Спосіб превентивної профілактики ішемічного ураження печінки

Реферат: Спосіб превентивної профілактики ішемічного ураження печінки включає призначення лікарських засобів - модуляторів синтезу оксиду азоту. Призначають водний розчин L-аргініну інтраперитонеально один раз на день впродовж 3 діб у дозі 25 мг/кг, причому третє введення здійснюють за 10 хвилин до формування ішемічної реперфузії. UA 69009 U (54) СПОСІБ ПРЕВЕНТИВНОЇ ПРОФІЛАКТИКИ ІШЕМІЧНОГО УРАЖЕННЯ ПЕЧІНКИ UA 69009 U UA 69009 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель стосується медицини, а саме експериментальної патології, і може бути використана для попередження ішемічного ураження печінки різного ґенезу. Відомий спосіб превентивної профілактики ішемічного ураження печінки, що включає призначення лікарських засобів - модуляторів синтезу оксиду азоту [1]. За відомим способом, з метою превентивної профілактики реперфузійної ішемії вводять терапевтичні донори оксиду азоту, такі, як органічні нітрати та похідні сиднонімінів, попередники синтезу оксиду азоту, в тому числі аргінінвмісні препарати. Недоліком відомого способу є недостатня клінічна ефективність профілактичних заходів, що випливає з того, що використання вказаних фармакологічних засобів забезпечує лише зниження інтенсивності ішемії та її наслідків, а не їх попередження. До того ж, притаманний відомому способу відносно швидкий розвиток толерантності до вказаних препаратів, недостатня їх біодоступність, пов'язана із швидкою утилізацією в печінці, тощо. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом зміни технології застосування фармакологічного засобу - коректора патологічного процесу, а саме модулятора реперфузійного ішемічного ураження печінки, спрямованого на створення в організмі, перш за все в печінці, депо попередника оксиду азоту, досягають зниження проявів ішемії та лікувальної підвищення ефективності в цілому. При вирішенні поставленої задачі було взято до уваги те, що порушення, які виникають при ішемічно-реперфузійних ураженнях печінки, асоціюється з гострою реактивною відповіддю запального характеру та дисфункцією капілярів мікроциркуляторного апарату, що в кінцевому результаті призводить до незворотного ураження гепатоцитів [2]. Лікувальний ефект L-аргініну полягає у покращанні мікроциркуляції в печінці. Так, L- аргінін виступає попередником оксиду азоту (NО) з притаманною йому роллю ендогенного фактора релаксації в судинній стінці [3]. Протекторний вплив препарату за вказаних умов пов'язаний також із здатністю його попереджувати агрегацію та адгезію тромбоцитів. Позитивним слід вважати і те, що L-аргінін виявляє стрес-протекторну дію в організмі і тканині печінки за рахунок зниження інтенсивності процесів вільно-радикального окиснення та підвищення активності антиоксидантних ферментів. При цьому, оксид азоту, що утворюється з L- аргініну, активує синтез цитопротекторних білків теплового шоку родини HSP-70, які належать до важливої системи захисту клітин печінки при шоковій реакції. Наведені позитивні ефекти L-аргініну посилюються за рахунок здатності його мобілізувати мікросомальну систему печінки, що супроводжується підвищенням рівня мембрано-протекторної функції [4]. Беручи до уваги наведені міркування, у відомому способі превентивної профілактики ішемічного ураження печінки, що включає призначення лікарських засобів - модуляторів синтезу оксиду азоту, відповідно до корисної моделі призначають водний розчин L- аргініну інтраперитонеально один раз на день впродовж 3 діб у дозі 25 мг/кг, причому третє введення здійснюють за 10 хвилин до формування ішемічної реперфузії. Перелік фігур. Фіг. 1. Мікроструктура печінки тварини при ішемії-реперфузії. Забарвлення гематоксилінеозином; х160. Фіг. 2. Гістологічна картина печінки тварини після профілактичного введення L-аргініну і наступній ішемії-реперфузії. Забарвлення гематоксилін-еозином; х160. Спосіб здійснюють наступним чином. Лабораторній тварині - білому щуру інтраперитонеально вводять водний розчин L-аргініну один раз на день впродовж 3 діб у дозі 25 мг/кг. Третє введення здійснюють за 10 хвилин до формування ішемічної реперфузії. Ішемію медіальної та лівої латеральної часток печінки проводять шляхом перетискання судинного пучка, що містить портальну вену і гілки печінкової артерії, атравматичним капілярним затискачем протягом 45 хв. Наприкінці експериментальної ішемії судинний затискач знімають і спостерігають за відновленням реперфузії, яка триває зазвичай 2 год. Матеріал - сироватку крові і тканину печінки беруть на біохімічні та морфологічні дослідження. Результати оцінюють за показниками активності печінкових ферментів, а саме АлАТ, АсАТ; показників перекисного окиснення ліпідів - гідроперексидів ліпідів (ГПЛ), ТБК - активних продуктів (ТБП); антиоксидантного захисту - активності супероксиддисмутази (СОД) та каталази; рівню відновленого глутатіону (GSH), вмісту нітрит (NО2 ) і нітрат (NO3 ) аніону в сироватці крові. За результатами порівнювання показників активності ферментів в контролі і досліді, даних гістологічного дослідження роблять висновки про ефективність превентивної профілактики реперфузійного ішемічного ураження печінки. Приклад 1. Білому щуру-самцю масою 180 г L-аргінін вводили інтраперитонеально 3,5 мг один раз на добу впродовж 3 днів, третє введення здійснили за 10 хв. до моделювання реперфузійного ішемічного ураження печінки. Ішемію медіальної та лівої латеральної часток 1 UA 69009 U 5 10 печінки проводили шляхом перетискання судинного пучка, що містить портальну вену і гілки печінкової артерії протягом 45 хв. Далі кровотік відновлювали на 2 години, після чого тварину декапітували під кетаміновим наркозом, а матеріал - сироватку крові і тканину печінки взяли на біохімічні та морфологічні дослідження. Результати оцінювали за показниками активності печінкових ферментів: АлАТ, AcAT; показників перекисного окиснення ліпідів - гідроперексидів ліпідів (ГПЛ), ТБК - активних продуктів (ТБП); антиоксидантного захисту - активності супероксиддисмутази (СОД) та каталази; рівню відновленого глутатіону (GSH), вмісту нітрит (NO2 ) і нітрат (NО3 ) аніону в сироватці крові. Висновки про ефективність превентивної профілактики реперфузійного ішемічного ураження печінки робили за результатами порівнювання показників активності ферментів у контрольних і дослідних тварин. Приклад 2. За запропонованим способом провели оцінку впливу L-аргініну на функціональний стан печінки в експерименті на 18 тваринах (по 6 у кожній групі). Результати наведені в таблиці. Таблиця Біохімічні показники контрольної та експериментальних груп тварин Серії дослідів Контрольна група АлАТ, (ммоль/год. х л) 0,44±0,10 АсАТ, (ммоль/год. х л) 1,63±0,12 КАТ, кат/кг 4,47±0,12 СОД, ум.од/кг 5,61±0,25 ГПЛ, ум.од. /кг 3,53±0,29 ТБК (печ.), мкмоль/кг 3,04±0,12 GSH, ммоль/кг 4,07±0,09 1,62±0,08 10,18±0,42 ΝΟ2 (сир.), мкмоль/л ΝΟ3 (сир.), мкмоль/л Ішемія-реперфузія печінки 2,35±0,09 р