Спосіб заморожування еритромаси

Изобретение относится к биологии и медицине, точнее к консервированию биообъектов, в частности эритроцитов. Цель изобретения - обеспечение сохранности эритроцитов без криопротектора. Для этого эритромассу напыляют на охлажденную внутреннюю поверхность цилиндрического контейнера вращающимся диском, завершающим возвратно-поступательное движение вдоль оси контейнера, находящегося в термос^аторе с хладагентом. Диск движется вверх, при достижении верхней точки зоны напыления подача клеточной суспензии на распыливающий диск прекращается. v Во время движения диска вниз капли, намороженные на внутреннюю поверхность контейнера, сбрасываются на его дно, т.е. идет гранулирование замороженного объекта. Цикл повторяется. После замораживания - отогрева сохраняется 78% клеток, уровень свободного галоглобина в надосадке 1,84+ +0,15 г/л. Гемолиз после отогрева 100%. (Л С Oi ел ел 24-! ї 1406855 Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для консервирования биологических объектов, в частности эритроцитов. Цель изобретения - обеспечение сохранности эритроцитов без криопротектора за счет увеличения скорости охлаждения и выравнивания ее по высоте контейнера и в пределах одного слоя. Способ осуществляют следующим образом. При достижении распиливающего диска в одну сторону, например вверх, 15 осуществляется напыление клеточной суспензии на чистую внутреннюю поверхность контейнера. При достижении верхней точки зоны напыления подача клеточной суспензии на распьшиваклций 20 диск прекращается. Во время движения распиливающего диска в обратную сторону кайли, намороженные на внутреннюю поверхность контейнера,"сбрасываются на дно контейнера, т.е. про- 25 исходит гранулирование замороженного объекта. После этого весь цикл повторяется. Для выравнивания скорости охлаждения в пределах одного слоя необходимо проводить напыление таким образом, чтобы капли в одном слое не перекрывали одна другую. Это достигается при скорости V движения распыливающего диска, отвечающей уело__ ВИЮ ся частотой вращения двигателя системы подачи биообъекта. Диаметр контейнера D 54 мм, толщина стенки контейнера 2 мм, высота контейнера 200 мм, длина зоны распыления 100 мм. Диаметр распыляющего диска 18 мм, частота вращения распыляющего диска 3000 об/мин. Диаметр капли d 0,8 мм, ориентировочная скорость охлаждения 5000 К/с. Скорость движения распыливающего диска V 25 мм/с задавалась частотой вращения электродвигателя привода возвратно-поступательного движения. В качестве хладагента использовали 3 жидкий азот. Время распыления 10 см биообъекта 2 мин, так как распыление происходит только при движении в.одну сторону. После замораживания-отогрева сохранилось 78% клеток, уровень свободного гемоглобина в надосадке 1,84+ ±0,15 г/л. Параллельно осуществляли замораживание эритромассы без криопротектора известным способом. После отогрева гемолиз составлял 100%. Таким образом, предлагаемый способ замораживания обеспечивает высокую (75-80%) сохранность эритроцитов без использования криопротектора. Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Способ замораживания эритромассы путем напыления ее на охлажденную внутреннюю поверхность цилиндрического контейнера вращающимся диском, совершающим возвратно-поступательное 40 движение вдоль оси контейнера, устагде G - объемный расход распыливаемого объекта-, позленного вертикально в термостатиD - внутренний диаметр контейрованную емкость с хладагентом, о тнера; л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цеd - диаметр капли на поверхности лью обеспечения сохранности эритро45 цитов без криопротектора, напыление контейнера. Высокая скорость охлаждения доспроизводят при движении распыливаютигается за счет того, что единичная щего диска в одном направлении, при капля охлаждается быстрее, чем слой, этом скорость V движения распыливаютак как основной характеристический щего диска должна отвечать условию размер меньше, чем у слоя. 50 3G Скорость охлаждения задается од2iTDd ' нозначно в зависимости от размера капли, толщины материала и стенки где G - объемный расход распыливаконтейнера. емого объекта; П р и м е р . Эритромассу с пока- 55 D - внутренний диаметр контейзателем гематокрита 0,2 замораживали нера; без криопротектора. Расход ^иопогиd - дпаметр капли на поверхносческого объекта G 167 мм 3 /с задавалти контейнера. 1406855 Редактор Т.Горячева Составитель Н.Гуляева Техред М.Ходанич Корректор Л.Пилипенко Заказ 575/ДСП Тираж 410 . Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений н открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 ' Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород» ул. Проектная, 4