N-(о, п-динітрофенілсульфоніл)біцикло[2.2.1]гепт-2-еніл-ендо-5-метиламін

N-(o, пдинітрофенілсульфоніл)біцикло[2 2 1]гепт-2-енілендо-5-метиламш формули C14H15N3O6S NO 2 CH2NHSO2 якии виявляє анальгетичну, антиппоксичну та протисудомну дію Ця задача вирішується синтезом N-(o,nдинітрофенілсульфоніл)біцикло[2 2 1]гепт-2-єнілендо-5-метиламшу [C14H15N3O6S, динітросульфану (1)] Прототипом заявляємої речовини є "нітросульфан", а саме N-(nнітрофенілсульфоніл)біцикло[2 2 1]гепт-2-єнілендо-5-метиламш (II) [6], у якого була відсутня здатність проявляти антиппоксичний ефект Для синтезу сполуки (І) запропоновано два способи Першій з них заключається у взаємодії у двофазній системі (ефір-вода) біцикло[2 2 1]гепт2-єніл-ендо-5-метиламшу та о,пдинітрофенілсульфонілхлориду в присутності основ Другий спосіб заключається у взаємодії 5бромметилбіцикло[2 21]гепт-2-єну з о,пдинітрофенілсульфонамідом в умовах міжфазового каталізу в системі рідинальердетіло Приклад В колбу з мішалкою вносять 1 23г (0 01 моль) біцикло[2 2 1]гепт-2-єніл-ендо-5метиламшу, 2мл (0 01 моль) 20% водного розчину гідроксиду натрію та Юмл ефіру До емульсії, що перемішується, додають по краплям 2 48г (0 01 моль) о,п-динітрофенілсульфонілхлоріду в 10мл ефіру впродовж ЗОхв Реакційну масу перемішують при кімнатній температурі до закінчення реакції за даними ТШХ Органічний шар ВІДДІЛЯЮТЬ, розчинник видаляють Забруднений сіллю продукт обробляють Юмл хлороформу та Юмл води, органічний шар ВІДДІЛЯЮТЬ та О (О со 00 (О 46836 висушують прожареним сульфатом магнію, розчинник видаляють Сульфонамід очищають кристалізацією, вихід 2 53г (71 6%), т пл 94 - 95 °С (із спирту) Сполука синтезована вперше, раніше не описана Склад та структура заявляемої сполуки доведені елементним аналізом, а також аналізом 14 спектрів та спектрів ПМР Знайдено, % С 47 62 Н 4 19 N 12 00, дорослих білих мишах обох статей масою 20 - 30г Досліджувану речовину (І) уводили внутрібрюшинно у вигляді 1% розчину, виготовленого на ТВІН-40 (1 1мг в 0 1мл) Досліджувалися чотири дози препарату 150мг/кг, 200мг/кг, 250мг/кг та 300мг/кг Тварини знаходилися під наглядом на протязі двох тижнів ЛДбо (серед ньосмертельна доза) виявилася рівною 248 25 ± 52 25мг/кг Заявляема сполука відноситься до середньотоксичних речовин, до III класу небезпеки [7] C14H15N3O6S Вирахувано, % С 47 59 Н 4 25 N 11 90 1 14 спектр (КВг), с м 3368, 3092, 1592, 1504, 1432, 1336, 1144,832, 720 Спектр ПМР, 5, м д (CDCI3) 9 1 5 і (1Н, Аг Аг 8 28 м (1Н, Н ), 8 15 д (1Н, Н ) 6 28 і (1Н Н2), 3 8А 5 98 м (1Н, Н ), 3 55 м (1Н, Н ), 3 36 (1Н, Н 8 В ), 5 3 01 м (1Н, Н'), 2 91 м (1Н, Нч), 2 51 м (1Н, Н°), ПН, H I 91 7син бекз 2 03 (1Н, Н °), 1 56 д (1Н, Н ) } 1 36 д (1Н, Н 7анти-,.0 70 (1Н, Нбендо) Біологічна активність синтезованої речовини вивчалася в 5 серіях В першій серії експериментів досліджувалася гостра токсичність за методом Litchfield, Wilcokson (1949) в модифікації В П Прозоровського (1962) Досліди здійснювалися на Вивчення знеболюючої активності проводили за допомогою методу термічного подразнення ("hot plate" - гарячої пластини) при температурі 53°С С[8] Критерієм больового порогу були перші ознаки оборонної реакції - вилизування задніх лапок Дослідним мишам внутрібрюшинно уводили досліджувану речовину (на ТВІН-40) в дозі 1/10 ЛДбо тобто 24 8мг/кг Контрольні тварини одержували внутрібрюшинно ІН'ЄКЦІЮ ІЗОТОНІЧНОГО розчину хлориду натрію в доданням ТВІН-40 Аналіз знеболюючих властивостей показав, що заявляема сполука володіє значною активністю Таблиця 1 Вплив М-(о,п-динггрофенілоульфоніл)біцикло[2 2 ]Згепт-2-єніл-ендо-5-метиламшу (І) на больовий поріг мишей при термічному подразненні Серія Латентний період реакції на термічне подразнення КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ Вихідний фон ЗО 60 120 5 Сполука Показники Час після введення (хв) М ±т 11 4 ± 1 55 176*±23 26 6* ± 1 63 158±29 +54 4 +133 3 +38 6 11 1 6 ± 0 8 125±087 11 8 ± 1 76 11 7 5 ± 1 14 +5 7 +5 3 100±074 137±1 28 19 0* ± 3 69 17 7 ± 3 10 +37 +90 +77 102±093 9 8 ± 0 67 12 8 ± 1 71 11 1 ± 1 19 -4 +25 +16 (І) (заявляема сполука) % ЗМІН Контроль до (І) 5 Нітросульфан (II) 18 М ±т +120 % ЗМІН (прототип) М ±т % ЗМІН 23 Контроль М ±т до нітросульфану (П) % ЗМІН Примітка знак * відповідає достовірній ВІДМІННОСТІ, р 0 05) В контрольній групі мишей спостерігалися неістотні флюктуацм больового порогу на 5 - 12% вище початкових показників При порівнянні знеболюючих властивостей досліджуваної сполуки та прототипу слід ВІДМІТИТИ, що дія заявляємої речовини (І) черев ЗО та 60 хвилин після уведення проявляється інтенсивніше, ніж у нітросульфану на 17 та 43% ВІДПОВІДНО Щоб з'ясувати відношення речовини (І) до судомної активності центральної нервової системи, досліджувалася протисудомна активність заявляємої сполуки на моделі коразолових судом , Коразол уводили внутрібрюшинно в дозі 90мг/кг (у вигляді 10% ампул ного розчину) Дослідним тваринам за ЗО хвилин до уведення коразолу була зроблена внутрібрюшинна ІН'ЄКЦІЯ препарату (І) в КІЛЬКОСТІ 1/10 ЛДбо - 24 8мг/кг Контрольні миші отримували штраперитонально ІЗОТОНІЧНИЙ розчин хлориду натрію Вплив вивчаємого препарату на судомний статут тварин оцінювався по ЗМІНІ тривалості життя дослідних мишей, які отримали речовину (І), та контрольних тварин Наведені дані свідчать про наявність тенденції до протисудомної активності у заявляемого препарату (І), про що свідчить зростання тривалості життя тварин на 96 7%, майже ВДВІЧІ 5 46836 Проте, антиконвульсантна дія досліджуємо! тобто виражається речовини виражена набагато слабше в порівнянні тривалості життя з прототипом Ефект нітросульфану сягає 402 7%, пятикратним зростанням Таблиця 2 Вплив М-(о,п-динггрофенілсульфоніл)біцикло[2 2 1]гепт-2-єніл-ендо-5-метиламшу (І) на судомну дію коразолу Тривалість життя в порівнянні з контролем ДОСЛІДІВ в хвилинах 5 Заявляема Зміна тривалості життя КІЛЬКІСТЬ Серія 11 8 ± 4 42 +96 7% сполука (І) Контроль до (І) 5 6 0 ± 1 47 Нітросульфан (II) 5 93 5* ± 26 5 5 186±876 +402 7% (прототип) Контроль до нітросульфану (II) Депримируючий вплив препарату на центральну нервову систему вивчався ва тестом підвищення тривалості гексеналового сну, який являється репрезентативним показником транквілізуючих властивостей Гексенал уводили внутрібрюшинно у дозі бОмг/кг у вигляді 0 2% розчину, який готувався ex tempore, відразу перед дослідом За ЗО хвилин до уведення гексеналу дослідним тваринам робилася ІН'ЄКЦІЯ заявляємо! речовини у ДОБІ 1/10 ЛДбо, а саме 24 8мг/кг - теж внутрібрюшинно Контрольним мишам уводили ІЗОТОНІЧНИЙ розчин хлориду натрію - у тому ж об'ємі До обох розчинів додавався ТВІН-40 Результати ДОСЛІДІВ, що приведені в табл 3, свідчать про наявність у заявлюємої речовини пригноблюючого впливу на ДНЦ, ступінь якого суттєво не відрізняється від прототипу СТІЙКІСТЬ ДО ГІПОКСІЇ Є важливим показником фармакологічних властивостей препарату, що забезпечують витривалість організму до дії несприятливих факторів Таблиця З Вплив М-(о,п-динггрофенілсульфоніл)біцикло[2 2 1]гепт-2-єніл-ендо-5-метиламшу (І) на тривалість гексеналового сну Серія КІЛЬКІСТЬ Тривалість сну % ЗМІН ДОСЛІДІВ в хвилинах (в порівнянні з контролем) 8 95 13 ± 1 79 +122 3* 7 42/79 ±5/16 Нітросульфан (II) 5 81 80 ± 23 5 Контроль до 5 35 00 ± 8 96 Заявляємий препарат (І) Контроль до препарату (II) +133 7 нітросульфану (II) Антигіпоксична активність вивчалася на моделі нормоборичної артеріально-ппоксичної гіпоксії у замкнутому просторі об'ємом 250мл (О Н Єлизарова, 1971, Н А Агаджанян, 1984) Дослідним тваринам за півгодини до експерименту уводили внутрібрюшинно заявляємий препарат у дозі 1/10 ЛД50, а саме 25мг/кг, контрольним мишам уводили таким же шляхом ІЗОТОНІЧНИЙ розчин хлориду натрію в тому ж об'ємі До обох розчинів додавався ТВІН-40 Таблиця 4 Антигіпоксична активність г\І-(о,п-динггрофенілсульфоніл)біцик-ло[2 2 1] гепт-2-єніл-ендо-5-метиламшу (І) Серія Тривалість життя КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ Заявляема речовина (І) в хвилинах % змін (до контролю) 4 20 5 ± 4 5 +86 0 8 Продовження таблиці 4 46836 Серія Тривалість життя КІЛЬКІСТЬ ДОСЛІДІВ в хвилинах Контроль до (1) 4 11 0 ± 1 5 Нітросульфан (II) 5 15 8 ± 1 07 5 % змін (до контролю) 1 5 6 ± 1 28 +1 28 (прототип) Контроль до нітросульфану (II) Як видно з табл 4, заявляема сполука призводить до підвищення тривалості життя в умовах гіпоксії на 86% На відміну від пропонуємої речовини прототип "Нітросульфан" не мав антиппоксичних властивостей Таким чином, заявляема сполука, яка володіє порівняною по інтенсивності з прототипом транквілізуючою активністю та більш слабкою протисудомною дією, відрізняється присутністю нової властивості - антиппоксичного ефекту, а також більш виразною анальгетичною дією ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна (044)456-20- 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71