Спосіб низькотемпературного консервування біологічних об’єктів

Номер патенту: 15990

Опубліковано: 29.08.1997

Автори: Кушнір Володимир Маркович, Кушнір Олена Володимирівна

Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Способ низкотемпературной консервации биологических объектов, включающий заполне­ние дозой объекта цилиндрического контейнера из полимерного материала, термическую герметиза­цию, размещение контейнера в упаковку, замора­живание и хранение в емкости с жидким азотом, отличающийся тем, что, с целью снижения потерь и повышения выживаемости биологических объек­тов, дозы объекта вводят в контейнер, снабженный капиллярными трубками различной длины, разме­щенными на противоположных сторонах контей­нера, размещение контейнера в упаковке производят таким образом, чтобы конец длинной трубки находился внизу, а замораживание прово­дят в два этапа, причем первый этап включает в себя замораживание до момента начала кристал­лизации объекта, находящегося в капиллярной трубке, извлечение объекта из жидкого азота с по­следующим вибрационным воздействием.

Текст

f\ ДЛЯ СЛУЖРБИОГО ПОЛЬЗОВАНИЯ ЭКЗ N» СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (19) (II) (5D4 А 01 N 1 / 0 2 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО'ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3882776/28-14 * (22) 14.03.85 -* " ' t(75) Е.В.Кушнир и В.М.Кушнир (53) 615.475 (088.8) (56) Осташко Ф. И. Методические рекомендации по Харьковской технологии асептического получения и криоконсервации спермы производителей для госплемстанций и племпредприятий. Харьков, 1978. (54) СПОСОБ НИЗКОТЕМПЕРАТУРНОЙ КОНСЕРВАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ (57) Изобретение относится к криобиологии, касается способов криоконсервации биоматериалов (спермы, клеточного мозга, эритроцитов крови и др.) ,Цель изобретения - уменьшение потерь и повышение выжимаемости клеток при герметизации и замораживании биообъектов путем расфасовки жидких объектов в заранее обусловленного объема контейнеры, соединенные медцу собой тонкими капиллярными каналами для непрерывной их расфасовки и самодочировки без использования в производственных условиях различных дозирующих аппаратов-автоматов. При этом меньше повреждается клеток при герметизации термической сваркой тонких капилляров в отличие от сварки контейнеров, не имеющих таких капилляров. Замораживание объекта протекает в два этапа - вначале в капилляре из переохлажденного состояния, а затем в емком резервуаре из непереохлажденного. Замораживание объекта без переохлаждения способствует меньшему повреждению клеток, чем в переохлажденных объектах. 9) 9) 05 ъ 1* 1 1436966 Изобретение относится к криобиолоПодготовленный к замораживанию гии, а именно к способам низкотемпеконтейнер представляет собой заполратурной консервации биоматериалои, ненный не на весь объем резерпуар и например спермы, клеточного мозга, загерметизированный так, что одна эритроцитов крови и т.д. трубка значительно больше другой (фиг.2). Цель изобретения - снижение потерь и повышение выживаемости биолоКонтейнеры укладывают в специаль( гических объектов. ный штатив длинными капиллярными На фиг. 1 изображены контейнеры, 10 трубками книзу, сверху фиксируют вид сверху; на фиг. 2 - один контейнер, крышкой, охлаждают и эквилибрируют в вид сверху; на фиг. 3 - разрез А-А холодильнике. Затем штатив переносят на фиг. 2; на фиг. 4 - разрез Б-Б в широкогорлое жидкоазотное хранилина фиг. 2. ще и размещают его так, чтобы капиллярные трубки касались поверхности Контейнер состоит (фиг.2,3,4) из 15 жидкого азота. Через 8-10 с их извлеемкого цилиндрического резервуара 1 кают из азота и, чтобы обеспечить из полимерного материала и отходящей одинаковый режим замораживания во от него капиллярной трубки 2 с одной всех контейнерах, вызывают принуди-г стороны и такой же трубки с другой. тельную кристаллизацию биообъекта Для придания прочности контейнерам 20 во всех капиллярах путем подключения капиллярная трубка и место перехода вибратора к штативу, постукивая по в основной резервуар выполнены из нему деревянной планкойv Штатив выболее толстого полимерного материала. держивают в парах азота 8-10 мин, Способ осуществляют следующим обзатем полностью погружают в жидкий разом. 25 азот для 'длительного хранения. Через крайнюю трубку фабричной заготовки (фиг.1) с помощью шприца или какого-либо другого приспособления Для повышения качественных показаполняют контейнеры дозой объекта. зателей замороженно-оттаянных клеЗапаивают крайнюю трубку термической 30 ток биообъекта кристаллизацию в трубсваркой. Затем первый контейнер неках вызывают в тот момент, когда в сколько прижимают, чтобы из него вырезервуаре основная масса объекта еще текло определенное количестдо бионе достигла криоскопической темпераобъекта и герметиризуют его вручную туры. При таких искусственно созданили с помощью аппарата с противопоных условиях замораживания, когда в • 35 объекте наступает кристаллизация ложной стороны термической сваркой трубки с одновременным отделением без его переохлаждения, клетки успезаполненного контейнера. Аналогичным вают разместиться в межкристалличесспособом герметизируют и отделяют кие пространства и-повреждаются в все остальные заполненные биообъектом меньшей степени, чем при интенсивной 40 кристаллизации после сильного переконтейнеры. охлаждения всего объема замораживаеГерметизация биологического объмого объекта. екта путем термической сварки капиллярных трубок способствует значительПеред использованием биообъект отно меньшему повреждению клеток от 45 таивают в контейнере при 3&-40 С и п-ерегрева, так как в капиллярной проверяют качество клеток. Контейнер трубке находится их минимальное кообрабатывают спиртовым ватным тамполичество, а место сварки отдалено от ном, вскрывают его путем прокола резервуара контейнера - основного иглой трубки в месте ее сварки и вывместилища объекта. Неполностью заполненный резервуар 50 давливают необходимое количество объекта, например спермы, для анализа контейнера и герметизация путем сварбез предварительного помещения дозы ки трубок, выполненных из более толсв инструмент, например в зоошприц того полимерного материала, предуразового пользования для осеменения преждает брак биологического объекта 55 коров и телок. Возможность оценки за счет сохранения целостности конкачества спермы из контейнера позвотейнеров при увеличении объема замоляет сохранить осеменитальные инструраживаемого объекта, прочности трубменты при некачественной сперме. ки и места сварки. 1436966 ный капиллярными трубками различной Ф о р м у л л и з о б р е т е н и я длины, размещенными на противоположСпособ низкотемпературной консерных сторонах контейнера, размещение вации биологических объектов, вклюконтейнера в упаковке производят тачающий заполнение дозой объекта циким образом, чтобы конец длинной линдрического контейнера из полимертрубки находился внизу, а замораживаного материала, термическую герметиние проводят в два этапа, причем перзацию, размещение контейнера в упавый этап включает в себя замораживаковку, замораживание и хранение в ние до момента начала кристаллизаемкости с жидким азотом, о т л и 10 ции объекта, находящегося в капиллярч а ю щ и й с я тем, ч т о , с целью ной трубке, извлечение объекта из снижения потерь и повышения выживаежидкого азота с последующим вибрацимости биологических объектов, дозы онным воздействием. объекта вводят в контейнер, снабжен // / і 1 Фиг. і г2 Фиг. U36966 Редактор А.Долинкч Составитель Л.Гохштейн Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни Заказ 1410/ДСП Тираж 365 Подписное ВИИИЇЇИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская н а С , д. А/5 Произволетвенно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная,

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for low-temperature preserving of biological objects

Автори англійською

Kushnir Olena Volodymyrivna, Kushnir Volodymyr Markovych

Назва патенту російською

Способ низкотемпературной консервации биологических объектов

Автори російською

Кушнир Елена Владимировна, Кушнир Владимир Маркович

МПК / Мітки

МПК: A01N 1/02

Мітки: біологічних, об'єктів, низькотемпературного, спосіб, консервування

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/4-15990-sposib-nizkotemperaturnogo-konservuvannya-biologichnikh-obehktiv.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб низькотемпературного консервування біологічних об’єктів</a>

Подібні патенти