенільним заступником. Будь-який атом кільця, що заміщують, може бути заміщений (наприклад, одним і більше заступниками). Гетероциклоалкенільні групи можуть містити зчленовані кільця. Зчленовані кільця – це кільця, що ділять загальний атом вуглецю. Приклади гетероциклоалкенільних молекул включають тетрагідропіриділ і дигідропіранил, але не обмежуються ними. Терміни "гетаралкіл і "гетероаралкіл", використані в цьому документі, відповідають алкільній групі, що заміщена гетероарильною групою. Гетероатоми кільця сполук, представлених у цьому документі, включають N-O, S(O) і S(O)2. Термін "оксо" відповідає атому кисню, що утворює карбоніл при приєднанні до вуглецю, Nоксід при приєднанні до азоту й сульфоксід або сульфон при приєднанні до сірки. Термін "ацил" відповідає алкілкарбонільному, циклоалкілкарбонільному, арилкарбонільному, гетероциклілкарбонільному або гетероарилкарбонільному заступникові, кожний з яких може бути також заміщений (наприклад, одним або більше заступником). Термін "заступники" відносяться до групи, "заміщеної" алкільною, циклоалкільною, алкенільною, алкінільною, гетероциклічною, гетероциклоалкенільною, циклоалкенільною, арильною або гетероарильною групою на атомі групи, що заміщують. Будь-який атом, що заміщують, може бути заміщений. Якщо не зазначено інакше, до таких заступників відносять, без обмежень, алкіл (наприклад, C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11, C12 прямі або розгалужені ланцюги алкілу), циклоалкіл, галоалкіл (наприклад, такий перфторалкіл як CF 3), арил, гетероарил, аралкіл, гетероаралкіл, гетероцикліл, алкеніл, алкініл, циклоалкеніл, гетероциклоалкеніл, алкоксі, галоалкоксі (наприклад, перфторалкоксі OCF 3), гало, гідроксі, карбоксі, карбоксілат, ціано, нітро, аміно, алкіламіно, SO 3Н, сульфат, фосфат, метилендіоксі (О-СН2-О-, у якому атоми кисню з'єднані з віціальними атомами), етилендіоксі, оксо (не є заступником на гетероарилі), тіоксо (наприклад, C=S) (не є заступником на гетероарилі), іміно (алкіл, арил, аралкіл), S(O)nалкіл (де n дорівнює 0-2), S(O)nарил (де n дорівнює 0-2), S(O)n гетероарил (де n дорівнює 0-2), S(O)nгетероцикліл (де n дорівнює 0-2), амін (моно-, ді-, алкіл, циклоалкіл, аралкіл, гетероаралкіл, арил, гетероарил і їх комбінації), ефір (алкіл, аралкіл, гетероаралкіл, арил, гетероарил), амід (моно-, ді-, алкіл, аралкіл, гетероаралкіл, арил, гетероарил і їх комбінації), сульфонамід (моно-, ді-, алкіл, аралкіл, гетероаралкіл і їх комбінації). З одного боку, заступники на групі є незалежно будь-яким одиночним або будь-якою підгрупою вищезгаданих заступників. З іншого боку, заступник може сам бути заміщеним кожним з наведених вище заступників. Термін "вибірково" означає, принаймні, в 2, 3, 4, 5, 6 або 10 разів більшу модуляцію (наприклад, активацію) ПКМ2, чим ПКМ1. Термін "активатор", використовуваний у цьому документі, означає речовину, що (вимірно) збільшує активність піруваткінази (наприклад, ПКМ2) або є причиною підвищення активності піруваткінази (наприклад, ПКМ2) до рівня, що перевищує вихідні рівні активності ПКМ2. Наприклад, активатор може імітувати ефект, викликаний природним лігандом (наприклад, ФДФ). Дія, що активує, що викликана сполукою, що представлена у цьому документі, може бути такою же, більше вираженою або менш вираженою, чим дія природного ліганда, що активує, але тип дії той же самий. Сполука, представлена в цьому документі, може бути досліджена для визначення, чи є вона активатором, шляхом прямого або непрямого виміру активності піруваткінази при впливі вказанної сполуки. Активність сполуки, що представлена в цьому документі, може бути обмірювана, зокрема, у порівнянні з контрольною речовиною. У ряді випадків обмірювана активність випробовуваної сполуки, є для активації ПКМ2. Активність ПКМ2 може бути обмірювана, наприклад, шляхом моніторингу концентрації таких речовин як АТФ або НАДН. Абревіатури Ме, Et, Ph, Tf, Nf, Ts, Ms позначають метил, етил, феніл, трифторметансульфоніл, нонафторбутансульфоніл, р-толуенсульфоніл і метансульфоніл відповідно. Більше повний список абревіатур, що використовується фахівцями хімікамиорганіками, приводиться в першому випуску кожного тому Журналу органічної хімії; цей список, як правило, представлений у таблиці, що озаглавлена Стандартний список абревіатур. Абревіатури, що входять у зазначений список, а також всі абревіатури, використовувані фахівцями хіміками-органіками, включені в даний документ посиланням на них. 15 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 Способи оцінки сполук Здатність сполук, описаних у цьому документі, модулювати ПКМ2 (наприклад, активувати ПКМ2) може бути досліджена відомими фахівцям способами. У деяких варіантах втілення даного винаходу здатність описаних сполук модулювати ПКМ2 (наприклад, активувати ПКМ2) оцінюють в умовах недостачі серину. У деяких варіантах типові способи враховують включення сполуки в клітинний аналіз, що дозволяє оцінити здатність модулювати (наприклад, активувати) ПКМ2. Зокрема, при контакті ймовірної сполуки із клітиною виробляється вимір споживання кисню або виробництва лактату. Зміна клітинного фосфоенолпірувату, зміна гліцерин-фосфату, зміна рибози або дезоксірибози, зміна синтезу ліпідів, або зміна в перетворенні глюкози в ліпіди, нуклеїнові кислоти, амінокислоти або білки може також використовуватися для оцінки здатності сполуки модулювати ПКМ2 (наприклад, активувати ПКМ2). Оцінка може також включати вимір зміни пірувата або визначення зміни потенціалу мітохондриальної мембрани, наприклад, по вимірах за допомогою флуоресцентних потенціометричних барвників. Активність ферменту ПКМ2, досліджувана при скринінзі/випробуванні, може бути обмірювана, зокрема, шляхом моніторингу концентрації субстрату (наприклад, АТФ або НАДН), присутнього в реакційній суміші. Піруват, що є продуктом ферментативної активності піруваткінази, перетворюється в лактат за допомогою лактатдегідрогенази, що вимагає споживання НАДН (НАДH → НАД+). Таким чином, активність ПКМ2 може бути побічно обмірювана шляхом моніторингу споживання НАДH, наприклад, за допомогою флуоресцентного аналізу. Таким чином, активність ферменту ПКМ2 може прямо відслідковуватися виміром вироблення АТФ, тому що АТФ утвориться при перетворенні фосфоенолпірувату в піруват. Способи моніторингу кількості субстрату в реакційній суміші включають, зокрема, вимір абсорбції, флуоресценції, комбінаційне розсіювання світла, вимір фосфоресценції, люмінесценції, вимір аналіз люциферази й радіоактивності. Процедура скринінгу вимагає наявності певних компонентів у реакційній суміші. Компоненти, використовувані в аналізі, включають, зокрема, нуклеозид діфосфат (наприклад, АДФ), фосфоенолпіруват, НАДН, лактатдегідрогеназу, ФДФ, відновлювач (наприклад, дітіотреїтол), детергент (наприклад, Бридж 35), гліцерин і розчинник (наприклад, ДМСО). Умови типових реакцій представлені в таблиці 1. 30 Таблиця 1 Компоненти умов реакції АДФ Фосфоенолпіруват НАДН Лактатдегідрогеназа Фруктоза-1, 6-дісфосфат ДТТ Брідж 35 Гліцерин Піруваткіназа M2 (використовувана для скринінгу) ДМСО 35 40 45 Кількість при аналізі на активності 0,1-5,0 мM 0,1-5,0 мM 10-1000 мкM 0,1-10 одиниць 0 0,1-50 мкM 0,01-1 % 0,1-10 % 1-100 пг 1-10 % У деяких варіантах здійснення даного винаходу, сполука, описана в цьому документі, може бути оцінена при клітинному аналізі/аналізі поза організмом (ex vivo). Наприклад, клітину обробляють сполукою, що описана у цьому документі (тобто, активатором піруваткінази-М2), і сполука оцінюється, наприклад, по здатності проникати в клітину й зв'язувати ПКМ2, приводячи до формування активованої конформації ПКМ2. Надлишок незв'язаної сполуки може бути вимитий за допомогою фосфатно-сольового буферного розчину, а клітини лізовані, наприклад, шляхом швидкого заморожування на сухому льоді, з наступним додаванням детергентутримуючого лізуючого буферу. Лізат, у якому активована ПКМ2 залишається інтактним, може бути потім вилучений і доданий у хімічну суміш, що включає речовини, необхідні для виміру активності піруваткінази. Аналіз може бути сполучений з іншим аналізом, таким як аналіз, сполучений з ферментом лактатдегідрогеназою. Величина обмірюваної активності піруваткінази може бути нормалізована по загальному змісті білка в лізаті й співвіднесена з концентрацією доданого в клітину активатора ПКМ2. Це дозволяє одержати значення AC 50 (концентрація, при якій ПКМ2 активується на 50 %). Також може бути розраховане загальне кратне збільшення активності в порівнянні із клітинами, обробленими імітатором сполуки, а "максимальний рівень активації" може бути використаний для розпізнавання сполук, що повністю активують ПКМ2, і 16 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 сполук, які можуть лише частково активувати ПКМ2. У випадку виміру активності ПКМ2 у тканині (наприклад, у клітинній пухлині), сполуки можна дозувати тваринам із тканиною/пухлиною, що представляє інтерес. Після закінчення певного періоду часу, за яке був досягнутий вплив на тканину, пухлину-мішень, що представляє інтерес, тканина/ пухлина може бути забрана у тварини, піддана швидкому заморожуванню, а потім лізована й гомогенізована. У даному лізаті може бути зроблене кількісне визначення активності піруваткінази як описано вище. ПКМ1 і ПКМ2 для використання при способах скринінгу/випробуванні, описаних у цьому документі, можуть бути отримані будь-яким відомим способом для експресії рекомбінантних білків. Наприклад, нуклеїнові кислоти, що кодують бажаний поліпептид, можуть бути уведені в різні типи клітин і безкліткові системи для експресії. Можуть бути створені еукаріотичні (наприклад, лінії клітин COS, HEK293T, СНО й NIH) і прокаріотичні (наприклад, кишкова паличка) системи, що експресують, у яких послідовність для ПКМ уводиться в плазмід або інший вектор, використовуваний потім для перетворення живих клітин. Конструкції, у яких кДНК ПКМ містять повну відкриту рамку зчитування або біологічно активні фрагменти такої, вставляють у правильній орієнтації в експресуючий плазмід і можуть бути використані для експресії білка. Прокаріотичні й еукаріотичні системи, що експресують, допускають експресію й відновлення рекомбінаційних білків, у яких білок ПКМ ковалентно пов'язаний з амінокінцевою або карбокискінцевою стороною міченої молекули, що полегшує ідентифікацію й/або очищення. До прикладів міток, які можуть бути використані, відносять гексагістидин, HA, FLAG, і c-myc епітопні мітки. Ферментативна або хімічна ділянка рестрикції може бути створена між білком ПКМ і міченою молекулою таким чином, щоб мітка могла бути вилучена після очищення. Сполуки, що служать як активатори ПКМ2, демонструють специфічність і активацію ферменту ПКМ2 при відсутності ФДФ на рівні перевищуючому на 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99 або 100 % такової у присутності ФДФ. Більше того, сполуки можуть бути оцінені в присутності або відсутності пептиду фосфотірозина. Зв'язування пептиду фосфотірозина із ПКМ2 приводить до відділення ФДФ від ПКМ2 і конформаційним змінам ПКМ2 з активної тетрамірної форми в неактивну. Сполуки, що зв'язують ПКМ2 і блокують фермент із активною конфірмацією навіть у присутності пептиду фосфотірозину, приводять до втрати аллостеричного контролю над ПКМ2, необхідного для скидання біохімічних проміжних продуктів із процесу гліколізу в процес біосинтезу інших проміжних продуктів. Це, у свою чергу, приведе до придушення росту ракових клітин, активованих імунних клітин і жирових клітин. Способи лікування В одному з варіантів втілення даного винаходу наданий спосіб лікування або профілактики захворювання, патологічного стану або порушення, як описано в цьому документі (наприклад, лікування), що включає застосування сполуки, фармацевтично прийнятних солей сполуки або фармацевтичної композиції, що включає сполуку, що описана в цьому документі (наприклад, сполуку формули (I), (I-a), (II) або на фігурі 1). Сполуки й композиції, описані в цьому документі, можуть бути застосовані в культурах клітин, наприклад in vitro (у пробірці) або ex vivo (поза організмом) або в суб'єкта для лікування, профілактики й/або діагностики ряду порушень, включаючи описані нижче. Термін "лікувати" або "лікування", використаний у цьому документі, означає зовнішнє застосування або введення сполуки, одної або в комбінації із другою сполукою суб'єктові, наприклад, пацієнтові, або зовнішнє застосування або введення сполуки в ізольовану тканину або клітину, наприклад, клітинну лінію, отриману від суб'єкта, наприклад, пацієнта із захворюванням (наприклад, захворювання, що описане в цьому документі), симптомом захворювання, або схильністю до захворювання з метою лікування, зцілення, полегшення, ослаблення, зміни, усунення, поліпшення, коректування або впливу на захворювання, один або більше симптомів захворювання або схильності до захворювання (наприклад, для попередження, принаймні, одного симптому захворювання або відстрочки початку, принаймні, одного симптому захворювання). Ефективна доза сполуки для лікування порушення, згідно із даного документу, або "терапевтично ефективна кількість" відповідає кількості сполуки, ефективної при застосуванні в однократній або багаторазовій дозах у суб'єкта, при впливі на клітину або в лікуванні, полегшенні, усуненні або поліпшенні стану суб'єкта із захворюванням, перевершуючи очікування при відсутності такого лікування. Доза сполуки, ефективна в профілактиці захворювання, згідно з даним документом, або "профілактично ефективна кількість" сполуки відповідає кількості, ефективній при однократному або багаторазовому застосуванні в суб'єкта з метою профілактики або відстрочки початку прояву або рецидиву захворювання або симптому захворювання. 17 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Використовуваний у цьому документі термін "суб'єкт" відповідає людині або тварині. До типових людей-суб'єктів відносять людей-пацієнтів, що страждають захворюванням, наприклад, захворюванням, описаним у цьому документі, або здорові суб'єкти. Термін "тварини" містить у собі всіх хребетних, наприклад, не ссавців (таких як кури, земноводні, плазуючі) і ссавців, таких, як примати, крім людини, тварини, що використовують в домашньому й/або сільському господарстві, наприклад, вівці, собаки, кішки, корови, свині й так далі. Пухлинні захворювання Сполука або композиція, описані в цьому документі, можуть використовуватися з метою лікування пухлинних захворювань. "Пухлинне захворювання" -це захворювання або порушення, що характеризується наявністю клітин, здатних до автономного росту й розмноження, наприклад, патологічний стан, що характеризується проліферативним клітинним ростом. Прикладом пухлинних захворювань можуть бути карцинома, саркома, метастатичні захворювання (наприклад, пухлини простати, товстої кишки, легенів, молочної залози й печінки), пухлинні захворювання органів кровотворення, зокрема, лейкози, метастатичні пухлини. Широко розповсюджені види раку містять у собі: рак молочної залози, простати, товстої кишки, легенів, печінки й підшлункової залози. Лікування сполукою може проводитися в дозі, що ефективна для поліпшення, принаймні, одного із симптомів новоутворення, зокрема, зменшення клітинної проліферації, зниження маси пухлини й т.д. Описані способи ефективні при профілактиці й лікуванні злоякісних захворювань, включаючи, зокрема, солідні пухлини, пухлини м'яких тканин і метастази. Наведені способи ефективні також при лікуванні несолідних пухлин. До солідних пухлин відносять злоякісні новоутворення (наприклад, саркоми, аденокарциноми й карциноми) різних систем органів, наприклад, легенів, молочної залози, лімфоїдної системи, шлунково-кишкового тракту (наприклад, товстої кишки) і сечостатевих (наприклад, нирок, уротеліальні пухлини або пухлини яєчка) шляхів, глотки, простати і яєчників. Прикладами аденокарциноми можуть служити колоректальний рак, нирково-клітинний рак, рак печінки, недрібноклітинний рак легені й рак тонкої кишки. Інші приклади раку включають гострий лімфобластний лейкоз у дорослих, гострий лімфобластний лейкоз у дітей, гострий мієлоїдний лейкоз у дорослих; рак кори надниркової залози; рак кори надниркової залози у дітей; СНІД-асоційована лімфома, Снід-асоційовані злоякісні новоутворення; рак анального каналу; астроцитома мозочка в дітей; астроцитома головного мозку в дітей; рак позапечіночних жовчних проток; рак сечового міхура, рак сечового міхура в дітей; рак костей, остеосаркома / злоякісна фіброзна гистіоцитома; гліома стовбура головного мозку в дітей, пухлина головного мозку в дорослих; пухлини головного мозку, гліома стовбура головного мозку в дітей; пухлина головного мозку, астроцитома мозочка в дітей, пухлина головного мозку, астроцитома головного мозку / злоякісна гліома в дітей, пухлина головного мозку, епендімома в дітей; пухлина головного мозку, медуллобластома в дітей; пухлина головного мозку, супратенторіальні приметилні нейроектодермальні пухлини в дітей; пухлина головного мозку, гліома зорових шляхів і гіпоталамічна гліома в дітей, пухлини головного мозку в дітей (інші); рак молочної залози, рак молочної залози й вагітність; рак молочної залози в дітей, рак молочної залози в чоловіків;бронхіальні аденоми / карциноїди в дітей; карциноїдна пухлина в дітей; карциноїдна пухлина шлунково-кишкового тракту; рак кори надниркової залози; карцинома островкових клітин; карцинома невідомого походження; лімфома центральної нервової системи, первинна; астроцитома мозочка в дітей; церебральна астроцитома / злоякісна гліома в дітей; рак шийки матки; карциноми дитячого віку; хронічний лімфолейкоз; хронічний мієлолейкоз; хронічні мієлопроліферативні захворювання; світлоклітинна саркома сухожильної піхви, рак товстої кишки, колоректальний рак у дітей; Tклітинна лімфома шкіри, рак ендометрію; епендімома в дітей; епітеліальний рак яєчників, рака стравоходу, рак стравоходу в дітей; пухлини Юінгу; екстракраніальні герміногенноклітинні пухлини в дітей; екстрагонадні герміногенні пухлини; рак позапечіночних жовчних проток; рак очей, внутріочна меланома; рак очей, ретинобластома; рак жовчного міхура; рак шлунка, рак шлунка в дітей; карциноїдна пухлина шлунково-кишкового тракту; герміногенні екстракраніальні пухлини в дітей; герміногенні позагонадніпухлини; герміногенні пухлини яєчників; гестаційні трофобластичні пухлини; гліома стовбура мозку в дітей; гліома зорових шляхів і гіпоталамуса в дітей; ворсинчатоклітинна лейкемія; рак голови й шиї; гепатоцеллюлярний рак (печінки) у дорослих (первинний); гепатоцеллюлярний рак (печінки) у дітей (первинний); лімфома Ходжкіна в дорослих, лімфома Ходжкіна в дітей; лімфома Ходжкіна під час вагітності; поглоточний рак; гліома гіпоталамуса й гліома зорових шляхів у дітей; внутріочна меланома; карцинома островкових клітин (ендокринна частина підшлункової залози); саркома Капоші, рак нирок, рак гортані, рак гортані в дітей; гострий лімфобластний лейкоз у дорослих; гострий лімфобластний 18 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 лейкоз у дітей; гострий мієлобластний лейкоз у дорослих; гострий мієлобластний лейкоз у дітей; хронічний лімфолейкоз, хронічний мієлобластний лейкоз; ворсинчатоклітинна лейкемія; рак губ і порожнини рота, рак печінки в дорослих (первинний), рак печінки в дітей (первинний), недрібноклітинний рак легені, дрібноклітинний рак легенів; гострий лімфобластний лейкоз у дорослих; гострий лімфобластний лейкоз у дітей; хронічний лімфолейкоз; СНІД-асоційована лімфома; лімфома центральної нервової системи (первинна); T-клітинна лімфома шкіри; лімфома Ходжкіна в дорослих; лімфома Ходжкіна в дітей; лімфома Ходжкіна під час вагітності; неходжкинська лімфома у дорослих, неходжкинська лімфома у дітей; неходжкинська лімфома під час вагітності; лімфома первинна центральної нервової системи; макроглобулінемія Вальденстрему; рак молочної залози в чоловіків; злоякісна мезотеліома в дорослих; злоякісна мезотеліома в дітей; злоякісна тімома; медуллобластома в дітей; меланома; внутріочна меланома; меркеліома; злоякісна мезотеліома; метастатичний сквамозний рак шиї з невідомим первинним походженням; синдром множинних ендокринних неоплазій у дітей; множинна мієлома/плазмацитома; грибоподібний мікоз; мієлодиспластичні синдроми; хронічний мієлогенний лейкоз; гострий мієлоїдний лейкоз у дітей; множинна мієлома; хронічні мієлопроліферативні порушення; рак носової порожнини й поруч носової пазухи; назофарінгеальний рак; назофарінгеальний рак у дитячому віці; нейробластома; неходжкинська лімфома у дорослих; неходжкинська лімфома у дітей; неходжкинська лімфома під час вагітності; недрібноклітинний рак легені; рак порожнини рота в дітей; рак порожнини рота й губи; ротоглоточний рак; остеосаркома/злоякісна фіброзна гистіоцитоксантома кістки; рак яєчників у дітей; епітеліальний рак яєчників; гоноцитома яєчників; прикордонна пухлина яєчника; рак підшлункової залози; рак підшлункової залози в дітей; рак підшлункової залози, інсулоцитів; рак поруч носової пазухи й носової порожнини; рак паращитоподібної залози; рак полового члена; феохромоцитома; пінеальні й супратенторіальні приметилні нейроектодермальні пухлини в дітей; пухлина гіпофізу; плазмоцитома/ множинна мієлома; плевролегенева бластома; рак молочної залози й вагітність; лімфома Ходжкіна під час вагітності; неходжкинська лімфома під час вагітності; первинний лімфома центральної нервової системи; первинний рак печінки в дорослих; первинний рак печінки в дітей; рак передміхурової залози; рак прямої кишки; нирковоклітинний рак (нирки); нирковоклітинний рак (нирки) у дітей; переходноклітинний рак ниркової балії й сечоводу; ретинобластома; рабдоміосаркома в дітей; рак слинної залози; рак слинної залози в дітей; саркома Юїнга; саркома Капоші; саркома (остеогенна саркома)/злоякісна фіброзна гистіоцитоксантома кістки; саркома, рабдоміосаркома в дітей; саркома м'яких тканин у дорослих; саркома м'яких тканин у дітей; синдром Сезарі; рак шкіри; рак шкіри в дітей; рак шкіри (меланома); рак шкіри із клітин Меркеля; дрібноклітинний рак легенів; рак тонкої кишки; саркома м'яких тканин у дорослих; саркома м'яких тканин в дітей; первинний метастатичний сквамозний рак шиї невідомого походження; рак шлунка; рак шлунка в дітей; супратенторіальна приметильна нейроектодермальна пухлина в дітей; Т-клітинна лімфома шкіри; рак яєчка; тімома в дітей; злоякісна тімома; рак щитовидної залози; рак щитовидної залози в дітей; переходноклітинний рак ниркової балії й сечоводу; гестаціонна трофобластична хвороба; рак невідомої первинної локалізації в дітей; рідкі форми раку в дітей; переходноклітинний рак ниркової балії й сечоводу; рак уретри; саркома матки; рак піхви; гліома зорових шляхів і гліома гіпоталамуса в дітей; рак вульви; макроглобулінемія Вальденстрему; пухлина Вильмса. Метастази вищезгаданих раків також можуть піддаватися лікуванню або можуть бути відвернені відповідно до способів, що описані в цьому документі. Комбіноване лікування раку У деяких варіантах здійснення даного винаходу сполука, описана в цьому документі, застосовується з одним або більше додатковими способами лікування злоякісних захворювань. Типове лікування злоякісних захворювань включає, наприклад: хіміотерапію, цільову терапію, таку як терапія антитілами, імунотерапію й гормональну терапію. Приклади кожного із цих способів лікування наведені нижче. Хіміотерапія У деяких варіантах сполука, що описана в цьому документі, застосовується з однією або більше хіміотерапією. Хіміотерапія є способом лікування злоякісного новоутворення лікарськими препаратами, що руйнуть ракові клітини. "Хіміотерапія", на відміну від ціьової терапії, як правило, проводиться цитотоксичними засобами, які в більшості випадків швидко впливають на клітини, що діляться. Хіміотерапевтичні препарати порушують розподіл клітин різними можливими способами, наприклад, шляхом дуплікації ДНК або сепарації знову утворених хромосом. Більшість видів хіміотерапії націлені на клітини, що дуже швидко діляться і не специфічні для ракових клітин, хоча деякий ступінь специфічності може виходити з 19 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 нездатності багатьох ракових клітин відновлювати ушкодження ДНК, у той час як нормальні клітини в можуть більшості випадків. Прикладами хіміотерапевтичних агентів, що використовують у терапії раку, є антиметаболіти (наприклад, фолієва кислота, пурин і похідні піримідина) і алкілюючі засоби (наприклад, препарати хлорметину, нітрозомочевини, платини, солі алкілсульфокислоти, гідразини, тріазени, азирідини, веретенна отрута, цитотоксичні засоби, інгібітори топоізомерази й інші). Типовими засобами є акларубіцин, актиноміцин, алітретіноїн, альтретамін, аміноптерин, амінолевулинова кислота, амрубіцин, амсакрин, анагрелід, окис миш'яку, аспарагіназа, атразентан, белотекан, бексаротен, бендамустин, блеоміцин, бортезоміб, бусульфан, камптотецин, капецитабін, карбоплатин, карбоквон, кармофур, кармустин, целекоксіб, хлорамбуцил, хлорметин, цисплатин, кладрібин, клофарабин, кризантаспаз, циклофосфамід, цитарабін, дакарбазин, дактиноміцин, дауноміцин, децитабін, демеколцин, доцетаксел, доксорубіцин, ефапроксірал, елескломол, елзамітруцин, еноцитабін, епірубіцин, естрамустин, етоглюцид, етопозид, флоксурідин, флударабін, 5-фторурацил, фотемустин, гемцитабін, імплантанти Гліадела, гідроксікарбамід, гідроксімочевина, ідарубіцин, іфосфамід, іринотекан, ірофульвен, іксабепілон, ларотаксил, лейковорин, ліпосомальний доксорубіцин, ліпосомальний дауноміцин, лонідамін, ломустин, лукантон, манносульфан, мазопрокол, мелфалан, меркаптопурин, месна, метотрексат, метил-амінолевулінат, мітобронітол, мітогуазон, мітотан, мітоміцин, мітоксантрон, недаплатин, німустин, облімерсен, омацетаксин, ортатаксел, оксаліплатин, паклітаксел, пегаспаргаза, пеметрексед, пентостатин, пірарубіцин, піксантрон, плікамицин, порфімер натрію, преднімустин, прокарбазин, ралтітрексед, ранімустин, рубітекан, сапацитабін, семустин, сітімаген цераденовек, сатраплатін, стрептозоцин, талапорфін, тегафурурацил, темопорфін, темодал, теніпозид, тезетаксел, тестолактон, тетранітрат, тіотепа, тіазофурин, тіогуанін, типифарніб, топотекан, трабектедин, тріациквон, триетеленмеламін, триплатін, третіноїн, треосульфан, трофосфамід, урамустін, валрубіцин, вертепорфін, вінбластин, вінкристін, віндезін, вінфлунін, вінорелбін, воріностат, зорубіцин і інші цитостатики або цитотоксичні засоби, описані в цьому документі. У зв'язку з тим, що деякі лікарські препарати більш ефективні при спільному застосуванні, ніж при монотерапії, одночасно часто застосовуються два або більше препарати. Найчастіше два або більше хіміотерапевтичні засоби використовують як поєднану хіміотерапію. У деяких варіантах хіміотерапевтичні засоби (включаючи поєднану хіміотерапію) можуть бути використані в комбінації з речовиною, що описана в цьому документі. Цільова терапія У деяких варіантах здійснення даного винаходу сполуку, що описана в цьому документі, застосовують із однією або декількома видами цільової терапії. Цільова терапія являє собою використання засобів, специфічних для разрегульованих білків ракових клітин. Низькомолекулярні прицільні лікарські препарати в більшості випадків є інгібіторами ферментативних доменів мутованих, зверхекспресованих або інакше критичних білків ракової клітини. Вираженими прикладами є інгібітори тірозинкінази, такі як аксітиніб, босутиніб, цедираніб, дазатиніб, ерлотиніб, іматиніб, гефітиніб, лапатиніб, лестортиніб, нілотиніб, семаксаніб, сорафеніб, сунитиніб і вандетаніб, а так само інгібітори циклінзалежної кінази, такі як алвоцидіб і селицикліб. Терапія моноклональними антитілами є іншим способом, у якому терапевтичний засіб – це антитіло, що специфічно зв'язує білок на поверхні ракових клітин. Прикладами є антитіла до HER2/neu трастузумаб (ГЕРЦЕПТИН®), звичайно застосовувані при раку молочної залози, і анти-CD20 антитіла рітуксимаб і тозитумомаб, звичайно застосовувані при В-клітинному лейкозі. До інших типових антитіл відносять цетуксимаб, панітумумаб, трастузумаб, алемтузумаб, бевацизумаб, едреколомаб і гемтузумаб. Типові гібридні білки включають афліберцепт і денілейкін діфтітокс. У деяких варіантах цільова терапія може бути використана в сполученні із сполукою, що описана у цьому документі. Цільова терапія так само може включати малі пептиди в якості "пристроїв самонаведення", які можуть зв'язувати рецептори поверхні клітини або порушеного позаклітинного матрикса, що оточує пухлину. Радіонукліди, приєднані до цих пептидів (напр., RGD), знищують ракову клітину, якщо нуклід розпадається поруч із клітиною. Прикладом такої терапії є БЕКСКСАР®. Імунотерапія У деяких варіантах здійснення даного винаходу, сполука, що описана в цьому документі, застосовується з однією або декількома видами імунотерапії. Імунотерапія рака включає різноманітні терапевтичні стратегії, розроблені для індукування боротьби з пухлиною власної імунної системи пацієнта. Сучасні способи вироблення імунної відповіді проти пухлин включають внутрішньопузирну БЦЖ-імунотерапію при поверхневому раку сечового міхура, і 20 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 використання інтерферонів і інших цитокинів для індукування імунної відповіді в пацієнтів з нирковоклітинною карциномою й меланомою. Аллогенна трансплантація стовбурних кровотворних клітин може бути розглянута як форма імунотерапії, оскільки імунні клітини донора часто атакують пухлину при ефекті транплантат проти хазяїна. У деяких варіантах імунотерапевтичні засоби можуть бути використані в сполученні з речовиною, описаною в цьому документі. Гормональна терапія У деяких варіантах здійснення даного винаходу, сполука, що описана в цьому документі, застосовується з однією або декількома видами гормональної терапії. Ріст деяких злоякісних новоутворень можна інгібувати, уводячи або блокуючи певні гормони. Розповсюдженими прикладами гормонально-чутливих пухлин є певні типи раку молочної залози й рака передміхурової залози. Видалення або блокування естрогену або тестостерону часто є важливим додатковим лікуванням. При певних злоякісних новоутвореннях застосування агонистів гормонів, таких як прогестогени, може мати терапевтично ефект. У деяких варіантах гормональна терапія може застосовуватися в сполученні із сполукою, що описана у цьому документі. Ожиріння й порушення жирового обміну Сполука або композиція, що описані в цьому документі, можуть бути використані для лікування або профілактики ожиріння, наприклад, у людини, зокрема, дитини або дорослого. "Ожиріння" відповідає до стану, при якому індекс маси тіла суб'єкта перевищує або дорівнює 30. Багато сполук, що описані в цьому документі, можуть бути використані для лікування або профілактики станів з надлишковою масою тіла. "Надлишкова маса тіла" відповідає стану, при якому індекс маси тіла пацієнта перевищує або дорівнює 25,0. Індекс маси тіла (ІМТ) і інші визначення зазначені згідно "Клінічному керівництву Національного інституту здоров'я по ідентифікації, клінічному обстеженню й лікуванню надлишкової маси тіла й ожиріння в дорослих" (1998). Лікування сполукою може проводитися в дозі, що ефективна для зміни маси тіла суб'єкта, щонайменше, на 2, 5, 7, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 25, 40, 45, 50 або 55 %. Лікування сполукою може проводитися в дозі, що ефективна для зниження індексу маси тіла суб'єкта, менш 30, 28, 27, 25, 22, 20 або 18. Сполуки можуть бути використані для лікування або запобігання неправильного або неадекватного збільшення маси тіла, швидкості метаболізму або жировідкладення, наприклад, анорексії, булімії, ожиріння, цукрового діабету або гіперліпідемії (зокрема, підвищення рівня тригліцеридів і/або холестерину), а так само порушень жирового обміну або обміну ліпідів. Сполука або композиція, що описані в цьому документі, можуть застосовуватися для лікування ожиріння, асоційованого із синдромом Прадера-Віллі (СПВ). СПВ є генетичним порушенням, асоційованим з ожирінням (зокрема, патологічне ожиріння). Сполука або композиція, що описані в цьому документі, можуть застосовуватися для скорочення жирової тканини організму, запобігання збільшення жирової тканини в організмі, зниження рівня холестерину (наприклад, загального холестерину й/або співвідношення загального холестерину до холестерину ліпопротеїнів високої щільності), і/або зниження апетиту в людей, що страждають синдромом Прадера-Віллі, асоційованим з ожирінням, і/або полегшення супутніх захворювань, таких як цукровий діабет, серцево-судинні захворювання й інсульт. Композиції й способи застосування Описані в цьому документі композиції включають сполуки, описані в цьому документі (наприклад, сполука, певна в цьому документі), а також додаткові фармакологічні засоби, якщо такі присутні, у кількостях, ефективних для модулювання хвороби або її симптомів, включаючи описані в цьому документі. Термін "фармацевтично прийнятний носій або допоміжна речовина" відповідає носіям або допоміжним речовинам, які можна застосовувати в пацієнта разом із представленою сполукою, і які не порушують фармакологічну активність такого й не є токсічними при застосуванні в дозах, достатніх для доставки терапевтичної дози сполуки. Фармацевтично прийнятні носії, допоміжні сполуки й наповнювачі, які можна використовувати в представлених в цьому документі фармацевтичних композиціях, включають, не обмежуючись наступні, іонообмінні речовини, алюмінію оксід, алюмінію стеарат, лецитін, самоемульгуючі системи доставки лікарського препарату (SEDDS), такі як d-α-токоферол поліетиленгліколь 1000 сукцинат, сурфактанти, що використовують у фармацевтичних лікарських формах, наприклад, у твінах або інших подібних полімерних матрицях доставки, сироватковий білок, наприклад, альбумін людської сироватки, буферні речовини, наприклад, фосфати, гліцин, сорбінова кислота, сорбат калію, неповні гліцеридні суміші насичених 21 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 рослинних жирних кислот, воду, солі або електроліти, наприклад, протамінсульфат, дінатрійфосфат водню, дікалійфосфат водню, натрію хлорид, солі цинку, колоїдну кремнекислоту, магнію трисилікат, полівінилпірролідон, речовини на основі целюлози, полиетиленгліколь, карбоксіметилцеллюлозу натрію, поліакрилати, воски, поліетилен поліксіпропілен-блок-полімери, поліетиленгліколь і ланолін. Циклодекстріни, такі як α-, β-, і γциклодекстрін, або хімічно модифіковані похідні, такі як гідроксіалкілциклодекстріни, включаючи 2- і 3-гідроксіпропіл- β-циклодекстріни, або інші солюбілізовані похідні можна також успішно використовувати для поліпшення доставки сполук даної формули. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можна застосовувати перорально, парентерально, у складі інгаляційних спреїв, місцево, ректально, назально, буккально, вагінально або за допомогою імплантованого депо, переважно пероральне або ін'єкційне застосування. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можуть містити які-небудь стандартні нетоксічні фармацевтично прийнятні носії, ад'юванти або наповнювачі. Не обов'язково, pH фармацевтичного складу може коректуватися фармацевтично прийнятними кислотами, основами або буферами для підвищення стабільності розробленої сполуки або його форми доставки. Термін "парентеральний", що використовують у цьому документі, включає підшкірні, внутрішкірні, внутрішньовенні, внутрім'язові, внутрісуглобні, внутріартеріальні, внутрісиновіальні, інтрастернальні, інтракраніальні ін'єкції або інфузії, а також введення усередину уражених тканин. Фармацевтичні композиції можуть бути у вигляді стерильної ін'єкційної форми, наприклад, стерильної ін'єкційної водної або масляної суспензії. Суспензія може бути розроблена відповідно до відомих технік з використанням підходящих діспергуючих або зволожуючих речовин (таких як, наприклад, твін 80) і суспендуючих речовин. Стерильною ін'єкційною формою також може бути стерильний ін'єкційний розчин або суспензія в нетоксічному прийнятному для парентерального введення розріджувачі або розчиннику, наприклад, розчин в 1, 3-бутандіолі. До прийнятних наповнювачів і розчинників, які можна використовувати, відносять маннітол, воду, розчин Рінгеру й ізотонічний розчин хлориду натрію. Крім того, стерильні нелетучі масла традиційно використовуються як розчинник або суспендуюче середовище. Із цією метою можна використовувати будь-які легкі нелетучі масла, включаючи синтетичні моно- або дігліцериди. Жирні кислоти, такі як, олеїнова кислота і її гліцеридні похідні, придатні в готуванні ін'єкційних лікарських форм, оскільки є натуральними фармацевтично прийнятними жирами, як зокрема маслинове масло або касторове масло, особливо в поліоксіетильованих формах. Ці масляні розчини або суспензії можуть також містити довголанцюгові спиртові розріджувачі або діспергуючі речовини, або карбоксіметилцеллюлозу або подібні діспергуючі речовини, які часто використовуються в розробці фармацевтично прийнятних лікарських форм, наприклад, емульсій або суспензій. Для цих цілей можуть також використовуватися інші розповсюджені сурфактанти, наприклад, твіни або спани й/або інші подібні емульгуючі речовини або підсилювачі біодоступності, які часто використовуються у виробництві фармацевтично прийнятних твердих, рідких або інших лікарських форм. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можна застосовувати перорально в будь-якій пероральній прийнятній лікарській формі, включаючи, але не обмежуючись наступні: капсули, таблетки, емульсії й водні суспензії, дисперсії й розчини. У випадку таблеток для перорального застосування до найбільше часто використовуваних носіїв відносять лактозу й кукурудзяний крохмаль. Звичайно додаються речовини, що змазують, наприклад, стеарат магнію. При пероральному застосуванні капсул придатні такі розріджувачі як лактоза й висушений кукурудзяний крохмаль. При пероральному застосуванні водних суспензій і/або емульсій, речовина, що діє, яке можна суспендувати або розчинити в масляній фазі, сполучається з емульгуючими речовинами й/або суспендуючими речовинами. При бажанні, можна додати які-небудь підсолоджувачі й/або підсилювачі смаку й/або барвники. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можна також застосовувати у формі ректальних суппозиторіїв. Ці композиції можуть бути приготовлені шляхом змішування сполуки, представленої в цьому документі, з підходящим недратівним наповнювачем, що є твердою речовиною при кімнатній температурі, але рідким при ректальній температурі й, таким чином, стане в прямій кишці й визволить активні компоненти. У цю групу входять, не обмежуючись згаданим, наступні речовини: кокосове масло, бджолиний віск і поліетиленгліколі. Місцеве застосування фармацевтичних композицій, представлених у цьому документі, придатно, коли бажаному лікуванню піддаються області або органи, легкодоступні при місцевому застосуванні. Для місцевого застосування на шкірі фармацевтична композиція повинна бути складена з підходящою маззю, що містить діючі речовини, суспендовані або розчинені в носії. До носіїв для місцевого застосування сполук, представлених у цьому 22 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 документі, відносять, не обмежуючись згаданими, мінеральні масла, нафталанська нафта, білий вазелін, пропіленгліколь, поліоксіетиленові поліоксіпропіленові сполуки, неіонний емульгованний віск і вода. Як альтернативний варіант, фармацевтична композиція може бути складена з підходящим лосьйоном або кремом, що містить діючу речовину, суспендовану або розчинену в носії з підходящими емульгуючими речовинами. До підходящих носіїв відносять, не обмежуючись згаданими, мінеральні масла, сорбітанмоностеарат, полісорбат 60, цетилові воскові ефіри, цетеариловий спирт, 2-октилдодеканол, бензиловий спирт і вода. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можна також застосовувати топічно в нижніх відділах кишечника за допомогою ректальних суппозиторіїв або за допомогою клізми. Також сюди відносять топічні трансдермальні пластири. Фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, можна вводити за допомогою назальних аерозолів або шляхом інгаляцій. Такі композиції готуються відповідно до добре відомих технологій готування лікарських форм, вони можуть бути приготовлені як розчини у фізіологічному розчині, з використанням бензилового спирту або інших підходящих консервантів, підсилювачів усмоктування для посилення біодоступності, фторовуглецю, і/або інших відомих солюбілізуючих або діспергуючих речовин. Коли композиції, представлені в цьому документі, включають комбінацію сполуки описаної тут формули й одного або більше додаткових лікарських або профілактичних речовин, і сполука, і допоміжна речовина повинні входити в дозі приблизно від 1 до 100 %, а переважніше від 5 до 95 % від звичайно застосовуваної дози при монотерапії. Допоміжні речовини можна застосовувати окремо від сполук, представлених у цьому документі, як частину режиму багаторазових доз. Як варіант, ці речовини можуть входити до складу однієї лікарської форми, змішаної із сполуками, представленими в цьому документі, в одній композиції. Описані в цьому документі композиції можна застосовувати ін'єкційно, внутрівенно, внутріартеріально, підшкірно, інтраперітонеально, внутрім'язово або підшкірно; або перорально, буккально, назально, трансмукозальним способом, місцево, в очних лікарських формах або шляхом інгаляцій, у дозі від 0,5 до 100 мг/кг маси тіла, або в дозах від 1 мг до 1000 мг/дозу кожні 4-120 годин, або відповідно до вимог застосування конкретного препарату. Дані способи мають на увазі застосування ефективної дози сполуки або композиції для досягнення бажаного або зазначеного ефекту. Як правило, фармацевтичні композиції, представлені в цьому документі, варто застосовувати від 1 до 6 разів у день або способом безперервного уливання. Таке застосування можна використовувати в якості хронічної або гострої терапії. Кількість діючої речовини, яку можна комбінувати з носіями для готування однієї лікарської форми, буде варіювати залежно від реципієнта, що одержує лікування, і певного способу введення. Типовий препарат буде містити від 5 % до 95 % активної сполуки (вагове співвідношення). Як варіант, такі препарати містять від 20 % до 80 % активної сполуки. Можуть знадобитися більше низькі або високі дози в порівнянні з вищезгаданими. Конкретні режими доз і лікування для будь-якого конкретного пацієнта будуть залежати від ряду факторів, включаючи активність певної використовуваної сполуки, вік, масу тіла, загальний стан здоров'я, стать, режим харчування, час введення, швидкість виведення, сполучення з іншими препаратами, ступінь важкості й перебіг хвороби, стан або симптоми, схильність пацієнта до хвороби, стану або симптомам, а також від думки лікаря. Після поліпшення стану пацієнта при необхідності можна вводити підтримуючу дозу сполуки, композиції або комбінації, представлені у цьому документі. Згодом дозу або частоту введення, або й те, і інше залежно від симптомів можна скоротити до рівня, при якому поліпшення стану зберігається, а симптоми полегшені до бажаного рівня. Однак пацієнтам може знадобитися довгострокове періодичне лікування при рецидиві симптомів хвороби. Добір і моніторинг пацієнтів Сполука, що описана в цьому документі, може модулювати ПКМ2. Відповідно, пацієнт і/або суб'єкт може бути відібраний для лікування сполукою, що описана у цьому документі, після вихідного обстеження пацієнта й/або суб'єкта з метою визначення, чи потребує він у модуляції ПКM 2, і, у випадку якщо обстеження показує, що суб'єкт має потребу в модуляції ПКM 2, з наступним застосуванням у суб'єкта сполуки, описаної в цьому документі. Обстеження суб'єкта на предмет необхідності модулювання ПКM 2 може бути проведене з використанням відомих способів, наприклад, шляхом виміру наявності й/або активності ПKM2 в організмі пацієнта. У деяких варіантах активність і/або рівень ПKM2 оцінюється в новоутворенні. Моніторинг пацієнта, що одержує сполуки, описаний в цьому документі, може виконуватися, наприклад, з метою визначення поліпшення стану й/або небажаних ефектів. Поліпшення стану пацієнта можна оцінювати, спостерігаючи за ростом, відсутністю росту або регресією ракової 23 UA 107667 C2 5 10 15 пухлини. У деяких варіантах проводиться рентгенологічне обстеження пацієнта або оцінка гемолітичних параметрів. ПРИКЛАДИ Приклад 1. Кількісне визначення ПКМ2. Процедура: - Матковий ферментний розчин ПКМ2 розвели в робочому буферному розчині. - У кожну лунку додали 2 мкл препарату, після чого ввели 180 мкл реакційної суміші. - Інкубували реакційні суміші (без АДФ) протягом 30 хвилин при температурі 4 °C. - Пластинки повторно зрівноважили до кімнатної температури, після чого додали 20 мкл АДФ із метою ініціації реакції. - Хід реакції вимірювали по змінах абсорбції при довжині хвилі 340 нм при кімнатній температурі (25 °C) Реакційна суміш: ПКМ2 (50 нг/лунка), АДФ (0,7 ммоль), фосфоенолпіруват (0,15 ммоль), НАД (180 напівтемних), ЛДГ (2 одиниці) у робочому буферному розчині. Робочий буферний розчин: 100 ммоль KCl, 50 ммоль трис pH 7.5, 5 ммоль MgCl 2, 1 ммоль ДТТ, 0.03 % бичачий сироватковий альбумін. Приклад 2: Сполуки і їх готування Схема 2: 20 25 30 Загальна процедура одержання сполуки 1: до розчину 4-бромфенола (5,0, 0,0289 моль, 1 еквівалент) з діметилформамідом (ДМФ) (50 мл) після додаванням йодистого етилу (4,70 мл, 0,0578 моль, 2 еквіваленти) додали вуглекислий калій (9,970 г, 0,0722 моль, 2,5 еквіваленти) і перемішували всю ніч. Хід реакції відслідковували за допомогою тонкошарової хроматографії. Після закінчення дій з вихідним матеріалом реакційну суміш прохолоджували водою (25 мл) і екстрагували етилацетатом (2 × 50 мл). Промивання комбінованих органічних шарів здійснювалося соляним (40 мл) розчином. Етилацетатний шар сушили над Na2SO4 і концентрували в умовах зниженого тиску. Неочищений продукт очищали за допомогою колоночної хроматографії (9:1, етилацетат/гексан) для одержання сполуки 1 (5,0 г, 86,2 %). Масспектрометрія (201,06) 202,1 (M+1). Загальна процедура для сполуки 2: Сполуку 1 помістили в колбу із двома горлечками (2,00 г, 0,0099 моль, 1 еквівалент). Хлорсульфонову кислоту (25 мл, 0,358 моль, 36 еквівалентів) додали повільно протягом 10 хвилин при температурі -10 °C. Отриману суміш перемішували 24 UA 107667 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 при тій же температурі протягом 10 хвилин. По завершенні реакційну суміш поміщали в крижану воду (100 мл) і проводили екстракцію етилацетатом. Шар органічної речовини промивали H 2O, сушили над Na2SO4 і концентрували при зниженому тиску. Бажану сполуку 2 було отримано за допомогою очищення колоночною хроматографією (силікагель 60-120 меш, 5 % етилацетатгексан) у вигляді твердої речовини (3 г, 43,3 %). Загальна процедура для сполуки 3: До розчину етил-4-амінобензоната (300 мг, 1,81 ммоль, 1 еквівалент) у суміші 1:1 ДХМ (діхлорметан)/піридин (5 мл/5 мл) був доданий розчин 5-бром-2етоксібезол-1-сульфонилхлориду (сполуки 2, 654 мг, 2,17 ммоль, 1,2 еквіваленти) у ДХМ (5 мл/5 мл) при температурі 0 °C. Реакційну суміш перемішували протягом ночі при кімнатній температурі. По завершенні реакції реакційну суміш розвели ДХМ і промили водою, висушили над натрію сульфатом і сконцентрували при зниженому тиску. Неочищений продукт промили діетиловим ефіром, а потім n-гексаном і висушили до виходу сполуки 3 у вигляді білуватого кольору твердої речовини (0,600 г, 77 %). 1 H NMR (200 МHz, ДМСО-d6) 1,30 (t, 3H), 1,58 (t, 3H), 4,20-4,40 (m, 4H), 6,82 (d, 1H), 7,10-7,20 (m, 2H), 7,56-7,60 (dd, 1H), 7,90-8,00 (m, 3H). Загальна процедура для сполуки 4: етил 4-(5-бромо-2-етоксіфеніл сульфонамід)бензоат (сполука 3, 600 мг, 0,0014 моль, 1 еквівалент) внесли в ТГФ-H2O (ТГФ – тетрагідрофуран або тетрагідрофолат) (1:1, 30 мл/30 мл). Потім до вищевказаної реакційної суміші додали LiOH.H 2O (0,293 г, 0,007 моль, 5 еквівалентів) і перемішували протягом ночі в колбі зі зворотним холодильником. Після обробки вихідної речовини, розчинник видалили при зниженому тиску для одержання неочищеного продукту. Неочищений продукт промили етилацетатом. Водний шар підкислили лимонною кислотою (PH=4) і повторно екстрагували етилацетатом (2 × 25 мл). Комбінований шар органічної речовини висушили над Na 2SO4 і сконцентрували при зниженому тиску. Отриману кислоту на наступному етапі промили гексаном для одержання чистої сполуки 4 (0,500 г, 89 %). 1 Мас-спектрометрія (400.24) 397.9 (M-2 пік, режим визначення негативних іонів); H NMR (200 MHz, ДМСО-d6) 1.20 (t, 3H), 4.18 (q, 2H), 7.10 (d, 1H), 7.10-7.20 (d, 3H), 7.60-8.0 (m, 4H), 10.6 (s, 1H), 12.6 (bs, 1H). Загальна процедура для сполуки 7: до розчину 4-(5-бромо-2-етоксіфеніл сульфонамід) бензойної кислоти (сполука 4, 0,300 г, 0,00074 моль, 1 еквівалент) у ДМФ (25 мл) при температурі 0 °C додали 1- (3-діметиламіно- пропіл)- 3-етилкарбодіїмід гідрохлорид (EDCI) (0,157 г, 0,00082 моль, 1,1 еквівалент), HOBt (0,126 г, 0,00082 моль, 1,1 еквівалент) і ДІПЕА (0,48 мл, 0,0026 моль, 3,5 еквівалент) і перемішували протягом 15 хвилин. Потім при температурі 0 °C був доданий розчин 1-2-(метоксіфеніл) піперазина (сполука 6, 0,171 г, 0,00074 моль, 1 еквівалент), після чого отриману суміш перемішували протягом ночі при кімнатній температурі. Після завершення реакції була додана вода (30 мл) і проведена екстрагування етилацетатом (2 × 30 мл). Комбінований шар органічної речовини висушили над безводним Na2SO4 і сконцентрували в умовах зниженого тиску. Неочищений продукт розчинили в етилацетаті (EtOAc) і додали до пентану для одержання сполуки 7, що представляє собою тверду речовину білого кольору, що відфільтровали й висушили (200 мг, вихід 46,5 %). 1 45 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 1.30 (t, 3H), 2.80-3.0 (bs, 4H), 3.30-3.60 (bm, 4H), 3.78 (s, 3H), 4.20 (q, 2H), 6.80-7.00 (m, 4H), 7.10-7.20 (m, 3H), 7.30-7.34 (d, 2H), 7.70-7.75 (dd, 1H), 7.80 (d, 1H), 10.35 (s, 1H); Мас-спектрометрія 574.0; Ширина піка при мас-спектрометрії 574.0; чистота ВЕЖХ 97.80 %. Синтез сполуки 6: 25 UA 107667 C2 Схема 3: 5 10 15 20 25 Загальна процедура для сполуки 5: у круглодонну колбу із двома горлечками помістили трет-бутил піперазин-1-карбоксилат (4,97 г, 0,0267 моль, 1 еквівалент), 2-бромоанізол (5,0 г, 0,0267 моль, 1 еквівалент) і CS2CO3 (21,7 g, 0,0668 моль, 2,5 еквіваленти) у дегазованому 1, 4діоксані (100 мл) при атмосфері N2. Потім до реакційної суміші були додані 2,2’-біс-діфенілфосфіно-1,1’-бінафтил (BINAP) (1,49 г, 0,00240 моль, 0,09 еквівалента) і Pd (OAc) 2 (0,96 г, 0,00042 моль, 0,016 еквіваленту) в умовах атмосфери N2, після чого здійснювалося перемішування при 80 °C протягом ночі. Моніторинг ходу реакції проводили за допомогою способу тонкошарової хроматографії. По закінченні надлишковий розчинник відігнали при зниженому тиску, а залишок розвели водою й екстрагували етилацетатом. Шар органічної речовини відокремили, висушили над Na2SO4 і сконцентрували в умовах зниженого тиску. Неочищений продукт очищали колонковою хроматографією (силікагель 60-120 меш, 5-6 %, етилацетат/гексан) для виходу цільової сполуки 5, що виявляє у вигляді грузлого масла (2,8 г, 36 %). 1 H NMR (500 MHz, CDCl3): 1.42 (s, 9H), 3.0 (m, 4H), 3.60 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 6.80-7.00 (m, 4H); Мас-спектрометрія 293,1 (M+1 пік). Загальна процедура для сполуки 6: у круглодонной колбі із двома горлечками тре-бутил - 4(2-метоксіфеніл) піперазин-1-карбоксілат (сполука 5, 0,600 г, 0,00205 моль, 1 еквівалент) обробили ефіром-HCl (10 мл). Отриману суміш перемішували протягом ночі. Після завершення обробки вихідного матеріалу, згідно ТСХ, ефір видалили при зниженому тиску й одержали твердий матеріал. Твердий матеріал промили етилацетатом і висушили для одержання аміносполуки 6 у вигляді твердої речовини білого кольору (0,425 г, 90,08 %). Наступні аналоги були приготовлені з використанням вищевказаної процедури з різними сульфонилхлоридами замість сполуки 2. 5-хлор-2-метоксі-N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл) бензолсульфамід (8) 30 35 Сполука 8 було приготовлено з наявного в продажі 2-метоксі-5хлоробензенсульфонилхлориду, як показано на схемі 2. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.8-3.0 (bm, 4H), 3.40-3.78 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 6.80-7.00 (m, 4H), 7.12 (d, 2H), 7.21 (d, 1H), 7.30 (d, 2H), 7.65 (dd, 1H), 7.74 (d, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 516 (відношення маси до заряду); чистота ВЕЖХ: 94.33 % 5-бром-2-метоксі-N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл) бензолсульфамід (9) 26 UA 107667 C2 5 10 15 Відповідний сульфонілхлорид був отриманий з 4-бромофенолу.O-метилювання 4бромофенолу з наступною реакцією із хлорсульфоновою кислотою дозволило одержати 2метоксі-5-бромобензилсульфонілхлорид, використаний для одержання сполуки 9, як показано на схемі 2. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bm, 4H), 3.40-3.78 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 6.80-7.00 (m, 4H), 7.10-7.18 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.70 (dd, 1H), 7.74 (d, 1H); Основний пік при масспектрометрії становить 562.0; чистота ВЕЖХ: 94.36 % N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)нафталін-2-сульфонамід (10) Наявний у продажі нафтален-2-сульфонілхлорид використовували замість сполуки 2 для 1 одержання сполуки 10. H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.80-3.00 (bm, 4H), 3.40-3.78 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.80-7.00 (m, 4H), 7.10-7.30 (m, 4H), 7.60-7.80 (m, 3H), 8.00-8.20 (m, 3H), 8.50 (s, 1H), 10.7 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 504.2; Чистота ВЕЖХ: 93.65 % (СЕЖХ) 5-хлор-2-етоксі-N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)бензол-сульфонамід (11) 20 25 30 Відповідний сульфонілхлорид був отриманий з 4-хлорофенолу.O-етилювання 4хлорофенолу з наступною реакцією із хлорсульфоновою кислотою в рамках при відповідних умовах дозволило одержати 2-етоксі-5-хлоробензен, використаний для одержання сполуки 11, як показано на схемі 2. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 1.30 (t, 3H), 2.80-3.0 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 4.20 (q, 2H), 6.80-7.00 (m, 4H), 7.16 (d, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.38 (d, 2H), 7.60 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 10.20 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 530.1; Чистота ВЕЖХ: 97.48 % N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)бензен-сульфонамід (12) 1 35 Сполуку 12 було отримано за схемою 2 з використанням бензенсульфонилхлориду. H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.84-6.98 (m, 4H), 7.15 (d, 2H), 7.30 (d, 2H), 7.56-7.64 (m, 3H), 7.80 (d, 2H), 10.6 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 452.6; Чистота ВЕЖХ: 96.90 %. 27 UA 107667 C2 N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)нафталін-1-сульфонамід (13) 5 10 15 Сполука 13 отримана за схемою 2 з використанням наявного в продажі нафтален-1сульфонілхлориду. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.84-6.98 (m, 4H), 7.10 (d, 2H), 7.24 (d, 2H), 7.62-7.78 (m, 3H), 8.08 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.72 (d, 1H), 10.98 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 502.1; Чистота ВЕЖХ: 96.59 %. 2,6-діфторо-N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)бензен-1-сульфонамід (14) Сполука 14 отримана за схемою 2 з використанням наявного в продажі 2,6діфторобензенсульфонілхлориду. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.84-7.00 (m, 4H), 7.20 (d, 2H), 7.30 (t, 2H), 7.38 (d, 2H), 7.68-7.74 (m, 1H), 11.2 (s, 1H); Основний пік при масспектрометрії становить 488.1; Чистота ВЕЖХ: 97.16 %. N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)хінолін-8-сульфонамід (15) 20 25 Сполука 15 отримана за схемою 2 з використанням наявного в продажі хінолін 8сульфонилхлориду. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.82 (d, 2H), 6.90-7.00 (m, 2H), 7.15-7.20 (2 дублети, 4H), 7.70-7.78 (m, 2H), 8.24 (d, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.50 (d, 1H), 9.15 (bs, 1H), 10.42 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 503.2; Чистота ВЕЖХ: 97.11 %. N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)бензо[d]тіазол-5-сульфонамід (17) 30 35 Сполука 17 отримана з наявного в продажі бензтіазол-6-сульфоніл хлориду у відповідності зі схемою 2 протоколу. 1 H NMR (500 MHz, ДМСО-d6) 2.90-3.00 (bs, 4H), 3.40-3.78 (bm, 4H), 3.80 (s, 3H), 6.82-7.00 (m, 4H), 7.20 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 7.90 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.78 (s, 1H), 9.60 (s, 1H), 10.70 (s, 1H); Основний пік при мас-спектрометрії становить 509.1; Чистота ВЕЖХ: 97.29 % N-(4-(4-(2-метоксіфеніл)піперазин-1-карбоніл)феніл)-3,5-діметилбензен-сульфонамід (18) 28