Комбінований гіпотензивний засіб

1. Комбінований гіпотензивний засіб, що містить амлодипін, лізиноприл та допоміжні формотвірні речовини, який відрізняється тим, що до 2 C2 1 3 ситься, але має ряд побічних ефектів, серед яких головний біль, артеріальна гіпертензія, сонливість, серцебиття, гіперемія шкіри обличчя, нудота, біль у животі, шкірні алергічні реакції. Підвищення дози діючої речовини посилює небажану побічну дію препарату. Відомий комбінований засіб амлодак-АТ [2] у таблетованій формі, який містить амлодипін (5мг) у сполученні з атенололом (50мг). Останній є селективним блокатором β1-адренорецепторів, знижує частоту серцевих скорочень, серцевий викид, систолітичний і діастолітичний артеріальний тиск, має антиаритмічну дію, знижує потребу міокарду у кисні. Проте наявність атенололу у складі амлодакуАТ до побічних ефектів амлодипіну додає небажаної побічної дії, такої як, підвищення концентрації печінкових ферментів та/або білірубіну у сироватці крові, психози, діарея, псоріазоформний сип, тромбоцитопенія, порушення зору, розвиток вовчаночного синдрому тощо. Відомий гіпотензивний засіб лізиноприл [3] у таблетованій формі з вмістом діючої речовини 5мг або 10мг або 20мг. Лізиноприл є інгібітором ангіотензинперетворюючого ферменту (АПФ). Препарат знижує артеріальний систолічний та діастолічний тиск, опір ниркових судин, поліпшує кровообіг у нирках. Проте даний препарат не може бути засобом монотерапії внаслідок вузької спрямованості фармакологічної дії. Лізиноприл має широкий перелік дозозалежних побічних ефектів з боку серцевосудинної, кровоутворюючої, лімфатичної, сечостатевої, дихальної систем та кишково-шлункового тракту. Препарат може провокувати порушення функції нирок і викликати шкірні, алергічні та імунопатологічні реакції. Існує комбінований засіб лізоретик [4] у формі таблеток, який містить лізиноприл (10мг) у сполученні з тіазидним діуретиком - гідрохлортіазидом (12,5мг). Останній є сульфонамідним похідним і проявляє салуретичну гіпотензивну дію, підвищує виведення з сечею натрію та води з організму, інгібує реабсорбцію іонів натрію та хлору переважно у дистальних ниркових канальцях. Поряд з позитивною дією гідрохлортіазид, що входить до складу лізоретику, додатково підсилює негативну побічну дію відомого засобу, внаслідок чого можливі диспепсичні явища, панкреатит, шкірні прояви алергічних реакцій, порушення зору та вуглеводного обміну тощо. Підвищений вміст лізиноприлу також посилює побічний ефект препарату в цілому. В якості прототипу і препарату порівняння заявленого засобу вибрано комбінований гіпотензивний препарат гіприл-А [5] у формі таблеток, до складу якого входять по 5 мг амлодипіну і лізиноприлу. Виходячи з відомої вищенаведеної дії цих компонентів, гіприл-А призначають у комплексній терапії АГ. Проте дія відомого препарату обмежується сумарною дією його компонентів (блокатор кальцієвих каналів та інгібітор АПФ) і є недостатньою для використання гіприлу-А в якості засобу монотерапії АГ. Побічна дія гіприлу-А складається з 90235 4 відомих побічних дій його компонентів: амлодипіну та лізиноприлу. Завдання винаходу полягає у створенні нового гіпотензивного засобу, в якому завдяки введенню в якості додаткового компонента діуретика нового покоління - індапаміду - при заданому співвідношенні всіх компонентів, досягається оптимальна низькодозова комбінація активних речовин з різною спрямованістю дії, що охоплює найбільший діапазон критеріїв стратифікації ризику і дозволяє рекомендувати заявлений засіб як ефективний монозасіб при терапії АГ, який відрізняється низькою токсичністю, відсутністю виражених алергічних реакцій та є нешкідливим при тривалому застосуванні. Поставлене завдання вирішується таким чином, що комбінований гіпотензивний засіб, що містить амлодипін, лізониприл та допоміжні формоутворюючі речовини, у відповідності з винаходом додатково містить індапамід при наступному співвідношенні компонентів на одну дозовану форму (мг): амлодипш 4,5-5,5 лізониприл 4,5-5,5 індапамід 2,25-2,75 допоміжні формоутворюючі речовини решта. Винаходом передбачено, що заявлений засіб виконаний у твердій лікарській формі для перорального застосування. Згідно з винаходом допоміжні формоутворюючі речовини заявленого засобу необов'язково можуть бути вибрані з переліку: целюлоза мікрокристалічна, лактози моногідрат, крохмаль картопляний, кальцію стеарат. Якісний та кількісний вміст компонентів заявленого засобу визначений експериментальним шляхом. Згідно з винаходом до заявленого засобу введено індапамід - перший представник нового класу антигіпертензивних/діуретичних засобів-індолів. Індапамід [6] є сульфонамідним похідним, який фармакологічно близький до тіазидних діуретиків і призначається для лікування АГ. Завдяки багатобічному механізмові дії індапамід знижує артеріальний тиск, але не викликає суттєвого підвищення діурезу. Препарат діє на рівні нирок і судин. Судинний механізм дії обумовлений зниженням скорочуваності гладких м'язів у зв'язку з впливом на трансмембранний іонний обмін (зокрема, зниженням внутрішньоклітинного транспорту кальцію) та стимуляцією синтезу простагландіну Е2, який має судиннорозширюючу і гіпотензивну дію. Препарат проявляє помірний діуретичний та салуретичний ефект. Проте поряд з позитивними властивостями індапамід має досить широкий перелік побічних ефектів: вертиго, парестезії, головний біль, втомлюваність, слабкість, болі у м'язах, нудота, сухість у роті, алергічні дерматологічні реакції тощо. Вибір індапаміду в якості додаткового діючого компонента заявленого засобу обумовлений його здатністю у новій сукупності компонентів підсилювати гіпотензивну дію амлодипіну та лізиноприлу, не мати негативного впливу на метаболізм ліпідів і 5 вуглеводний обмін, сприяти неочевидному зниженню токсичності та побічної дії заявленого засобу в цілому. Заявлена комбінація трьох антигіпертензивних засобів є раціональною і дозволяє підвищити ефективність лікування за рахунок використання різних механізмів дії, дозволяє досягти потенціювання дії компонентів, збільшення тривалості дії засобу та зниження частоти побічних ефектів і токсичності як за рахунок неочевидної взаємодії, так і в результаті використання кожного з компонентів у низьких дозах. Згідно з винаходом амлодипін та лізиноприлу використовують у дозі [4,5-5,5]мг на одну дозовану форму. Переважно 5,0мг. Зменшення вмісту цих компонентів від 4,5мг на прийом призводить до зниження фармакологічної дії, а збільшення дози понад 5,5мг може призвести до посилення сумарної побічної дії та є нераціональним з економічних міркувань Заявлений засіб може містити індапамід у кількості [2,25-2,75]мг на дозовану форму. Переважно 2,5мг. Така добова доза є необхідною і достатньою для досягнення вираженого і пролонгованого гіпотензивного та слабкого діуретичного ефектів засобу. Окремі компоненти засобу відомі і дозволені до використання у фармації та медицині. Проте заявлене сполучення вибраних компонентів з відповідним кількісним вмістом в одній лікарській формі є новим, не відомим з джерел інформації. Авторами доведено неочевидний ефект мінімізації токсичності та побічної дії заявленого засобу при поєднанні у ньому компонентів, кожен з яких має негативну побічну дію. Доклінічні дослідження заявленого засобу довели, що він є малотоксичним препаратом, в умовах гострого і хронічного досліду не викликає патоморфологічних змін у внутрішніх органах дослідних тварин, не має місцевої подразнюючої та алергізуючої дії, проявляє виражену антигіпертензивну та протиаритмічну активність і може безпечно застосовуватися протягом тривалого часу. Заявлений засіб може бути виконаний у будьякій твердій дозованій формі для перорального застосування з фіксованим вмістом ефективних добових доз діючих компонентів. Це забезпечує зручність вживання лікувального засобу, запобігає передозуванню, дозволяє здійснювати монотерапію АГ. Вибір допоміжних формоутворюючих речовин здійснюють, виходячи з умов їх фармацевтичної придатності, безпечності, відсутності взаємодії між собою та з діючими речовинами, здатності сприяти підвищенню біодоступності засобу, забезпечення очікуваних фізико-хімічних та органолептичних властивостей лікарської форми, її стабільності та терміну зберігання. 90235 6 Заявлений засіб у твердій лікарській формі для перорального застосування (таблетки, капсули тощо) може бути одержаний за стандартними технологіями у відповідності з вимогами ДФУ. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. Для одержання заявленого засобу у формі таблеток відважили діючі речовини: по 5г амлодипіну у формі амлодипіну бензилату і лізиноприлу у формі лізиноприлу дигідрату та 2,5г індапаміду. Додали допоміжні речовини: 14,0мг целюлози мікрокристалічної, 84,1г лактози моногідрату (67,3г М80, 16,8г – М200)3 28г крохмалю картопляного та 1,4 г кальцію стеарату. Збільшення маси компонентів на технологічні втрати не наведено. З ретельно перемішаної таблеткової маси методом прямого пресування на таблетковому пресі одержали 1000 таблеток масою 140мг наступного складу (мг): амлодипін 5,0 лізониприл 5,0 індапамід 2,5 целюлоза мікрокристалічна 14,0 лактози моногідрат 84,1 крохмаль картопляний 28,0 кальцію стеарату 1,4. Одержані таблетки за своїми фізико-хімічними та ергономічними властивостями відповідають вимогам ДФУ. Приклад 2. Гостру токсичність заявленого засобу при одноразовому внутрішньошлунковому введенні вивчали на двох видах статевозрілих тварин - 42 білих мишах масою 23-37г та 9 білих щурах масою 200-340г. У дослідах використовували порошкоподібний склад всіх компонентів таблетки заявленого засобу у вигляді 0,1-20% завису на 3% свіжоприготованому крохмальному слизу. Одержаний слиз через зонд вводили до шлунку мишей у зростаючих дозах від максимально переносимої до абсолютно смертельної. За показником загибелі мишей визначали максимально переносиму, середньосмертельну (ДЛ50) та абсолютно смертельну (ДЛ100) дозу. Вивчення гострої токсичності заявленого засобу на щурах при внутрішньошлунковому введенні проводили за експресним методом І.В.Саноцького [7], який дозволяє провести дослідження на обмеженій кількості тварин. При цьому кожна зі зростаючих доз засобу вводиться одному щуру одноразово внутрішньошлунково. За ДЛ50 приймається найменша доза, що викликає загибель тварин. Великі дози, які перевищували максимальний об'єм рідини для внутрішньошлункового введення мишам (0,5мл) та щурам (5мл), вводили дрібно з інтервалом 1 год. Дані досліду наведенні у таблиці 1. 7 90235 8 Таблиця 1 Дослідження гострої токсичності заявленого засобу Умови досліду Миші Щурі Токсикометричні параметри Максимально-переносима доза, г/кг ДЛ50, г/кг 0,05 1,3 5,00 6,0 У відповідності з ДЛ5о заявлений засіб відноситься до IV класу токсичності для мишей (ДЛ5о в інтервалі 0,5-5,0г/кг), тобто до малотоксичних речовин, і до V класу токсичності для щурів (ДЛ5о в інтервалі 5,0-15,0г/кг), тобто до практично нешкідливих речовин, згідно класифікації Сидорова К.К. [8]. Дослід свідчить про наявність у тварин видової чутливості до заявленого засобу (миші>щури), що є підставою для безпечної екстраполяції одержаних даних на більш високоорганізованих тварин і на людину. Проведено також вивчення хронічної токсичності заявленого засобу у дослідах на 20 щурах протягом 6 місяців. В умовах 180-денного введення заявленого засобу загальний стан, у тому числі поведінка, дослідних тварин не змінився. Не виявлено негативних реакцій з боку центральної нервової системи. Проведені після завершення досліду морфологічні дослідження внутрішніх органів дослідних тварин свідчать про відсутність будьяких значних відхилень від норми. Дослідження встановили позитивний вплив заявленого засобу на стан печінки, відсутність порушень функціонального стану нирок, відсутність змін з боку серцево-судинної системи, відсутність гематоксичної дії. ДЛ100, г/кг 3,5 Термін загибелі тварин 1-24 години 12-24 години Таким чином, експериментально доведено низьку токсичність заявленого засобу, як при короткому, так і при тривалому застосуванні, в той час, як кожен з активних компонентів, що входить до складу заявленого засобу, має широкий спектр побічних ефектів. Приклад 3. Специфічну антигіпертензивну дію заявленого засобу у терапевтичній дозі 4мг/кг вивчали на 18 щурах лініїWАО масою 200-350г. В якості препарату порівняння було обрано гіпотензивний засіб гіприл-А у дозі 0,6мг/кг. Модельну гіпертензію викликали внутрішньочеревною ін'єкцією розчину кофеїн-бензоату натрію у дозі 24мг/кг. Дослідних тварин було поділено на групи: контроль та дві групи тварин, які до введення кофеїн-бензоату натрію одержали відповідно заявлений засіб та препарат порівняння. Артеріальний тиск (AT) вимірювали шляхом реєстрації вихідного пульсу на хвостовій артерії щурів у момент перетискання судин та у момент відновлення кровотоку, що відповідає рівню систолічного артеріального тиску. Результати досліду наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Вивчення антигіпертензивної дії заявленого засобу у порівнянні з контролем та референс-препаратом Група Контроль Гіприл-А Заявлений засіб Вихідний фон 106,67±6,05 110,83±4,92 111,67±4,08 Артеріальний тиск, мм.рт.ст. Після введення кофеїн-бензоату натрію 155,83±4,91* 128,33±8,16*'** 130,83±6,64*'** Примітки: * - Р≤0,05 достовірно у порівнянні з вихідним фоном. ** - Р≤0,05 достовірно у порівнянні з контролем. Введення кофеїн-бензоату натрію тваринам контрольної групи викликало статистично достовірне збільшення AT у порівнянні з вихідним фоном на 46%. У тварин, які попередньо одержали заявлений засіб або препарат порівняння, ін'єкція кофеїнбензоату натрію викликала достовірне зростання AT на 16-17%. Дані досліду свідчать, що заявлений засіб має виражену антигіпертензивну дію на рівні препарату порівняння. Приклад 4. Специфічну антиаритмічну дію заявленого засобу вивчали на 30 щурах лінії WAG масою 170210г на моделі хлоридкальцієвої аритмії шляхом внутрішньочеревного введення 10% розчину хлориду кальцію у дозі 200мг/кг. Після введення аритмогену відмічали на електрокардіограмі (ЕКГ) 9 90235 частоту серцевих скорочень (ЧСС), екстрасистоли, фібриляції шлуночків та їх зміни після введення досліджуваних препаратів. Антиаритмічну дію зая 10 вленого засобу у дозі 4мг/кг вивчали у порівнянні з амлодипіном (0,3мг/кг) та гіприлом-А (0,6мг/кг). Дані досліду наведені у таблиці 3. Таблиця 3 Вивчення антиаритмічної дії заявленого засобу у порівнянні з контролем та референс-препаратами Вихідний фон Група R,MB ЧСС, уд./хв. R, мВ 5,50±0,54 2,50±0,54 2,33±0,75 4,50±1,04 ЧСС, уд./хв. 335,00±35,07 350,00±45,16 355,00±44,15 300,00±26,83 Контроль Амлодипін Гіприл-А Заявлений засіб Після введення CaCl2 260,00±70,14* 345,00±31,46 3500,00±48,98 315,00±62,20 8,00±1,54** 2,33±0,51 3,50±0,83 4,00±0,63 Примітки: * - достовірність різниці ЧСС у порівнянні з вихідним фоном (Р≤0,050. ** - достовірність різниці вольтажу зубця R у порівнянні з вихідним (Р≤0,05). Аналіз даних табл. 3 свідчить, що при введенні хлористого кальцію у тварин контрольної групи у порівнянні з вихідним фоном виникає статистично достовірне зменшення ЧСС на 22,4% та збільшення вольтажу зубця R на 45%. При введенні хлористого кальцію на фоні обох препаратів порівняння та заявленого засобу не відбувається достовірних змін ЧСС і вольтажу зубця R. Це свідчить про те, що заявлений засіб має виражену антиаритмічну дію на рівні референспрепаратів. Приклад 5. Специфічну діуретичну дію заявленого засобу оцінювали на моделі хлорид-натрієвого діурезу (0,9% розчин натрію хлориду внутрішньошлунково 5мл/100,0г маси щура) у порівнянні з ефектом гіприлу-А на 15 щурах лінії WAG масою 170-220г. Дані досліду наведенні у таблиці 4. Таблиця 4 Вивчення діуретичної дії заявленого засобу за показниками добового діурезу у порівнянні з контролем та референс-препаратом Показники Об'єм сечі, мл рН Питома вага, г/л Креатинін сечі, ммоль/доб. Сечовина сечі, ммоль/л Білок, г/л Креатинін крові, ммоль/доб. Сечовина крові, ммоль/л Контроль 9,50±1,00 6,26±0,35 1,019±0,004 6,65±0,52 352,43±50,35 0,21±0,08 0,03±0,004 4,12±0,58 Групи тварин Заявлений засіб 9,26±0,50 5,98±0,34** 1,019±0,002 6,66±0,62** 360,59±61,18 0,19±0,02 0,03±0,007 4,20±0,83 Гіприл-А 9,70±0,86 6,70±0,18* 1,019±0,001 5,67±0,60* 394,78±15,52 0,26±0,06 Примітки: * - Р≤0,05 у порівнянні з контролем. ** - Р≤0,05 у порівнянні з введенням гіприлу-А. При внутрішньошлунковому введенні заявленого засобу у дозі 4мг/кг не спостерігається збільшення добового діурезу у порівнянні з показниками контрольної групи та гіприлом-А. Показники, що характеризують функціональний стан нирок, при введенні заявленого засобу залишалися у межах видової норми, достовірно не відрізняючись від контрольних. Відсутність змін з боку креатиніну і сечовини у крові свідчить про збереження видільної функції нирок у нормі. Приклад 6. Можливу алергізуючу дію заявленого засобу вивчали стандартним шляхом, використовуючи комбінований (пероральний і нашкірний) спосіб сенсибілізації. Досліди проведені на 18 мурчаках масою 610700г. Тварини дослідних груп одержували заявлений засіб у формі завису у 3% крохмальному слизу у дозі відповідно 4мг/кг та 40мг/кг (у 10 разів більше за терапевтичну дозу). Контрольні тварини 11 90235 одержували 3% крохмальний слиз. За критерій прийняті показники загального стану тварин. Дослід тривав 30 днів. Паралельно проводили нашкірну сенсибілізацію шляхом втирання заявленого засобу у вистрижену ділянку шкіри на лівому боці 12 тварин. Критерієм сенсибілізації слугували шкірні прояви, що оцінювалися за бальною шкалою від 0 (немає реакції) до 5 (еритема, інфільтрація, виразки). Дані досліду наведені у таблицях 5, 6. Таблиця 5 Визначення можливої сенсибілізуючої дії заявленого засобу при внутрішньошлунковому введенні Групи тварин Контрольна група Заявлений засіб, 4мг/кг Заявлений засіб, 40мг/кг Вихідні данні 10-й день 15-й день 30-й день Вихідні данні 10-й день 15-й день 30-й день Вихідні данні 10-й день 15-й день 30-й день Показники загального стану тварин Температура у Температура шкіМаса, г прямій кишці, °С ри, °С 508,3±40,2 38,0±0,6 36,9±0,6 530,8±28,5 38,7±0,4 37,8±0,4* 540,8±15,6 39,3±0,3* 37,3±0,04* 545,0±16,7 38,3±0,6 36,7±0,7 533,3±113,5 37,9±0,6 36,9±0,9 550,8±97,3 37,9±0,5** 36,9±0,4** 542,5±100,2 39,1±0,4* 37,7±0,04** 540,8±109,1 39,1±0,3*'** 37,4±0,7 497,5±106,1 38,7±0,5 38,0±0,5** 485,8±100,3 38,8±0,5 38,2±0,2 507,5±95,2 39,0±0,5 38,0±0,2** 549,1±89,6 39,2±0,5** 38,0±0,7** Примітки: * - Р≤0,05 з вихідними даними. ** - Р≤0,05 з контролем. Таблиця 6 Визначення можливої сенсибілізуючої дії заявленого засобу за оцінкою шкірних проб Групи тварин Термін тестування Метод тестування Контроль Заявлений засіб, 4мг/кг Заявлений засіб, 40мг/кг Б 10-й день 15-й день 30-й день Внутрішньошкірний Внутрішньошкірний Внутрішньошкірний А А Б А Б 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Примітки: А - кількість тварин з позитивною реакцією. Б - інтенсивність реакції у балах. Аналіз одержаних даних свідчить про відсутність алергічних реакцій при застосуванні заявленого засобу протягом тривалого часу як у терапевтичній дозі, так і при передозуванні у 10 разів. Важливо відмітити, що кожен з активних компонентів (амлодипін, лізиноприлу, індапамід), що входить до складу заявленого засобу, у переліку побічних ефектів має алергічну дію, в той час, як заявлена композиція у дослідах на тваринах не викликає алергічних реакцій. Таким чином, заявлено новий комбінований гіпотензивний засіб, що містить оптимальне сполучення компонентів з антигіпертензивною, антиаритмічною та діуретичною дією і може бути рекомендований як засіб монотерапії при лікуванні АГ. Доклінічними дослідженнями доведено виражену ефективність заявленого засобу при низьких 13 90235 дозах компонентів, його низьку токсичність, відсутність алергізуючої дії, придатність до безпечного застосування протягом тривалого часу. Заявлений засіб може бути одержаний на хіміко-фармацевтичному підприємстві за типовою технологією з використанням стандартного обладнання. Джерела інформації: 1. Компендиум. Лекарственные препараты 2008. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2008. T.I, С.Л-80, Т.И, С.С-11. 2. Компендиум. Лекарственные препараты 2008. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2008. T.I, С.Л-79, Т.И,С.С-18. 3. Компендиум. Лекарственные препараты 2008. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко 14 А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2008. T.I, С.Л791-792, Т.И, С.С-138. 4. Компендиум. Лекарственные препараты 2008. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2008. T.I, С.Л792, Т.П,С.С-61. 5. Компендиум. Лекарственные препараты 2007. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2007. T.I, С.Л354-Л-356. 6. Компендиум. Лекарственные препараты 2008. В двух томах. Под ред. В.Н.Коваленко, А.П.Викторова. - Киев: «Морион», 2008. T.I, С.Л548-Л-549. 7. Саноцкий И.В. Токсикометрия. Москва, 1980, - С.56-57 8. Сидоров К.К. Токсикология новых промышленных химических веществ - М.: Медицина, 1973. - Вып.3. - 47с. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601