2-(2,7-діацетоксіфлуорениліден-9-гідразоно)-5-фурфурилідентіазолідон-4, що виявляє противірусну дію відносно віруса венесуельського енцефаліту коней та віруса грипа типу а та а-2

Изобретение к а с а е т с я замещенных тиазолидона, в частности 2 - ( 2 , 7 - д и ацетоксифлуоренилиден-9-гидразоно) -5-фурфурилидентиазолидона-4 ( Т З ) , который проявляет активность против вируса гриппа типа А и А-2 и может быть использован в медицине. Для выявления активности у соединений т и а золидонового ряда был получен новый ТЗ из тиосемикарбазона 2 , 7 - д и г и д р о к с и флуоренона-9, фурфурола, СН^СІСООН в среде СН 3 С00Н-(СН э С0) 4 0 в присутствии Na С О при кипячении 8 ч . Затем о т фильтровывают смесь, фильтрат р а з б а в ляют водой до получения раствора и кристаллизуют при охлаждении. Выход 8 4 , 8 % , т . п л . 175 О С. Испытания ТЗ п о казывают, что он на 24-48 ч задержив а е т р а з в и т и е цитопатогенного эффект а в сравнении с ремантадином (РМ), ТЗ оказывает равное с Р действие в М отношении вируса гриппа типа А и в 2 раза превышает действие против вируса гриппа типа А-2, Токсичность ТЗ 1621 мг/кг против 179 мг/кг д л я РМ, 1 табл. (Л 00 to f 1282504 2 биции бляшек вируса в агаре более изобретение относится к новому 20,0 мм в диаметре. биологически активному соединению, а именно к 2-(2,7-диацетоксифлуорениВ тесте снижения инфекционного титлиден-9-гидразоно)-5-фурфурилиденра вируса 2-(2,7-диацетоксифлуоренилитиазолидону-4, обладающему противови- 5 ден-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиаэорусным действием в отношении вируса лндон-4 показал 2,3Їg БОЕ/мл и задері венесуэльского энцефалита лошадей и живал развитие цитопатогенного эффек1 вируса гриппа типа А и А -2, которое та на 2 4-48 ч по сравнению с эффективможет найти применение в медицине. ным лекарственным средством реманта1 Целью изобретения является выявле-' - дином. ние новых свойств в ряду производных Таким образом впервые установлено 5-фурфулидентиазолидона-4. противовирусное действие препарата П р и м е р . Синтез 2-(2,7-диацев отношении вируса ВЭЛ, токсифлуоренилиден-9-гидразоно)-5Изучение ачтигриппозной активнос-фурфурилидентиазолидона-4 (соеди' ти проведено в системе in vitro и нение I ) . in ovo в отношении вируса гриппа типаі А и А-2 в концентрациях, составляСмесь 8,55 г (0,030 моль) тиосеющих 1/2 - 1/8 от максимально переномикарбазона 2,7-дигидроксифпуореносимых доз (МПК 800 мкг/мл, ХТИ 3,2). на-9, 3,09 г (0,039 моль) монохлорПрепарат вносили в биосистему через уксусной кислоты, 3,00 г (0,031 моль) 60 мин после заражения вирусом и за фурфурола, 3,00 г безводного карбона60 мин до инфицирования вирусом в дота натрия кипятят в течение 8 ч в 180 мл смеси ледяной уксусной кислоты зах, обеспечивающих 100%-ный эффект и уксусного ангидрида (в соотношении инфицирования моделей. Инкубацию ви25 русрепродуцирующей системы проводили 8:1). Затем реакционную массу отфильт-' ровывают, к фильтрату прибавляют диспри 37°С на протяжении 48 ч. Опыты тиллированную воду до помутнения растучитывали при соответствующих контвора, охлаждают до -5°С, Выкристалролях по снижению инфекционных и гелизовавшийся осадок выделяют, сушат магглютационных титров вируса. Эффеки получают 12,4 г (84,8%) продукта в 30 тивность противовирусного действия виде темно-желтого кристаллического оценивали по степени ингибиции репровещества, т.пл, 175°С (разлагается, дукции вируса в изучаемых биологичесиз водного этанола). ких системах по сравнению с активностью ремантадина. Инфекционная активНайдено, %: С 61,95; Н 4,02; 35 ность вируса при этом составляла N 8,83; S 6,88. 5,51g ТПД (ткане-цитопатической С 25Н,7 N 3 ° 6 S дозы) для клеток куриных фибробластов Вычислено, %: С 61,60; Н 3,51; и 6,0-7,01g ЭЙД (эмбрионо-инфицируN 8, 62; S 6,58. ющей дозы) для куриных эмбрионов. Максимумы поглощения в УФ-свете 40 В результате проведенных опытов (в этаноле): 237-244 нм, изгиб,265 нм выявлено вирусингибирующее действие (Hg£ 4,55), 307-310 нм (lg£4,27), 2-(2,7-диацетоксифлуоренилиден-9-гид340-345 нм (Eg£ 4,26). разоно)-5-фурфурилидентиазолидона-4 Испытания антивирусной активности в системе in vitro, выражающееся в 2- (2,7-диацетоксифлуоренилиден-9-гид- 45 снижении выхода вируса на 4,0-5,0Fg, разоно)-5-фурфурилидентиазолидона-4 аналогичное действию ремантадина в на модели вируса ВЭЛ, вакцинный штамм отношении вируса гриппа штамм A (WSN) 230, проведены согласно методике пери 5,5~4,9£g, т.е. повышающее действичной оценки противовирусной активвие ремантадина в отношении вируса ности химических соединений. 50 гриппа штамм А (Англия) 42/72 (H.N ) , Определена максимально переносимая так как ремантадин в указанных услоконцентрация препарата для культуры виях подавляет вирус на 3»0-2,5 fig клеток фибробластов эмбриона кур (см. таблицу), (ФЭК), составляющая 800 мкг/мл. ХимиоВ опытах на развивающихся куриных терапевтический индекс (ХТИ) исследуэмбрионах отмечено четкое различие в емого вещества равен 3,2, ' в вирусостатическом эффекте исследуПрепарат в тесте ингибиции бляшкоемого вещества и эталона сравнения. образования вируса венесуэльского энТак, в системе in ovo испытуемый прецефалита лошадей вызывал зону инги 1282504 621 мг/кг, а для ремантадина парат ингибирует репродукцию вируса 179,0 мг/кг массы животного. Полученгриппа штамм A .(WSN) на 6,5lg за ные результаты свидетельствуют о том, 60 мин до инфицирования системы виручто 2-(2,7-диацетоксифлуоренилиден)~ сом и на 5,7tg через 60 мин после за-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазолиражения, в то время как ремантадин дон-4 в 3,5 раза менее токсичен по в аналогичных условиях опыта подавлясравнению с ремантадином. ет вирус соответственно на 3,2Fg и В системе in ovo исследуемое соединение I ингибирует репродукцию ви- to руса гриппа штамм А (Англия) 42/72 ( I N ) на 5,4Eg за 60 м до инфицироI вания системы вирусом и на 4,5?g через 60 м после заражения, в то время как эталонный препарат в тех же ус- Ї5 ловиях опыта ингиСирует вирус соответственно на 2,9Ig и 2,O2g. Соединение I оказывает равное с ремантадином действие в отношении вируса гриппа типа А и в 2 раза превы- 20 шает действию его в отношении вируса гриппа типа А-2 в системе in vitro и in ovo. Острая токсичность определена в 25 сравнении с ремантадином для белых беспородных мышей при однократном внутрибрюшинном введении. LD 5 O составляет для изучаемого соединения I Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я 2-(2,7-Диацетоксифлуоренилиден-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазолидон-4 формулы ОСОСНз обладающий противовирусным действием в отношении вируса венесуэльского энцефалита лошадей и вируса гриппа типа А и А-2, Противогриппозная активность соединения I А (Англия) 42/72 (Н N) а A (WSN) Препарат in vitro, 10 ТПД 60 до инфи- после цирова- инфиния цирования Ремантадинэталон 2-(2,7-Диацетоксифлуоренилиден-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазолидон-4 in OVO, 10 ад s o инфи- после цирова- инфиния цирования ДО in vitro, 10 ТІШ So до инфи- после цирова- инфиния цирования m . ovo, 10 Эmsa до инфи- после цирова- инфицирония вания 5,0 3,5 3,2" 2,7 3,0 2,5 2,9 2,0 р