Протипухлинний засіб – калієва сіль 8-бромтеофіліну (бротеофін)

Протипухлинний засіб - калієва сіль 8-бромтеофіліну (бротеофін). Винахід відноситься до медицини, а саме до онкофармакології. Калієва сіль 8-бромтеофіліну (бротеофін) відноситься до антиметаболітів пуринового обміну - метилксантинам з хімічною структурою: Результати порівняльного вивчення протипухлинної дії бротеофіну з 6-меркаптопурином надані у табл. Із таблиці видно, що процент пригнічення росту всіх використаних моделей пухлин, крім саркоми 180, перевищував прийняті критерії значущості [3] і був вищим, ніж у 6-меркаптопурину, крім карциноми 755 (фіг. - Спектр протипухлинної дії бротеофіну в порівнянні з 6-меркаптопурином.) Позитивний ефект бротеофіну при експериментальних пухлинах з'ясовується механізмами його дії на пухлинний ріст, а саме він як преформований пурин гальмує передачу генетичної інформації по вертикалі (ДНК→РНК→білок) [4]. До цієї дії додаються ефекти метилксантинів конкурентна блокада р 1-пуринорецепторів, зниження активності фосфодіестерази пухлин з підвищенням рівню цАМФ [4]. Крім того, бротеофін проходить через гематоенцефалічний бар'єр [5], що обумовлює його активність при пухлинах головного мозку в експерименті і клініці. Слід відмітити, що токсичність бротеофіну в значній мірі нижча в порівнянні з 6-меркаптопурином (ЛД50 6-меркаптопурину при внутрішньочеревному введенні білим нелінійним щурам становить 137 мг/кг маси тіла, бротеофіну - 564 мг/кг). Одночасно бротеофін відповідає рівню протипухлинної активності речовин з прогнозом високого протипухлинного ефекту в умовах клініки [6]: >90% гальмування росту пухлин на 3-х моделях (лімфосаркома Пліса, саркома М-1, карцинома РА); в межах 70% гальмування пухлинного росту з урахуванням зазначених пухлин - на 8 моделях CH3 За хімічною структурою бротеофін не має аналогів в арсеналі відомих протипухлинних засобів. Найбільш близьким препаратом за хімічною структурою є протилейкозний засіб 6меркаптопурин [1]. Дослідження останнього показали, що він не має значної протипухлинної дії і в медичній практиці використовується для лікування гострих та хронічних лейкозів [2]. Завданням винаходу було експериментальне і клінічне обгрунтування доцільності використання бротеофіну для лікування хворих із злоякісними пухлинами головного мозку, молочної залози, прямої кишки. Поставлена задача здійснювалася шляхом експериментального і клінічного вивчення бротеофіну на прищепних пухлинах тварин, гетеротрансплантатах пухлин людини (підкапсульний тест), а також в Клініці внутрішньомозкових пухлин Інституту нейрохірургії ім. акад. А.П. Ромоданова АМН України (хворі на злоякісні пухлини головного мозку). Бротеофін вводився в експериментальних дослідженнях внутрішньочеревно в фізіологічному розчині натрію хлориду, в клініці-внутрішньовенно. CH3 A Br .H2O Br .H2O (13) N N 40511 N K N N K N (11) N N UA O O (19) O H3C O H3C 40511 (карцинома легень Льюїс, меланома В-16, карциносаркома Уокера, карцинома 755, карцинома PC). Вище критерію значущості (>25% збільшення терміну життя тварин) активність бротеофіну (+31,0%) на лейкемії Р388. Показник меркаптопурину - +25,0%. Приклад 1. Білим нелінійним щурятам з масою тіла 40,050,0 г внутрішньоцеребрально (права лобна область) трансплантували 20% суміш пухлинних клітин гліобластоми Яблоновської (штам 101,8) в середовищі 199, в об'ємі 0,1 мл [7, 8]. Бротеофін вводили при появі неврологічної симптоматики (79 день після трансплантації) внутрішньочеревно в дозі 180 мг/кг, 6 введень через 48 годин. Ефект оцінювався за відсотком збільшення продовження життя тварин при лікуванні бротеофіном в порівнянні з контролем (тварини без лікування). Бротеофін у зазначених умовах продовжував життя тварин на 20,3% при критерії значущості ≥25,0%. Приклад 2. В клініці брався операційний матеріал пухлин головного мозку людини, трансплантувався під капсулу нирки тварин (миші лінії СВА, маса тіла 80120 г) за методом Богдена та співавт. [9] В клініці бротеофін вводили внутрішньовенне в дозі 300-600 мг, починаючи з 5-7 дня після операції. Інтервал між введеннями - 24 години (10 введень). Повторні курси проводили через 1,5 місяці. В цілому при клінічній апробації дослідження показали, що у 70% хворих при лікуванні бротеофіном був виявлений клінічний ефект (у 59% хворих, оперованих та лікованих бротеофіном та у 11% неоперованих хворих тільки лікованих бротеофіном). У порівнянні з групою хворих, які отримували лікування фторафуром, середня тривалість життя при використанні бротеофіну у пацієнтів II ступеня анаплазії становила 36,4±8,7 міс, фторафур у 27,3±3,9 міс. При гістомах III ступеня анаплазії відповідно 22,0±7,6 міс. та 11,0±1,0 міс. При гліобластомах IV ступеня анаплазії - 14,8±5,1 міс. та 8,3±3,4 міс. Маса трансплантата - 1 мг. Введення його здійснювалося під гексеналовим наркозом (внутрішньочеревно, по 0,2 мл розчину гексеналу 15 мг : 1 мл). Курс лікування починався через 3 дні після трансплантації пухлинного матеріалу. Введення бротеофіну здійснювалося в дозі ЛД10 [8 ], щоденно протягом 3 днів (180 мг/кг). Критерій значущості для цього методу - 25% гальмування росту трансплантату [8]. Бротеофін виявив активність на пухлинах головного мозку людини - 48,3% гальмування росту гетеротрансплантатів. Приклад 3. Хворий Сидорчук С.Ф. 1963 p. народження. Історія хвороби № 2110 (за 1997 р.) У 1996 р. оперований у м. Львові з приводу гліоми III анаплазії у правій лобно-кальозній області. Проведено її субтотальне знищення. У післяопераційному періоді одержав 6 курсів бротеофіну. (Інститут нейрохірургії АМН України ім. А.П. Ромоданова). На сьогодні хворий живий, термін життя перевищує 46 місяців. В експерименті бротеофін має широкий спектр протипухлинної дії. Проведені клінікоекспериментальні дослідження щодо поширення клінічних показань препарату з використанням пухлин людини (підкапсульний тест, див. с. 5). Показано, що бротеофін має активність, що перевищує критерій значущості (25%) на злоякісних пухлинах молочної залози (38,8%), прямої кишки (54,0%) та шлунку (52,4%), що передбачає можливість поширення його клінічних показань. Джерела інформації 1. Противоопухолевая химиотерапия. Справочник под ред. Н.И. Переводчиковой. - М., 1996. 222 с. 2. Гарин А.М., Хлебнов А.В. Справочник практической химиотерапии опухолей. - М.: Росмэн, 1995. - 309 с. 3. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США (под ред. З.П. Софьиной, Я.Б. Сыркина (СССР), А. Голдина, А. Кляйна (США). - М.: Медицина, Лит. изд., 1979, 286 с. 4. Механизмы биологического действия бротеофина. В кн.: "Химиотерапия опухолей в СССР." М., 1982. - Вып. 38. - С. 90-97. 5. Фармакологические аспекты изучения производных теофиллина с противоопухолевой активностью. В кн.: "Химиотерапия опухолей в СССР." М., 1987. - Вып. 47. - С. 7-12. 6. Доклінічне вивчення специфічної активності протипухлинних засобів. Методичні рекомендації. / H.I. Шарикіна, Г.І. Кулик, В.А. Шля ховенко, Ю.В.Бардик. - Київ, Фармакологічний комітет МОЗ України, 1996. - 16 с. 7. Яблоновская Л.Я., Дегтева С.А. Действие фенестерина на глиальные опухоли мозга мышей. // Ар хив патологии. - 1965. - № 12. - С. 60-63. 8. Яблоновская Л.Я. Экспериментальные опухоли головного мозга, полученные методом гетеротрансплантации и индуцирования. - Л.: Медицина, 1967. - 175 с. 9. Підкапсульний тест (гетеротрансплантати пухлин людини) Bogden А.Е., Cobb W.R., Lepage D.L. et al. Chemotherapy responsiveness of human tumours as first transplant generation xenografts in the normal mouse six day sub re-nal capsule assay // Cancer, 1981, vol. 48, № 1, p. 10-20. 2 3 56,3 30 20 160 60 процент гальмування росту пухлин 46 150 62,5 135 68,8 67,3 180 108 Карцинома Льюїс Дози, мг/кг ** збільшення тривалості життя тварин * 6-меркаптопурин Бротеофін Препарат 66,2 29,4 76,4 Меланома В-16 87,8 78,3 65,2 Карцинома 755 58,6 62,2 71,1 Карцинома Уокера 34,3 96,9 92,3 Лімфосаркома Пліса 61,3 32,3 81,5 Саркома 45 69,4 89,6 89,6 Саркома М-1 36,0 68,7 77,7 Карцинома РС Штами експериментальних пухлин* 15,1 80,9 86,4 Карцинома РА +2,9 0 +12,9 0 Лейкемія L1210* * +25,0 +19,5 +31,0 Лейкемія Р388** Таблиця 40511 Фіг. 40511 4 40511 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 5