Стабілізовані склади, які містять антитіла до рецептора інтерлейкіну 6 (il-6r)

Реферат: Винахід стосується cтабільного фармацевтичного складу, що містить: антитіло людини, яке специфічно зв'язується з рецептором інтерлейкіну 6 людини (hIL-6R), в концентрації приблизно від 5 до 200 мг/мл і містить варіабельну область важкого ланцюга з амінокислотною послідовністю SEQ ID NО:18 (НCVR) і варіабельну область легкого ланцюга (LCVR) з амінокислотною послідовністю SEQ ID NО:26; гістидин в концентрації від 25 до 100 мМ; аргінін в концентрації від 25 до 50 мМ; сахарозу в кількості від 2 до 10 % мас./об.; і полісорбат 20 у кількості від 0,1 до 0,2 % мас./об. UA 107211 C2 (12) UA 107211 C2 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Галузь винаходу Даний винахід стосується галузі складів терапевтичних антитіл. Більш конкретно, даний винахід стосується галузі фармацевтичних складів, що містять антитіло людини, яке специфічно зв'язується з рецептором інтерлейкіну 6 людини. Список послідовностей Одночасно з даним описом поданий текстовий файл зі списком послідовностей відповідний стандарту WIPO ST.25 (1998). Зміст текстового файлу включений в цей документ як посилання. Текстовий файл, який містить список послідовностей, називається "IL6RAbFormulationSeqList", створений 7 січня 2010 року і містить 37387 байт. Попередній рівень техніки Терапевтичні макромолекули (наприклад, антитіла) необхідно формулювати таким способом, який не тільки робить молекули прийнятними для введення пацієнту, але також підтримує їх стабільність при зберіганні. Наприклад, якщо розчин сформульований не належним чином, терапевтичні антитіла в рідкому розчині схильні до руйнування, агрегації і/або небажаних хімічних модифікацій. Стабільність антитіла в рідкому складі залежить не тільки від характеру ексципієнтів, що використовуються в складі, але також від кількості і відношення ексципієнтів один відносно одного. Крім того, крім стабільності, при отриманні рідкого складу антитіла в розрахунок необхідно приймати інші чинники. Приклади таких додаткових чинників включають в'язкість розчину і концентрацію антитіла, яку можна забезпечити при даному складі. Таким чином, при формулюванні терапевтичного антитіла, для отримання складу, який залишається стабільним, містить достатню концентрацію антитіла і має відповідну в'язкість, а також інші властивості, які забезпечують зручне введення складу пацієнтам, необхідно прикладати великі зусилля. Антитіла до рецептору інтерлейкіну 6 людини (hIL-6R) являють собою один з прикладів терапевтично значної макромолекули, якій необхідний прийнятний склад. Антитіла до hIL-6R клінічно придатні для лікування і/або запобігання таким захворюванням, як ревматоїдний артрит, анкілозуючий спондиліт і інші стани. Ілюстративні антитіла до IL-6R в числі інших описані в US 7582298; 6410691; 5817790; 5795695 і 6670373. Особливо важливим антитілом до hIL-6R з великим терапевтичним потенціалом є антитіло, позначене в US 7582298 як VQ8F11-21 (що також позначається в цьому документі як "mAb1"). Хоча антитіла до hIL-6R відомі, в даній галузі залишається необхідність в нових фармацевтичних складах, що містять антитіла до hIL-6R, які в достатній мірі стабільні, а також підходять для введення пацієнтам. Коротка суть винаходу Даний винахід задовольняє вказаній вище необхідності, надаючи фармацевтичні склади, що містять антитіло людини, яке специфічно зв'язується з рецептором інтерлейкіну 6 людини (hIL6R). Склади за винаходом в доповнення до антитіла до hIL-6R можуть містити ексципієнти. Наприклад, в певних варіантах здійснення склад може містити (i) антитіло людини, що специфічно зв'язується з hIL-6R; (ii) щонайменше одну амінокислоту; і (iii) щонайменше один вуглевод. Амінокислота може являти собою, наприклад, гістидин і/або аргінін. Вуглевод може являти собою цукор, такий як, наприклад, сахароза, глюкоза, маніт, лактоза або трегалоза. По певних варіантах здійснення даного винаходу склад додатково містить неіонну поверхнево-активну речовину. Неіонна поверхнево-активна речовина може являти собою, наприклад, полісорбат 20, полісорбат 80, поліоксіетиленсорбітанмоноолеат, поліетиленгліколь і т. д. Антитіло, що міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом, може являти собою будь-яке антитіло, яке специфічно зв'язується з hIL-6R. Ілюстративні антитіла, які можуть міститися в складах за винаходом, являють собою антитіла, що містять варіабельну область важкого ланцюга (HCVR) і варіабельну область легкого ланцюга (LCVR), де HCVR містить область важкого ланцюга, яка визначає комплементарність (HCDR) 1, з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:20, HCDR2 з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:22 і HCDR3 з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:24; і де LCVR містить область легкого ланцюга, яка визначає комплементарність (LCDR) 1, з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:28, LCDR2 з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:30 і LCDR3 з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:32. У певних варіантах здійснення антитіла, що містяться в складах за даним винаходом, являють собою антитіла, які містять HCVR з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:18 і LCVR з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:26. Склади антитіл за даним винаходом можуть міститися в будь-якому прийнятному контейнері, придатному для зберігання фармацевтичних складів. Приклади таких прийнятних 1 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 контейнерів включають, наприклад, скляні або пластикові флакони, шприци і картриджі. Контейнер може бути прозорим або світлонепроникним (наприклад, жовтого кольору). По певних аспектах даного винаходу фармацевтичні склади залишаються відносно стабільними після зберігання протягом декількох діб, місяців або років при певній температурі. Наприклад, в певних ілюстративних варіантах здійснення даного винаходу зберігається високий процентний вміст антитіла (наприклад, 90 %, 95 %, 96 % або більше) в його нативній формі після зберігання щонайменше протягом 3, 6, 9 або більше місяців. Процентний вміст нативної форми антитіла можна вимірювати, наприклад, за допомогою ЕВЕРХ або будь-яким іншим відомим в даній галузі способом. Температура зберігання, при якій підтримується стабільність антитіла, може становити, наприклад, -80ºC, -40ºC, -20ºC, 0ºC, 5ºC, 25ºC, 45ºC або більше. Інші варіанти здійснення даного винаходу стануть очевидними при розгляді наступного далі докладного опису. Короткий опис креслень На фіг. 1 наданий процентний вміст нативного mAb1, що залишається після різних періодів часу зберігання при -20ºC (зафарбовані трикутники), -30ºC (зафарбовані квадрати) і -80ºC (зафарбовані ромби) по вимірюваннях за допомогою ЕВЕРХ. На фіг. 2 наданий процентний вміст кислих молекул mAb1, після різних періодів часу зберігання при -20ºC (зафарбовані трикутники), -30ºC (зафарбовані квадрати) і -80ºC (зафарбовані ромби) по вимірюваннях за допомогою КОВЕРХ. На фіг. 3 наданий процентний вміст нативного mAb1, що залишається в різних складах з мінімальною кількістю ексципієнтів після різних періодів часу зберігання при -30ºC по вимірюваннях за допомогою ЕВЕРХ. Зафарбовані ромби представляють склад 1 (80 мг/мл mAb1, 0,13 % полісорбат 20, 6 % сахароза, 10 мМ гістидин); зафарбовані квадрати представляють склад 2 (80 мг/мл mAb1, 0,13 % полісорбат 20, 10 мМ гістидин); зафарбовані трикутники представляють склад 3 (80 мг/мл mAb, 1 % сахароза, 10 мМ гістидин); незафарбовані квадрати представляють склад 4 (80 мг/мл mAb1, 2 % сахароза, 10 мМ гістидин); зірочки представляють склад 5 (80 мг/мл mAb1, 4 % сахароза, 10 мМ гістидин); зафарбовані кола представляють склад 6 (80 мг/мл mAb1, 6 % сахароза, 10 мМ гістидин); хрести представляють склад 7 (80 мг/мл антитіло, 10 мМ гістидин); і незафарбовані кола представляють склад 8 (65 мг/мл антитіло, 10 мМ гістидин). Всі склади приведені в таблиці 6 (див. приклад 2, нижче). На фіг. 4 наданий процентний вміст нативного mAb1, що залишається в різних складах з мінімальною кількістю ексципієнтів після різних періодів часу зберігання при -20ºC по вимірюваннях за допомогою ЕВЕРХ. Зафарбовані ромби представляють склад 1 (80 мг/мл mAb1, 0,13 % полісорбат 20, 6 % сахароза, 10 мМ гістидин); зафарбовані квадрати представляють склад 2 (80 мг/мл mAb1, 0,13 % полісорбат 20, 10 мМ гістидин); зафарбовані трикутники представляють склад 3 (80 мг/мл mAb, 1 % сахароза, 10 мМ гістидин); незафарбовані квадрати представляють склад 4 (80 мг/мл mAb1, 2 % сахароза, 10 мМ гістидин); зірочки представляють склад 5 (80 мг/мл mAb1, 4 % сахароза, 10 мМ гістидин); зафарбовані кола представляють склад 6 (80 мг/мл mAb1, 6 % сахароза, 10 мМ гістидин); хрести представляють склад 7 (80 мг/мл антитіло, 10 мМ гістидин); і незафарбовані кола представляють склад 8 (65 мг/мл антитіло, 10 мМ гістидин). Всі склади приведені в таблиці 6 (див. приклад 2, нижче). Докладний опис Перед тим, як буде описаний даний винахід, потрібно розуміти, що винахід не обмежений конкретними описаними способами і експериментальними умовами, оскільки ці способи і умови можуть варіювати. Також потрібно розуміти, що термінологія, що використовується в цьому документі, призначена тільки для мети опису конкретних варіантів здійснення, і не призначена для обмеження, оскільки об'єм даного винаходу обмежений тільки прикладеною формулою винаходу. Якщо не визначено інакше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються в цьому документі, мають те ж значення, як звичайно розуміє фахівець в галузі, до якої належить даний винахід. Як застосовують в цьому документі, термін "приблизно", коли його використовують по відношенню до конкретного вказаного числового значення, означає, що значення може варіювати від вказаного значення не більш ніж на 1 %. Наприклад, як застосовують в цьому документі, вираз "приблизно 100" включає 99 і 101 і всі значення між ними (наприклад, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 і т. д.). Хоч в практичному здійсненні або тестуванні даного винаходу можна використовувати будьякі способи і матеріали, схожі зі способами і матеріалами, що описуються в цьому документі, 2 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 або еквівалентні ним, в цьому документі описані переважні способи і матеріали. Всі вказані в цьому документі публікації включені в цей документ як посилання для опису в повному об'ємі. Фармацевтичні склади Як застосовують в цьому документі, вираз "фармацевтичний склад" означає комбінацію щонайменше одного активного інгредієнта (наприклад, низькомолекулярної сполуки, макромолекули, сполуки і т. д., здатних виявляти біологічну дію у людини або у тварини, що не є людиною) і щонайменше одного неактивного інгредієнта, який, при комбінації з активним інгредієнтом і/або одним або декількома додатковими неактивними інгредієнтами, підходить для терапевтичного введення людині або тварині, що не є людиною. Як застосовують в цьому документі, якщо конкретно не указано інакше, термін "склад" означає "фармацевтичний склад". Даний винахід стосується фармацевтичних складів, що містять щонайменше один терапевтичний поліпептид. По певних варіантах здійснення даного винаходу терапевтичний поліпептид являє собою антитіло, що специфічно зв'язується з рецептором інтерлейкіну 6 людини (hIL-6R), або його антигензв'язувальний фрагмент. Більш конкретно, даний винахід стосується фармацевтичних складів, що містять: (i) антитіло людини, що специфічно зв'язується з hIL-6R; (ii) гістидин; і (iii) вуглевод. У склади за даним винаходом можна включати додаткові компоненти, такі як, наприклад, щонайменше одна неіонна поверхнево-активна речовина і щонайменше одна додаткова амінокислота. Конкретні ілюстративні компоненти і склади, що включаються в даний винахід, детально описані нижче. У певних варіантах здійснення фармацевтичні склади за даним винаходом можуть являти собою текучі склади. Як застосовують в цьому документі, вираз "текучий склад" означає суміш щонайменше двох компонентів, яка при температурі приблизно від 5ºC до приблизно 45ºC знаходиться переважно в текучому стані. Текучі склади в числі інших включають рідкі склади. Текучі склади можуть мати низьку, помірну і високу в'язкість залежно від частинок, які їх складають. Антитіла, які специфічно зв'язуються з hIL-6R Фармацевтичні склади за даним винаходом можуть містити антитіло людини або його антигензв'язувальний фрагмент, що специфічно зв'язується з hIL-6R. Як застосовують в цьому документі, термін "hIL-6R" означає рецептор цитокіну людини, що специфічно зв'язується з інтерлейкіном 6 (IL-6). У певних варіантах здійснення антитіло, що міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом, специфічно зв'язується з позаклітинним доменом hIL-6R. Позаклітинний домен hIL6R представлений амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:74. Як застосовують в цьому документі термін "антитіло" в основному стосується молекул імуноглобулінів, що містять чотири поліпептидні ланцюги, два важкі (Н) ланцюги і два легкі (L) ланцюги, зв'язані дисульфідними зв'язками, а також їх мультимерів (наприклад, IgM); однак визначення терміну "антитіло також включені молекули імуноглобулінів, що складаються тільки з важких ланцюгів (тобто, за відсутністю легких ланцюгів). Кожний важкий ланцюг містить варіабельну область важкого ланцюга (що скорочується в цьому документі як HCVR або VH) і константну область важкого ланцюга. Константна область важкого ланцюга містить три домени, CH1, CH2 і CH3. Кожний легкий ланцюг містить варіабельну область легкого ланцюга (що скорочується в цьому документі як LCVR або VL) і константну область легкого ланцюга. Константна область легкого ланцюга містить одну домен (CL1). Області VH і VL можна додатково поділяти на області гіперваріабельності, які називаються областями, які визначають комплементарність (CDR), що чергуються з областями, які є більш консервативними, які називаються каркасними областями (FR). Кожна VH і VL складається з трьох CDR і чотирьох FR, розташованих від N-кінця до С-кінця в наступному порядку: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Як застосовують в цьому документі, якщо конкретно не указано інакше, термін "антитіло", потрібно розуміти як такий, що охоплює молекули цілих антитіл, а також їх антигензв'язувальні фрагменти. Як застосовують в цьому документі терміни "антигензв'язувальна частина" або "антигензв'язувальний фрагмент" антитіла (або просто "частина антитіла" або "фрагмент антитіла"), стосуються одного або декільком фрагментів антитіла, що зберігають здатність до специфічного зв'язування з hIL-6R. Як застосовують в цьому документі, "виділене антитіло", призначене для позначення антитіла, яке по суті не містить інших антитіл з відмінною антигенною специфічністю (наприклад, виділене антитіло, яке специфічно зв'язується з hIL-6R по суті не містить антитіл, що специфічно зв'язуються з антигенами, відмінними від hIL-6R). Термін "специфічно зв'язується" або т. п., означає, що антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент формують з антигеном комплекс, який відносно стабільний в 3 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 фізіологічних умовах. Специфічне зв'язування можна характеризувати константою дисоціації -6 щонайменше приблизно 1×10 M або більше. Способи визначення специфічного зв'язування двох молекул добре відомі в даній галузі і включають, наприклад, рівноважний діаліз, поверхневий плазмонний резонанс і т. п. Однак виділене антитіло, що специфічно зв'язується з hIL-6R, може мати перехресну реактивність з іншими антигенами, такими як молекули IL-6R інших видів. У контексті даного винаходу поліспецифічні (наприклад, біспецифічні) антитіла, що зв'язуються з hIL-6R, а також з одним або декількома додатковими антигенами вважають такими, що "специфічно зв'язуються" з hIL-6R. Крім того, виділене антитіло по суті може не містити інших клітинного матеріалу і/або хімічних речовин. Ілюстративні антитіла до hIL-6R, які можна включати в фармацевтичні склади за даним винаходом, вказані в US 7582298, опис якого повністю включений як посилання. По певних варіантах здійснення даного винаходу антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять область важкого ланцюга, яка визначає комплементарність (HCDR) 1, з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:4, 20, 36 і 52; HCDR2 з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:6, 22, 38 і 54; і HCDR3 з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:2, 18, 34 і 50. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять домени HCDR1-HCDR2HCDR3, відповідно, вибрані з групи, яка складається з: (i) SEQ ID NO:4-6-8; (ii) SEQ ID NO:20-2224; (iii) SEQ ID NO:36-38-40; і (iv) SEQ ID NO:52-54-56. По певних варіантах здійснення даного винаходу антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять область легкого ланцюга, яка визначає комплементарність (LCDR) 1, з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:12, 28, 44 і 60; LCDR2 з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:14, 30, 46 і 62; і LCDR3 з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:16, 32, 48 і 64. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять домени LCDR1-LCDR2LCDR3, відповідно, вибрані з групи, яка складається з: (i) SEQ ID NO:12-14-16; (ii) SEQ ID NO:2830-32; (iii) SEQ ID NO:44-46-48; і (iv) SEQ ID NO:60-62-64. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять домени HCDR1-HCDR2-HCDR3/LCDR1-LCDR2-LCDR3, відповідно, вибрані з групи, яка складається з: (i) SEQ ID NO:4-6-8/SEQ ID NO:12-14-16; (ii) SEQ ID NO:20-22-24/SEQ ID NO:2830-32; (iii) SEQ ID NO:36-38-40/SEQ ID NO:44-46-48; і (iv) SEQ ID NO:52-54-56/SEQ ID NO:60-6264. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять варіабельну область важкого ланцюга (HCVR) з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:2, 18, 34 і 50. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять варіабельну область легкого ланцюга (LCVR) з амінокислотною послідовністю, вибраною з групи, яка складається з SEQ ID NO:10, 26, 42 і 58. У певних варіантах здійснення антитіло до hIL-6R або його антигензв'язувальний фрагмент містять пару амінокислотних послідовностей HCVR/LCVR, вибрану з групи, яка складається з SEQ ID NO:2/10; 18/26; 34/42 і 50/58. Необмежувальне ілюстративне антитіло, що використовується в прикладах в цьому документі, позначають як "mAb1". Це антитіло в US 7582298 також позначене як VQ8F11-21. mAb1 (VQ8F11-21) містить пару амінокислотних послідовностей HCVR/LCVR з SEQ ID NO:18/26 і домени HCDR1-HCDR2-HCDR3/LCDR1-LCDR2-LCDR3, представлені SEQ ID NO:20-22-24/SEQ ID NO:28-30-32. Кількість антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, яка міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом може варіювати залежно від конкретних бажаних властивостей складів, а також конкретних умов і цілей використання, для яких призначені склади. У певних варіантах здійснення фармацевтичні склади можуть містити приблизно від 1 мг/мл до приблизно 500 мг/мл антитіла; приблизно від 5 мг/мл до приблизно 400 мг/мл антитіла; приблизно від 5 мг/мл до приблизно 200 мг/мл антитіла; приблизно від 25 мг/мл до приблизно 180 мг/мл антитіла; приблизно від 25 мг/мл до приблизно 150 мг/мл антитіла; або приблизно від 50 мг/мл до приблизно 180 мг/мл антитіла. Наприклад, склади за даним винаходом можуть містити приблизно 1 мг/мл; приблизно 2 мг/мл; приблизно 5 мг/мл; приблизно 10 мг/мл; приблизно 15 мг/мл; приблизно 20 мг/мл; приблизно 25 мг/мл; приблизно 30 мг/мл; приблизно 35 мг/мл; приблизно 40 мг/мл; приблизно 45 мг/мл; приблизно 50 мг/мл; приблизно 55 мг/мл; приблизно 60 мг/мл; приблизно 65 мг/мл; приблизно 70 мг/мл; приблизно 75 мг/мл; приблизно 80 мг/мл; приблизно 85 мг/мл; приблизно 86 мг/мл; приблизно 87 мг/мл; приблизно 88 мг/мл; 4 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 приблизно 89 мг/мл; приблизно 90 мг/мл; приблизно 95 мг/мл; приблизно 100 мг/мл; приблизно 105 мг/мл; приблизно 110 мг/мл; приблизно 115 мг/мл; приблизно 120 мг/мл; приблизно 125 мг/мл; приблизно 130 мг/мл; приблизно 131 мг/мл; приблизно 132 мг/мл; приблизно 133 мг/мл; приблизно 134 мг/мл; приблизно 135 мг/мл; приблизно 140 мг/мл; приблизно 145 мг/мл; приблизно 150 мг/мл; приблизно 155 мг/мл; приблизно 160 мг/мл; приблизно 165 мг/мл; приблизно 170 мг/мл; приблизно 175 мг/мл; приблизно 180 мг/мл; приблизно 185 мг/мл; приблизно 190 мг/мл; приблизно 195 мг/мл; або приблизно 200 мг/мл антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, які специфічно зв'язуються з hIL-6R. Ексципієнти і pH Фармацевтичні склади за даним винаходом містять один або декілька ексципієнтів. Як застосовують в цьому документі, термін "ексципієнт" означає будь-який нетерапевтичний засіб, що додається до складу для забезпечення бажаної консистенції, в'язкості або стабілізуючої дії. У певних варіантах здійснення фармацевтичний склад за винаходом містить щонайменше одну амінокислоту. Ілюстративні амінокислоти, придатні для використання в складах за даним винаходом, в числі інших включають аргінін і/або гістидин. Кількість амінокислоти, яка міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом може варіювати залежно від конкретних бажаних властивостей складів, а також конкретних умов і цілей використання, для яких призначені склади. У певних варіантах здійснення склади можуть містити приблизно від 1 мМ до приблизно 200 мМ амінокислоти; приблизно від 2 мМ до приблизно 100 мМ амінокислоти; приблизно від 5 мМ до приблизно 50 мМ амінокислоти; або приблизно від 10 мМ до приблизно 25 мМ амінокислоти. Наприклад, фармацевтичні склади за даним винаходом можуть містити приблизно 1 мМ; приблизно 1,5 мМ; приблизно 2 мМ; приблизно 2,5 мМ; приблизно 3 мМ; приблизно 3,5 мМ; приблизно 4 мМ; приблизно 4,5 мМ; приблизно 5 мМ; приблизно 5,5 мМ; приблизно 6 мМ; приблизно 6,5 мМ; приблизно 7 мМ; приблизно 7,5 мМ; приблизно 8 мМ; приблизно 8,5 мМ; приблизно 9 мМ; приблизно 9,5 мМ; приблизно 10 мМ; приблизно 10,5 мМ; приблизно 11 мМ; приблизно 11,5 мМ; приблизно 12 мМ; приблизно 12,5 мМ; приблизно 13 мМ; приблизно 13,5 мМ; приблизно 14 мМ; приблизно 14,5 мМ; приблизно 15 мМ; приблизно 15,5 мМ; 16 мМ; приблизно 16,5 мМ; приблизно 17 мМ; приблизно 17,5 мМ; приблизно 18 мМ; приблизно 18,5 мМ; приблизно 19 мМ; приблизно 19,5 мМ; приблизно 20 мМ; приблизно 20,5 мМ; приблизно 21 мМ; приблизно 21,5 мМ; приблизно 22 мМ; приблизно 22,5 мМ; приблизно 23 мМ; приблизно 23,5 мМ; приблизно 24 мМ; приблизно 24,5 мМ; приблизно 25 мМ; приблизно 25,5 мМ; приблизно 26 мМ; приблизно 26,5 мМ; приблизно 27 мМ; приблизно 27,5 мМ; приблизно 28 мМ; приблизно 28,5 мМ; приблизно 29 мМ; приблизно 29,5 мМ; приблизно 30 мМ; приблизно 35 мМ; приблизно 40 мМ; приблизно 45 мМ; або приблизно 50 мМ амінокислоти (наприклад, гістидину і/або аргініну). Фармацевтичні склади за даним винаходом також можуть містити один або декілька вуглеводів, наприклад, один або декілька цукрів. Цукор може являти собою відновлювальний цукор або невідновлювальний цукор. "Відновлювальні цукри" включають, наприклад, цукри з кетоновою або альдегідною групою і містять і реактивну напівацетальну групу, що дозволяє діяти цукру як відновник. Конкретні приклади відновлювальних цукрів включають фруктозу, глюкозу, гліцеральдегід, лактозу, арабінозу, манозу, ксилозу, рибозу, рамнозу, галактозу і мальтозу. Невідновлювальні цукри можуть містити аномерний атом вуглецю, який являє собою ацеталь і по суті не реагує з амінокислотами або поліпептидами з ініціацією реакції Майяра. Конкретні приклади невідновлювальних цукрів включають сахарозу, трегалозу, сорбозу, сукралозу, меліцитозу і рафінозу. Цукрові кислоти включають, наприклад, цукристі кислоти, глюконаті інші полігідроксицукри і їх солі. Кількість цукру, яка міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом, варіює залежно від конкретних умов і цілей використання, для яких призначені склади. У певних варіантах здійснення склади можуть містити приблизно від 0,1 % до приблизно 20 % цукру; приблизно від 0,5 % до приблизно 20 % цукру; приблизно від 1 % до приблизно 20 % цукру; приблизно від 2 % до приблизно 15 % цукру; приблизно від 3 % до приблизно 10 % цукру; приблизно від 4 % до приблизно 10 % цукру або приблизно від 5 % до приблизно 10 % цукор. Наприклад, фармацевтичні склади за даним винаходом можуть містити приблизно 0,5 %; приблизно 1,0 %; приблизно 1,5 %; приблизно 2,0 %; приблизно 2,5 %; приблизно 3,0 %; приблизно 3,5 %; приблизно 4,0 %; приблизно 4,5 %; приблизно 5,0 %; приблизно 5,5 %; приблизно 6,0 %; 6,5 %; приблизно 7,0 %; приблизно 7,5 %; приблизно 8,0 %; приблизно 8,5 %; приблизно 9,0 %; приблизно 9,5 %; приблизно 10,0 %; приблизно 10,5 %; приблизно 11,0 %; приблизно 11,5 %; приблизно 12,0 %; приблизно 12,5 %; приблизно 13,0 %; приблизно 13,5 %; приблизно 14,0 %; приблизно 14,5 %; приблизно 15,0 %; приблизно 15,5 %; приблизно 16,0 %; 5 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 16,5 %; приблизно 17,0 %; приблизно 17,5 %; приблизно 18,0 %; приблизно 18,5 %; приблизно 19,0 %; приблизно 19,5 %; або приблизно 20,0 % цукру (наприклад, сахарози). Фармацевтичні склади за даним винаходом також можуть містити одну або декілька поверхнево-активних речовин. Як застосовують в цьому документі, термін "поверхнево-активна речовина" означає речовину, що знижує поверхневе натягнення рідини, в якій вона розчинена і/або знижує міжфазне натягнення між маслом і водою. Поверхнево-активні речовини можуть бути іонними або неіонними. Ілюстративні неіонні поверхнево-активні речовини, які можна включати в склади за даним винаходом, включають, наприклад, алкілполі(етиленоксид), алкілполіглюкозиди (наприклад, октилглюкозид і децилмальтозид), жирні спирти, такі як цетиловий спирт і олеїловий спирт, кокамід-MEA, кокамід-DEA і кокамід-ТЕА. Конкретні неіонні поверхнево-активні речовини, які можна включати в склади за даним винаходом, включають, наприклад, полісорбати, такі як полісорбат 20, полісорбат 28, полісорбат 40, полісорбат 60, полісорбат 65, полісорбат 80, полісорбат 81 і полісорбат 85; полоксамери, такі як полоксамер 188, полоксамер 407; поліетиленполіпропіленгліколь або поліетиленгліколь (PEG). Полісорбат 20 також відомий як TWEEN 20, сорбітанмонолаурат і поліоксіетиленсорбітанмонолаурат. Кількість поверхнево-активної речовини, що міститься в фармацевтичних складах за даним винаходом, може варіювати залежно від конкретних бажаних властивостей складу, а також конкретних умов і цілей використання, для яких призначені склади. У певних варіантах здійснення склади можуть містити приблизно від 0,05 % до приблизно 5 % поверхнево-активних речовини або приблизно від 0,1 % до приблизно 0,2 % поверхнево-активних речовини. Наприклад, склади за даним винаходом можуть містити приблизно 0,05 %; приблизно 0,06 %; приблизно 0,07 %; приблизно 0,08 %; приблизно 0,09 %; приблизно 0,10 %; приблизно 0,11 %; приблизно 0,12 %; приблизно 0,13 %; приблизно 0,14 %; приблизно 0,15 %; приблизно 0,16 %; приблизно 0,17 %; приблизно 0,18 %; приблизно 0,19 %; приблизно 0,20 %; приблизно 0,21 %; приблизно 0,22 %; приблизно 0,23 %; приблизно 0,24 %; приблизно 0,25 %; приблизно 0,26 %; приблизно 0,27 %; приблизно 0,28 %; приблизно 0,29 %; або приблизно 0,30 % поверхневоактивних речовини (наприклад, полісорбату 20). pH фармацевтичних складів за даним винаходом може складати приблизно від 5,0 до приблизно 8,0. Наприклад, pH складів за даним винаходом може становити приблизно 5,0; приблизно 5,2; приблизно 5,4; приблизно 5,6; приблизно 5,8; приблизно 6,0; приблизно 6,2; приблизно 6,4; приблизно 6,6; приблизно 6,8; приблизно 7,0; приблизно 7,2; приблизно 7,4; приблизно 7,6; приблизно 7,8; або приблизно 8,0. Ілюстративні склади По одному з аспектів даного винаходу фармацевтичний склад містить: (i) антитіло людини, що специфічно зв'язується з hIL-6R (наприклад, mAb1); (ii) амінокислоту (наприклад, гістидин); і (iii) цукор (наприклад, сахарозу). Конкретні необмежувальні ілюстративні варіанти здійснення, що охоплюються цим аспектом винаходу, приведені в таблиці 1. Таблиця 1 Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин і сахарозу mAb1 (мг/мл) 25 Гістидин 10 (мМ) Сахароза (%) 1 40 45 50 50 100 150 25 50 100 150 25 50 100 150 25 50 100 150 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 1 1 1 2 2 2 2 4 4 4 4 6 6 6 6 По іншому аспекту даного винаходу фармацевтичний склад містить: (i) антитіло людини, що специфічно зв'язується з hIL-6R (наприклад, mAb1); (ii) амінокислоту (наприклад, гістидин); (iii) цукор (наприклад, сахарозу); і (iv) поверхнево-активну речовину (наприклад, полісорбат 20). Конкретні необмежувальні ілюстративні варіанти здійснення, що охоплюються цим аспектом винаходу, приведені в таблицях 2A і 2B. По іншому аспекту даного винаходу фармацевтичний склад містить: (i) антитіло людини, що специфічно зв'язується з hIL-6R (наприклад, mAb1); (ii) першу амінокислоту (наприклад, гістидин); (iii) цукор (наприклад, сахарозу); (iv) поверхнево-активну речовину (наприклад, полісорбат 20); і (v) другу амінокислоту (наприклад, аргінін). Конкретні необмежувальні ілюстративні варіанти здійснення, що охоплюються цим аспектом винаходу, приведені в таблицях 3A, 3B, 3C, 3D, 3E і 3F. 6 UA 107211 C2 Таблиця 2A Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу і полісорбат 20 mAb1 (мг/мл) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) 25 10 2 0,1 50 10 2 0,1 100 10 2 0,1 150 10 2 0,1 25 10 5 0,1 50 10 5 0,1 100 10 5 0,1 150 10 5 0,1 25 10 10 0,1 50 10 10 0,1 100 10 10 0,1 150 10 10 0,1 Таблиця 2B Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу і полісорбат 20 mAb1 (мг/мл) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) 25 10 2 0,2 50 10 2 0,2 100 10 2 0,2 150 10 2 0,2 25 10 5 0,2 50 10 5 0,2 100 10 5 0,2 150 10 5 0,2 25 10 10 0,2 50 10 10 0,2 100 10 10 0,2 150 10 10 0,2 Таблиця 3A Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мМ) 25 10 2 0,2 10 50 10 2 0,2 10 100 10 2 0,2 10 150 10 2 0,2 10 25 10 5 0,2 10 50 10 5 0,2 10 100 10 5 0,2 10 150 10 5 0,2 10 25 10 10 0,2 10 50 10 10 0,2 10 100 10 10 0,2 10 150 10 10 0,2 10 Таблиця 3B Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мМ) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мм) 25 10 2 0,2 25 50 10 2 0,2 25 100 10 2 0,2 25 150 10 2 0,2 25 25 10 5 0,2 25 50 10 5 0,2 25 100 10 5 0,2 25 150 10 5 0,2 25 25 10 10 0,2 25 50 10 10 0,2 25 100 10 10 0,2 25 150 10 10 0,2 25 5 Таблиця 3C Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мм) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мм) 25 25 2 0,2 10 50 25 2 0,2 10 100 25 2 0,2 10 150 25 2 0,2 10 25 25 5 0,2 10 50 25 5 0,2 10 100 25 5 0,2 10 150 25 5 0,2 10 25 25 10 0,2 10 50 25 10 0,2 10 100 25 10 0,2 10 150 25 10 0,2 10 Таблиця 3D Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мм) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мм) 25 25 2 0,2 25 50 25 2 0,2 25 100 25 2 0,2 25 150 25 2 0,2 25 7 25 25 5 0,2 25 50 25 5 0,2 25 100 25 5 0,2 25 150 25 5 0,2 25 25 25 10 0,2 25 50 25 10 0,2 25 100 25 10 0,2 25 150 25 10 0,2 25 UA 107211 C2 Таблиця 3E Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мм) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мм) 25 25 2 0,2 50 50 25 2 0,2 50 100 25 2 0,2 50 150 25 2 0,2 50 25 25 5 0,2 50 50 25 5 0,2 50 100 25 5 0,2 50 150 25 5 0,2 50 25 25 10 0,2 50 50 25 10 0,2 50 100 25 10 0,2 50 150 25 10 0,2 50 Таблиця 3F Ілюстративні фармацевтичні склади, що містять mAb1, гістидин, сахарозу, полісорбат 20 і аргінін mAb1 (мг/мл) Гістидин (мм) Сахароза (%) Полісорбат 20 (%) Аргінін (мм) 5 10 15 20 25 30 35 40 160 25 2 0,2 50 170 25 2 0,2 50 175 25 2 0,2 50 180 25 2 0,2 50 160 25 5 0,2 50 170 25 5 0,2 50 175 25 5 0,2 50 180 25 5 0,2 50 160 25 10 0,2 50 170 25 10 0,2 50 175 25 10 0,2 50 180 25 10 0,2 50 Додаткові необмежувальні приклади фармацевтичних складів, що охоплюються даним винаходом, приведені в інших розділах цього документа, що включають демонстраційні приклади, надані нижче. Стабільність і в'язкість фармацевтичних складів Як правило, фармацевтичні склади за даним винаходом демонструють високі рівні стабільності. Як застосовують в цьому документі термін "стабільний" по відношенню до фармацевтичних складів означає, що антитіла в фармацевтичних складах зберігають прийнятний ступінь структури, і/або функції, і/або біологічної активності після зберігання протягом певного періоду часу. Склад може бути стабільним навіть незважаючи на те, що антитіло, що міститься в ньому, не зберігає 100 % своєї структури, і/або функції, і/або біологічної активності після зберігання протягом певного періоду часу. У певних умовах як "стабільне" можна розглядати збереження приблизно 80 %, приблизно 85 %, приблизно 90 %, приблизно 95 %, приблизно 96 %, приблизно 97 %, приблизно 98 % або приблизно 99 % структури, і/або функції, і/або біологічної активності антитіла після зберігання протягом певного періоду часу. Стабільність, в числі іншого, можна вимірювати, визначаючи процентний вміст нативного антитіла, що залишається в складі після зберігання протягом певного періоду часу при даній температурі. Процентний вміст нативного антитіла, в числі іншого, можна визначати за допомогою ексклюзійної хроматографії (наприклад, ексклюзійної високоефективної рідинної хроматографії [ЕВЕРХ]). "Прийнятний ступінь стабільності", як цю фразу застосовують в цьому документі, означає, що в складі після зберігання протягом певного періоду часу при даній температурі можна детектувати щонайменше 90 % нативної форми антитіла. У певних варіантах здійснення в складі після зберігання протягом певного періоду часу при даній температурі можна детектувати щонайменше приблизно 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % або 100 % нативної форми антитіла. Певний період часу після якого вимірюють стабільність може складати щонайменше 1 місяць, щонайменше 2 місяці, щонайменше 3 місяці, щонайменше 4 місяці, щонайменше 5 місяців, щонайменше 6 місяців, щонайменше 7 місяців, щонайменше 8 місяців, щонайменше 9 місяців, щонайменше 10 місяців, щонайменше 11 місяців, щонайменше 12 місяців, щонайменше 18 місяців, щонайменше 24 місяці або більше. Температура, при якій можна зберігати фармацевтичний склад при оцінці стабільності, може являти собою будь-яку температуру приблизно від -80ºC до приблизно 45ºC, наприклад, зберігання приблизно при -30ºC, приблизно при -20ºC, приблизно при 0ºC, приблизно при 5ºC, приблизно при 25ºC або приблизно при 45ºC. Наприклад, фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо після 3 місяців зберігання при 5ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Також фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо після 6 місяців зберігання при 5ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Також фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо після 9 місяців зберігання при 5ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Також фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо 8 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 після 3 місяців зберігання при 25ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Також фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо після 6 місяців зберігання при 25ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Також фармацевтичний склад можна вважати стабільним, якщо після 9 місяців зберігання при 25ºC за допомогою ЕВЕРХ детектують більше ніж приблизно 90 %, 95 %, 96 % або 97 % нативного антитіла. Для оцінки стабільності складів за даним винаходом можна використовувати інші, такі як, наприклад, диференціальна скануюча калориметрія (DSC) для визначення термостабільності, контрольоване перемішування для визначення механічної стабільності і оптична густина приблизно при 350 нм або приблизно при 405 нм для визначення каламутності розчину. Наприклад, склад за даним винаходом можна вважати стабільним, якщо після 6 або більше місяців зберігання при температурі приблизно від 5ºC до приблизно 25ºC зміна OD 405 складу складає менше ніж приблизно 0,05 (наприклад, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01 або менше) від OD 405 складу в момент t=0. Стабільність також можна оцінювати за допомогою вимірювання біологічної активності і/або афінності зв'язування антитіла з його мішенню. Наприклад, склад за даним винаходом можна вважати стабільним, якщо після зберігання, наприклад, при 5ºC, 25ºC, 45ºC і т. д. протягом певного періоду часу (наприклад, від 1 до 12 місяців) антитіло до IL-6R, яке міститься в складі зв'язується з IL-6R з афінністю, яка складає щонайменше 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 % або більше від афінності зв'язування антитіла до вказаного зберігання. Додаткові способи оцінки стабільності антитіла в складі продемонстровані в прикладах, наданих нижче. У рідкій формі фармацевтичні склади за даним винаходом в певних варіантах здійснення можуть демонструвати рівні в'язкості від низьких до помірних. Як застосовують в цьому документі "в'язкість" може являти собою "кінематичну в'язкість" або "абсолютну в'язкість". "Кінематична в'язкість" являє собою міру резистивний потік рідини під впливом гравітації. Коли дві рідини однакового об'єму вміщують в ідентичні капілярні віскозиметри і дозволяють текти під дією гравітації, більш в'язкій рідині для протікання через капіляр необхідний більший час, ніж менш в'язкій рідини. Наприклад, якщо одній рідині для повного протікання необхідно 200 секунд, а другій рідині необхідно 400 секунд, друга рідина є в два рази більш в'язкою, ніж перша по шкалі кінематичної в'язкості. "Абсолютна в'язкість", яка іноді називається динамічною або простою в'язкістю, являє собою добуток кінематичної в'язкості і густини рідини (абсолютна 2 в'язкість = кінематична в'язкість× густина). Розмірність кінематичної в'язкості являє собою L /Т, де L являє собою довжину, а Т являє собою час. Як правило, кінематичну в'язкість виражають в 2 сантистоксах (сСт). Одиницею СІ кінематичної в'язкості є мм /сек, що становить 1 сСт. Абсолютну в'язкість виражають в одиницях сантипуаз (сП). Одиницею СІ абсолютної в'язкості є міліпаскаль•сек (мПа•сек), де 1 сП = 1 мПа•сек. Як застосовують в цьому документі, низький рівень в'язкості по відношенню до текучого складу за даним винаходом, демонструє абсолютну в'язкість меншу ніж приблизно 20 сПуаз (сП). Наприклад, можна вважати, що текучий склад за винаходом має "низьку в'язкість", якщо при вимірюванні стандартними способами вимірювання в'язкості склад демонструє абсолютну в'язкість приблизно 19 сП, приблизно 18 сП, приблизно 17 сП, приблизно 16 сП, приблизно 15 сП, приблизно 14 сП, приблизно 13 сП, приблизно 12 сП, приблизно 11 сП, приблизно 10 сП, приблизно 9 сП, приблизно 8 сП, приблизно 7 сП, приблизно 6 сП, приблизно 5 сП, приблизно 4 сП або менше. Як застосовують в цьому документі, помірний рівень в'язкості по відношенню до текучого склад за даним винаходом, демонструє абсолютну в'язкість приблизно від 30 сП до приблизно 20 сП. Наприклад, можна вважати, що текучий склад за винаходом має "помірну в'язкість", якщо при вимірюванні стандартними способами вимірювання в'язкості склад демонструє абсолютну в'язкість приблизно 30 сП, приблизно 29 сП, приблизно 28 сП, приблизно 27 сП, приблизно 26 сП, приблизно 25 сП, приблизно 24 сП, приблизно 23 сП, приблизно 22 сП, приблизно 21 сП або приблизно 20 сП. Як проілюстровано в прикладі 6 нижче, автори даного винаходу зробили несподіване відкриття, що текучі склади з в'язкістю від низької до помірної, яка містить високі концентрації антитіла до hIL-6R (наприклад, щонайменше до 175 мг/мл) можна отримувати, формулюючи антитіло з гістидином в концентрації від 25 мМ до 100 мМ і аргініном в концентрації від 25 мМ до 50 мМ. Крім того, додатково виявлене, що в'язкість складу можна знижувати навіть в більшій мірі, доводячи вміст сахарози менше ніж до 10 %. Контейнери для фармацевтичних Складів і способи введення Фармацевтичні склади за даним винаходом можна утримувати в будь-якому контейнері, прийнятному для зберігання лікарських засобів і інших терапевтичних композицій. Наприклад, 9 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 фармацевтичні склади можна утримувати в закритому і стерилізованому пластиковому або скляному контейнері певного об'єму, такому як флакон, ампула, шприц, картридж або пляшка. Для утримування складів за даним винаходом можна використовувати різні типи флаконів, включаючи, наприклад, прозорі і світлонепроникні (наприклад, жовті) скляні або пластикові флакони. Подібним чином для утримування і/або введення фармацевтичних складів за даним винаходом можна використовувати будь-який тип шприца. Фармацевтичні склади за даним винаходом можна утримувати в шприцах з "нормальним вмістом вольфраму" або в шприцах з "низьким вмістом вольфраму". Як зрозуміло фахівцям в даній галузі, спосіб отримання скляних шприців, як правило, включає використання гарячого вольфрамового стрижня, який діє, протикаючи скло, утворюючи, таким чином, отвір з якого рідини можна випускати і виганяти з шприца. Цей спосіб приводить до відкладення незначних кількостей вольфраму на внутрішній поверхні шприца. Для зниження кількості вольфраму в шприці можна використовувати подальше відмивання і інші етапи обробки. Як застосовують в цьому документі, термін "нормальний вміст вольфраму" означає, що шприц містить більше 500 мільярдних часток (млрд. ч.) вольфраму. Термін "низький вміст вольфраму" означає, що шприц містить менше 500 млрд. ч. вольфраму. Наприклад, шприц з низьким вмістом вольфраму за даним винаходом може містити менше ніж приблизно 490, 480, 470, 460, 450, 440, 430, 420, 410, 390, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 або менше млрд. ч. вольфраму. Для запобігання забрудненню медичного вмісту шприца або флакона і/або збереження його стабільності на гумові плунжери, що використовуються в шприцах, і гумові пробки, що використовуються для закриття отворів флаконів, можна наносити покриття. Таким чином, фармацевтичні склади за даним винаходом по певних варіантах здійснення можна утримувати в шприці, що містить плунжер з нанесеним покриттям, або у флаконі, який герметично закривають гумовою пробкою з нанесеним покриттям. Наприклад, плунжер або пробку можна покривати шаром фторвуглецю. Приклади пробок і/або плунжерів з нанесеним покриттям, придатних для використання у флаконах і шприцах, що містять фармацевтичні склади за даним винаходом, вказані, наприклад, в патентах США №№ 4997423; 5908686; 6286699; 6645635 і 7226554, вміст яких повністю включений в цей документ як посилання. Конкретні ілюстративні гумові пробки і плунжери з нанесеним покриттям, які можна використовувати в контексті даного винаходу, комерційно доступні під торговою маркою "FluroTec®", доступною в West Pharmaceutical Services, Inc. (Lionville, PA). По певних варіантах здійснення даного винаходу фармацевтичні склади можна утримувати в шприці з низьким вмістом вольфраму, який містить покритий фторвуглецем плунжер. Як описано в розділі прикладів нижче, виявлено, що комбінація шприца з низьким вмістом вольфраму і покритого фторвуглецем плунжера забезпечує несподівані характеристики стабільності відносно фармацевтичних складів за даним винаходом. Фармацевтичні склади можна вводити пацієнту парентеральними маршрутами, такими як ін'єкція (наприклад, підшкірна, внутрішньовенна, внутрішньом'язова, інтраперитонеальна і т. д.) або черезшкірне, слизове, назальне, легеневе і/або пероральне введення. Для підшкірної доставки фармацевтичних складів за даним винаходом можна використовувати множину шприц-ручок і/або автоін'єкторних засобів доставки з повторним використанням. Деякі приклади як необмежувальні приклади включають автопен (AUTOPEN™) (Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK), шприц-ручку дисетронік (DISETRONIC™) (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Switzerland), хумалог (HUMALOG) MIX 75/25™ pen, шприц-ручку хумалог (HUMALOG™), шприц-ручку хумалін (HUMALIN) 70/30™ (Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN), новопен (NOVOPEN™) I, II і III (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), новопен джунінор (NOVOPEN JUNIOR™) (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), шприц-ручку BD™ (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), оптипен (OPTIPEN™), оптипен про (OPTIPEN PRO™), оптипен старлет (OPTIPEN STARLET™) і оптиклік (OPTICLIK™) (Sanofi-Aventis, Frankfurt, Germany). Деякі приклади розподільних шприц-ручок і/або автоін'єкторних засобів доставки, що знаходять застосування при підшкірній доставці фармацевтичної композиції за даним винаходом, як необмежувальні приклади включають шприц-ручку солостар (SOLOSTAR™) (Sanofi-Aventis), флекспен (FLEXPEN™) (Novo Nordisk) і квікпен (KWIKPEN™) (Eli Lilly), автоін'єктор сурклік (SURECLICK™) (Amgen, Thousand Oaks, CA), пенлет (PENLET™) (Haselmeier, Stuttgart, Germany), епипен (EPIPEN) (Dey, L.P.) і шприц-ручку хуміра (HUMIRA™) (Abbott Labs, Abbott Park, IL). Також по цьому документу для доставки фармацевтичних складів за даним винаходом передбачене використання мікроінфузора. Як застосовують в цьому документі, термін "мікроінфузор" означає засіб підшкірної доставки, розроблений для повільного введення великих об'ємів (наприклад, приблизно до 2,5 мл або більше) терапевтичного складу протягом 10 UA 107211 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 тривалого періоду часу (наприклад, приблизно 10, 15, 20, 25, 30 або більше хвилини). Див., наприклад, U.S. 6629949; US 6659982 і Meehan et al., J. Controlled Release 46:107-116 (1996). Мікроінфузори особливо придатні для доставки великих доз терапевтичних білків, що містяться у високій концентрації (наприклад, приблизно 100, 125, 150, 175, 200 або більше мг/мл) і/або у в'язких розчинах. Терапевтичні застосування фармацевтичних складів Фармацевтичні склади за даним винаходом в числі іншого придатні для лікування, запобігання і/або поліпшенням стану будь-якого захворювання або порушення, асоційованого з активністю IL-6, включаючи захворювання або порушення, опосередковувані активацією рецептора IL-6. Як необмежувальні приклади, захворювання і порушення, які можна лікувати і/або запобігати введенням фармацевтичних складів за даним винаходом, включають, наприклад, ревматоїдний артрит, анкілозуючий спондиліт, хворобу Крона, виразковий коліт, панкреатит, юнацький ідіопатичний артрит, васкуліт, хворобу Кавасакі, системний червоний вовчак, псоріаз, псоріатичний артрит, синдром Шегрена, хворобу Стілла, хворобу Кастлемана, розсіяний склероз, захворювання, асоційовані з аномальним згортанням крові або фібринолізом (наприклад, тромбоз), злоякісну пухлину (наприклад, рак молочної залози, лейкоз, рак яєчників, меланому, рак передміхурової залози, рак підшлункової залози, лімфому, рак легень, нирковоклітинну карциному, колоректальний рак, множинну мієлому і т. д.), кахексію, хронічне відторгнення трансплантованих органів і клітин, кардіопатію, вірусну інфекцію (наприклад, інфекцію ВІЛ, інфекцію ВЕБ і т. д.), плазмацитоз, гіперімуноглобулінемію, анемію, нефрит, мезотеліому і втрату слуху і інші порушення внутрішнього вуха. Таким чином, даний винахід стосується способів лікування, запобігання і/або поліпшення стану будь-якого захворювання або порушення, асоційованого з активністю IL-6 або активацією IL-6R (включаючи будь-яке з вказаних вище захворювань, порушень і станів). Способи лікування за даним винаходом включають введення індивідууму будь-якого складу, що містить антитіло до hIL-6R, як описано в цьому документі. Індивідуум, якому вводять фармацевтичний склад, може являти собою, наприклад, будь-кого з людини або тварини, що не є людиною, потребуючої такого лікування, запобігання і/або поліпшення стану, або які іншим чином отримають користь від інгібування або зниження активності IL-6 і/або активності, опосередкованої IL-6R. Наприклад, індивідуум може являти собою індивідуума, у якого діагностовано або у якого виявлений ризик ураження будь-яким з вказаних вище захворювань або порушень. Даний винахід додатково включає використання будь-якого з фармацевтичних складів, що описуються в цьому документі, у виробництві лікарського засобу для лікування, запобігання і/або поліпшення стану будь-якого захворювання або порушення, асоційованого з активністю IL-6 або активацією IL-6R (включаючи будь-яке з вказаних вище ілюстративних захворювань, порушень і станів). Приклади Приведені нижче приклади використовують для того, щоб надати фахівцям в даній галузі повне розкриття і опис того, як отримувати і використовувати способи і композиції за винаходом, і вони не призначені для обмеження сфери того, що автори винаходу розглядають як їх винахід. Були зроблені зусилля для забезпечення точності відносно використовуваних чисел (наприклад, кількостей, температури і т. д.), однак потрібно враховувати деякі експериментальні помилки і відхилення. Якщо не указано інакше, частини являють собою масові частини, молекулярна маса являє собою середню молекулярну масу, температура приведена в градусах Цельсія, а тиск являє собою атмосферний або близький до атмосферного. Приклад 1. Стабільність повністю людського антитіла до рецептора інтерлейкіну 6 (IL-6R) людини ("mAb1") після зберігання при низьких температурах У цьому прикладі, отримували різні склади, що містять антитіло до IL-6R людини без ексципієнтів. Ілюстративне антитіло, що використовується в цьому і у всіх подальших прикладах, приведених нижче, являє собою антитіло, що містить варіабельну область важкого ланцюга (HCVR) з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:18, і варіабельну область легкого ланцюга (LCVR) з амінокислотною послідовністю SEQ ID NO:26. Це антитіло в цьому документі позначене як "mAb1". Як попередній експеримент, стабільність mAb1 в рідкому розчині визначали після різних періодів часу зберігання в замороженому стані при -20ºC, -30ºC і -80ºC. Концентрація mAb1, що використовується в цьому прикладі, становила 128 мг/мл. У різні моменти часу визначали стабільність mAb1 за допомогою ексклюзійної високоефективної рідинної хроматографії (ЕВЕРХ) і за допомогою катіонообмінної високоефективної рідинної хроматографії (КОВЕРХ). Стабільність оцінювали на основі процентного вмісту нативного mAb1, що залишається в зразку 11 UA 107211 C2 (за допомогою ЕВЕРХ; таблиця 4) і за процентним вмістом кислих молекул, що спостерігаються в зразку (за допомогою КОВЕРХ; таблиця 5). (Збільшення процентного вмісту кислих молекул відповідає дезамінуванню антитіла, і, таким чином, його розглядають як небажане явище відносно фармацевтичних складів за даним винаходом). 5 Таблиця 4 Процентний вміст нативного mAb1 (ЕВЕРХ), яке залишається Час (місяці) -80ºC 95,9 95,7 95,6 96,1 95,6 0 1 3 6 9 Температура зберігання -30ºC 95,9 94,3 93,6 96,0 91,6 -20ºC 95,9 93,2 89,3 88,9 87,9 Таблиця 5 Процентний вміст кислих молекул (КОВЕРХ) Час (місяці) -80ºC 28,6 27,3 27,3 28,6 29,0 0 1 3 6 9 10 15 Температура зберігання -30ºC 28,6 28,0 27,7 29,6 28,8 -20ºC 28,6 28,1 28,3 29,3 29,0 Результати в таблицях 3 і 4 зображені на фіг. 1 і 2, відповідно. Ці результати демонструють, що mAb1 при концентрації 128 мг/мл при зберіганні при -80ºC може залишатися стабільним протягом щонайменше 9 місяців. Приклад 2. Стабільність складів mAb1, що містять мінімальну кількість ексципієнтів Отримували вісім різних складів, що містять mAb1 і мінімальну кількість ексципієнтів, як приведено в таблиці 6. Склади тестували на стабільність за допомогою ЕВЕРХ після різних періодів часу при -30ºC і -20ºC. Результати, що виражаються в процентному вмісті нативного mAb1, що залишається, приведені в таблицях 7 (зберігання при -30ºC) і 8 (-20ºC). Таблиця 6 Склади mAb1 з мінімальною кількістю ексципієнтів Склад 1 2 3 4 5 6 7 8 Ексципієнт 0,13 % полісорбат 20 6 % сахароза 0,13 % полісорбат 20 1 % сахароза 2 % сахароза 4 % сахароза 6 % сахароза none none Всі склади містять 10 мМ гістидин, pH 6,0 12 mAb1 (мг/мл) 80 80 80 80 80 80 80 65 UA 107211 C2 Таблиця 7 Процентний вміст нативного mAb1, що залишається після зберігання при -30ºC (ЕВЕРХ) Час (місяці) 0 1 2 3 4 6 9 1 96,4 96,4 96,4 96,5 97,2 97,0 96,7 2 96,2 95,1 94,7 94,7 95,2 94,2 93,6 № складу (див. таблицю 6) 3 4 5 6 96,4 96,5 96,5 96,6 96,3 96,3 96,4 96,6 96,0 96,4 96,5 96,0 96,3 96,7 96,7 96,7 96,7 97,4 97,3 97,3 96,2 96,8 97,1 96,9 96,0 96,6 96,5 96,9 7 96,2 95,1 95,0 94,4 95,1 94,0 93,4 8 96,5 95,3 95,4 94,9 95,7 94,5 93,8 Таблиця 8 Процентний вміст нативного mAb1, що залишається після зберігання при -20 °C (ЕВЕРХ) Час (місяці) 0 1 2 3 4 6 9 5 10 1 96,4 96,7 96,4 96,9 97,2 96,9 96,5 2 96,2 94,5 90,9 90,1 90,7 86,9 86,0 № складу (див. таблицю 6) 3 4 5 6 96,4 96,5 96,5 96,6 96,0 96,8 96,5 96,3 95,3 96,4 96,4 96,4 95,1 96,6 96,6 96,7 95,8 97,4 97,1 97,1 94,1 96,9 96,9 97,1 93,3 96,6 96,6 96,7 7 96,2 94,1 90,9 90,5 91,4 87,5 86,7 8 96,5 94,5 91,8 90,9 91,8 88,587,5 Результати в таблицях 7 і 8 зображені на фіг. 3 і 4, відповідно. Як показано в цьому прикладі, стабільність mAb1 після декількох місяців зберігання при -20ºC і -30ºC значною мірою зберігалася в складах 1, 4, 5 і 6. Ці результати демонструють, що стабільність mAb1 при -20ºC і -30ºC можна збільшувати додаванням щонайменше 2 % сахарози. Приклад 3. Стабілізований склад mAb1 Отримували стабілізований склад, що містить різні концентрації mAb1, для застосування в прикладах 4 і 5 нижче. Цей склад, позначений "склад А", приведений в таблиці 9. Таблиця 9 Стабілізований склад mAb1 "A" Компонент Склад А 25-100 мг/мл 10 мМ 0,2 % 10 % mAb1 Гістидин Полісорбат 20 Сахароза pH доводили до 6,0 15 20 Приклад 4. Стабільність складу А після зберігання при 5 °C Склад А (див. приклад 3), який містить 25, 50 або 100 мг/мл mAb1 тестували на стабільність після декількох місяців зберігання при 5ºC в прозорих флаконах. Стабільність оцінювали по наступних параметрах: (a) зовнішній вигляд; (b) каламутність (OD 405 нм); (с) pH; (d) отримуваний процентний вміст загального mAb1 (по вимірюваннях за допомогою ВЕРХ-ОФ); (d) отримуваний процентний вміст нативного mAb1 (по вимірюваннях за допомогою ЕВЕРХ); (е) отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 (по вимірюваннях за допомогою КОВЕРХ) і (f) отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 (по вимірюваннях за допомогою КОВЕРХ). 13 UA 107211 C2 Результати аналізу стабільності для складу А, що містить 25, 50 і 100 мг/мл mAb1, узагальнені в таблицях 10, 11 і 12, відповідно. Таблиця 10 Стабільність складу A, який містить 25 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в прозорих флаконах Параметр 0 1 Тривалість зберігання при 5ºC (місяці) 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 (OD405 нм) pH 6,0 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 Отримуваний процентний вміст 100 99 101 112 103 94 101 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 97,5 98,0 97,5 97,6 97,5 97,5 97,8 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 58,4 57,9 58,7 58,1 57,9 57,9 58,4 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 26,5 28,0 26,5 28,0 27,3 28,0 27,9 молекул mAb1 Таблиця 11A Стабільність складу A, який містить 50 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в прозорих флаконах (0-9 місяців) Параметр Зовнішній вигляд Каламутність (OD405 нм) pH Отримуваний процентний вміст загального mAb1 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 Тривалість зберігання при 5ºC (місяці) 0 1 2 3 6 9 Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,8 5,9 5,8 5,9 5,9 6,0 100 99 104 106 100 109 97,4 97,5 97,3 97,2 97,3 97,2 57,1 56,7 58,0 54,2 53,3 57,9 27,6 26,7 27,6 28,5 26,8 26,9 5 14 UA 107211 C2 Таблиця 11B Стабільність складу A, який містить 50 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в прозорих флаконах (12-24 місяців) Тривалість зберігання при 5ºC (місяці) 12 18 24 Пройдений Пройдений Пройдений 0,00 0,00 0,00 5,9 6,0 5,9 Параметр Зовнішній вигляд Каламутність (OD405 нм) pH Отримуваний процентний вміст загального mAb1 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 103 107 105 97,1 97,1 96,9 56,4 57,1 56,4 28,1 28,3 29,0 Таблиця 12A Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в прозорих флаконах (0-9 місяців) Параметр Зовнішній вигляд Каламутність (OD405 нм) pH Отримуваний процентний вміст загального mAb1 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 Тривалість зберігання при 5 °C (місяці) 0 1 2 3 6 9 Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,9 6,0 5,9 5,9 5,9 5,9 100 99 100 107 101 106 97,3 97,0 97,0 97,1 96,9 96,9 55,1 55,5 57,9 55,9 55,4 56,8 27,6 26,9 27,4 29,6 27,4 27,4 Таблиця 12B Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в прозорих флаконах (12-24 місяців) Тривалість зберігання при 5ºC (місяці) 12 18 24 Пройдений Пройдений Пройдений 0,00 0,00 0,00 6,0 6,0 6,0 Параметр Зовнішній вигляд Каламутність (OD405 нм) pH Отримуваний процентний вміст загального mAb1 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 101 103 96,8 15 102 96,7 96,5 UA 107211 C2 Продовження таблиці 12В Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 5 10 57,3 57,5 56,7 27,3 28,1 28,7 Результати цього прикладу демонструють, що склад А, який містить 25, 50 або 100 мг/мл mAb1, залишався стабільним протягом щонайменше 9 місяців зберігання при 5 °C в прозорих флаконах, приблизно з 97 % або більше нативного mAb1, що залишається у всіх зразках після 9 місяців зберігання в цих умовах. Для складів з 50 і 100 мг/мл, 96,9 % і 96,5 % нативного mAb1, відповідно, детектували після періоду зберігання при 5ºC до 24 місяців. Крім того, процентний вміст кислих молекули залишалися на рівні 29 % або менше у всі аналізовані моменти часу, таким чином, підтверджуючи стабільність складів. Подібні дослідження стабільності також проводили з використанням складу А, що містить 75 мг/мл mAb1, після зберігання при 2-8ºC. Ні для якої тестованої концентрації після зберігання протягом 24 місяців при 2-8ºC, як визначали за допомогою ЕВЕРХ і КОВЕРХ значного руйнування не спостерігали (дані не показані). Таблиця 13 Стабільність складу A, який містить 25 мг/мл mAb1, після зберігання при 5ºC в 5 мл прозорих флаконах Зберігання при 5ºC (місяці) Параметр t=0 0 1 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,1 Отримуваний процентний вміст 100 106 103 98 100 100 101 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 97,1 97,0 96,9 96,9 97,0 96,4 96,6 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,8 56,8 56,2 54,2 56,4 56,4 56,8 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 27,9 30,7 30,8 33,0 30,6 29,8 30,1 молекул mAb1 15 20 Приклад 5. Стабільність складу А, що виготовляється в прозорих флаконах і у флаконах з жовтого скла Проводили додаткові експерименти для порівняння стабільності складу А (див. приклад 3), який містить 25 і 100 мг/мл mAb1, що виробляється у флаконах з жовтого скла, з тим же складом, що виготовляється в прозорих флаконах. У цьому прикладі використовували два типи флаконів з жовтого скла: 5 мл і 20 мл флакони з жовтого скла. Стабільність оцінювали після 16 UA 107211 C2 зберігання при 5ºC, 25ºC або 45ºC на основі тих же параметрів, які використали в прикладі 4. Результати для складів з 25 мг/мл і 100 мг/мл узагальнені в таблицях 13-21. Таблиця 14 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в 5 мл прозорих флаконах Зберігання при 5ºC (місяці) Параметр t=0 0 1 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,1 6,0 6,1 6,0 6,1 6,1 Отримуваний процентний вміст 100 106 104 97 100 99 100 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 96,2 96,3 96,1 96,0 95,9 95,5 95,4 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,6 57,3 57,9 55,5 56,2 56,4 55,4 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 28,2 30,2 29,4 31,1 30,7 30,0 32,2 молекул mAb1 Таблиця 15 Стабільність складу A, який містить 25 мг/мл mAb1, після зберігання при 5ºC в 5 мл флаконах з жовтого скла Зберігання при 5ºC (місяці) Параметр t=0 0 1 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 Отримуваний процентний вміст 100 104 104 98 99 97 101 загального mAb1 5 17 UA 107211 C2 Продовження таблиці 15 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 97,1 97,4 96,8 96,7 96,7 96,1 96,3 57,8 56,4 56,3 56,1 55,7 55,9 55,2 27,9 30,4 30,6 31,8 31,0 30,5 32,9 Таблиця 16 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 5ºC в 5 мл флаконах з жовтого скла Параметр 0 1 Зберігання при 5ºC (місяці) 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,1 Отримуваний процентний вміст 100 102 104 97 101 100 100 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 96,2 95,0 96,0 96,0 95,8 95,0 95,3 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,6 56,9 58,0 55,6 56,3 56,5 55,1 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 28,2 30,1 29,4 31,4 30,4 30,0 32,3 молекул mAb1 18 UA 107211 C2 Таблиця 17 Стабільність складу A, який містить 25 мг/мл mAb1, після зберігання при 5ºC в 20 мл флаконах з жовтого скла Параметр 0 1 Зберігання при 5ºC (місяці) 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 Отримуваний процентний вміст 100 105 103 97 101 98 101 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 97,1 96,9 97,0 96,8 97,0 96,2 96,6 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,8 56,4 57,1 55,9 55,6 56,1 55,2 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 27,9 20,9 30,2 30,5 30,7 30,0 31,9 молекул mAb1 Таблиця 18 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 5 °C в 20 мл флаконах з жовтого скла Параметр 0 1 Зберігання при 5ºC (місяці) 2 3 6 9 12 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 6,0 Отримуваний процентний вміст 100 105 103 97 99 98 100 загального mAb1 19 UA 107211 C2 Продовження таблиці 18 Отримуваний процентний вміст нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 96,2 96,2 96,0 96,0 95,8 95,4 95,5 57,6 57,9 56,3 56,5 56,5 56,4 55,3 28,2 29,8 30,4 30,3 30,6 30,0 30,9 Таблиця 19 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 25 °C і 45 °C в прозорих флаконах Параметр 0 Зберігання при 45ºC (доби) 7 14 28 Зберігання при 25 °C (місяці) 2 3 6 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 (OD405 нм) pH 6,0 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 Отримуваний процентний вміст 100 101 97 105 105 102 97 101 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 95,6 94,8 93,8 91,2 94,6 93,7 93,1 93,4 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,6 45,7 34,9 22,3 53,1 49,0 43,0 37,9 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 28,2 37,3 49,8 70,8 32,5 36,8 42,4 53,8 молекул mAb1 20 1 UA 107211 C2 Таблиця 20 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 25 °C і 45 °C в 5 мл флаконах з жовтого скла Зберігання при 45ºC (доби) Параметр t=0 0 7 14 Зберігання при 25 °C (місяці) 28 1 2 3 6 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,00 0,00 0,01 0,02 0,00 0,00 0,01 0,02 (OD405 нм) pH 6,0 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 6,1 6,0 Отримуваний процентний вміст 100 101 100 105 106 103 97 100 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 95,6 94,6 93,6 90,9 94,5 93,7 93,4 92,7 нативного mAb1 Отримуваний процентний вміст 57,6 46,1 35,2 21,6 52,7 46,3 42,0 34,2 основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих 28,2 37,3 50,1 70,9 32,8 39,6 43,4 57,3 молекул mAb1 Таблиця 21 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1, після зберігання при 25 °C і 45 °C в 20 мл флаконах з жовтого скла Зберігання при 45ºC (доби) Параметр t=0 0 7 14 Зберігання при 25ºC (місяці) 28 1 2 3 6 Зовнішній Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений вигляд Каламутність 0,00 0,01 0,00 0,02 0,00 0,01 0,00 0,02 (OD405 нм) pH 6,0 6,0 6,1 6,1 6,0 6,0 6,0 6,0 Отримуваний процентний вміст 100 101 101 105 104 103 96 100 загального mAb1 Отримуваний процентний вміст 95,6 94,9 93,8 91,5 94,3 94,0 93,6 93,5 нативного mAb1 21 UA 107211 C2 Продовження таблиці 21 Отримуваний процентний вміст основного піка mAb1 Отримуваний процентний вміст кислих молекул mAb1 5 10 15 57,6 45,7 34,2 23,3 52,7 49,3 43,5 36,7 28,2 36,7 51,1 68,6 32,5 35,8 41,3 55,0 Як показано в цьому прикладі, склад А, що містить 25 мг/мл або 100 мг/мл mAb1, при зберіганні в прозорих флаконах або флаконах з жовтого скла демонстрував еквівалентні профілі стабільності. Крім того, як показано в прикладі 4 для зберігання в прозорих флаконах, в складі А при зберіганні в прозорих флаконах або флаконах з жовтого скла при 5ºC протягом періоду до 12 місяців зберігалася відносно висока стабільність mAb1. Приклад 6. Вплив концентрацій аргініну, гістидину і сахарози на в'язкість і стабільність складів, що містять 150 мг/мл mAb1 Отримували декілька складів, що містять 150 мг/мл, 175 мг/мл і 200 мг/мл mAb1 і різні кількості гістидину, аргініну і сахарози. Для кожного складу вимірювали в'язкість і осмоляльність. Крім того, оцінювали стабільність складів з 150 мг/мл після 4 тижнів зберігання при 45ºC відносно процентного вмісту нативного mAb1, що залишається (за допомогою ЕВЕРХ) і процентного вмісту головного піка, що залишається (за допомогою КОВЕРХ). Результати узагальнені в таблиці 22. Таблиця 22 Вплив аргініну, гістидину і сахарози на в'язкість і стабільність складів mAb1 mAb1 (мг/мл) 150 150 150 150 150 175 175 175 175 175 175 200 200 200 200 200 200 [Гіс-тидин] [Аргі-нін] (мМ) (мМ) 10 25 25 25 25 10 25 25 25 100 100 10 25 25 25 100 100 0 25 25 25 25 0 25 25 50 0 50 0 25 25 25 0 50 [Сахароза] (%) В'язкість (сПуаз) 10 10 5 2,5 0 10 10 5 5 5 5 10 10 5 0 10 10 ≈15 ≈11,5 ≈8,5 ≈8,0 ≈8,5 ≈27 ≈20,5 ≈19 ≈14,5 ≈12,5 ≈10 ≈44 ≈35 ≈30 ≈28 ≈27 ≈21 Процентний вміст Про-центОсмоляльнативного ний вміст ність (мосм) mAb1*, який кислих залишамоле-кул ється 375 90,8 19,9 500 91,6 19,5 305 91,8 19,8 220 91,1 19,9 115 90,3 20,6 395 415 300 390 415 515 410 480 300 130 570 670 *Вихідний процентний вміст нативного mAb1=96,5 % (ЕВЕРХ) 20 Результати, представлені в таблиці 16, демонструють, що збільшення концентрації гістидин до 25 мМ або 100 мМ і додавання до складу аргініну (25 мМ або 50 мМ) значно знижують в'язкість складу в порівнянні з складами, що містять тільки 10 мМ гістидин і не містять аргінін. 22 UA 107211 C2 Крім того, зниження концентрації сахарози з 10 % до 5 % з гістидином і аргініном, що додаються, знижувала в'язкість складу навіть в більшій мірі. Основуючись, щонайменше частково, на вказаному вище, отримували вказані нижче в таблиці 23 склади (що позначаються "склад В" і "склад С"). 5 Таблиця 23 Стабілізовані склади mAb1 "B" і "C" Компонент mAb1 Гістидин Полісорбат 20 Сахароза Аргінін pH доводили до 6,0 10 15 Склад В 25-200 мг/мл 25 мМ 0,2 % 5% 25 мМ Склад С 25-200 мг/мл 25 мМ 0,2 % 5% 50 мМ Приклад 7. Стабільність складу В, що містить 150 мг/мл mAb1, при виробництві у флаконі і шприцах Склад В (див. таблицю 23), який містить 150 мг/мл mAb1, отримували в 2 мл скляному флаконі і в двох різних шприцах: із звичайним і низьким вмістом вольфраму. Препарати зберігали при 5, 25 і 45ºC протягом різних періодів часу. Стабільність mAb1 після зберігання вимірювали за допомогою ЕВЕРХ і КОВЕРХ. Результати представлені в таблиці 24. (Збільшення процентного вмісту кислих молекул відповідає дезамінуванню антитіла, і, таким чином, його розглядають як небажане явище відносно фармацевтичних складів за даним винаходом). Таблиця 24 Стабільність складу B, який містить 150 мг/мл mAb1, у флаконі і шприці Шприц з низьким вмістом вольфраму Процентний Процентний Процентний Процентний Процентний Процентний вміст вміст вміст вміст вміст вміст нативТемп. Час кислого нативного кислого нативного кислого ного mAb1 mAb1 mAb1 mAb1 mAb1 mAb1 (ЕВЕРХ) (КОВЕРХ) (ЕВЕРХ) (КОВЕРХ) (ЕВЕРХ) (КОВЕРХ) Початок 96,7 32,2 96,5 32,3 96,7 31,7 45ºC 14 діб 94,1 52,7 94,3 54,5 94,3 56,1 45ºC 28 діб 92,7 69,7 92,7 69,7 92,5 70,8 45ºC 56 діб 86,7 84,7 87,8 82,6 86,9 83,5 25ºC 1 місяць 95,1 31,2 95,7 30,6 95,6 31,1 25ºC 2 місяці 95,3 34,6 94,7 37,4 96,0 36,3 25ºC 3 місяці 94,3 40,6 93,9 43,7 94,1 42,6 5ºC 1 місяць 96,2 30,2 96,5 29,1 96,4 29,3 5ºC 2 місяці 96,3 29,3 96,4 29,0 96,4 29,1 5ºC 3 місяці 95,7 29,4 95,8 29,6 95,8 29,6 2 мл скляний флакон 20 25 Звичайний шприц Як показано в цій таблиці, склад В, що містить 150 мг/мл mAb1, який зберігається в скляному флаконі або шприці при 5ºC, залишався відносно стабільним протягом щонайменше 3 місяців. Приклад 8: Стабільність складів mAb1 в попередньо заповнених шприцах Проводили ряд експериментів для оцінки стабільності різних складів mAb1 в попередньо заповнених шприцах. Для цих експериментів використовували різні шприци Люера і з незнімною голкою із звичайним вмістом вольфраму і з низьким вмістом вольфраму в комбінації з різними типами плунжерів (покритих і непокритих) і кінцевих ковпачків. Склади тестували на стабільність після зберігання в попередньо заповнених шприцах при 45ºC, 25ºC і 5ºC протягом різних періодів часу (в діапазоні від 14 діб до 12 місяців, залежно від тестованих умов). 23 UA 107211 C2 5 10 У цьому прикладі на стабільність в попередньо заповнених шприцах тестували шість різних складів mAb1: (1) склад А (див. таблицю 9), який містить 100 мг/мл mAb1; (2) склад А (див. таблицю 9), який містить 25 мг/мл mAb1; (3) склад В (див. таблицю 23), який містить 150 мг/мл mAb1; (4) склад В (див. таблицю 23), який містить 25 мг/мл mAb1; (5) склад С (див. таблицю 23), який містить 175 мг/мл mAb1; і (6) склад С (див. таблицю 23), який містить 25 мг/мл mAb1. Стабільність оцінювали по наступних параметрах: (a) візуальний аналіз; (b) каламутність (OD405 нм); (с) отримуваний процентний вміст за допомогою ВЕРХ-ОФ; (d) процентний вміст нативного mAb1 за допомогою ЕВЕРХ; (е) процентний вміст основного піка mAb1 за допомогою КОВЕРХ; і (f) процентний вміст кислих молекул за допомогою КОВЕРХ. Результати характерної експериментальної оцінки стабільності складу А, що містить 100 мг/мл mAb1, в двох різних шприцах (шприц № 1 і шприц № 2) приведені в таблицях 25 і 26 нижче. Таблиця 25 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1 в попередньо заповненому шприці № 1 зі знімною голкою Шприц: Плунжер: Кінцевий наконечник: Силіконізація Темп. 45ºC 45ºC 45ºC 25ºC 25ºC 25ºC 25ºC 25ºC 25ºC 5ºC 5ºC 5ºC 5ºC 5ºC 5ºC Опис шприца № 1: BD 1 мл довжиною 29 калібрів × 1,2ʺ Physiolis, низький вміст вольфраму West FluroTec® 4023/50 BD 260 Напилення Процентний Процентний ВізуОтримуваний Процентний Каламутність вміст вміст Час альний процент-ний вміст кислих (OD405 нм) нативного основного аналіз вміст молекул mAb1 піка Початок Пройдений 0,00 100 96,6 56,9 28,7 14 діб Пройдений 0,00 99 95,1 32,7 50,7 28 діб Пройдений 0,01 103 92,6 20,9 66,1 56 діб Пройдений 0,03 105 88,8 9,9 80,9 1 місяць Пройдений 0,00 106 95,6 52,4 32,0 2 місяці Пройдений 0,00 107 95,2 48,0 37,0 3 місяці Пройдений 0,00 106 94,2 44,8 41,8 6 місяців Пройдений 0,01 101 93,7 34,8 53,9 9 місяців Пройдений 0,03 98 91,4 26,1 64,6 12 місяців Пройдений 0,03 101 89,9 21,3 69,4 1 місяць Пройдений 0,00 110 96,4 56,8 29,9 2 місяці Пройдений 0,00 108 96,2 55,7 31,1 3 місяці Пройдений 0,00 104 96,0 56,3 30,0 6 місяців Пройдений 0,00 100 96,5 55,0 31,3 9 місяців Пройдений 0,00 98 96,2 56,7 30,3 12 місяців Пройдений 0,00 101 95,4 57,3 30,2 15 24 UA 107211 C2 Таблиця 26 Стабільність складу A, який містить 100 мг/мл mAb1 в попередньо заповненому шприц № 2 зі знімною голкою Шприц: Плунжер: Кінцевий наконечник: Силіконізація Темп. Час 45ºC 45ºC 45ºC 25ºC 25ºC Початок 14 діб 28 діб 56 діб 1 місяць 2 місяці 25ºC 3 місяці 25ºC 6 місяців 25ºC 9 місяців 12 25ºC місяців 5ºC 1 місяць 5ºC 2 місяці 5ºC 3 місяці 5ºC 6 місяців 5ºC 9 місяців 12 5ºC місяців 5 10 Опис шприца № 2: Schott 1 мл довжиною SN CF 29 калібрів × 1/2" West FluroTec® 4023/50 Stelmi 4800 w/RNS Напилення Процентний Процентний Отримуваний Процентний Візуаль- Каламутність вміст вміст процент-ний вміст кислих ний аналіз (OD405 нм) нативного основного вміст молекул mAb1 піка Пройдений 0,00 100 96,3 57,5 28,0 Пройдений 0,00 100 95,2 33,7 49,6 Пройдений 0,00 103 93,3 22,8 64,7 Пройдений 0,03 107 88,0 9,9 81,1 Пройдений 0,00 108 95,5 52,5 31,8 Пройдений 0,00 107 95,2 49,2 35,7 Не 0,00 106 93,9 43,1 42,0 пройдений Не 0,00 102 92,9 34,4 54,0 пройдений Пройдений 0,02 100 92,3 26,9 63,5 Пройдений 0,03 103 90,0 20,0 70,2 Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений Пройдений 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 111 112 106 102 100 96,3 95,6 96,1 96,0 95,9 56,7 55,9 57,2 54,9 56,7 29,9 31,1 29,4 31,6 30,2 Пройдений 0,00 102 95,4 56,0 30,7 Нижче, в таблицях 27 і 28, приведені результати іншої характерної експериментальної оцінки стабільності складу С, що містить 175 мг/мл mAb1, в двох різних шприцах (шприц № 1 і шприц № 3). Результати цього ряду експериментів демонструють, що різні склади в попередньо заповнених шприцах залишаються відносно стабільними, особливо при зберіганні при температурах від 25ºC і нижче, протягом одного місяця або більше. Крім того, виявлено, що різні склади за винаходом мають поліпшену стабільність при зберіганні в шприцах з низьким вмістом вольфраму, які містять покриті фторвуглецем плунжери. 25 UA 107211 C2 Таблиця 27 Стабільність складу C, який містить 175 мг/мл mAb1, в попередньо заповненому шприц № 1 зі знімною голкою Шприц: Плунжер: Кінцевий наконечник: Силіконізація Темп. Час 45ºC 45ºC 45ºC 45ºC 25ºC 25ºC 5ºC 5ºC Початок 7 діб 14 діб 28 діб 56 діб 1 місяць 2 місяці 1 місяць 2 місяці Опис шприца № 1: BD 1 мл довжина 29 калібрів × 1/2" Physiolis з низьким вмістом вольфраму West FluroTec® 4023/50 BD 260 Напилення Процентний Процентний Отримуваний Процентний Візуаль- Каламутність вміст вміст процент-ний вміст кислих ний аналіз (OD405 нм) нативного основного вміст молекул mAb1 піка Пройдений 0,00 100 96,7 59,7 32,4 Пройдений 0,01 102 96,1 48,6 39,5 Пройдений 0,03 97 95,0 36,9 50,0 Пройдений 0,03 98 91,9 24,7 66,0 Пройдений 0,05 97 91,9 12,3 83,3 Пройдений 0,02 99 95,4 56,9 33,8 Пройдений 0,00 100 95,0 51,1 39,8 Пройдений 0,00 98 96,1 59,5 32,7 Пройдений 0,00 101 96,4 56,3 37,1 Таблиця 28 Стабільність складу C, який містить 175 мг/мл mAb1, в попередньо заповненому шприц № 3 зі знімною голкою Шприц: Плунжер: Кінцевий наконечник: Силіконізація Темп. 45ºC 45ºC 45ºC 45ºC 25ºC 5ºC 5ºC 5 Час Початок 7 діб 14 діб 28 діб 56 діб 1 місяць 1 місяць 2 місяці Опис шприца № 1: Daikyo Seiko CZ 1 мл std 30 калібрів × 1/2" Daikyo D-21-6-1 FluroTec® Coated 7028 н. п. Процентний Процентний Отримуваний Процентний Візуаль- Каламутність вміст вміст процент-ний вміст кислих ний аналіз (OD405 нм) нативного основного вміст молекул mAb1 піка Пройдений 0,00 100 96,4 58,2 33,6 Пройдений 0,00 101 95,7 45,4 40,4 Пройдений 0,01 101 94,8 37,5 48,8 Пройдений 0,04 96 94,0 29,4 59,4 Пройдений 0,06 99 85,9 7,8 87,0 н.в. н.в. н.в. н.в. н.в. н.в. Пройдений 0,00 100 96,4 56,7 34,0 Пройдений 0,00 101 96,2 54,7 34,0 Даний винахід не обмежений в об'ємі конкретними варіантами здійснення, що описуються в цьому документі. Фактично, фахівцям в даній галузі на основі вказаного вище опису і супроводжуючих фігур очевидні різні модифікації винаходу в доповнення до того, що описується в цьому документі. Мається на увазі, що такі модифікації входять в об'єм прикладеної формули винаходу. 26 UA 107211 C2 27 UA 107211 C2 28