Спосіб лікування чи попередження станів, викликаних грампозитивними бактеріями

1. Спосіб лікування чи попередження стану, викликаного грампозитивними бактеріями, вибраного з групи: сепсис, септичний шок, синдром системної запальної відповіді (ССЗВ), ССЗВ з дисфункцією чи недостатністю органа, недостатністю органа та дисфункцією органа, який полягає у призначенні внутрішньовенно суб'єкту, який цього потребує, ефективної кількості композиції, вільної від білків та пептидів, яка містить достатню кількість жовчної кислоти або солі жовчної кислоти та фосфатидилхолін для лікування чи попередження стану у вказаного суб'єкта. 2. Спосіб за п. 1, де вказаною жовчною кислотою або сіллю жовчної кислоти є холанова кислота чи сіль холанової кислоти. 3. Спосіб за п. 1, де вказана композиція крім того містить нейтральний ліпід. C2 2 UA 1 3 89545 4 вання чи профілактики станів, обумовлених ГрамMatz et al., J. Biol. Chem. 257(8): 4535-4540 позитивними бактеріями, як-то, але не обмежую(1982) описує міцелу фосфатидилхоліну з аполічись цим, сепсис, септичний шок, синдром систепопротеїдом АІ. Описані різноманітні співвідномної запальної відповіді (ССЗВ), ССЗВ з дисфункшення двох компонентів, та запропоновано застоцією та/чи декомпенсацією органа, недостатність совувати описаний спосіб для створення інших органа та порушення його функції. міцел. Також запропоновано застосовувати міцеНормальна сироватка містить певну кількість ли, як ферментний субстрат чи як модель для мочасточок ліпопротеїдів, які характеризуються за лекули ЛПВЩ. Даний документ не розглядає заїхньою щільністю у хіломікронах: ліпопротеїди дустосування міцел для виведення холестерину, та же низької щільності (ЛПДНЩ), ліпопротеїди низьне дає пропозицій щодо діагностики та терапії. кої щільності (ЛПНЩ) та ліпопротеїди високої Williams et al., Biochem. & Biophys. Acta щільності (ЛПВЩ). Вони утворені вільним та есте875:183-194 (1986) показують, що ліпосоми фосрифікованим холестерином, тригліцеридами, та фоліпідів введені в плазму, збирають апопротеїни фосфоліпідами, деякими іншими другорядними та холестерин. Розкрито ліпосоми, які поглинають ліпідними складовими та протеїнами. ЛПДНЩ апопротеїн in vivo, так само як холестерин, і було транспортують енергію, у формі тригліцеридів, до припущено, що поглинання холестерину підвищеклітин організму для зберігання та застосовуванне у ліпосомах фосфоліпідів, які провзаємодіяли ня. Коли тригліцериди доставлені, ЛПДНЩ оберта поглинули апопротеїни. таються на ЛПНЩ. ЛПНЩ транспортують холестеWilliams et al., Persp. Biol. & Med. 27(3): 417рин та інші жиророзчинні речовини до клітин 431 (1984) розглядають ліпосоми лецитину для організму, в той час як ЛПВЩ транспортують надвиведення холестерину. Документ підсумовує лишкові чи непридатні ліпіди до печінки для виверанні роботи показуючи, що ліпосоми, які містять дення. В нормі, ці ліпопротеїди знаходяться у певапопротеїни, виводять холестерин з клітин in vitro ному співвідношенні, забезпечуючи належну ефективніше, ніж ліпосоми, які їх не містять. Вони доставку та виведення жиророзчинних речовин. не обговорюють застосовування in vivo апопротеїПри патології низький рівень ЛПВЩ може як нів, що містять ліпосоми чи міцели, та радять бути спричинити певні хворобливі стани, так і обумовиобережними під час роботи in vivo з ліпосомами. ти вторинні ускладнення інших. Патенти США №№ 5,506,218; 5,344,822; У нормальних умовах, природній ЛПВЩ є тве5,614,507; 5,587,366; 5,674,855 та всі, які об'єднані рдою речовиною з поверхнею, вкритою одним шаза посиланням, описують як композиції, що містять ром фосфоліпідів, який оточує гідрофобне ядро. фосфоліпід, як-то фосфатидилхолін, природний Аполіпопротеїни А-І та А-ІІ приєднані до поверхні ліпід, як-то тригліцерид, жовчну кислоту чи сіль за допомогою гідрофобного кінця їх альфа спіражовчної кислоти, як-то холанова кислота чи сіль льного домену. У їх незрілій чи новосекретованій холанової кислоти, як-то натрій холат, призначені формі, частка має дископодібну форму та приєддля попередження чи полегшення Грам-негативної нує вільний холестерин у свій подвійний шар. Хобактеріальної інфекції, як-то інфекція S. лестерин естерифікується під впливом лецитинtyphlmurium, шляхом інактивації ліпіду А, прикріпхолестерин ацилтрансферази (ЛХАТ) та леного до молекули ліпополісахариду. переміщується у центр диска. Рух складного естеУ патенті США №5,128,318, розкриття якого ру холестерину до центру є результатом обмежеуведено як посилання, описано, що відтворені ності простору та розчинності у подвійному шарі. часточки, які містять аполіпопротеїн, пов'язаний з Частинка ЛПВЩ "накачується" до сфероподібної ЛПВЩ та ліпід, який здатнийзв'язувати ендотокформи наскільки можливо та більше холестерину син для його інактивації, можуть застосовуватись в естерифікується та просувається до центру. Скларолі ефективного матеріалу для зменшення токсидний естер холестерину та інші водонерозчинні чного впливу токсину. ліпіди, які збираються у "накачане ядро" ЛПВЩ, Тепер, цілком несподівано, було виявлено, що згодом очищуються печінкою. фосфоліпіди можуть бути застосовувані самостійAnantharamaiah, in Segrest et al., Meth. но чи у поєднанні з додатковими речовинами, якEnzymol. 128:627-647 (1986) зображує Ланцюги то нейтральні ліпіди, солі жовчної кислоти, тощо, пептидів, які формують "спіральні кільця", як реяк ефективні засоби для полегшення та/чи попезультат взаємодії амінокислот у білку. Такі спіраредження Грам-позитивної інфекції. Особливу пельні кільця являють собою неполярну грань та ревагу віддають застосовуванню фосфатидилхополярну грань у їх конфігураціях. Взагалі, посиліну ("ФХ" далі) самостійно чи у поєднанні з лання показує, що пептиди можуть переміщувати іншими фосфоліпідами, як-то сфінголіпіди, у комапопротеїни у цих часточках. позиціях, які по суті вільні від пептидів та білків, якJonas et al, Meth. Enzym. 128A: 553-582 (1986) то аполіпопротеїни чи пептиди, що походять з них. створили зчислений ряд відтворених часточок, Нейтральні ліпіди, як-то моно-, ди-, та тригліцерисхожих на ЛПВЩ. Методика включає відокремленди можуть бути поєднані з фосфоліпідами, поки ня та деліпідацію ЛПВЩ за допомогою стандартзагальна кількість нейтральних ліпідів знаходиться них методик (Hatch et al., Adv. Lip. Res. 6: 1-68 нижче певного масового відсотка, коли композиції (1968); Scanu et al., Anal. Biochem. 44:576-588 застосовують у формі внутрішньовенної ін'єкції. (1971)) для отримання апо-ЛПВЩ-протеїнів. АпопПри застосуванні у інших формах призначення, якротеїни фракціонують та відновлюють за допомото, наприклад, крапельна внутрішньовенна інфугою фосфоліпіду та холестерину (чи без нього), зія, масова частка не є настільки критичною але застосовуючи очисний діаліз. бажаною. Жовчні кислоти чи солі жовчної кислоти, як-то холати, наприклад, натрій холат, можуть бу 5 89545 6 ти поєднаними з цими іншими двома компонентаТаблиця 2 ми для вироблення особливо ефективних композицій. Контроль з гліцерином Особливо бажаним втіленням даного винаходу є ті композиції, де нейтральним ліпідом є триLTA TNF гліцерид, складний естер холестерину чи суміш нг/мл пг/мл складного естеру холестерину та тригліцеридів. 0.001 0 Тут продемонстровано ефективність жовчних 0.010 0 кислот та солей жовчних кислот, як-то холати, у 0.100 44.19 лікуванні, профілактиці та/чи попередженні Грам0.300 8.081 позитивних інфекцій та/чи нейтральних ліпідів, як1.000 66.41 то фосфатидилхолін та/чи тригліцерид. Дані жовч3.000 58.07 ні кислоти можна застосовувати самостійно, чи у 10.00 39.4 поєднанні з одним чи більше та фосфоліпідами 100.0 290.7 та/чи нейтральними ліпідами, як-то фосфатидилхолін та/чи тригліцерид. Представлені композиції Вищезазначені приклади детально описують можуть бути застосовувані у лікуванні чи профілавинахід, який охоплює, згідно з одним аспектом, ктиці станів, що включають, але не обмежуються спосіб лікування чи попередження сепсису, септицим, описані раніше, найкраще застосовуючи такі, чного шоку, синдрому системної запальної відпояк описані раніше, навіть ще краще у формі емувіді (ССЗВ), ССЗВ з дисфункцією/недостатністю льсії. органу, недостатностями органів та дисфункцією Винахід описаний більш детально, як нижчеоргану, викликаних грам-позитивними бактеріями. наведено: Приклади також показують, що призначення У наступних експериментах було визначено, члену родини жовчних кислот чи солей жовчних що емульсія, яка містить фосфатидилхолін, трикислот, як-то холанова кислота чи сіль холанової гліцерид та натрій холат, була корисною для очикислоти, можуть також бути застосовуваними у щення крові від токсинів Грам-позитивної інфекції. поєднанні з фосфоліпідом та нейтральним ліпіБула виготовлена емульсія, що містить розчин дом, чи із фосфоліпідом поодинці, наприклад, для фосфатидилхоліну (далі "ФХ"), у 99.7мг/мл, 18мМ профілактики, полегшення, попередження чи лікунатрій холату та тригліцеридів (ТГ) які складають вання інфекцій грам-позитивними бактеріями. Та7.5% маси всіх ліпідів у емульсії у водному розчині ким чином, композиції, вільні від пептиду та білку, гліцерину (2.6%). які містять одне чи обидва з жовчної кислоти/солі Для контролю було застосовувано 2.6% розжовчної кислоти та фосфоліпід, можуть бути зачин гліцерину. стосовуваними для лікування таких інфекцій. ХоЕмульсія та контроль були розведені 1:10 та ланові кислоти є описаними, наприклад, Hofinann, приєднані до тест-розчинів обробленої ЕДТА суHepatology 4(5): 4S-14S (1984), що уведено як поцільної крові при 50% розведеннях, до яких були силання. Увагу спрямовано зокрема на сторінку доданими розчини з різними розведеннями 5мг/мл 5S, FIGS. 1 та 2, що уведено як посилання, покаліпотейхолевої кислоти ("LTA") отриманої з В. зуючи структури, характеристичні для холанових subtilis. кислот. Зразки змішали та витримали протягом 4 гоСуб'єкт, якого лікують є переважно людиною, дин при 37°С, після чого вони були погашеними на але практика винаходу є підхожою також у ветерильоді. Зразки були центрифугованими нарному контексті. (1000об/хвил, 2000хg), та фактор некрозу пухлин "Полегшення" як застосовувано тут стосується ("TNF") у плазмі було виміряно, застосовуючи сталікування для полегшення важкості інфекції, виндартну, комерційно доступну ELISA. кликаної будь-яким з різних токсинів, вироблених Результати, які є представленими у Таблиця 1 грам-позитивними бактеріями (наприклад, В. (емульсія), та Таблиця 2 (контроль), показують subtilis). Профілактику можна виконувати застосуефективність емульсій у видаленні токсину з крові. ванням засобу у момент," коли суб'єкт є у ситуації, де відбувається піддавання дії грам-позитивних Таблиця 1 бактерій чи у момент, коли це може відбутися Звичайно, це відбувається при хірургічному втручанні. Емульсія Таким чином, суб'єкт у момент хірургічної операції може мати активний інгредієнт вже прийнятим LTA TNF перед операцією. нг/мл пг/мл Ефективна кількість фосфоліпіду та комбінації 0.001 0 жовчної кислоти, необхідна для лікування суб'єкта, 0.010 0 може варіювати. Взагалі, загальна доза приблизно 0.100 -0 від 200мг до приблизно 800мг фосфоліпіду на кі0.300 0 лограм маси тіла суб'єкта є переважною, хоча кі1.000 4.531 лькість може падати або зростати, залежно від 3.000 0 суворості інфекції чи ступеню ризику у контексті 10.00 0 профілактики. Для жовчних кислот та солей, як-то 100.0 15.15 холанова кислоти та її солі, є застосовуваною доза приблизно від 10мг до приблизно 300мг/кг маси 7 89545 8 тіла, більш переважно від 15мг до приблизно ліпіди (наприклад, складний естер холестерину чи 275мг/кг маси тіла. неестерифікований холестерин), вуглеводневі олії Бажано застосовувати жовчні кислоти/солі жояк-то сквален, антіоксиданти як-то вітамін Е, але вчної кислоти та фосфоліпіди у композиціях які вони не є обов'язковими. Безумовно, більше, ніж також містять нейтральні ліпіди, але це не є неободин фосфоліпід та/чи більше, ніж один нейтральхідним, оскільки емульсії фосфоліпідів, вільні від ний ліпід можуть бути застосовуваними у будь-якій нейтральніих ліпідів, є також розглянутими. Бажатакій композиції. Коли комбінації нейтрального ність комбінованого призначення фосфоліпідів з ліпіду та фосфоліпіду є застосовуваними, нейтранейтральними ліпідами є результатом того, що льний ліпід повинен бути присутнім у кількості нейтральні ліпіди та фосфоліпіди асоціюються у приблизно від 3% приблизно до 50мас.% відносно часточки, які схожі на ліпопротеїни, але відрізнязагальної кількості ліпіду у композиції. ються від них тим, що вони не містять білкових чи Форма, у якій композиції можуть бути застосопептидних компонентів, які є, безумовно, завжди вуваними, можуть варіювати, з особливо переважприсутні у ліпопротеїнах. ними болюсними чи іншими внутрішньовенними Особливо бажаними формами для лікування є формами. Коли є застосовуваною болюсна форті, де фосфоліпідом є фосфатидилхолін, як-то ма, а композиція містить, наприклад, тригліцерид, фосфатидилхолін яєчного жовтка, фосфатидилдеяка увага повинна бути приділеною дозуванню. холін на основі сої чи сфінголіпід. Для жовчної Досить добре відомо, що тригліцериди є токсичкислоти/солі жовчної кислоти, переважними є хоними при застосуванні у такій дуже великій кільколанова кислота та/чи її солі, як-то натрій холат, сті. Звичайний спеціаліст, однак, Може легко сфонатрій дезоксихолат, та натрій хенодезоксихолат. рмувати композиції так, щоб ризик отруєння Що стосується нейтральних ліпідів, переважним є тригліцеридом ε зниженим чи виключеним. Взагазастосування складного естеру холестерину чи лі, коли є застосовуваною болюсна форма, компотригліцериду, але інші нейтральні ліпіди, як-то зиції повинні містити не більше, ніж приблизно сквален чи ін. вуглеводневі олії, ди- та моно80мас.% тригліцериду чи іншого нейтрального гліцериди та антіоксиданти як-то вітамін Е, можуть ліпіду, переважно не більше, ніж 70мас.%. Найтакож бути застосовуваними. краще, композиції повинні містити не більше, ніж Форма, у якій композиції можуть бути застосоприблизно 50мас.%, нейтрального ліпіду, коли є вуваними, можуть варіювати, з особливо переважзастосовуваним болюс. ними болюсними чи іншими внутрішньовенними Коли, однак, є застосовуваною неболюсна формами Коли є застосовуваною болюсна форма, форма, як-то інші внутрішньовенні форми, ризик а композиція містить, наприклад, тригліцерид, деінтоксикації є зниженим. Однак, визначені вище яка увага повинна бути приділеною дозуванню. межі є переважними для внутрішньовенних чи інДосить добре відомо, що тригліцериди є токсичших форм застосування, хоча треба розуміти, що ними при застосуванні у такій дуже великій кільковони не є обов'язковими. Переважно, є застосовусті Звичайний спеціаліст, однак, може легко сфорваною доза приблизно до 200мг/кг маси тіла жовчмувати композиції так, щоб ризик отруєння ної кислоти/солі жовчної кислоти або фосфоліпід. тригліцеридом є зниженим чи виключеним. ВзагаЗастосування приблизно до 800мг/кг є також реалі, коли є застосовуваною болюсна форма, компольним. Дози є загальними та повинні, однак, варізиції повинні! містити не більше, ніж приблизно ювати залежно від суб'єкту та форми застосуван80мас.% тригліцериду чи іншого нейтрального ня. ліпіду, переважно не більше, ніж 70мас.%. НайЯк показано вище, вільні від білків та пептидів краще, композиції повинні містити не більше, ніж композиції потребують, щоб принаймні один фосприблизно 50мас.%, нейтрального ліпіду, коли є фоліпід чи жовчна кислота/сіль жовчної кислоти застосовуваним болюс. були присутніми Для фосфоліпідів переважним є Коли, однак, є застосовуваною неболюсна те, щоб принаймні один нейтральний ліпід, як-то форма, як-то інші внутрішньовенні форми, ризик тригліцерид, дигліцерид чи моногліцерид був приінтоксикації є зниженим. Однак, визначені вище сутнім. Композиції можуть містити додаткові матемежі є переважними для внутрішньовенних чи інріали як-то стероли (наприклад, холестерин, беташих форм застосування, хоча треба розуміти, що ситостерол), естерифіковані чи неестерифіковані вони не є обов'язковими. Переважно, є застосовуліпіди (наприклад, складний естер холестерину чи ваною доза приблизно до 200мг/кг маси тіла жовчнеестерифікований холестерин), вуглеводневі олії ної кислоти/солі жовчної кислоти або фосфоліпід. як-то сквален, антіоксиданти як-то вітамін Е, але Застосування приблизно до 800мг/кг є також реавони не є обов'язковими. Безумовно, більше, ніж льним. Дози є загальними та повинні, однак, варіодин фосфоліпід та/чи більше, ніж один нейтральювати залежно від суб'єкту та форми застосуванний ліпід можуть бути застосовуваними у будь-якій ня. такій композиції. Коли комбінації нейтрального Як показано вище, вільні від білків та пептидів ліпіду та фосфоліпіду є застосовуваними, нейтракомпозиції потребують, щоб принаймні один фосльний ліпід повинен бути присутнім у кількості фоліпід чи жовчна кислота/сіль жовчної кислоти приблизно від 3% приблизно до 50мас.% відносно були присутніми Для фосфоліпідів переважним є загальної кількості ліпіду у композиції. те, щоб принаймні один нейтральний ліпід, як-то У випадку жовчної кислоти/солі жовчної кислотригліцерид, дигліцерид чи моногліцерид був прити їх можна застосовувати окремо чи у комбінації з сутнім. Композиції можуть містити додаткові матефосфоліпідом, нейтральним ліпідом чи обома. ріали як-то стероли (наприклад, холестерин, бетаСтосовно цих додаткових матеріалів (наприклад, ситостерол), естерифіковані чи неестерифіковані фосфоліпідів та нейтральних ліпідів) переважними 9 89545 10 є ті, що вищенаведено та обговорено раніше. Нехованими раніше, масові частки відносно усієї обов'язкові додаткові інгредієнти охоплюють перекомпозиції безумовно зменшуються, але співвідраховані раніше. ношення інгредієнтів повинні залишатися тими ж. Також винахід охоплює застосування компоСлід пам'ятати, що такі І терапевтичні композиції зицій у лікуванні певних станів, асоційованих з завжди є по суті вільними від білків та пептидів. інфікуванням бактеріями, як-то станів, що обговоУ випадку композицій, що не містять жовчної рено раніше. Ці композиції містять переважно прикислоти/солі жовчної кислоти, такі вільні від білків близно від 5% приблизно до 30мас.% жовчної киста пептидів композиції містять переважно принайлоти/солі жовчної кислоти, приблизно від 3% мні приблизно від 3% до 50мас.% нейтрального приблизно до 50мас.% нейтрального ліпіду та ліпіду, а все інше складає фосфоліпід. Переважно приблизно від 10% приблизно до 95мас.% фосфонейтральним ліпідом є тригліцерид, але він може ліпіду та є вільними від білків та пептидів. Перебути будь-яким з додаткових нейтральних ліпідів, важно ці композиції мають форму емульсій Особобговорених вище. Також, фосфоліпідом є переливо переважними є композиції, що містять важно фосфатидилхолін. приблизно від 10% до 15мас.% жовчної кислоКомпозиції винаходу є ефективними у лікуванти/солі жовчної кислоти, приблизно від 5% прині чи попередженні станів, обумовлених грамблизно до 10мас.% нейтрального ліпіду, а все інпозитивними бактеріями, охоплюючи, але без обше складає фосфоліпід. При цьому вираз "вільні меження, такі стани, як сепсис, синдром септичновід білків та пептидів" стосується композицій, які го шоку, синдром системної запальної реакції чи не містять помітної кількості білків та пептидів чи "ССЗВ", ССЗВ з дисфункцією чи недостатністю їх обох, для лікування та попередження станів, якоргану, недостатністю органу, та/чи дисфункцією то тих, що перераховані раніше, хоча залишкові органу викликаною грам-позитивними бактеріями. недостатні їх кількості можуть бути присутніми. Інші аспекти винаходу повинні бути зрозуміСлід зауважити, що масові частки стосуються лими спеціалісту та не потребують тут повтореня. композицій, які складаються з трьох компонентів. Треба розуміти, що опис та приклади є ілюстКоли трьох-компонентну систему комбінують, наративними, але без обмеження заявленого винаприклад, з носіями, наповнювачами чи необов'язходу, та що інші втілення у дусі та рамках винахоковими додатковими інгредієнтами, як-то перераду повинні бути відомі самим спеціалістом. Комп’ютерна верстка О. Гапоненко Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601