Гідрохлорид 3-(31,51-дитретбутил-41- гідроксифеніл)-6,7-дигідро-5н-піроло[1,2-а]імідазолу, що має протипухлинні властивості

Реферат: 1 1 1 Гідрохлорид 3-(3 ,5 -дитретбутил-4 -гідроксифеніл)-6,7-дигідро-5Н-піроло[1,2-а]імідазолу N N HCl OH має протипухлинні властивості UA 84238 U (12) UA 84238 U UA 84238 U Корисна модель належить до органічної, фармацевтичної хімії та медицини, а саме до 1 1 1 одержання біологічно активного гідрохлориду 3-(3 ,5 -дитретбутил-4 -гідроксифеніл)-6,7дигідро-5Н-піроло[1,2-а]імідазолу, що має формулу: N N HCl OH 5 10 15 . Зазначена сполука проявляє протипухлинну активність та може бути використана при лікуванні меланоми, раку нирок та пухлини молочної залози. Перелік сучасних фармацевтичних субстанцій, що призводить до досягнення паліативного ефекту та зменшення пухлини і відповідно до клінічної ремісії, досить широкий і налічує понад 40 протипухлинних препаратів, активних при різних формах злоякісних утворень. Відомі протипухлинні препарати мають різний механізм дії і застосовуються у відповідних схемах лікування. При цьому виражений клінічний ефект складає від 20 % до 80 %. В окремих випадках ремісія складає до 2 років, а понад 10 % хворих мають ремісію понад 3 роки. Широке застосування набули детіцен, метатрексат, вінкристин, адріабластин. Лікарські засоби, що перелічені, мають необхідні лікувальні властивості, але проявляють значні побічні ефекти, що супроводжується розвитком патологічних процесів в організмі. Так, лікарський засіб детіцен є похідним імідазолу, а саме: 5-диметиламіноазо-3Н-імідазол4-карбоксамідом формули: N N N N N O NH2 20 25 30 35 . Він виявляє активність проти меланоми, лімфогранулематозу, саркоми матки, раку легенів та щитовидної залози [1]. Застосування детіцену може супроводжуватися розладами травної системи, а саме: зниженням аппетиту, стоматитом, тошнотою, блювотою, діареєю. В окремих випадках він викликає гепатонекроз, що обумовлений оклюзією внутрішньо-печінкових вен; можливі, навіть, летальні випадки. Крім вищезазначених побічних проявів, застосування препарату може викликати анемію, гранулоцитопенію, тромбоцитопенію, лейкопенію головний біль, порушення зору, судороги, астенію, тощо. При тривалому застосуванні збільшується ризик виникнення новоутворень. Цей препарат стає активним після метаболізму в печінці внаслідок вивільнення діазометану, який ковалентно зв'язується з SH-групами біомолекул. За рахунок утворення комплексів з карбонієвими іонами він блокує синтез РНК та ДНК, що, в свою чергу, призводить до зупинки мітозу клітин. В основу корисної моделі поставлена задача пошуку нової речовини, що проявляє високу протипухлинну активність - здатність пригнічувати ріст клітин раку нирки А498, RXF 393, ТК-10 молочної залози, зокрема клітин MDA-MB-468 та меланоми SK-MeL-5. Поставлена задача вирішується шляхом синтезу нової хімічної речовини - гідрохлориду 31 1 1 (3 ,5 -дитретбутил-4 -гідроксифеніл)-6,7-дигідро-5Н-піроло [1,2-а]імідазолу. Заявлену сполуку одержують з високими виходами шляхом конденсації 2-метокси-4,5дигідро-ЗН-піролу [3] з гідрохлоридом α-аміно-(3,5-дитрет-бутил-4-гідроксифеніл)-ацетофенону [4] та подальшої циклізації кип'ятінням в водному розчині (схема 1): Схема 1 1 UA 84238 U O OMe + HCl . H2N O H N OH N N . HCl OH 1 3 2 N N HCl OH 4 5 10 15 20 25 . Приклади конкретного виконання. 1 1 1 Приклад 1. Гідрохлорид 3-(3 ,5 -дитретбутил-4 -гідроксифеніл)-6,7-дигідро-5Н-піроло[1,2а]імідазолу: Суміш 9,0 г (0,03 моль) гідрохлориду α-аміно-(3,5-дитретбутил-4-гідроксифеніл)ацетофенону та 9,0 мл 2-метокси-4,5-дигідро-3Н-піролу ретельно перемішують та витримують 24 години при температурі 20 °C. Після цього реакційну суміш розтирають з етером та відфільтровують. Осад що утворився без додаткового очищення розчиняють в 100 мл води, додають 3 мл концентрованої хлоридної кислоти і кип'ятять із зворотним холодильником протягом 2 годин. Після чого суміш упарюють досуха і кристалізують із пропанолу-2. Вихід 6,59 г (63 %), т.пл.=150-152 °C. Знайдено, %: N=7,95 Cl=10,4 C20H29ClN2O. Вирахувано, %: N=8,03 Сl=10,2. Спектр ПМР (CF3COOH, TMC): 1,53 (м, 18Н, 2С(СН3)3), 3,02 (м, 2Н, 6-СН2), 3,36 (т, 2Н, 7СН2), 4,46 (с, 2Н, 5-СН3), 7,33 (с, 1Н, 2-СН), 7,41 (с, 2Н, С6Н2). Приклад 2. Для визначення протипухлинної активності гідрохлориду дослідження проведено in vitro на 60 лініях ракових клітин (лейкемії, легень, товстого кишечнику, ЦНС, меланоми, -5 яєчників, нирок, простати, молочної залози) при дії речовини в концентрації 10 моль/л за стандартною процедурою [2] оцінки мітотичної активності нових потенційних біологічно активних сполук методом флуоресцентного зафарбування (барвник - сульфородамін Б), виконаних у Національному інституті раку США (National Cancer Institute of Health, USA) в рамках Development Therapeutic Program. Результат проведених досліджень виражали у відсотках росту клітин раку у порівнянні з контролем - 5-фторурацилом. Наведені у таблиці значення показують наскільки досліджувана сполука є більш ефективною у пригніченні росту ракових клітин у порівнянні з 5-фторурацилом. -5 В умовах експерименту заявлена сполука у концентрації 10 моль/л виявила здатність пригнічувати ріст клітин раку, що охоплюють практично весь спектр онкологічних захворювань людини (таблиця). Найбільш ефективною зазначена сполука є відносно клітин меланоми SKMeL-5 (значення складає - 88,80), клітин раку нирки RXF-393 (значення складає - 53,31) та раку молочної залози MDA-MB-468 (значення складає - 21,31). Від'ємні значення свідчать не лише про пригнічення росту і поділу клітин, а й про їх знищення. 30 2 UA 84238 U Таблиця Протипухлинна активність сполуки формули 4 in vitro на лініях -5 клітин раку при дії речовин в концентрації 10 моль/л Лінії ракових клітин Лейкемія MOLT-4 ВТ-549 T-47D MDA-MB-468 NCI-H226 NCI-H522 786-0 А498 ACHN RFX393 ТК-10 UO-31 КМ12 IGROV1 OVCAR-3 OVCAR-8 SK-OV-3 SF-295 SF-539 SNB-19 LOXIMVI MDA-MB-435 SK-MEL-28 SK-MEL-5 Рак молочної залози Дрібноклітинний рак легенів Рак нирок Рак товстого кишківника Рак яєчників Рак кори головного мозку Меланома 5 10 15 20 % росту 67,13 -11,01 53,76 -21,31 56,84 -13,88 -26,11 -37,80 79,70 -53,31 -31,31 64,74 62,87 -10,66 53,02 61,79 42,91 -0,14 37,53 48,08 -1,08 -13,38 -88,80 Визначення проводили високочутливим флюорометричним методом, кількісно оцінюючи інтенсивність кольору флуоресцентного випромінювання (барвник - сульфородамін Б) через 48 год. опромінення клітини зі сполукою, що тестується. Результат проведених досліджень виражали у відсотках росту клітин раку до контролю. Використана система відбору та вивчення сполук з потенційною протипухлинною активністю in vitro базується на визначенні відсотку росту клітин пухлини (PG) під впливом сполуки, що тестується. Таким чином, запропонована нова біологічно активна сполука, яка може бути потенційним протипухлинним засобом. Джерела інформації: 1. Serrone L, Zeuli M, Sega F Μ et al: Dacarbazine-bazed chemotherapy for metastatic melanoma: Thirty year experience overview. J Exp Clin ICancer Res 19: 21-34, 2000. 2. Beverly A. Teicher, Paul A. Andrews. Anticancer drug development guide: preclinical screening, clinical. - Medical.-2004. - V. 1.-450 p. 3. Граник В.Г., Жидкова A.M., Курятов Н.С. и др. Ацетали лактамов. VII. Исследование алкилирования N-метиллактамов и лактимных эфиров диметилсульфатом//ХГС - 1973.- Ш1.-С. 1532-1535. 4. Isomura, Yasuo; Sakamoto, Shuichi; Ito, Noriki; Homma, Hiroshige; Abe, Tetsushi; Kubo, Kazuo Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 1984. - Vol.32. - № 1. - Р. 152-165. 3 UA 84238 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 1 1 1 Гідрохлорид 3-(3 ,5 -дитретбутил-4 -гідроксифеніл)-6,7-дигідро-5Н-піроло[1,2-а]імідазолу N N HCl 5 OH , що має протипухлинні властивості. Комп’ютерна верстка С. Чулій Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4