Спосіб одержання комплексу полісахаридів гемостатичної та протизапальної дії

Спосіб одержання комплексу полісахаридів гемостатичної та протизапальної дії, шляхом екстракції рослинної сировини водою з наступним упарюванням одержаного екстракту, осадженням спиртом етиловим, відокремленням осаду, його сушкою та подрібненням, який відрізняється тим, що як рослинну сировину використовують листя акації білої, екстракцію проводять принаймні двічі протягом 2-3 годин при перемішуванні та постійній температурі 90ºС при співвідношенні сировина : екстрагент 1:14-15, а екстракт упарюють до 1/15 попереднього об'єму і осаджують трикратною кількістю спирту етилового 95%. Винахід відноситься до фармації та медицини, а саме до способів одержання біологічно активних речовин з рослинної сировини. Сучасний арсенал лікарських засобів з гемостатичною та протизапальною дією представлений, насамперед, засобами синтетичного походження, які здебільшого мають негативну побічну дію. Альтернативним рішенням є створення лікарських засобів рослинного походження з м'якою дією та практичною відсутністю негативних побічних ефектів. Відомий спосіб одержання протимікробного, кровоспинного та цитотоксичного засобу [Деклараційний патент 56771 А, Україна, МПК7 А61К35/78, заявл.05.09.2002, опубл.15.06.2003, Бюл. №5], який передбачає екстракцію 70% етанолом попередньо знежиреної хлороформом подрібненої кори рослин роду вільха. Екстрагування здійснюють методом дрібної мацерації при загальному співвідношенні сировина : екстрагент 1:101:15. До недоліків зазначеного способу можна віднести використання у якості реактивів хлороформу та спирту е тилового: перший не є безпечним і потребує використання спеціальних засобів захисту при здійсненні способу, а другий ви трачається у великій кількості, що впливає на вартість одержаного засобу. В якості прототипу вибраний відомий спосіб отримання комплексу полісахаридів протиалергічної дії [Патент 24032, Україна, МПК6 А61К35/78, заявл.28.12.95, опубл.31.08.98, Бюл. №4] шляхом трикратної екстракції листя смородини чорної гарячою водою при співвідношенні сировина : екстрагент 1:5-6, об'єднання одержаних екстрактів, їх упарювання до 1/7 попереднього об'єму з наступним осадженням чотирикратною кількістю спирту етилового 92-95% при співвідношенні екстракт : спирт етиловий 1:4, відокремленням осаду, його промивкою спиртом етиловим, сушкою та подрібненням. Проте в результаті здійснення відомого способу одержують засіб з вузькоспрямованою фармакологічною дією - протиалергічною. Завданням винаходу є створення способу одержання комплексу полісахаридів гемостатичної (19) UA (11) 83557 (13) C2 (21) a200611042 (22) 19.10.2006 (46) 25.07.2008, Бюл.№ 14, 2008 р. (72) ДЕМЕШКО ОЛЬГА ВОЛОДИМИРІВН А, U A, КОВАЛЬОВ СЕРГІЙ ВОЛОДИМИРОВИЧ, U A, КОМІС АРЕНКО АНДРІЙ МИКОЛАЙОВИЧ, U A, МАЛОШТАН ЛЮДМИЛА МИКОЛАЇВН А, UA, УЛАНОВА ВІРА АН АТОЛІЇВН А, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) Лікарські рослини : Енциклопедичний довідник / Відп. ред. А. М. Гродзінський. - К.: Голов. ред. УРЕ, 1990. - 544. UA 24032 C1, 31.08.1998. UA 56771 A, 15.05.2003. RU 1561262 C, 30.10.1994. 3 83557 4 та протизапальної дії шляхом екстрагування листя Використання сполучення нетрадиційного виакації білої гарячою водою при заданих параметду рослинної сировини і усіх параметрів заявленорах способу, в результаті чого одержують біологіго способу дозволяє одержати цільовий продукт чно активну субстанцію з гемостатичною та протикомплекс полісахаридів, який має гемостатичну і запальною дією, яка може бути використана як протизапальну активність. активна діюча речовина у складі лікарських засоЗаявлений спосіб здійснюють наступним чибів, виконаних у різних лікарських формах і приданом. тних до тривалого застосування внаслідок м'якої Зібране у період листопада висушене подрібдії та практично не-токсичності засобу і відсутності нене листя акації білої завантажують у реактор з побічних ефектів. мішалкою і паровою сорочкою, заливають гарячою Поставлене завдання вирішується таким чиводою 90°С у співвідношенні сировина - екстраном, що у способі одержання комплексу полісахагент 1:14-15. Екстракцію проводять на протязі 2-3ридів гемостатичної та протизапальної дії, який х годин при перемішуванні і постійно витриманій включає екстракцію рослинної сировини водою, температурі - 90°С. Для найбільш повного вилуупарювання одержаного екстракту, осадження чення комплексу полісахаридів одну й ту ж порцію спиртом етиловим, відокремлення осаду, його сировини піддають екстракції принаймні двічі. сушку та подрібнення, винаходом передбачено, Одержані зливи з'єднують і упарюють на вакуумщо як рослинну сировину використовують листя випарювальному апараті до 1/15 початкового об'акації білої, екстракцію проводять при співвідноєму. В упарений екстракт додають 95% етиловий шенні сировини до екстрагенту 1:14-1:15, а екстспирт у співвідношенні екстракт : спирт 1:3 і залиракт упарюють до 1/15 попереднього об'єму і осашають на добу до повного висадження. Надосадоджують трикратною кількістю спирту етилового. ву рідину видаляють при фільтруванні під вакууЗаявлений спосіб передбачає використання в мом, осад промивають етиловим спиртом, сушать якості рослинної сировини листя акації білої. Відоі подрібнюють. Вихід готового продукту 5,5-7% від мі дані про використання в народній медицині суцповітряно сухої сировини. віть акації білої в якості в'яжучого, сечогінного, Заявлений спосіб ілюструється наступними спазмолітичного, протисудомного, жарознижуючоприкладами: го, відхаркувального та гіпоазотемічного засобу. Приклад 1. 1,7кг подрібненого повітряноВикористання листя акації білої як лікарської сисухого листя акації білої завантажують у реактор з ровини для одержання засобів з гемостатичною та мішалкою і паровою сорочкою, заливають 25л гапротизапальною дією є невідомим з джерел інфорячої води 90°С і екстрагують при перемішуванні і рмації та неочевидним. постійній температурі 2,5 години. Екстракцію проКрім того, заявлений спосіб передбачає виководять двічі. Одержані екстракти 22,5л і 22,0л відристання листя акації білої у період листопаду, що повідно об'єднують і упарюють на вакуумдозволяє використовувати дешеву і доступну сивипарювальному апараті. Одержаний упарений ровину, завдяки широкому розповсюдженню акації екстракт в кількості 1,5 заливають в чан, додають білої в Україні. 4,5л етилового спирту 95%, перемішують й залиЕкспериментальним шляхом було визначено, шають на добу до повного висадження. Осад відщо оптимальним екстрагентом для одержання діляють на фільтрі під вакуумом, промивають 95% комплексу полісахаридів з гемостатичною та проетиловим спиртом, сушать і подрібнюють. Вихід тизапальною дією з вибраної сировини є гаряча цільового продукту 112,20г, тобто 6,6% від початвода бажано 90°С. Цей екстрагент також вигідний кової кількості повітряно-сухої сировини (1,7кг). з боку те хнологічних вимог до здійснення способу, Готовий продукт (субстанція) являє собою свібо є доступним, дешевим та екологічно безпечтло-кремовий негігроскопічний порошок, переважним. но комплекс полісахаридів, який має гемостатичну Співвідношення сировина : екстрагент 1:14та протизапальну активність. 1:15 знайдено експериментально і є оптимальним Приклад 2. Гемостатичну активність полісахадля даної сировини. Менша кількість екстрагенту ридного комплексу, одержаного за заявленим споне дозволяє ефективно провести екстракцію і пособом, вивчали у дослідах in vitro. Гемостатичну требує більшої кратності екстракції, а також стводію визначали за часом згортання крові при додарює труднощі те хнологічного характеру при оброванні у фізіологічний розчин комплексу полісахабці великої кількості сировини малим обсягом ридів у порівнянні з контролем (фізіологічний розрозчинника (закупорка зливної горловини тощо). чин) та відомими гемостатиками. Дію комплексу Більша кількість екстрагенту нераціональна, тому полісахаридів визначали у дозах 0,1мг/мл, що екстракція повністю досягається заявленою 0,2мг/мл, 0,3мг/мл, тобто відповідно 1мг, 2мг і 3мг кількістю екстрагенту. Збільшення останнього веде субстанції розчиняли у 10мл фізіологічного розчидо зниження концентрації екстракту і, як наслідок, ну. до збільшення енергетичних втрат і часу на упаДослідження проводили за методом Альтгаурювання екстракту. зена, який базується на визначенні швидкості споШляхом проведення серії експериментів були нтанної появи перших ниток фібрину. Для цього на визначені інші оптимальні технологічні параметри підігріте до температури 37°С знежирене предмезаявленого способу: у парення екстракту до 1/15 тне скло наносили краплю крові, які брали із вушпопереднього об'єму та осадження комплексу поної вени морської свинки, і додавали відповідний лісахаридів трикратною кількістю спирту етиловорозчин комплексу полісахаридів. Через кожні 15го. 20сек. ін'єкційною голкою проводили по краплі крові до появлення першої нитки фібрину. В якості 5 83557 6 препаратів порівняння використовували гемостати досліду представлені в таблиці 1. тик - 5% водний екстракт листя кропиви. РезультаТаблиця 1 Вивчення гемостатичної активності комплексу полісахаридів, одержаних за заявленим способом Доза, мг/мл Час згортання крові, с 0,1 135±3,8* Об'єкти дослідження Полісахаридний комплекс, одержаний за заявленим способом Гемостатична активність у порівнянні з контролем, % 34,4 0,2 144±9,5* 30,0 0,3 108±3,9* 206±18,1 116±2,8* 47,57 Контроль Водний екстракт листя кропиви * вірогідно стосовно контролю p