Спосіб цитологічної діагностики лімфоїдних тимом і пролімфоцитарних лімфом

Спосіб цитологічної діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом, що включає морфометрію пофарбованих за методом Паппен геима препаратів за допомогою цитоаналізатора "Интеграл-2МТ", який відрізняється тим, що отримані карюметричні показники лімфоідних клітин, які характеризують патологічний процес, мають статистично вірогідні ВІДМІННОСТІ ДЛЯ лімфоідних тимом (площа - 56,29±0,56 мкм2, периметр 28,03±0,14 мкм, діаметр ядра - 8,46±0,04 мкм) і пролімфоцитарних лімфом (площа - 104,95±2,16 мкм2, периметр - 38,43±0,39 мкм, діаметр ядра 11,53±0,12 мкм) Винахід відноситься до медицини, зокрема, до онкології і стосується цитологічної (морфологічної) діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом В літературі відомий спосіб морфометричних досліджень (2, 3, 4), за допомогою якого автори проводили морфометрію лімфоідних клітин при неходжкінських лімфомах, реактивній гіперплазії та лімфогранулематозі Однак використання цих даних недостатньо для діагностики дрібноклітинних медіастінальних новоутворень в зв'язку з відсутністю в наукових джерелах морфометрії пухлин вилочкової залози Прототипом запропонованого способу може служити дослідження А Ч Дубровського (А Ч Дубровский Цитологическая характеристика неходжкинских лимфом Автореф канд дисс , г Минск -1994 -18 сс) Автор проводив морфометрію лімфоідних клітин злоякісних лімфом за пофарбованими препаратами на цитоаналізаторі "Интеграл-2МТ" Перевагою згаданого способу є об'єктивізація цитологічних ознак, що сприяє більш точній діагностиці неходжкінських лімфом Недоліком зазначеного способу є відсутність морфометричних параметрів ядер лімфоідних клітин в той час, як автор отримав морфометричні дані цілих клітин В основу винаходу поставлена задача вдосконалити спосіб цитологічної діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом шляхом отримання карюметричних показників лімфоідних клі тин, які характеризують патологічний процес, що дозволить покращити цшолопчн} діагностику лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом Запропонований спосіб цитологічної діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом базується на дослідженні пофарбованих за методом Паппенгейма цитологічних препаратів, виготовлених з матеріалу трансторакальних пунктатів медіастінальних новоутворень, з пунктатів і відбитків лімфатичних вузлів Морфометричні дослідження виконані за допомогою цитоаналізатора "Интеграл-2МТ" В зв'язку з дистрофічними змінами цитоплазми проведена лише карюметрія лімфоідних елементів, які характеризували патологічний процес, з визначенням показників площі, периметру і коефіцієнту форми ядра 3 метою більш легкого впровадження даних досліджень в цитологічну практику визначали діаметр ядра В кожному випадку проводилась карюметрія 100 незрілих пухлинних клітин Отримані параметри карюметричних показників двох складних в ЦИТОЛОГІЧНІЙ диференційній діагностиці медіастінальних дрібноклітинних новоутворень - лімфоідних тимом (15 хворих) і пролімфоцитарних лімфом (16 хворих) Встановлені вірогідні ВІДМІННОСТІ ПЛОЩІ, периметру і діаметру ядер лімфоідних тимом, ВІДПОВІДНО 56,29 ± 0,56мкм2, 28,03 ± 0,4мкм, 8,46 ± 0,04мкм, і пролімфоцитарних лімфом, ВІДПОВІДНО 104,95 ± 2,16мкм2, 38,43 ± 0,39мкм, 11,53 ± 0,12мкм, на основі яких з урахуванням цитоморфолопчних ознак можна виносити об'єктивне діаг О со Ю 51301 ностичне рішення (табл 1, 2) Технічний результат винаходу полягає в тому, що при його використанні можна отримати ЧІТКІ об'єктивні морфологічні показники для проведення більш точної диференційної діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом Прикладами конкретного використання запропонованого "Способу цитологічної діагностики лімфоідних тимом і пролімфоцитарних лімфом'1 є 1 Кашпировецький В В , 1938 р н, історія хвороби №499/90 р , який обсіеж\вався в Українському інституті онкології з 23 01 90 р по Таблиця 1 КАРЮМЕТРИЧНІ ПОКАЗНИКИ ЛІМФОІДНИХ ТИМОМ № п/п Прізвище Стать Вік 1 С-к ж 50 2 0-ко ж 42 3 Н-ш ч 43 4 К-ий ч 52 5 Р-ва ж 15 6 Т-на ж 29 7 Л-н ж 34 8 Д-ко ж 25 9 М-к ж 8 10 Б-г ч 18 11 3-на ж 17 12 С-ш ч 18 13 3-ий ч 42 14 П-ва ж 9 15 С-ко ж 37 Серединні показники Площа ядра, Периметр ядра, Коеф форми Діаметр ядра, мкм мкм ядра мкм 50,00 ±1,06* 26,30 ± 0,36 1,12 ±0,002 7 98 ± 0,08 29 - 82** 20,30 - 38 ЗО 1,08-1,19 6,08-1022 54,20 ± 0,72 27,50 ±0,18 1,12 ±0,002 8 31 ± 0 05 42-78 24,00 - 33,20 1,08-1,16 7 31 - 9 97 52,40 ± 0,44 27,00 ±0,12 1,12 ±0,002 8 17 ±0,03 42-64 24,10-29,90 1,06-1,18 7 31 - 9 03 55,60 ± 0,34 27,80 ±0,11 1,11 ±0,002 8 42 ± 0 03 47-64 25,30 - 30,60 1,07-1,18 7,74 - 0,93 58,30 ± 0,36 28,40 ± 0,09 1,10 ±0,002 8,62 ± 0 03 50-68 26,20 - 30,90 1,05-1,14 7,98 - 9 ЗО 56,00 ± 0,34 27,90 ± 0,08 1,11 ±0,002 8,44 ± 0 03 48-65 25,90-30,10 1,07-1,17 7,82-9 10 65,70 ± 0,46 30,20 ±0,10 1,11 ±0,002 9,15 ± 0 03 55-78 27,90 - 32,80 1,06-1,17 8 37 - 9 97 58,30 ± 0,54 28,80 ±0,12 1,14 ±0,004 8 62 ± 0 04 48-75 26,40 - 32,60 1,07-1 26 782 - 9,77 44,00 ± 0,42 24,90 ±0,13 1 13 ± 0 003 7 49 ± 0,04 36-57 22,20 - 28,70 1,07-1,22 6 77 - 8 52 59,80 ± 0,70 29,20 ±0,18 1,15 ±0,005 8,73 ± 0 05 43-78 25,00 - 34,00 1,07-1,31 7,40 - 9,97 54,60 ± 0,48 27,70 ±0,12 1,12 ±0,004 8 34 ± 0 04 45-69 24,80 - 30,80 1,07-1,27 7 57 - 9,37 61,90 ±0,70 29,40 ±0,15 1,12 ±0,003 8,88 ± 0 05 49-84 26,30 - 33,80 1,07-1,23 7,90-10,34 61,10 ±0,72 29,20 ±0,15 1,12 ±0,003 8,82 ± 0,05 48-84 26,10-33,80 1,06-1,20 7,82-10,34 57,80 ± 0,60 28,50 ±0,13 1,13 ±0,003 8,58 ± 0,04 49-79 26,30 - 32,90 1,06-1,20 7 90-100 54,70 ± 0,52 27,70 ±0,13 1,12 ±0,004 8 35 ± 0 04 44-70 24,50-31,20 1,06-1,26 7 49 - 9 44 56,29 ± 0,56 28,03 ±0,14 1,12 ±0,003 8 46 ± 0 04 29-84 20,30-38,30 1,05-1,31 6 08-10 34 - середні показники - інтервали коливань Таблиця 2 КАРЮМЕТРИЧНІ ПОКАЗНИКИ ПРОЛІМФОЦИТАРНИХ ЛІМФОМ № п/п Прізвище Стать Вік 1 2 3 4 1 Р-ко ч 19 2 Б-ко ч 12 3 3-к ч 23 Площа ядра, мкм 5 132,30±2,86* 82-225** 134,00±1,96 87-185 104,00±3,18 39-198 Периметр яд- Коеф форми Діаметр ядра, ра, мкм ядра мкм 6 7 8 43,70±0,46 1,17±0,004 12,98±0 13 34,10-57,30 1,09-1,30 10,22-16,93 43,50±0,32 1,14±0,005 13,07±0,10 35,90-51,70 1,06-1,32 10,53-15,35 37,60±0,57 1,12±0,004 11,51±0,18 23,40-51,90 1,07-1,25 7,05-15,88 51301 продовження таблиці 2 1 2 3 4 4 І-к ж 4 5 Л-к ж 6 6 Б-ко ч 9 7 3-ц ж 6 8 Г-ов ч 5 9 К-н ч 13 10 Л-ць ч 31 11 С-ко ч 64 12 4-ий ч 50 13 С-ко ж 14 14 С-в ч 79 15 Н-в ч 52 16 К-ко ж 3 Середні показники 5 99,30±3,40 46-216 97,90±1,82 63-154 95,30±1,28 69-133 114,40±2,68 58-192 82,10±1,92 45-141 114,50±3,10 67-222 103,60±3,18 58-217 89,20±1,24 60-122 112,90±3,39 59-172 129,10±1,68 86-170 82,10±0,92 60-106 85,00±1,06 61-114 103,50±0,92 85-131 104,95±2,16 39-225 6 37,10±0,47 27,70-51,30 37,00±0,35 30,60-48,10 37,10±0,25 31,30-43 80 39,30±0,49 28,00-52,40 33,60±0,39 25,30-44,80 40,20±0,49 31,20-55,80 37,70±0,59 25,30-54,80 36,00±0,32 29,90-46,10 41,30±0 66 32,20-54,10 42,70±0,32 34,60-50,40 34,30±0,22 28,80-40,00 34,80±0,21 29,70-40,40 39,10±0,19 34,60-44,20 38,43±0,39 23,40-57,30 7 1ЛЗ±0,004 1,06-1,27 1,13±0,003 1,07-1,22 1,16±0,005 1,08-1,31 1,11 ±0,002 1,07-1,19 1,14±0,003 1,07-1,21 1,15±0,003 1,08-1,25 1,12±0,003 1,06-1,21 1,17±0,005 1,09-1,35 1,22±0,014 1,09-1,55 1,13±0,003 1,07-1,22 1,15±0,005 1,05-1,29 1,14±0,003 1,08-1,23 1,18±0,006 1,08-1,39 1,15±0,005 1,05-1,55 8 11,25±0 18 7 65-16 59 11,17±0,10 896-1401 11,02±0 07 9,38-13,02 12,07±0,14 8,60-15,64 10,22±0,12 7,57-1340 12,08±0,15 9 24-16,82 11,49±0,16 8,60-16,63 10,66±0 07 8 74-1247 11,99±0,18 8,67-14 80 12 82±0 09 10,47-1472 10,22±0,06 8 74-11,62 10,40±0 06 8,81-12,05 11,48±0 05 10,40-12 91 11,53±0,12 7,05-1693 - середні показники * - штерва ні коливань 27 02 90р Захворів місяць тому, коли при профогляді на флюорографії ВІДМІТИЛИ пухлину в передньому середостінні, яка була підтверджена рентгенографічно 26 01 90 р Під місцевою анестезією 01 02 90 р і рентгенографічним контролем проведена тонкоголкова аспіраційна біопсія патологічної ТІНІ середостіння через II міжребір'я парастернально 3 отриманого матеріалу виготовлені і пофарбовані за методом Паппенгейма ЦИТОЛОГІЧНІ препарати Мікроскопічне дослідження проводили за допомогою мікроскопа МБІ-3, з використанням об'єктивів (хЮ, х20, х40, х90) Цитологічне дослідження №44/90 р цитологічно більше даних за лімфоіднутимому Морфометрія 100 лімфоідних клітин, які характеризували патологічний процес, проводилась за допомогою цитоаналізатора "Интеграл-2МТ" Статистична обробка отриманих даних дозволила визначити середні морфометричні параметри площа (55,60 ± 0,34мкм2), периметр (27,80 ± 0,11мкм), коефіцієнт форми (1,11 ± 0,002) і діаметр ядра (8,42±0,03мкм) Хворому проведена операція 12 02 90 р - видалення пухлини середостіння Патопстолопчне дослідження операційного матеріалу № 3574-77 від 19 02 90 р Лімфоідна тимома Заключний,КЛІНІЧНИЙ діагноз лімфоідна тимо ма середостіння 2 Коваленко А О , 1994р н , історія хвороби № 3901/97р , яка знаходилась в КЛІНІЦІ Українського інституту онкології з 18 07 97р по 24 07 97р Хворіла протягом 2 МІСЯЦІВ, коли батьки помітили погіршення апетиту, схуднення, задишку, кашель При обстеженні на рентгенограмі 18 07 97р виявлена пухлина середостіння 21 07 97р проведена біопсія лімфатичого вузла шиї справа 3 отриманого матеріалу зроблені ЦИТОЛОГІЧНІ препарати, які пофарбували за методом Паппенгейма Мікроскопічне дослідження проводили за допомогою мікроскопа МБІ-3, з використанням об'єктивів (хЮ, х20, х40, х90) Цитологічне заключения № 2251/97 серед лімфоідних елементів з явищами проліферації визначаються скупчення незрілих лімфоідних клітин з ознаками проліферації, атипії і вираженої дистрофії, що походять із злоякісної пухлини, яку слід диференціювати між пролімфоцитарною лімфосаркомою і лімфоідною тимомою Морфометричне дослідження цитологічних препаратів проводилось за допомогою цитоаналізатора "Интеграл-2МТ" в 100 лімфоідних клітинах, які характеризували патологічний процес Статистична обробка отриманих даних дозволила визначити середні морфометричні параметри площа (103,50 ± 0,92мкм2), периметр (39,10 ± 0,19мкм), 51301 коефіцієнт форми (1,18 ± 0,006) і діаметр ядра (11,48 ±0,05мкм) Патопстолопчне заключения матеріалу біопсії лімфатичного вузла шиї від 25 07 97р злоякісна лімфома, пролімфоцитарна лімфосаркома При порівнянні морфометричних даних хворих Кашпировецького В В і Коваленко А О виявлена вірогідна різниця, завдяки чому можна більш точно встановити морфологічний діагноз пролімфоцитарної лімфоми і лімфоідної тимоми, що має вирішальне значення для визначення тактики лікування 8 Література 1 Дубровский А Ч Цитологическая характеристика неходжкинских лимфом Автореф канд Диск , г Минск -1994 -18 ее - (Прототип) 2 Яблокова А В Морфо метрическая характеристика лимфоцитов при ЛГМ и ее прогностическая значимость Автореф канд дисс , М , 198916 ее 3 Cracker J ,EganM J //J Pathol -1988 -156, No 3 - P 233-239 4 Lehtmen T, Ame R , Lehtinen M et al // J Pathol -1989 -157, No 1 -P 27-36 ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71