Похідні 1,2,4-триазол-3-тіону, що мають антирадикальну, антиоксидантну дію та антигіпоксичну активність на моделі гіпоксії замкненого простору
Номер патенту: 50811
Опубліковано: 25.06.2010
Автори: Книш Євгеній Григорович, Парченко Володимир Володимирович, Панасенко Олександр Іванович, Каплаушенко Андрій Григорович, Сикін Валентин Олександрович, Белєнічев Ігор Федорович, Щербина Роман Олександрович, Павлов Сергій Васильович
Формула / Реферат
Похідні 1,2,4-триазол-3-тіону, а саме:
- амоній 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат:
,
- 2-гідроксіетаноламоній 2-(5-(3-піридил)-4-аміно-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат:
,
- піперидиній 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат:
,
- 2-метил-N'-(2-(5-метил-1,2,4-триазол-3-ілтіо)етиліден)фуран-3-карбогідразид:
,
які мають антирадикальну, антиоксидантну дію, а також антигіпоксичну активність в умовах замкненого простору.
Текст
Похідні 1,2,4-триазол-3-тіону, а саме: - амоній 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетат: N N H2 O NH4+ N S C C N O 2 3 цього є розвиток патологічного стану, визначуваний у результаті одним з головних чинників регуляції метаболізму - взаємовідношенням антиоксидантних і прооксидантных механізмів, іншими словами, здатністю АСО захистити клітку від вільних радикалів і пероксидів. Багаточисельними є дані, що стосуються вивчення механізмів перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) і його ролі в нормальному і патологічному функціонуванні кліток, проте, окрім головного субстрата переокислення - молекул біомембран і ядерного хроматину - АФК викликають і окислювальну модифікацію білків (ОМБ), або як її ще називають - перекисне окислення білків (ПОБ). В процесі окислювальної модифікації білка утворюються різні стабільні метаболіти амінокислот. Фармакокорекція екстремальних киснедефіцитних станів, що супроводжуються підвищеною кількістю вільних радикалів, активних форм оксигену і недостатністю кисню в тканинах, особливо головного мозку, є дуже актуальною проблемою для працівників підприємств вугільної, металургійної, хімічної та інших галузей. Таким чином, необхідність в створенні нових оригінальних лікарських засобів антирадикальної, антиоксидантної і антигіпоксичної дії є дуже гострою і потребує подальших досліджень. Близькими за хімічною структурою та дією, що досягається є: морфоліній 2-(5-(4-піридил)-4-(2метоксифеніл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетат, що має антигіпоксичну з термопротекторними властивостями і антиоксидантну активності (Пат. України № 37922; Заявл. 28.07.2008; Опубл. 10.12.2008, Бюл. № 23. і Пат. України № 37927; Заявл. 28.07.2008; Опубл. 10.12.2008, Бюл. № 23.); ряд 5-R-4-R11,2,4-тріазол-3-тіонів, що мають антиоксидантну активність (Пат. 43771 Україна, C07D 231/00, C07D 249/00, А61К 31/41. / Каплаушенко А.Г., Лук'янчук В.Д., Чадова Л.В. - заявка № u2009 04104; Заявл. 27.04.2009; Опубл. 25.08.2009; Бюл. № 16); морфоліній 3-(4-піридил)-1,2,4-триазоліл-5-тіооцтової кислоти, що виявляє антигіпоксичну, церебропротекторну, та кардіопротекторну активність (Пат. 20388 Україна, C07D 249/12 А61К 31/41. / Книш Є.Г., Панасенко О.І. - № 97052457; Заявл. 28.05.97; Опубл. 15.04.02; Бюл. № 4). Прототипом є вітчизняний препарат «тіотріазолін», що містить як діючу речовину морфоліній 2-(5-(4-піридил)-4-(2-метоксифеніл)-1,2,4-тріазол3-ілтіо)ацетат, високу антиоксидантну і антигіпоксичну активність якого ідентифіковано раніше (Болгов Д.М. Лечебно-профилактическая эффективность тиотриазолина при синдроме длительного раздавливания: Автореф. дис. ... канд. мед. наук Одеса, 2002. - 21 с.). Суттєві ознаки прототипу і винаходу, що збігаються є такі: - наявність в структурі нітрогенвмісних гетероциклів (1,2,4-тріазолові цикли); - молекули даних речовин містять карбонільні групи і атоми сульфуру; - в структурі прототипу і винаходу присутні групи C=N. Але прототип у порівнянні з корисною моделлю має менші показники антирадикальної, антиок 50811 4 сидантної дії та антигіпоксичної активності в умовах замкненого простору. В основу корисної моделі поставлено задачу створення нових біологічно активних сполук, що можуть знайти своє застосування як оригінальні лікарські засоби в ряду 1,2,4-тріазолу і проявляють в комплексі антирадикальну, антиоксидантну дію і антигіпоксичну активність в умовах замкненого простору. Поставлена задача вирішується тим, що: - амоній 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-тріазол3-ілтіо)ацетат містить при N4-aтомi ядра 1,2,4тріазолу метильний замісник, в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу 4-піридиновий радикал, двовалентний атом сірки, карбоксильну групу, з'єднану іонним зв'язком з іоном амонію, і має формулу: N N H2 O NH4+ N S C C N O CH3 (сполука 1) 2-гідроксиетанол амоній 2-(5-(3-піридил)-4аміно-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетат містить при N4aтомi ядра 1,2,4-тріазолу аміногрупу, в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу 3-піридиновий радикал, двовалентний атом сірки, карбоксильну групу, з'єднану іонним зв'язком з іоном етаноламонію і має формулу: N N N H2 S N C O H3N C + H2 H2 C C OH O CH3 (сполука 2) - піперідиній 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетат містить при N4-атомі ядра 1,2,4-тріазолу 3-толільний замісник, в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу 2-фурановий радикал, двовалентний атом сірки, карбоксильну групу, з'єднану іонним зв'язком з іоном піперідинію, і має формулу: H + 2 N N N H2 O N S C C N O CH3 (сполука 3) 2-метил-N’-(2-(5-метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)етиліден)фуран-3-карбо-гідразид містить в положенні 5 ядра 1,2,4-тріазолу метильний радикал, двовалентний атом сірки, карбонільну групу, а також фурановий радикал і має формулу: N NH H2 H O H3 C N (сполука 4) S C C N N H H3 C O 5 Така структура сполук забезпечує: високі показники антирадикальної, антиоксидантної дії, антигіпоксичної активності в умовах замкненого простору та нескладні методики синтезу. Амоній 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-тріазол3-ілтіо)ацетат (сполуку 1), що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2-(5-(4-піридил)-4-метил1,2,4-тріазлол-3-ілтіоацетатної кислоти з 25 % розчином амоніаку. Приклад 1. У відповідну колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 0,01 моль 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетатної кислоти, 20 мл 25 % амоніаку. Отриманий розчин випаровують. Вихід амоній 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетату складає 96 % в розрахунку на 2-(5-(4-піридил)-4-метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетатну кислоту. Жовта кристалічна речовина з Тпл 220°С (із суміші вода:ацетон 1:1) розчинна у воді, мало розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С 44,97, Н 4,85, N 26,20, S 12,03. C10H13N5O2S1. Вирахувано, % С 44,94, Н 4,87, N 26,22, S 11,99. В ІЧ-спектрі сполуки 1, що заявляється, наявні смуги поглинання -C=N-груп при 1610 см-1, C-Sгрупи при 710 см-1, -С-О-С-групи при 1270 см-1, О=С-групи при 1685 см-1, а також наявні смуги поглинання, характерні для солей карбонових кислот, що містять СОС- групу при 1420 см-1. 2-гідроксиетаноламоній-(5-(3-піридил)-4-аміно1,2,4-тріазол-3-ілтіо) ацетат (сполуку 2), що заявляється отримують шляхом взаємодії 2-(5-(3піридил)-4-аміно-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетату з етаноламіном в середовищі етанолу: Приклад 2. У відповідну колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 0,01 моль 2-(5-(3-піридил)-4-аміно-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетатної кислоти, 30 мл етанолу і 0,61 г моноетаноламонію. Залишають на 24 години, осад відфільтровують. Вихід 2-гідроксиетаноламоній 2(5-(3-піридил)-4-аміно-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетату складає 58 % в розрахунку на 2-(5-(3-піридил)-4аміно-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетатну кислоту. Біла кристалічна речовина з Тпл. 150-152°С (із етанолу) розчинна у воді, мало розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С 42,32, Н 5,14, N 26,84, S 10,33. C11H16N6O3S. Вирахувано, % С 42,30, Н 5,16, N 26,91, S 10,30. В ІЧ-спектрі сполуки 2, що заявляється, наявні смуги поглинання -C=N-груп при 1590 см-1, C-Sгрупи при 730 см-1, -С-О-С-групи при 1260 см-1, О=С-групи при 1675 см-1, а також наявні смуги поглинання, характерні для солей карбонових кислот, що містять СОС- групу при 1420 см-1. Піперідиній 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетат (сполуку 3), що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2-(5-(фуран-2-іл)-4(3-толіл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетатної кислоти з піперідином в спиртовому середовищі при температурі 78°С. 50811 6 Приклад 3. У відповідну колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 0,01 моль 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетатної кислоти, 50 мл 96 % етанолу. Суміш при постійному перемішуванні нагрівають до кипіння, протягом 5 хвилин додають 0,01 моль піперідину, нагрівають 30 хвилин (до повного розчинення), охолоджують і залишають на 24 години. Осад відфільтровують і висушують на повітрі. Вихід піперідиній 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)1,2,4-тріазол-3-ілтіо)ацетату складає 92 % в розрахунку на 2-(5-(фуран-2-іл)-4-(3-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетатну кислоту. Біла кристалічна речовина з Тпл. 191-193°С (із н-пропанолу) розчинна у воді, мало розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С 59,79, Н 6,02, N 13,95, S 7,99. C20H24N4O3S. Вирахувано, % С 59,98, Н 6,04, N 13,99, S 8,01. В ІЧ-спектрі сполуки 3, що заявляється наявні смуги поглинання -C=N-груп при 1590 см-1, C-Sгрупи при 690 см-1, -С-О-С-групи при 1230 см-1, О=С-групи при 1950 см-1, а також наявні смуги поглинання, характерні для солей карбонових кислот, що містять СОС- групу при 1420 см-1. 2-метил-N’-(2-(5-метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)етил іден)фуран-3-карбогідразид (сполуку 3), що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2(5-метил-1,2,4-тріазлол-3-ілтіо)ацетальдегіду з гідразидом піридин-4-карбонової кислоти в спиртовому середовищі при наявності каталітичної кількості кислоти хлоридної і температурі 78°С. Приклад 4. У відповідну колбу, обладнану змішувачем, холодильником, термометром завантажують 0,01 моль 2-(5-метил-1,2,4-тріазлол-3ілтіо)ацетальдегіду, 50 мл 96 % етанолу, 1 мл 32 % хлоридної кислоти і 0,01 моль гідразиду піридин-4-карбонової кислоти. Суміш при постійному перемішуванні нагрівають на паровій бані, протягом 2 годин, охолоджують, осад відфільтровують і висушують на повітрі. Вихід 2-метил-N'-(2-(5-метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)етиліден)фуран-3-карбогідразиду складає 34 % в розрахунку на 2-(5-метил-1,2,4-тріазлол-3ілтіо)ацетальдегід. Біла кристалічна речовина з Тпл. 280°С (із ацетатної кислоти), мало розчинна у воді розчинна в органічних розчинниках. Знайдено, % С 47,34, Н 4,73, S 11,42. C11H13N5O2S. Вирахувано, % С 47,30, Н 4,69, S 11,48. В ІЧ-спектрах сполуки 4, що заявляється наявні смуги поглинання «Амід І» і «Амід II» при 1680 і при 1520 см-1, C-S-групи при 665 см-1,СН3-групи при 2870 см-1, а також наявні смуги поглинання, характерні для фуранового циклу при 3140 см-1. Антиоксидантну і антирадикальну активність речовин, що заявляються оцінювали за окислювальною модифікацією і фрагментації білка (за концентрацією окиснених білкових структур - альдегідфенілгідразонів АФГ і кетонфенілгідразонів КФГ) в тканинах і в плазмі крові згідно «Методів оцінки антиоксидантних властивостей фізіологічноактивних сполук при ініціюванні вільно радикаль 7 50811 них процесів у дослідах in vitro» (Методичні рекомендації. Державний фармакологічний центр МОЗ України Київ - 2002). У плазмі крові і в гомогенатах тканин визначають спонтанної і метал-каталізуючої модифікації білка. Даний метод оцінки заснований на реакції взаємодії окиснених амінокислотних залишків з 2,4-динітрофенилгідразином (2,4-ДНФГ) з утворенням 2,4-динітрофенілгидразонів. Для ініціації окислювальної модифікації білка використовували середовище Фентона (0,1 М фосфатний буфер рН 7,4, 1 мМ Fe2+, 0,3 мМ Н2О2). Для окислювальної модифікації білка проводили попереднє їх осадження за допомогою 20 % розчину кислоти трихлорацетатної (КТХА). Для роботи брали два зразки біопроби: для спонтанної і для індукованої для металу реєстрації окислювальної модифікації і міри фрагментації білка. Реактиви: 2,8 % розчин FeSO4; 4 % розчин Н2О2; 2,2 % розчин 2,4-ДНФГ; 2 М НСl; етилацетат; 8 М сечовина. Хід визначення. До 0,1 мл плазми 0,1 мл 2,8 % розчину FeSO4 і 0,1 мл 4 % розчину Н2О2 (метал-індукованої окислювальної модифікації білка і 0,2 мл фізіологічного розчину спонтанної модифікації) інкубують 2 години при t°-37°. Потім додають 0,1 мл 20 % (КТХА) і центрифугують 30 хвилин при 3000 об/хв. Надосадну рідину обережно кількісно переносять в чисту пробірку і розбавляють в 10 разів фізіологічним розчином. У надосадній рідині визначають фрагментації білка в УФ-області спектру при довжинах хвилі 254, 272 і 280 нм. До осаду 1 мл 2,2 % розчину 2,4-ДНФГ на 2 М НС1 і центрифугують при 3000 об/хв. Надосадну рідину зливають, а осад промивають 3 мл етилацетату. Потім осад висушують і до нього 3,0 мл 8 М сечовини і 1 мл 2 М НСl. Проби спектрофотометрують при довжині хвилі 270 нм (аліфатичні аль 8 дегіди основних амінокислотних залишків - АФГ) і 363 нм (карбонільні групи основних амінокислотних залишків - КФГ). окислювальної модифікації білка розраховували за формулою: C=E/Cзаг. білка де: Е - екстінция дослідної проби Сзаг. білка - концентрація білка в плазмі крові або гомогенаті тканини Показники неферментативного ініціювання вільнорадикальго окислення (ВРО), ммоль/л та показники оптичної густини розчинів при різних довжинах хвилі наведені в табл. 1. За експериментальну модель для дослідження антигіпоксичної дії в умовах замкненого простору речовин, що заявляються, слугував патологічний процес, розвиток якого має місце у експериментальних тварин, при впливі гіпоксичної гіпоксії за умов замкненого простору. Такий екстремальний киснево -дефіцитний стан моделювали за допомогою спеціальної камери простійного об'єму, в яку поміщали піддослідних тварин (Иванов К.П. Кислородное голодание и температура тела. Л.: «Наука», 1988. - 80 с). Сполуки, що заявляються, вводили внутрішньочеревно одноразово групі з восьми лінійних щурів обох статей вагою 190-210 г. у вигляді водних розчинів в дозі 100 мг/кг за 50 хвилин до початку моделювання досліджуваного патологічного стану відповідно до методичних вказівок Державного фармакологічного центру МОЗ України. Контрольній групі тварин вводили еквівалентний об'єм фізіологічного розчину натрій хлориду. Як еталон порівняння використано «тіотріазолн» 1 % розчин для ін'єкцій, що вводили в раніш встановленій оптимальній дозі 100 мг/кг. Про величину противогіпоксичної активності судили по подовженню часу до першого апное у тварин. Результати наведені в табл. 2. Таблиця 1 Показники антирадикальної і антиоксидантної активностей нових похідних 1,2,4-тріазол-3-тіону, що заявляються Сполуки інтактні контроль тіотріазолін Піперідиній2-(5-(фуран-2іл)-4-(3-толіл)-1,2,4тріазол-3-ілтіо)ацетат 2-гідроксиетаноламоній(5-(3-піридил)-4-аміно1,2,4-тріазол-3-ілтіо) ацетат Амоній 2-(5-(4-піридил)-4метил-1,2,4-тріазол-3ілтіо)ацетат 2-метил-N'-(2-(5-метил1,2,4-тріазол-3ілтіо)етиліден)фуран-3карбогідразид Неферментативне ініціювання ВРО МДА, ммоль/л 10-3 IF 0,03±0,002 0,71±0,003 0,44±0,003 Інгібування супероксидрадикалу, оптична густина 10-3 10-5 0,52±0,006 0,35±0,004 Окислювальна модифікація білку АФГ КФГ АФГ КФГ -3 10 10-3 10-5 10-5 0,16±0,005 0,1±0,002 2,8±0,007 2,3±0,009 1,21±0,004 1,0±0,002 0,28±0,007* 0,34±0,004* 0,29±0,005** 0,32±0,003* 1,22±0,005 * 1,0±0,006* 1,31±0,006 * 1,2±0,004* 0,4±0,005* 0,52±0,003* 0,4±0,002* 0,46±0,006* 1,26±0,003 * 1,2±0,004* 1,32±0,005 * 1,28±0,00 7* 0,27±0,003** 0,29±0,004* 0,25±0,004** 0,31±0,005** 0,95±0,004 ** 0,99±0,005 ** 1,08±0,005 ** 1,8±0,003* 0,37±0,004* 0,47±0,004* 0,38±0,003* 0,42±0,005* 1,15±0,003 * 1,09±0,004 * 1,24±0,006 * 1,21±0,00 6* Примітки: * - р
ДивитисяДодаткова інформація
Назва патенту англійською1,2,4-triazole-3-thione derivatives exhibiting antiradical, antioxidant action and antihypoxic activity on enclosed space hypoxia model
Автори англійськоюBelienichev Ihor Fedorovych, Kaplaushenko Andrii Hryhorovych, Parchenko Volodymyr Volodymyrovych, Panasenko Oleksandr Ivanovych, Pavlov Serhii Vasyliovych, Knysh Yevhenii Hryhorovych, Sykin Valentyn Oleksandrovych, Scherbyna Roman Oleksandrovych
Назва патенту російськоюПроизводные 1,2,4-триазол-3-тиона, которые имеют антирадикальное, антиоксидантное действие и антигипоксическую активность на модели гипоксии замкнутого пространства
Автори російськоюБеленичев Игор Федорович, Каплаушенко Андрей Григорьевич, Парченко Владимир Владимирович, Панасенко Александр Иванович, Павлов Сергей Васильевич, Книш Евгений Григорьевич, Сыкин Валентин Олександрович, Щербина Роман Александрович
МПК / Мітки
МПК: C07D 231/08, A61K 31/41, C07D 231/00, C07D 249/12
Мітки: моделі, простору, замкненого, дію, мають, похідні, гіпоксії, антиоксидантну, антирадикальну, антигіпоксичну, активність, 1,2,4-триазол-3-тіону
Код посилання
<a href="https://ua.patents.su/5-50811-pokhidni-124-triazol-3-tionu-shho-mayut-antiradikalnu-antioksidantnu-diyu-ta-antigipoksichnu-aktivnist-na-modeli-gipoksi-zamknenogo-prostoru.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Похідні 1,2,4-триазол-3-тіону, що мають антирадикальну, антиоксидантну дію та антигіпоксичну активність на моделі гіпоксії замкненого простору</a>
Попередній патент: N-[3-метил-7-b-гідрокси-g-(4′-хлорофенокси)пропілксантиніл-8]аланін, який виявляє гіпохолестеринемічну дію
Наступний патент: Пристрій для формування гармонійних коливань із фіксованим фазовим зсувом у діапазоні частот
Випадковий патент: Пристрій для ультразвукового розпилення рідини