2-(4-ариліден-2,5-діоксоімідазолідин-1-іл)-n-арилацетаміди, що мають протилейкемічну активність

2-(4-Ариліден-2,5-діоксоімідазолідин-1-іл)-Nарилацетаміди формули 2 3 O H N N Ar N H 35653 R O O R1 , де Аr=С6Н5-СН=СН, 4-Сl-С6Н4, 4-СН3О-С6Н4; R, R1=H, СН3О, СІ, CF 3, що володіють протилейкемічною активністю. Синтезовані сполуки є білими або світложовтими кристалічними порошками, розчинними у ДМСО і ДМФА, малорозчинними в ацетатній кислоті, в спиртах і нерозчинними в етері, хлороформі, воді. Для доказу складу і структури синтезованих сполук були використані відомі фізико-хімічні методи, зокрема ЯМР-1Н- та мас-спектроскопія, та елементний аналіз. Одержані результати свідчать про відповідність синтезованих сполук заявленим. Заявлені 2-(4-ариліден-2,5-діоксоімідазолідин1-іл)-N-арилацетаміди одержують з високими виходами при використанні відомих синтетичних підходів у декілька стадій, що включають синтез 5ариліденгідантоїнів в умовах реакції Кньовенагеля, які через стадію одержання N-калійних солей вводять в реакції алкілювання з відповідними хлора 4 цетамідами, що приводить до утворення цільових продуктів. Для визначення протилейкемічної активності 2-(4-ариліден-2,5-діоксоімідазолідин-1-іл)-Nарилацетамідів проведено in vitro скринінг протилейкемічної активності на 6-ти лініях ракових клітин лейкемії (CCRF-CEM, HL-60(TB), К-562, MOLT4, RPMI-8226, SR) при дії речовин в серії 10-ти кратних розведень (концентрація 10-4-10-8М) згідно зі стандартною процедурою оцінки протипухлинної активності ново-синтезованих сполук в Національному інституті раку (National Cancer Institute of National Institute of Health, USA) в рамках Development Therapeutic Program згідно з договором між вказаною установою та Львівським національним медичним університетом імені Данила Галицького. В результаті проведених експериментальних досліджень отримали 3 дозозалежні параметри lgGI50 - логарифм концентрації досліджуваної речовини, яка пригнічує ріст 50% клітин, lgTGI - логарифм концентрації досліджуваної речовини, яка повністю пригнічує ріст клітин, lgLC50 логарифм концентрації досліджуваної речовини, яка викликає загибель 50% клітин [2, 3, 4]. В умовах експерименту заявлені 2-(4ариліден-2,5-діоксоімідазолідин-1-іл)-Nарилацетаміди виявили високу протилейкемічну активність (результати наведені в Таблиці). Таблиця Протилейкемічна активніть активність in vitro та гостра токсичність 2-(4-ариліден-2,5-діоксоімідазолідин-1-іл)-N-арилацетамідів Сполука / параметр 1 2 2* 3 4 5 6 7 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 lgGI50, IgTGI, lgLC50 Клітинні лінії лейкемії CCRF-CEM -4.87 >-4.00 >-4.00 -6.06 >-4.00 >-4.00 -5.92 -5.51 -4.83 -4.50 -4.17 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -4.66 >-4.00 >-4.00 -6.71 >-4.00 >-4.00 HL60-TB >-4.00 >-4.00 >-4.00 -6.53 -5.70 -5.16 -4.38 >-4.00 >-4.00 -4.71 -4.33 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -4.34 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 K-562 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -5.68 >-4.00 >-4.00 -5.27 >-4.00 >-4.00 -4.52 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -4.11 >-4.00 >-4.00 -4.30 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 * - дані повторного паралельного дослідження MOLT-4 -5.60 >-4.00 >-4.00 -6.52 -5.49 -4.53 -5.34 -4.62 -4.09 -4.96 -4.55 -4.14 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -4.28 >-4.00 >-4.00 -4.31 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 PRMI-8226 -4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 -4.68 -4.17 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 >-4.00 SR -6.51 -5.85 -5.02 -7.71 -4.90 -4.28 -5.15 -4.47 >-4.00 -4.47 >-4.00 >-4.00 -5.14 -4.70 -4.31 >-4.00 >-4.00 >-4.00 Гостра токсичність LD50, мг/кг >1000 >1000 >1000 870 >1000 950 >1000 5 35653 Як видно з даних, наведених у Таблиці, речовини, що заявляються, ефективно пригнічують ріст пухлинних клітин лейкемії, причому чітко прослідковується селективність впливу на певні лінії ракових клітин. Так сполука 1 володіє максимально вираженим впливом на лінії RPMI-8226 (lgGI50230°С. С19Н13СlF3N3 О3 , Знайдено, %: N 10,00; Вирахувано, %: N 9,92; EI-MS (m/z): 425 (М++1). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 4,32с (2Н, СН2), 6,50с (1Н, =СН ), 7,36д, 7,62д (4Н, 4-Сl-С6Н4), 7,27д, 7,44т, 7,80д, 7,95с (4Н, 3-CF3-C6H4), 10,40с, 10,86с (2Н, 2*NH). Синтез сполук 2-7 проводили аналогічно наведеному прикладу 3, використовуючи відповідний N-арилхлорацетамід та N-калійну сіль 5-ариліден2,4-імідазолідиндіону. Сполука 2. 2-[4-(4-Хлорбензиліден)-2,5діоксоімідазолідин-1-іл]-N-(2-трифторметилфеніл)ацетамід. Вихід 56%. Білий кристалічний порошок Тпл>230°С. C19H13ClF3N3 O3 , Знайдено, %: N 10,00; Вирахувано, %: N 9,92. EI-MS (m/z): 425 (М++1). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 4,35с (2Н, СН2), 6,50с (1H, =СН), 7,38м, 7,58-7,70м (8Н, аромат) 9,70с, 10,85с (2Н, 2*NH). Сполука 3. 2-[4-(4-Хлорбензиліден)-2,5діоксоімідазолідин-1-іл]-N-(4-хлорфеніл)-ацетамід. Вихід 80%. Білий кристалічний порошок Тпл>230°С. C18H13Cl2N3O 3, Знайдено, %: N 10,80; Вирахувано, %: N 10,77. EI-MS (m/z): 389 (М+). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 4,30с (2Н, СН2), 6,50с (1Н, =С H), 7,22д, 7,35д, 7,58д, 7,61д (8Н, 2*4-Сl-С6Н4) 10,18с, 10,85с (2Н, 2*NH). Сполука 4. N-(4-Хлорофеніл)-2-[2,5-діоксо-4(3-фенілаліліден)-імідазолідин-1-іл]-ацетамід. Вихід 80%. Світло-жовтий кристалічний порошок Тпл>230°С. С20Н16СlN3О3 , Знайдено, %: N 11,00; Вирахувано, %: N 11,01. EI-MS (m/z): 383 (М++1). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 4,27с (2Н, СН2), 6,42д, 6,95д, 7,30д (3Н, СН=СН-СН =), 7,32т, 7,38т, 7,52д (5Н, С6Н5), 7,31д, 7,59д (4Н, 4-Сl-С6Н4), 10,36с, 11,02с (2Н, 2*NH). Сполука 5. 2-[4-(4-Метоксибензиліден)-2,5діоксоімідазолідин-1-іл]-N-(3-трифторметилфеніл)ацетамід. Вихід 63%. Білий кристалічний порошок Тпл>230°С. С20Н16F 3N3O 4 Знайдено, %: N 10,00; Вирахувано, %: N 10,02. EI-MS (m/z): 419 (М+). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 3,82с (3Н, ОСН3), 4,37с (2Н, СН2), 6,59с (1Н, =СН), 7,00д, 7,66д (4Н, 4-СН3О 7 35653 С6Н4), 7,44д, 7,59т, 7,76д, 8,06с (4Н, 3-CF3-C6H4), 10,67с, 10,83с (2H,2*NH). Сполука 6. N-(2-Хлор-5-трифторметилфеніл)2-[4-(4-метокси-бензиліден)-2,5-діоксоімідазолідин1-іл]-ацетамід. Вихід 66%. Білий кристалічний порошок Тпл>230°С. C20H15ClF3N3 O4 , Знайдено, %: N 9,30; Вирахувано, %: N 9,26. EI-MS (m/z): 455 (М++1). ЯМР 1Н, d, м.ч.: 3,80с (3Н, ОСН3), 4,45с (2Н, СН2), 6,50с (1Н, =СН), 6,90д, 7,35д, 7,55д, 8,40с (7Н, аром.), 9,80с, 10,60с (2Н, 2*NH). Сполука 7. 2-[4-(4-Метоксибензиліден)-2,5діоксоімідазолідин-1-іл]-N-(4-метоксифеніл)ацетамід. Вихід 81%. Білий кристалічний порошок Тпл>230°С. C20H19N3 O5, Знайдено, %: N 11,00; Вирахувано, %: N 11,02. Комп’ютерна в ерстка М. Ломалова 8 LC-MS 1%, (m/z): 382 (82,15) (М++1). ЯМР 1Н, d м.ч.: 3,73с, 3,82с (6Н, 2*ОСН3), 4,25с (2Н, СН2), 6,53с (1Н,=СН), 6,83д, 6,94д 7,46д, 7,60д, (8Н, аром), 10,04с, 10,72с (2Н, 2*NH). Джерела інформації: 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. T.1 - Изд. 13-е, новое. - Харьков: Торсинг, 1998. - 560с. 2. Alley M.C., Scudiero D.A., Monks P.A. et al. II Cancer Research. - 1988. - Vol.48.-P.589-601. 3. Boyd M.R., Paull K.D. // Drug Development Research. - 1995. - Vol.34. - P.91-109. 4. Grever M.R., Schepartz S.A., Chabner B.A. // Seminars in Oncology. - 1992. - Vol.19, №6. - P.622638. 5. Litchfield J.T., Wilcoxon F. // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1949. Vol.96. - P.99. 6. Стефанов О.В. Доклінічні дослідження лікарських засобів Методичні рекомендації. - Київ: Авіцена, 2001. - 527с. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601