N’-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b]піридин-3-іл)-ацетил]-ацетатної кислоти гідразид, що проявляє антиоксидантну дію

Реферат: N'-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b)]піридин-3-іл)-ацетил]-ацетатної кислоти гідразид, що проявляє антиоксидантну дію. UA 115303 U (12) UA 115303 U UA 115303 U 5 10 15 20 Корисна модель належить до нових хімічних сполук і фармації, зокрема одержання біологічно активних речовин, а саме N'-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b]піридин-3-іл)ацетил]-ацетатної кислоти гідразид, що проявляє антиоксидантну дію і може бути використаний в клінічній медицині як антиоксидантний лікарський засіб. У живих клітинах в результаті аеробних метаболічних процесів постійно утворюються активні форми кисню (АФО). Серед них найпоширенішими є супероксидний аніон радикал (О2), гідроген пероксид (Н2О2), гіпохлорит аніон (СlO), гідроксид радикал (НО). АФО відіграють важливу роль у передачі клітинних сигналів, а також ініціюють процес вільнорадикального окиснення ліпідів. Проте, як свідчать клінічні та експериментальні дані, активні метаболіти кисню виконують також негативну функцію: сприяють розвитку значної кількості захворювань, зокрема таких, як атеросклероз, рак, діабет, нейродегенераційні захворювання (хвороби Паркінсона, Альцгеймера, Хантінґтона та ін.). Зазвичай організм захищає себе від негативної дії АФО, контролюючи концентрацію цих частинок у клітинах. Проте за надмірної кількості АФО або ослаблення антиоксидантного захисту організму виникає окиснювальний стрес, що призводить до ушкодження внутрішньоклітинних структур і виникнення захворювань. Похідні піридину становлять значну частину сучасного арсеналу лікарських засобів. З півтори тисячі найбільш регулярно вживаних лікарських препаратів понад 10% припадає на частку сполук, що мають піридинове кільце. Не менш цікавими залишаються і 4-тіазолідони. Спектр фармакологічної активності цих речовин досить широкий. Тому безумовно, синтез тіазолідинів, анельованих з піридиновим циклом, є цікавим і актуальним напрямом. В молекулі об'єкту, що заявляється, міститься піридиновий цикл, тому близьким за складом і будовою до заявлених сполук є похідне піридину - антиоксидантний лікарський засіб - мексидол [1] формули: OH COOH * N H3C 25 30 COOH C2H5 . Однак цей лікарський засіб має ряд недоліків, зокрема, при його застосуванні спостерігаються нудота, сухість слизової оболонки рота, шкірно-алергічні реакції. У цьому контексті актуальним є пошук органічних сполук, здатних проявляти високу антиоксидантну активність, та розробка на їхній основі нових лікарських засобів. В основу корисної моделі поставлена задача створення нових антиоксидантних лікарських засобів, що мають покращені властивості та не викликають побічних явищ. Поставлена задача вирішується синтезом N'-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b]піридин-3іл)-ацетил]-ацетатної кислоти гідразиду загальної формули: O N N N N O S 35 40 45 O , що проявляє антиоксидантну дію. Синтезована сполука являє собою світло-сірий кристалічний порошок, не розчинний у воді, розчинний у ДМФА та ДМСО. Для доказу складу і структури синтезованої сполуки були використані відомі фізико-хімічні методи, зокрема ПМР-спектроскопія та елементний аналіз. Одержані результати свідчать про відповідність синтезованої сполуки заявленій. Заявлений N'-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b] піридин-3-іл)-ацетил]-ацетатної кислоти гідразид одержують шляхом утилізації гідразиду-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b]піридин-3-іл)ацетатної кислоти хлорангідридом ацетатної кислоти. Оптимальними умовами цієї реакції є її проведення в середовищі діоксану в присутності еквімолярної кількості триетиламіну при нагріванні суміші протягом 15 хв. Антиоксидантну активність сполук досліджували in vitro, визначаючи зменшення концентрації вільного радикалу [2]. Для цього використали відносно стабільний радикал 2,2дифеніл-1-пікрилгідразилу (ДФГТГ). Інтенсивно фіолетовий ДФГТГ у розчині етанолу характеризується максимумом поглинання світла при 517 нм. У присутності антиоксидантів 1 UA 115303 U 5 10 15 20 гаситься вільнорадикальний центр ДФПГ, внаслідок чого розчин поступово втрачає фіолетове забарвлення. Порівняння оптичної густини розчину, який містить досліджувану субстанцію та надлишок радикалу, з оптичною густиною розчину самого радикалу дає змогу визначати радикал-поглинальну активність (РПА) сполук. Розчини сполук в етанолі (0,3 мл, 20 моль/л) додавали до спиртового розчину ДФПГ (2,7 мл, 150 моль/л). Суміш інтенсивно перемішували і залишали на 2 год. Після цього розчин вносили в кювету спектрофотометра і визначали його оптичну густину. Радикал-поглинальну активність сполук обчислювали за формулою:  ДФПГ   s   100 %,  ДФПГ де  ДФПГ - оптична густина розчину вільного радикалу ДФПГ (135 моль/л), As - оптична густина розчину ДФПГ із тестованою речовиною. Як стандарт використовували аскорбінову кислоту (РПА=21,5 %). Вимірювання проводили тричі з незалежними аліквотами. Токсикометричні дослідження синтезованої сполуки вивчали за відомою методикою [3]. Речовину вводили в дозах 500, 800, 1000, 1500 мг/кг маси тварини, при одноразовому парентеральному введенні суспензії речовини білим мишам обох статей. Як контроль використовували групу тварин, яким було введено воду очищену. За тваринами спостерігали впродовж 14 днів. У результаті проведених токсикометричних досліджень встановлено, що значення LD 50 дозволяє віднести синтезовану сполуку до V класу безпеки, тобто за ступенем токсичності і небезпеки вона відповідає вимогам до лікарських засобів. Результати проведених досліджень подано у Таблиці. Таблиця Сполука або еталонний лікарський засіб Аскорбінова кислота РПА % 34 LD50, мг/кг 36 320 O N N N N O S 25 30 35 40 45 O Отже, сполука, що заявляється, проявляє високу антиоксидантну дію, а за ступенем токсичності і небезпеки відповідає вимогам до лікарських засобів, тому може бути перспективним антиоксидантним лікарським засобом. Для розуміння корисної моделі нижче наведено приклад одержання синтезованої сполуки. Синтез N'-[2-(5,7-димeтил-2-oкco-тiaзoлo[4,5-b]пipидин-3-iл)-aцeтил]-ацетатної кислоти гідразиду. У 20 мл діоксану вносять 5 ммоль гідразиду (5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5b]піридин-3-іл)-ацетатної кислоти та еквімолярні кількості хлорангідриду ацетатної кислоти та триетиламіну. Суміш нагрівають при температурі 100 °С протягом 15 хв. Кристалічний осад, що випав після охолодження, відфільтровують, промивають метанолом та висушують. Одержану сполуку перекристалізовують з метанолу. Вихід 85 %. Т.топл. 190 °С. Брутто формула C12H14N4O3S. Знайдено, %: N 18,90; S 10,95. Вирахувано, % N 19,04; S 10,89. 1 Спектр Н ЯМР , м.ч., J, Гц (ДМСО-D6, 400 МГц): 2,32 (с, 3Н, СН3), 2,43 (с, 3Н, СН3), 2,51 (с, 3Н, СОСН3), 4,64 (с, 2Н, СН2), 7.01 (с, 1Н, Ру). Джерела інформації: 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. В двух томах. T.1. - Изд. 13-е, новое. Харьков: Торсинг, 1998. - 560 с. 2. Molyneux P. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity // J. Sci. Technol. - 2004. - Vol.26. - P. 211-219. 3. Стефанов О.В. Доклінічні дослідження лікарських засобів / Методичні рекомендації. - Київ: Авіцена, 2001. - 527 с. 2 UA 115303 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 N'-[2-(5,7-диметил-2-оксо-тіазоло[4,5-b)]піридин-3-іл)-ацетил]-ацетатної загальної формули: кислоти гідразид O N N N N O S O , що проявляє антиоксидантну дію. Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3