Етил 3-аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6-карбоксилат, який проявляє анальгетичну та протизапальну активність

Етил 3-аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6карбоксилат загальної формули: Винахід відноситься до хіміко-фармацевтичної галузі, а саме до нових біологічно активних хімічних сполук, похідних з ряду [2,3-d]-піримідин-6карбонової кислоти, які можуть використовуватися для створення лікарських засобів з властивостями, що характерні для групи нестероїдних протизапальних засобів (НПЗЗ) для лікування патологічних станів, що супроводжуються больовим синдромом та/або запаленням. Актуальність пошуку нових НПЗЗ обґрунтовується тим, що ряд побічних ефектів, пов'язаних з їх механізмом дії, таких як гастротоксичність, гепатотоксичність, нефротоксичність, гематотоксичність та тощо, обмежують їх застосування в клініці. Це та позитивні фармакологічні ефекти препаратів цієї групи: протизапальний, аналгетичний, жарознижувальний та антиагрегантний спонукають до пошуку та синтезу нових молекул з властивостями НПЗЗ, але більш нешкідливих та ефективних. У сучасній медичній практиці невідомі похідні [2,3-d]-піримідин-6-карбонової кислоти, які застосовуються як НПЗЗ. Аналогів за хімічною структурою заявленої сполуки етил 3-аміно-5-метил-2-(4метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин4-он-6-карбоксилату не знайдено. Аналогом за фармакологічною дією заявленої сполуки може бути препарат "Ортофен", діючою речовиною якого є диклофенак натрію (Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. T.1. - Изд. 13-е, новое. - Харьков: Торсинг, 1997. С.172), який виявляє виражені анальгетичні та протизапальні властивості і вважається одним з найефективніших та найбезпечніших з групи НПЗЗ. Ортофен (диклофенак натрію) є похідним фенілоцтової кислоти (натрієва сіль 2-[(2,6дихлорфенил)-аміно]-фенілоцтової кислоти) як і всі НПЗЗ призначений для лікування запальних захворювань, які супроводжуються больовим син O H3C O EtO N S N NH2 S (19) UA (11) 87088 (13) , який проявляє анальгетичну і протизапальну активність. C2 CH3 3 87088 дромом: гострого ревматизму, ревматоїдного артриту, анкілозуючого спондилоартриту (хвороби Бехтерева), артрозів, спонділоартрозів. До недоліків ортофену (диклофенаку натрію) можна віднести гастро-токсичну, гепатотоксичну та нефротоксичну побічну дію. Завданням винаходу є створення нової хімічної сполуки з вираженими анальгетичними та протизапальними властивостями без характерних для НПЗЗ побічних ефектів і може бути використана як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. Поставлене завдання вирішується шляхом синтезу етил 3-аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6-карбоксилату - індивідуальної хімічної сполуки загальної формули: O H3C O EtO N S N NH2 S CH3 який проявляє виражену анальгетичну та протизапальну активність і може бути віднесений до Заявлену сполуку одержують у 2 етапи. І. Етил 3-аміно-5-метил-2-тіоксо-1,2,3,4тетрагідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6карбокисилату (2). До розчину 10г діетил 5-аміно3-метилтіофен-2,4-дикарбоксилату (1) у ДМСО додавали 8,5мл сірковуглецю, а потім розчин NaOH 1,63г у 5мл води (при охолодженні). Суміш перемішували протягом 6 годин. Потім додавали 2,6мл йодистого метилу. Осад метилдитіокарбамінату відфільтровували і промивали спиртом. Метилдитіокарбамінат 9г розчиняли у 200мл етанолу при кип'ятінні. До розчину додавали 6мл гідразингідрату і кип'ятили протягом 15 хвилин. Після охолодження осад (2) відфільтровували, промивали ізопропанолом. Вихід 78%. Τ пл. 246-248°С. ІЧ (КВr, см-1): 3456, 3380, 2986, 1712, 1629, 1537. 1 H ЯМР (500MHz, ДМСО-D6): 1,30 (3Н, т, СООСН2СН3); 2,75 (3Н, с, СH3); 4,27 (2Н кв., СООСН2СН3), 7,09 (3Н, м., ΝΗ2+ΝΗ). Знайдено, %: Ν 15,88. C10H11N3O3S2. M+285. Розраховано, %: Ν 15,76. Μ 285,35. II. Одержання етилу 3-аміно-5-метил-2-(4метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин4-он-6-карбоксилату (3). До розчину (2) 2,9г в 30мл ДМФА і триетиламіну 1,7мл, додавали n 4 групи нестероїдних протизапальних засобів (НПЗЗ). Заявлена сполука невідома з джерел інформації. Заявлену речовину одержують шляхом взаємодії етил 3-аміно-5-метил-2-тіоксо-1,2,3,4тетрагідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6карбокисилату з n-метилбензилхлорид у присутності безводному ДМФА. Вихід речовини складає 78%. Етил 3-аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6карбокисилату - це біла ватоподібна речовина без запаху, розчинна в хлороформі, етилацетаті, ацетоні, диметилформаміді, при нагріванні розчиняється в ацетонітрилі, діоксані, оцтовій кислоті. Структура та індивідуальність заявленої хімічної речовини підтверджені за допомогою елементного аналізу, ІЧ-спектрофотометрії та 1Н ЯМРспектроскопії. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1 Схема одержання заявленої сполуки етил 3аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)-3,4дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6-карбокисилату метилбензилхлорид 1,46мл та реакційну суміш перемішували при 50°С протягом 3 годин. Після охолодження реакційну суміш розводили водою, а осад (3), який утворився, відфільтровували та перекристалізовували із суміші ізопропанол-ДМФА. Вихід 78%. Τ пл. 172-174°С. ІЧ (КВr, см-1): 3315, 3260, 3208, 2979, 2922, 1715, 1675, 1633, 1514, 1464, 1373. 1 Н ЯМР (200MHz, ДМСO-D6): 1,29 (3Н, т., СООСН2СН2) 2,27 (3Н, с, АrСН3), 2,76 (3Н, с, СH3), 4,5 (4Н, м., СООСН2СН3 + SCH2Ar), 5,72 (1Н, с, NHb), 7,09 (2Н, д., 3’H+5’H), 7,29 (2Н, д., 2’H+6’H). Знайдено, %: N 10,65. C18H20N3O3S2. Розраховано, %: N 10,79. М. 389,50. Приклад 2 Анальгетичну активність заявленої сполуки у порівнянні з ортофеном вивчали на моделі оцтовокислих корчів у білих лабораторних мишей масою 18-20г. [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В.Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С.307-320]. Анальгетичну активність (%) оцінювали за здатністю наведених засобів зменшувати кількість корчів у дослідній групі мишей у порівнянні з контрольною. Результати експерименту наведені у таблиці 1. 5 87088 6 Таблиця 1 Вивчення анальгетичної дії заявленої сполуки та препарату порівняння № п/п Варіанти досліду 1. Заявлена сполука 2. Ортофен Доза, мг/кг 5,0 10,0 15,0 1,0 5,0 10,0 Результати проведеного дослідження свідчать про те, що заявлена сполука етил 3-аміно-5метил-2-(4-метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3d]піримідин-4-он-6-карбоксилат проявляє виражену анальгетичну активність, яка перевищує анальгетичну активність препарату порівняння: за ЕД50 (0,7мг/кг) заявлена сполука перевершує у 7,2 рази ортофен (5,0мг/кг). Приклад 3 Протизапальну дію заявленої сполуки у порівнянні з референс-препаратом ортофеном вивчали Анальгетична Дія, % 26,79±14,51 89,01±1,20 79,07±9,98 14,1±2,46 42,2±3,21 70,4±8,06 ЕД50, мг/кг 0,7 5,00 на моделі ексудативного карагенінового набряку лапи у білих щурів масою 180-200г. [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В. Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С.292-306]. Протизапальну дію нової сполуки та препарату порівняння виражали у % і визначали за здатністю зменшувати набряки у дослідних тварин у порівнянні з контрольними. Результати дослідження наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Вивчення протизапальної дії заявленої сполуки (І) та препарату порівняння № п/п Назва речовини 1. Заявлена сполука (І) 2. Ортофен Доза, мг/кг 1,0 5,0 10,0 8,00 Протизапальна дія, % (середня за 5 годин) 47,58±2,65 42,57±3,23 47,04±2,59 66,62±4,34 ЕД, мг/кг ЕД40=1,10 ЕД50=8,00* ЕД50 ортофену, яка розрахована нами в інших дослідженнях та підтверджується даними літератури [Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації) // За редакцією: член-кор. АМН України О.В.Стефанова. - К.: Авіцена, 2001. - С. 292-306] Результати проведеного дослідження свідчать про те, що етил 3-аміно-5-метил-2-(4метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин4-он-6-кар-боксилат (ЕД40=1,10мг/кг) проявляє значущу протизапальну дію на рівні ЕД40 і за вираженістю ефекту дещо поступається препаратові порівняння ортофену (ЕД50=8мг/кг), протизапальна дія якого реалізується на рівні ЕД50. Приклад 4 Гостру токсичність заявленої сполуки вивчали з використанням стандартних загальноприйнятих методів на білих мишах масою 18-20г при одноразовому внутрішньошлунковому введенні сполуки у декількох дозах у діапазоні від 500мг/кг до 5000мг/кг з метою знаходження середньосмертельної дози (ЛД50). Для заявленої сполуки ЛД50 складає 5860мг/кг. Для порівняння ЛД50 вольтарену дорівнює 370мг/кг. Згідно з загальноприйнятою класифікацією токсичності речовин етил 3-аміно-5-метил-2-(4 метилбензилтіо)-3,4-дигідротієно[2,3-d]піримідин4-он-6-карбокисилат належить до V класу практично нетоксичных речовин (ЛД50>5000мг/кг). Таким чином, заявлено нову хімічну сполуку етил 3-аміно-5-метил-2-(4-метилбензилтіо)-3,4дигідротієно[2,3-d]піримідин-4-он-6-карбокисилат, що проявляє виражену анальгетичну та протизапальну активність, є практично нетоксичним. Заявлена сполука може знайти застосування у терапевтичній практиці для лікування патологічних станів, що супроводжуються больовим синдромом та запаленням. При синтезі заявленої сполуки використовують доступні реактиви, дозволені у фармацевтичній практиці. Речовина одержується за простою технологією, яка може бути відтворена у промислових умовах, є стійкою, що підвищує термін її зберігання. Таким чином, перелічені фактори дозволяють рекомендувати заявлену речовину як субстанцію для створення високоефективних лікарських засобів у різних лікарських формах. 7 Комп’ютерна верстка А. Рябко 87088 8 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601