Спосіб діагностики алергозів у дітей

1. Спосіб діагностики алергозів у дітей, що включає клінічне обстеження та визначення в крові пацієнта рівня загального сироваткового IgE, який відрізняється тим, що додатково визначають величини концентрацій серотоніну та гістаміну 3 14671 4 но для визначення алергозу у хворих дітей їм проТрадиційна алергодіагностика, до якої відноводять шкірне тестування алергенами in vivo, виситься і прототип, базується на оцінці даних алерзначають наявність еози-нофілії, випадки алергійгологічного анамнезу та результатах шкірних проб, них захворювань в сімейному анамнезі. В разі а при необхідності - провокаційних тестів. Лаборанаявності сукупності найхарактерніших ознак алеторна діагностика (in vitro) має перевагу перед ргозів рівень загального сироваткового IgЕ достошкірним тестуванням (in vivo), оскільки з'являється вірно зростає. Тому за відомим способом визнаможливість одночасного тестування великої кільчення рівня загального сироваткового IgЕ у кості алергенів, котрому не заважає навіть манікомплексі з клінічними дослідженнями та шкірним фестація шкірного процесу, виключається можлитестуванням рекомендують для діагностики алервість провокації активності процесу та розвитку гозів у дітей. загальних алергійних реакцій на алерген, щодо Недоліками відомого способу діагностики алеякого здійснюють тестування. Причиною недостаргозів у дітей є низька точність діагностики та нетньої точності відомого способу діагностики є невбезпечність тестування для здоров'я дитини, оскірахування в ньому складності механізмів розвитку льки: та різноманіття проявів алергозу. Відомим спосо- у дітей діагностують лише алергійну реакцію бом передбачене виявлення алергійної реакції негайного типу і не діагностують алергійну реакцію тільки негайного типу. За характером імунологічної уповільненого типу; реакції на алерген, що є антигеном, алергійні реа- метод не передбачає кількісні діагностичні кції поділяють на реакції негайного типу, обумовдослідження; лені переважно IgЕ, цитотоксичні, імунокомплексні - можливі провокації активності процесу та рореакції, та реакції уповільненого типу - клітиноопозвитку загальних алергійних реакцій на алерген, середковані Т-залежні реакції з участю сенсибіліщодо якого здійснюють шкірне тестування in vivo. зованих Т-лімфоцитів. Деякі алергени можуть виПричиною низької точності діагностики за вікликати в організмі одночасно більше однієї домим способом є односторонність досліджень реакції. У способі, що заявляється, використовуімунологічного стану організму пацієнта, а саме: ють комплексне дослідження імунного статусу орвраховують лише рівень IgЕ (реакцію негайного ганізму пацієнта: передбачено діагностування типу), комплексне ж дослідження імунного статусу алергозу, що перебігає за реакцією негайного типу хворої дитини, в тому числі реакції уповільненого (визначення загального сироваткового IgЕ), за типу, відсутнє. А шкірне тестування in vivo є небереакцією уповільненого типу (проведення РГМЛ), зпечним для здоров'я дитини. за реакцією медіаторів алергії (визначення гістаміВ основу корисної моделі поставлено задачу в ну, серотоніну). Така комплексна діагностика доспособі діагностики алергозів у дітей шляхом зазволяє визначати алергоз з високою точністю (до стосування комплексних методів визначення не100%). гайного та уповільненого типів алергійної реакції Для клінічної перевірки точності способу діагорганізму хворого на алерген in vitro забезпечити ностики, що заявляється, були відібрані 200 дітей високу точність діагнозу та безпечність тестувану віці від новонароджених до 14 років - пацієнтів ня. Спосіб, що заявляється, є високоточним (до Донецького дитячого алергоцентру. Діти стражда100% співпадіння результатів з клінічними спостели на алергоз або цей діагноз був попереднім реженнями) та безпечним, доступним, економіч(встановлений лише за клінічними ознаками). Осним, безболісним, зручним для хворого і лікаря. новну групу (І) склали 160 піддослідних пацієнтів, Поставлена задача вирішується тим, що у віяких діагностували за способом, що заявляється. домому способі діагностики алергозів у дітей шляАлергійний характер захворювання був уже встахом клінічного обстеження та визначення в крові новлений до даних іспитів та підтверджений ефекпацієнта рівня загального сироваткового IgЕ нотивністю антиалергійної терапії у 100 з них. Щодо вим є те, що додатково визначають величини конінших 60 дітей з І групи лікарі мали підозру на алецентрацій серотоніну та гістаміну в крові, діагносргоз. Групу (II) порівняння склали 40 дітей, алертичного індексу реакції гальмування міграції гійний характер захворювання у яких підозрювавлейкоцитів (РГМЛ) з харчовими, побутовими, епіся. Пацієнтів групи II діагностували за відомим дермальними та грибковими алергенами, і в разі, способом-прототипом. Алергоз діагностували в коли рівень загального сироваткового IgЕ та знаусіх 40 пацієнтів групи II за підвищеним рівнем IgЕ, чення хоча б одного з додатково визначених трьох за даними шкірного тестування, наявністю еозипоказників не відповідають фізіологічній нормі динофілії та випадків алергійних захворювань в сітини, у неї діагностують алергоз. мейному анамнезі (див. таблицю 1). В усіх 160 Новим в способі, що заявляється, є і те, що, пацієнтів І групи спочатку перевірили рівень загаколи не відповідають нормі рівень загального сильного сироваткового IgЕ. Він не відповідав нормі роваткового IgЕ та значення одного з додатково у 155 пацієнтів зі 160. У 5 дітей з групи І (підгрупа визначених показників, у дитини діагностують алеа) рівень IgЕ був у межах фізіологічної норми. Рергоз з точністю до 50%, IgЕ та значення двох дозультати перевірки концентрації серотоніну відподатково визначених показників - з точністю до відали нормі у 5 дітей групи Іа з нормальним рів75%, IgЕ та значення трьох додатково визначених нем IgЕ та ще у 16 групи Ід зі 155 пацієнтів з показників - з точністю до 100%. рівнем IgЕ поза фізіологічною нормою. Між сукупністю ознак корисної моделі і технічРезультати перевірки концентрації гістаміну ним результатом, якого можна досягти при її реавідповідали нормі у 5 дітей групи Іа з нормальним лізації, існує причинно-наслідковий зв'язок. рівнем IgЕ та ще у 24 дітей групи Іг з рівнем IgЕ та концентрацією серотоніну поза фізіологічними 5 14671 6 нормами. З кров'ю всіх 160 дітей І групи провели зультатами десенсибілзуючої терапії та елімінаРГМЛ з харчовими, побутовими, епідермальними ційної дієти (вживання харчових продуктів, що не та грибковими алергенами. За результатами РГМЛ містять алергенів), гігієнічних заходів з виключенпідрахували та проаналізували діагностичні індекням побутових алергенів і т.ін. си. Їхня величина перебувала в межах норми у 5 Перевірка точності діагнозу встановила (див. дітей групи Іа з нормальним рівнем IgЕ, у 24 дітей таблицю 1), що за відомим способом-прототипом групи Іг з рівнем IgЕ та концентрацією серотоніну вона складає 25%: діагноз підтверджено у 10 паціпоза фізіологічними нормами та ще у 80 пацієнтів єнтів з 40 (група II). Правильність діагностики за групи їв, у яких не відповідали нормі ні IgЕ, ні сеспособом, що заявляється, підтверджена в 100% ротонін, ні гістамін. Отже (див. таблиці 1), у 5 пацівипадків у пацієнтів групи Іа: скарги 5 маленьких єнтів групи Іа діагностували відсутність алергозу. У пацієнтів з цієї підгрупи мають неалергійну прироінших 155 пацієнтів групи І з різною точністю був ду (всі показники в нормі). Їм призначено додаткові встановлений алергоз за способом, що заявляєтьтестування та встановлені інші причини захворюся: у 51 - алергоз з очікуваною точністю до 100% вання, не пов'язані з алергією. У 100% випадків (16), у 80 - з очікуваною точністю до 75% (Ів), у 24 підтверджено діагноз у 51 пацієнта в групі Іб: всі з очікуваною точністю до 50% (Іг). показники не відповідають фізіологічній нормі тесТочність встановленого діагнозу за способом, тованих дітей. В групі Ів підтверджено діагноз в що заявляється (група І) та відомим способом 75% (у 60 дітей з 80) випадків: 3 з 4-х показників не (група II) перевірили, співставляючи з відомим відповідають нормі. В групі Іг підтверджено діагноз діагнозом алергозу у 100 дітей - пацієнтів Донецьв 50% (у 12 дітей з 24) випадків: 2 з 4-х показників кого дитячого алергоцентру. Інші 100 дітей, яких не відповідають нормі. залучили до досліджень з невизначеним діагноПорівняльна ефективність способу діагностики зом, були піддані додатковим тестуванням. Їхній алергозу, що заявляється як корисна модель, та діагноз підтверджували або спростовували за ревідомого способу-прототипу (n - число пацієнтів) Таблиця 1 Відповідність показника нормі Діагностовано алергозу числа № гру- Спосіб діагДіагноз підтверджено (+), невідповідність нормі (-) у пацієнтів з очікуваною точністю пи, n ностики у числа пацієнтів (%) чол. діагнозу (до%) (а) 5 - алергоз відсут(а) 5 + + + + (а) 5 - алергоз відсутній ній (100) корисна мо(6)51- - - (б) 51 (до 100) (6) 51 (100) І n=160, дель (в)80 - - - + (в) 80 (до 75) (в) 60 (75) (г)24 - - + + (г) 24 (до 50) (г) 12 (50) II n=40 прототип 40 40(100) 10(25) Спосіб діагностики алергозів у дітей, що заявляється, реалізують наступним чином. Дитині з підозрою на алергоз (шкірні висипи, кашель з астматичним компонентом і т.ін.) проводять клінічне обстеження. Потім натще шприцом з ліктьової вени беруть пробу крові в 8мл. Цю пробу розподіляють на 3 пробірки для 3-х подальших досліджень: 5мл, 2мл, 1мл. Пробу крові в 5мл з антикоагулянтом (цитратом натрію) перевіряють на РГМЛ з харчовими, побутовими, епідермальними (ТОВ "Алерген", Вінниця) та грибковими (НДІ епідеміології та мікробіології, Казань) алергенами за відомою методикою і за результатами РГМЛ розраховують діагностичний індекс, значення якого в нормі повинне бути вищим за 0,86 [Фрадкин В.А. Аллергодиагностика in vitro.- М., Медицина. 1975. - С.27-36]. Значення індексу нижче 0,86 свідчить про дію алергійної реакції уповільненого типу в організмі пацієнта. Паралельно в пробу крові пацієнта в 2мл додають препарат ЕДТА та центрифугують для відділення плазми. Одержану плазму тестують для визначення рівня загального сироваткового IgЕ за відомим імуноферментним методом, користуючись діагностичною тестсистемою ЗАТ "АлкорБіо" (Санкт-Петербург, РФ) та прикладеною інструкцією виробника. Коли рівень загального сироваткового IgЕ перевищує значення фізіологічної норми, у дитини діагносту ють розвиток алергійної реакції негайного типу [Мельник А.А. Референтные значения лабораторных показателей у детей и взрослых / Справочник врача-лаборанта. - К.: "Книга Плюс", 2000-118с.]. Пробу крові пацієнта в 1мл з додаванням гепарину тестують на вміст медіаторів алергії - гістаміну та серотоніну за відомою методикою [Прошина Л.Я. Исследование гистамина и серотонина в одной пробе крови // Лаб.дело. - 1981. - №2. С.90-93]. Авторами доведено, що розвиток помірної та сильної сенсибілізації уповільненого типу тісно пов'язаний з підвищенням концентрацій серотоніну та гістаміну в крові пацієнта [Трунова О.А., Андрухей С.В., Куляс В.М. и др. Возможности лабораторной аллергологической диагностики при атопическом дерматите у детей. - Імунологія та алергологія. - 2005. - №3. - С.39-43]. Одержані результати тестувань аналізують. Якщо рівень загального сироваткового IgЕ та хоча б один з трьох визначених показників (індекс РГМЛ, концентрація гістаміну чи серотоніну) не відповідають фізіологічній нормі дитини, у неї діагностують алергоз. Причому, коли не відповідає нормі рівень загального сироваткового IgЕ та ще один з додатково визначених показників, у дитини діагностують алергоз з точністю до 50%, IgЕ та два з додатково визначених показників - з точністю 7 14671 8 до 75%, IgЕ та три з додатково визначених показ5мл з цитратом натрію перевірили на РГМЛ з алеників - з точністю до 100%. ргенами малини, курячого яйця, апельсина. За Конкретні приклади реалізації способу, що заодержаними результатами РГМЛ розрахували являється. діагностичні індекси, які дорівнювали 0,60, 0,50, Приклад 1. Хвору дівчинку Юлю Л., 3 років, 0,43 відповідно. Значення індексу нижче 0,86 свідмати привела на консультацію до дитячого алерчить про дію алергійної реакції уповільненого типу голога Донецького дитячого алергоцентру. Юля в організмі Юлі. Паралельно в пробу крові в 2мл скаржиться на висипання та свербіння в зоні обдодали препарат ЕДТА та відділили плазму. Оделиччя, ліктьових та колінних згинів. Мати пов'язує ржану плазму тестували для визначення рівня загострення хвороби з прийомом в їжу малини, загального сироваткового IgЕ. Рівень загального апельсинів, курячих яєць. сироваткового IgЕ у Юлі перевищував значення Дитячий алерголог для встановлення діагнозу фізіологічної норми - 61МО/мл (норма - менше призначив дослідження за способом-прототипом. 60МО/мл), що свідчило про розвиток у дитини Випадків алергії у родичів Юлі не встановлено. алергійної реакції негайного типу. Шкірне тестування in vivo дівчинці не проводили Пробу крові Юлі в 1мл з додаванням гепарину через загострення хвороби, боячись можливої тестували на вміст медіаторів алергії - гістаміну та провокації активності процесу та розвитку загальсеротоніну. Встановлене значення концентрації них алергійних реакцій на алерген, щодо якого гістаміну в крові Юлі перевищувало фізіологічну здійснюють шкірне тестування in vivo. Аналіз крові норму для трирічних дітей: гістамін - 0,15мкг/мл (в на визначення концентрації еозинофілів показав нормі 0,02-0,10мкг/мл, [див. Большая медицинская граничне значення норми: 1% [Козинец Г.И. Интеэнциклопедия. - М.: «Советская энциклопедия», рпретация анализов крови и мочи и их клиничес1977. - Т.6. - С.50], а серотонін - 0,19мкг/мл - відкое значение. - М.: "Мир", 2000. - С.36]. повідав нормі (в нормі 0,05-0,20мкг/мл, див. там Дослідження рівня загального сироваткового же: 1984. - Т.23. - С.205]. IgЕ дало результат, який дещо перевищує фізіолоОдержані результати тестувань занесені до гічну норму для трирічної дитини: 61МО/мл (норма таблиці 2. Аналіз показав, що рівень загального - менше 60МО/мл, [див. Мельник А.А. Референтсироваткового IgЕ і значення двох визначених поные значения лабораторных показателей у детей казників (індекс РГМЛ, концентрація гістаміну) не и взрослых / Справочник врача-лаборанта. - К.: відповідають фізіологічним нормам для трирічної "Книга Плюс", 2000 - С.89]. дівчинки Юлі. Тому за способом, що заявляється, Отже, для підтвердження попереднього діагу неї діагностували алергоз з точністю до 75%. нозу (алергоз) за способом-прототипом даних неДівчинці Юлі призначили антиалергійну терапію та достатньо: з чотирьох критеріїв не відповідає нордотримання елімінаційної дієти з виключенням мі лише один (IgЕ). харчових продуктів, що містять алергени малини, Тоді дівчинці Юлі провели діагностичне дослікурячого яйця, апельсина. Після лікування шкірні дження за способом, що заявляється. У неї натще висипання та свербіння зникли. Через місяць після шприцом з ліктьової вени взяли пробу крові в 8мл. закінчення антиалергійної терапії Юлі повторили Цю пробу розділили на 3 пробірки для 3-х подадіагностичні тестування за способом, що заявляльших досліджень: 5мл, 2мл, 1мл. Пробу крові в ється. Всі показники відповідали нормі (таблиці 2). Таблиця 2 Результати діагностики алергозу у дівчинки Юлі Л., 3 роки. Спосіб діагнос- № тики п/п відомий заявлений 1 2 3 4 1 2 3 4 Діагностичні показники наявність алергії у близьких родичів еозинофіли,% шкірне тестування IgЕ, МО/мл IgЕ, МО/мл індекси РГМЛ з алергенами малини, курячого яйця, апельсина гістамін, мкг/мл серотонін, мкг/мл Приклад 2. Хворий хлопчик Юрко С., 10 років, звернувся до дитячого алерголога Донецького дитячого алергоцентру. Юрко скаржився на утруднене дихання, ядуху при фізичному навантаженні, коли утруднювався видих. Значення діагностичних показників після лікудо лікування норма вання відсутня відсутня 1