Похідне 3-тіо-1,2,4-триазолу, що проявляє туберкулостатичну дію

Реферат: Похідне 3-тіо-1,2,4-триазолу ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4H-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат формули: UA 93722 U (12) UA 93722 U N N S S N H2 C O C CH3 O CH CH3 , що проявляє туберкулостатичну дію. UA 93722 U 5 Корисна модель належить до фармацевтичної хімії, медицини та ветеринарії і може бути використана для створення протитуберкульозних засобів. Протягом останнього десятиріччя у всьому світі різко погіршується епідемічна ситуація з туберкульозу. З 1995 року в Україні досить активно поширюється це захворювання. Незважаючи на накопичений досвід у боротьбі та профілактиці цього захворювання, туберкульоз і на сьогодні продовжує бути однією з важливих медико-ветеринарно-соціальних проблем. Все більше актуальнішим стає питання своєчасного виявлення хвороби та ефективної боротьби з її збудником. Прототипом речовин, що заявляються, є препарат "Ізоніазид", формули: H N O 10 15 20 NH2 N що використовується як протитуберкульозний препарат (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - X.: Торсинг, 2002. - Т. 2. - 608 с. (с. 306-308)). Суттєві ознаки прототипу і корисної моделі, що збігаються, є такі: - в структурі прототипу і корисної моделі присутні групи C=N, С=О. - наявність в структурі нітрогенвмісних гетероциклів. Корисна модель в порівнянні з прототипом дещо активніше проявляє туберкулостатичну дію. В основу корисної моделі поставлена задача створення нових біологічно активних сполук з протитуберкульозною активністю. Це забезпечить розширення арсеналу протитуберкульозних засобів. Поставлена задача вирішується тим, що створено похідне 1,2,4-триазолу ізопропіл 2-(4феніл-5-(тіофен-2-іл)-4H-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат (сполука 1) N N S S N H2 C O C CH3 O CH CH3 25 30 35 40 45 , що проявляє туберкулостатичну дію. Сполуку 1, що заявляється, отримують шляхом взаємодії 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4H1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетатної кислоти з ізопропіловим спиртом в присутності каталітичної кількості сірчаної кислоти. Приклад 1. У круглодонну колбу, обладнану холодильником, завантажують 317 г (1 моль) 2-(4-феніл-5(тіофен-2-іл)-4H-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетатної кислоти, 1000 мл ізопропілового спирту та 20 мл сірчаної кислоти. Кип'ятять 40 годин, після чого дають охолонути та нейтралізують NaHCO3 до рН=7. Промивають дистильованою водою, відфільтровують та висушують. Вихід ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4H-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетату складає 82,30 %. Тпл. 108-110 °C нерозчинний у воді, розчинний в ізопропанолі та ДМФА. Вирахувано: С 56,80 %; Н 4,77; N 11,69 %; S 17,84 %; С17Н17N3O2S2. Знайдено: С 56,91 %, Н 4,78 %; N 11,67 %, S 17,82 %. В ІЧ-спектрі сполуки, що заявляється, наявні смуги поглинання ароматичного та тіофенового радикалів при 1497-1373 см-1, а також смуги в межах 1730-1700 см-1, що можуть вказувати на наявність СО-групи. Крім того, ІЧ спектр естеру характеризується смугами поглинання С-О-Сгрупи в інтервалі 1100-1040 см-1. Для визначення активності сполуки, що заявляється, було проведено наступне дослідження. Було проведено культивування патогенних штамів М. bovis за температури 37 °C та їх дисоціативних форм М. bovis за температури 3 °C на середовищі із рН 6,5 та 7,1, що додатково містить ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат у масових концентраціях 0,1; 0,5; 1 %, а також для порівняння ізоніазид у масових концентраціях 0,1; 0,5; 1 %. 1 UA 93722 U 5 10 15 20 25 Культивування та накопичення біомаси досліджуваних штамів М. bovis проводили на яєчному живильному середовищі, яке за складом було ідентичним стандартному, виготовленому ДП "Ветеринарна медицина" (Харків, Україна). До середовища додавали препарат ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат або ізоніазид відповідно для отримання концентрацій 0,1 %; 0,5 %; 1 %. Дослідження проводили зі встановленням двох рівнів рН 6,5 та 7,1. Висів мікобактерій 117 а варіанта, накопичених за температури культивування 3 °C, у кількості двох бактеріологічних петель проводили на скошене живильне середовище в 10 пробірок з наступною інкубацією в термостаті впродовж трьох місяців за різних температур (3; 37 °C), зі щоденним спостереженням. У виділених та накопичених мікобактерій вивчали тинкторіальні властивості, морфологічні ознаки, а також строки появи первинного росту, його інтенсивність і характер субкультури. Аналіз та оцінку колоній проводили за кількістю, величиною, формою, поверхнею, консистенцією, пігментоутворенням, прозорістю, блиском та емульгованістю у фізіологічному розчині. Тинкторіальні властивості мікобактерій визначали, готуючи мазки із колоній (культур), зафарбованих за методом Ціля-Нільсена та досліджуючи їх під імерсією мікроскопа SUNNY серії XS із цифровим мікроскопічним комплексом "Микмед-2-1600". Морфологію мікобактерій визначали за: довжиною, товщиною, формою, характером кінців клітин, зернистістю та розташуванням. Гравіметричні вимірювання виконували на лабораторних електронних аналітичних вагах моделі ESJ-200-4 (США). В результаті проведеного дослідження встановлено, що ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)4Н-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат за 1 % концентрації пригнічує ріст і розвиток патогенного штаму М. bovis, культивованого на середовищі з рН 7,1 за температури 37 °C, що свідчить про його туберкулостатичну дію (таблиця. 1). 2 UA 93722 U Таблиця 1 Характеристика культуральних властивостей 100 пасажу М. bovis, культивованих на середовищі з рН 7,1 за температури 37 °C Контроль Шорсткий наліт Контроль 7-а доба досліду Концентрація ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетату 0,1 % 0,5 % 1% За лінією посіву Ріст відсутній Ріст відсутній шорсткий наліт 14-а доба досліду Концентрація ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетату 0,1 % 0,5 % 1% Шорсткий наліт та За лінією посіву поодинокі білі колонії шорсткий наліт за лінією посіву Контроль Суцільний ріст. Гладенькі, дрібні колонії білуватого кольору Контроль Суцільний ріст. Гладенькі, дрібні колонії білуватого кольору Контроль Суцільний ріст 5 Ріст відсутній Ріст відсутній 30-а доба досліду Концентрація ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетату 0,1 % 0,5 % 1% Дрібні колонії білого кольору За лінією посіву шорсткий Без змін наліт 60-а доба досліду Концентрація ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетату 0,1 % 0,5 % 1% Зміна кольору Дещо збільшилася середовища, шорсткий кількість поодиноких Ріст відсутній наліт, з'являються мізерні дрібних колоній поодинокі колонії 90-а доба досліду Концентрація ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4Н-1,2,4-триазол-3ілтіо)ацетату 0,1 % 0,5 % 1% Значна кількість Значна кількість поодиноких дрібних поодиноких дрібних Ріст відсутній колоній колоній Оцінюючи дані, які отримані при дослідженні препарату порівняння ізоніазиду (таблиця 2) за 1 % концентрації встановлено, що він пригнічує ріст і розвиток патогенного штаму М. bovis, культивованого на середовищі з рН 7,1 за температури 37 °C, що свідчить про дещо меншу туберкулостатичну дію, ніж сполука, яка заявляється. 3 UA 93722 U Таблиця 2 Характеристика культуральних властивостей 100 пасажу М. bovis, культивованих на середовищі з рН 7,1 за температури 37 °C 7-а доба досліду Концентрація препарату ізоніазид Контроль 0,1 % 0,5 % Слизовий наліт Слизовий наліт Слизовий наліт жовтуватого кольору 14-а доба досліду Концентрація препарату ізоніазид Контроль 0,1 % 0,5 % Поодинокі гладенькі Без змін Без змін колонії 30-а доба досліду Концентрація препарату ізоніазид Контроль 0,1 % 0,5 % Численні колонії білого Поодинокі колонії Дрібні колонії білого кольору білуватого кольору кольору 60-а доба досліду Концентрація препарату ізоніазид Контроль 0,1 % 0,5 % Суцільний ріст. Дещо збільшилася Гладенькі, дрібні Дрібні колонії білого кількість поодиноких колонії білуватого кольору дрібних колоній кольору 90-а доба досліду Концентрація препарату ізоніазид Контроль 0,1 % 0,5 % Дещо збільшилася Суцільний ріст Суцільний ріст кількість поодиноких дрібних колоній 1% Ріст відсутній 1% Ріст відсутній 1% Ріст відсутній 1% Ріст відсутній 1% Ріст відсутній Таким чином, сполука, що заявляється, проявляє виражену туберкулостатичну дію та може бути використана в подальшому для створення нових протитуберкульозних засобів. 5 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Похідне 3-тіо-1,2,4-триазолу ізопропіл 2-(4-феніл-5-(тіофен-2-іл)-4H-1,2,4-триазол-3-ілтіо)ацетат формули: N N S S N H2 C O C CH3 O CH CH3 , 10 що проявляє туберкулостатичну дію. Комп’ютерна верстка С. Чулій Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4