Відновлення тонічної секреції естрогену з яєчників для довгочасних схем лікування

1 Способ терапевтического лечения состояния зависимости от гонадостероидов у млекопитающего путем снижения поступления эстрогена посредством введения антагониста GnRH в количестве, эффективном для торможения пролиферации эндометрия, но недостаточном для снижения эндогенного эстрогена до кастрационного уровня 2 Способ лечения по п 1, в котором млекопитающим является менструирующая женщина 3 Способ по п 1, в котором антагонист GnRH вводят в количестве, эффективном для обеспечения в течение 24 часов среднего уровня эстрадиола в сыворотке от 30 до 50пг/мл 4 Способ по п 3, в котором антагонист GnRH вводят в количестве, эффективном для обеспечения в течение 24 часов среднего уровня эстрадиола в сыворотке от 30 до 45пг/мл 5 Способ лечения по п 1, в котором дозу вводят многократно в кумулятивном количестве, эффективном для торможения пролиферации эндометрия ткани, но недостаточном, чтобы существенно ускорить разрежение кости, связанное с продолжительным недостатком эстрогена 6 Способ лечения по п 1, в котором дозу вводят многократно в кумулятивном количестве, эффективном для торможения пролиферации внутриматочной ткани, но недостаточном, чтобы усилить факторы риска для сердечно-сосудистой системы, СХЕМ связанные с продолжительным недостатком эстрогена 7 Способ лечения по п 1, в котором дозу вводят многократно в кумулятивном количестве, эффективном для торможения пролиферации внутриматочной ткани, но недостаточном, чтобы вызвать ощущение приливов, связанное с продолжительным недостатком эстрогена 8 Способ снижения пролиферации эндометрия у менструирующей женщины, не вызывающий снижения эндогенного эстрогена до кастрационного уровня, включающий стадии назначения схемы введения антагониста GnRH в количестве, эффективном для торможения пролиферации эндометрия у менструирующей женщины и обеспечения среднего уровня эстрадиола в сыворотке в течение 24 часов от 30 до 50пг/мл 9 Способ по п 8, в котором антагонист GnRH вводят в количестве, эффективном для обеспечения в течение 24 часов среднего уровня эстрадиола в сыворотке от 30 до 45пг/мл 10 Способ снижения пролиферации эндометрия у менструирующей женщины, не вызывающий снижения эндогенного эстрогена до кастрационного уровня, включающий стадии введения дозы антагониста GnRH в количестве, эффективном для торможения пролиферации эндометрия у менструирующей женщины и обеспечения среднего уровня эстрадиола в сыворотке в течение 24 часов от 30 до 50пг/мл 11 Способ по п 10, в котором уровень эстрадиола в сыворотке составляет от 35 до 45пг/мл 12 Способ снижения симптомов состояния, зависящего от гонадостероидов, у менструирующей женщины, не вызывающий снижения эндогенного эстрогена до кастрационного уровня, включающий стадии назначения схемы лечения антагонистом GnRH в количестве, эффективном в торможении пролиферации эндометрия у менструирующей женщины и обеспечения среднего уровня эстрадиола в сыворотке в течение 24 часов от 30 до 50 п г/мл 13 Способ по п 12, в котором уровень эстрадиола в сыворотке составляет от 35 до 45пг/мл 14 Способ снижения симптомов состояния зависимости от гонадостероидов у менструирующей женщины, не вызывающий снижения эндогенного о (О ю 51627 эстрогена до кастрационного уровня, включающий этом млекопитающем, в результате которого аместадии введения дозы антагониста GnRH в колинорея указывает на адекватное подавление вырачестве, эффективном для торможения пролифеботки эндогенного эстрогена рации эндометрия у менструирующей женщины и 18 Способ по п 17, в котором дозировку вводимообеспечения среднего уровня эстрадиола в сывого антагониста GnRH меняют после проведения ротке в течение 24 часов от 30 до 50пг/мл теста на введение прогестерона и на млекопитающем проводят дополнительный тест на введе15 Способ по п 14, в котором уровень эстрадиола ние прогестерона в сыворотке составляет от 35 до 45пг/мл 16 Способ определения того, является ли сни19 Способ по п 18, в котором уровень дозировки женная эстрогенная среда у отдельного млекопименяют его повышением тающего таковой, в которой концентрация эстра20 Способ по п 18, в котором уровень меняют диола снижена до оптимального уровня, понижением дозировки соответствующего терапевтическому лечению 21 Способ по п 18, в котором последовательность состояния зависимости от гонадостероидов у млеизменения дозировки и проведения дополнителькопитающего при отсутствии снижения эндогенноного теста на введение прогестерона повторяют го эстрогена до кастрационного уровня посредстболее одного раза вом введения антагониста GnRH этому 22 Способ по п 16, в котором состоянием зависимлекопитающему с заданным уровнем дозировки, мости от гонадостероидов является эндометриоз включающий титрование дозировки антагониста 23 Способ по п 16, в котором состоянием зависи17 Способ по п 16, в котором титрование включамости от гонадостероидов является лейомиома ет проведение теста на введение прогестерона на Это частичное продолжение заявки под серийным номером 08/279593, поданной 22 июля 1994г Эндометриоз представляет собой эктопическое наличие желез и стромы эндометриального типа на участках вне матки Это эктопическое проявление эндометриальной ткани часто образует кисты, содержащие измененную кровь Это состояние приводит к изнуряющей боли у миллионов женщин во всем мире и, в частности, имеет место вместе с месячной пролиферацией внутриматочной ткани Часто такое состояние бывает на протяжении всей жизни и иногда с ним связывают бесплодие Эндометриоз можно лечить разнообразными лекарственными средствами, но ни одно из этих средств не является достаточно безопасным и эффективным в течение длительного срока лечения свыше шести месяцев или больше Возможно самым традиционным лечением с видимым результатом является введение прогестина инъекцией, перорально или в комбинации с оральными контрацептивами Однако, длительное назначение прогестинов связано с рядом нежелательных побочных действий, сомнительной эффективностью и не получило одобрения соответствующих органов в США Синтетический стероид, полученный из этистерона, а именно, 17-а-прегна-2,4-диен-20ино[2,3-с!]-изоксазол-17-ол, известный так же, как даназол и зарегистрированный под товарным знаком Оапосппе(Данокрин), оказался эффективным средством в лечении эндометриоза, обеспечивающим гипоэстрогенную среду К сожалению, это лекарственное средство также обладает многими андрогенными побочными действиями Кроме вазомоторных приливов из-за эстрогенной недостаточности, он является причиной излишнего веса, мышечных спазмов, атрофии молочных желез, приливов, перепадов настроения, избыточной жировой секреции кожи, депрессии, отеков, угрей, утомления, гирсутизма, изменений в либидо, головных болей, сыпи и огрубления голоса Одним из наиболее эффективных видов лечения эндометриоза является назначение агониста гормона, высвобождающего roHaflOTponnH(GnRH), для подавления гипофизарной секреции гонадотропина и тем самым стимулирования состояния обратимой псевдоменопаузы, т е назначение дозы, постепенно снижающей секрецию Хотя индивидуальная ответная реакция различна, эндометриотические поражения, связанные с эндометриозом, обычно быстро претерпевают обратное развитие и уменьшаются в размере уже в течение трех месяцев после начала лечения По прекращении лечения боль часто возвращается и эндометриоз появляется вновь в течение нескольких месяцев после возврата нормальных менструальных циклов Лекарственное средство можно также применять для лечения фиброзных опухолей(лейомиом) Основным недостатком этой длительной терапии является ряд побочных действий, вызванных продолжительным и значительным пониженным содержанием эстрогена или состоянием псевдоменопаузы, индуцированным большим недостатком эстрогена, а именно, приливы, остеопороз и потеря защиты сердечно-сосудистой системы эстрогеном Опять же у разных пациентов это происходит по-разному, но остеопороз в основном начинает проявлять себя после 3 месяцев лечения и иногда у наиболее уязвимых пациентов его симптомы становятся очень значительными после приблизительно 6 месяцев лечения Этот побочный эффект остеопороза абсолютно неприемлем с точки зрения риска-преимуществ - предполагаемая продолжительность жизни после того, как женщина в постклимактерическом возрасте переносит перелом шейки бедра из-за остеопороза, составляет только около 3, 2 лет Из-за этого 51627 ста GnRH представляется возможным поддерживать тонус секреции эстрадиола яичниками на умеренном уровне, который достаточно снижен, чтобы контролировать гинекологические проблемы, вызванные эстрогеном, такие, как эндометриоз, но все же достаточно высок, чтобы избежать длительных осложнений из-за явного недостатка эстрогена Существует необходимость обеспечить дозу и/или схему лечения антагонистом GnRH, которые обеспечат оптимальный уровень концентрации эстрогена в сыворотке Как указывалось в статье Gordon et al выше, ответная реакция на конкретный антагонист GnRH различна у разных пациентов Поэтому дозировку антагониста GnRH следует определять у каждого больного, чтобы достичь нужной степени секреции эстрогена Следовательно, необходимо также найти удобный способ определения установления соответствующего уровня содержания эстрогена Надо сказать, что имеется много схем лечения, в которых желательно поддерживать тоническую секрецию эстрогена яичниками Такими примерами являются лечение эндометриоза и лейомиом Существует уровень агента, который подходит для безопасного(т е не возникает побочных действий в менопаузе, таких, как разрежение кости) и эффективного(т е лечится состояние заболевания) долгосрочного терапевтического лечения состояний, зависимых от гонадостероидов Настоящее изобретение обеспечивает такой уровень и способ его установления На фиг 1 показано, что остаточная секреция эстрогена яичниками зависит от доз антагониста В научной литературе также описано потенциGnRH и что степень торможения стабилизируется альное применение антагонистов гормона высвов течение 7-10 дней после начала лечения бождения гонадотропина, которое также эффективно в клиническом лечении эндометриоза и На фиг 2 показано, что популяции менструилейомиом матки Например, Gordon et al в Supрующих приматов можно титровать до нужного pression of Ovarian Estradiol Secretion by a Single уровня частичного торможения секреции эстрогеInjection of Antide in Monkeys Folhcular Phase Inна в яичниках termediate, Sustained and Reversible Actions, J Clm, Содержание изобретения Endocnn Metab, 731262 (1991), исследовали Изобретение относится к лечению широкого действие антагониста GnRH антида, и авторы спектра состояний, зависящих от гонадосделали вывод, что антагонист при введении одстероидов, таких, как эндометриоз, лейомиомы ной достаточной дозы может вызвать мгновенное матки, предменструальный синдром и дисфунки устройчивое торможение системы гипофизциональное маточное кровотечение Более коняичники Полученная гипоэстрогенная среда была кретно, изобретение относится к эффективному и достаточной, чтобы ожидать, что лечение пациенбезопасному лечению этих состояний, зависящих тов обеспечит контроль различных состояний гоот гонадо-стероидов, путем назначения схемы надо-стероидной зависимости, таких, как эндолечения антагонистом GnRH, который эффектиметриоз и лейомиома матки, без задержки и вен в значительном торможении пролиферации потенциальных последствий знакомых приливов и внутриматочной ткани у менструирующей женщиснижений в ответ на лечение агонистом GnRH ны, но неэффективен в прекращении выработки Однако, авторы также указали, что было бы очень эстрогена, то есть, неэффективен, чтобы значижелательно получить препарат, который обеспетельно индуцировать кастрационный уровень энчит больший контроль биодоступности и меньшую догенного эстрогена Другие предпочтительные индивидуальную реакцию на лечение варианты изобретения направлены на дозы антагониста GnRH, которые обеспечивают эффективОснованием для антагонистического подхода ные количества для торможения пролиферации настоящего изобретения является тот факт, что в внутриматочной ткани у менструирующей женщиотличие от агонистических продуктов, которые ны, но которые неэффективны, чтобы значительполностью тормозят подавление регуляции сисно задержать выработку эндогенного эстрогена В темы рецептора GnRH, антагонист монополизирунаиболее предпочтительных вариантах изобретеет рецепторы GnRH конкуретной занятостью, досния предлагаемая схема лечения и дозы обеспетигая таким образом других степеней торможения, чивают достаточную выработку эндогенного эсткоторые зависят от дозы рогена, чтобы вырабатывать и поддерживать Поэтому при соответствующей дозе антагонипобочного действия Управление по питанию и лекарственным средствам США(УПЛ) не предписывает назначение никаких аналогов гормона, высвобождающего гонадотропин, после шести месяцев общего лечения Другими словами, по настоятельному требованию УПЛ лекарство нельзя назначить повторно после перерыва Таким образом, основное опасение в лечении агонистом GnRH заключается в том, что длительное гипоэстрогенное состояние у женщин репродуктивного возраста может привести к кумулятивным побочным действиям истощения эстрогена, особенно ускоренному разрежению костной ткани, что повышает риск возникновения остеопороза и перелома костей Пациенты, получающие дозу агониста GnRH, "регулирующую снижение", имеют очень заниженные уровни эстрогена для борьбы с постклимактерическим состоянием Эта обеспокоенность послужила мотивом для клинических исследований схем "компенсации", основанных на "гипотезе пороговой величины эстрогена", по которым пациентов с клинически значительными фиброзами матки лечили агонистом GnRH в сочетании с малой компенсационной дозой гормона эстрогена-прогестина, последний давали по схеме лечения, приближающейся к знакомой схеме лечения в постклимактерическом периоде Целью было достижение достаточного снижения эндогенной секреции эстрогена яичниками посредством агониста вместе с экзогенным пополнением эстрогена-прогестина в небольшой дозе с тем, чтобы не потерять клинические преимущества изза схемы лечения с "компенсацией" гормона 51627 8 концентрацию эстрадиола в сыворотке в пределах секреции эстрогена из яичников выше самого низот около 30 до 50, а лучше от около 35 до 45пг/мл кого кастрационного(менопаузо-подобного) уровЭто изобретение также предлагает способ опня, обеспечивая таким образом благоприятное ределения того, является ли гипоэстрогенная воздействие среда у отдельного млекопитающего таковой, в Этот подход превосходит компенсационное которой концентрация эстрадиола была снижена лечение эстрогеном-прогестином, поскольку схему до оптимального уровня, соответствующего тералечения антагонистом GnRH титруют до индивипевтическому лечению состояния, вызванного дуальных потребностей, которые выявляют как по гонадо-стероидами у этого лица, путем введения остаточным уровням эстрогена в крови, так и по антагониста GnRH этому лицу в данной дозе, усфакту, является ли внутриматочная пролифератановленной титрованием, например, проведениция достаточной, чтобы снять кровотечение после ем теста на введение прогестерона этому лицу краткого курса терапии прогестероном В соответствии с настоящим изобретением В общем, эта технология дает практический предлагается схема лечения или доза антагониспособ, при котором уровни эстрогена достаточно ста GnRH, которая эффективна в торможении низки, чтобы достичь положительных результатов пролиферации внутриматочной ткани у менструив лечении от сниженного снабжения эстрогеном, рующей женщины, но неэффективна в значительно достаточно высоки, чтобы свести к минимуму ной задержке выработки эндогенного эстрогена или избежать последствий длительного недостатХотя количество антагониста GnRH, предусмотка эстрогена ренное в схеме, и доза могут меняться в зависиВ определении соответствующей дозировки, мости от конкретных субъектов, как правило, схеважно знать, что простое измерение уровня секму лечения и дозу регулируют таким образом, реции эстрадиола может не дать достаточной инчтобы достичь на протяжении 24 часов содержаформации Сейчас уже известно, что у разных ния эстрадиола в сыворотке порядка от около 30 людей в ответ на данную дозу антагониста GnRH до 50, а лучше от около 35 до 45пг/мл различен не только уровень секреции эстрадиола, но и дозировка антагониста, которого достаточно, Было высказано предположение, что снижечтобы вызвать аменорею у субъекта, также разние уровня эстрадиола в сыворотке дает нужный лична для разных людей Поэтому было выявлеэффект торможения пролиферации внутриматочно, что определение дозировки должно сопровожной ткани у менструирующей женщины Однако, даться титрованием дозы антагониста GnRH, существует и параллельная проблема, когда эстнапример, посредством применения теста на вверогена недостаточно, чтобы смягчить, избежать дение прогестерона или защитить от менопаузо-подобных симптомов, связанных с кастрационным уровнем эстрогена Соответственно, согласно изобретению, конНапример, когда уровень эндогенного эстрогена троль состояния зависимости от гонадопадает ниже приблизительно 15пг/мл, возникают стероидов, достигают введением антагониста побочные действия истощения эстрогена Чтобы GnRH субъекту и затем титрованием антагониста избежать этих побочных действий, после истощедо выбранной дозы и/или схемы лечения, с тем, ния эндогенного эстрогена до сих пор эстроген чтобы можно было достичь оптимальной гипоэствводили вновь, проводили так называемую "комрогенной среды пенсирующую терапию" Только в настоящем изоГормон, высвобождающий гонадотропин, бретении предлагается лечение состояний завипредставляет собой небольшой полипептид, высимости от гонадо-стероидов с поддержанием рабатываемый в гипоталамусе и иногда его назыуровней эндогенного эстрадиола в сыворотке по вают гонадотропным высвобождающим гормоном, меньшей мере в пределах около 30пг/мл, не полагормоном, высвобождающим лютеинизирующий гаясь на "компенсацию" или дополнительное ввегормон, GnRH или LHRH В настоящем изобретедение эстрогена нии используют те аналоги или пептомиметики этого полипептида, которые являются антагониКлиническое лечение некоторых гинекологистами ческих заболеваний, которые зависят от эстрогена, таких, как эндометриоз, более сложно, чем Примеры антагониста гормона высвобожделечение простого недостатка эстрогена у пациенния гонадотропина можно найти в патентах США 4 та В действительности, причиняющий боль очень 409 208, 4 547 370, 4 565 804, 4 569 927 и 4 619 сниженный уровень эстрогена в течение продол914, 5 198 533 и WO 89/01944, раскрытия которых жительного периода не только заставляет пациенвключены сюда ссылкой Примеры таких антаготов переносить неудобство симптомов недостатка нистов включают Азалин В, Антид(декапептид, эстрогена, но и создает риск ускорения разрежепредставленный формулой D-Ac-D-2-Nal1ния кости, а также возрастание факторов риска DpCIPhe2-D-3-Pal3-Ser4-Nil_ys5-D-Nicl_ys6-Leu7-ILys8для сердечно-сосудистой системы, что также свяPro9-D-Ala10) [Ac-D4CIDPhe1, D4CIDPhe2, DTrp3, зано с продолжительным недостатком эстрогена DArg6 DAIai0] GnRH, [Ac-4CIDPhe2, D3Pal3, Arg5, D2Nal6, DAIa10] GnRH, [Ac-D2-Nal1, 4CIDPhe2, Оптимальные условия лечения могут позвоDTrp3, DArg6, DAIa10] GnRH, [Ac-D2Nal1, 4FDPhe2, лить долгосрочный клинический контроль этих DTrp3, DArg6] GnRH, [Ac-D2Nal1, 4CIDPhe2, DTrp3, нарушений, ограничить секрецию эстрогена из DhArg(Et2)6, DAIa10] GnRH, and [Ac-Nal1, яичников до уровня, который дает ощутимый ре2 3 4 5 6 DME4CIPhe , DPal , Ser , Tyr , DArg , Leu7, ILys8, зультат при лечении(те боль внизу живота от Pro9, DAIa10] GnRH эктопических эндометриальных поражений значительно снижается или прекращается), при одноАнтагонисты гормона, высвобождающего говременном поддержании остаточной(базальной) надотропин, применяемые в настоящем изобре 51627 10 такого кровотечения является показателем того, что концентрация эстрадиола остается достаточной, чтобы стимулировать эндометрий и поэтому была снижена недостаточно В этом случае дозировку антагониста GnRH следует увеличить И наоборот, отсутствие кровотечения после прекращения введения прогестерона означает, что было достигнуто состояние аменореи, и что уровень эстрадиола либо достаточный, либо слишком низок В последнем случае снижают количество антагониста GnRH и повторяют тест на введение Цикл введения антагониста и проведения теста можно повторять до тех пор, пока не будет определена соответствующая концентрация вводимого антагониста Прогестерон можно вводить в любой удобной фармацевтической форме Например, такие формы могут содержать прогестин и подходящий носитель, такой, как твердые формы дозировки, которые включают таблетки, капсулы, облатки, пилюли, порошки или гранулы, наружные формы, которые включают растворы, порошки, жидкие эмульсии, жидкие суспензии, полутвердые средства, мази, пасты, кремы, гели или желе и пены, и парентеральные дозированные формы, которые включают растворы, суспензии, эмульсии или сухой порошок, содержащие эффективное количество прогестерона В данной области известно, что активный ингредиент, прогестин, может содержаться в таких препаратах вместе с фармацевтически приемлемыми разбавителями, наполнителями, дезинтеграторами, связующими, смазывающими веществами, сурфактантами, гидрофобными носителями, водорастворимыми носителями, эмульгаторами, буферами, увлажнителями, растворителями, консервантами и другими средствами, усиливающими действие лекарств Средства и способы введения известны и специалист может получить информацию в соответствующей литературе по фармакологии Например, можно проконсультироваться в "Modern Pharmaceutics", Bankers Rhodes, Marcel Dekker, Inc 1979, "Goodman & Gilman's The Pharmaceutical Basis of Therapeutics", 6th Edition, McMillan Publishing Co , Является ли количество введенного антагониNew York 1980 Аналогичным образом в тесте на ста достаточным, чтобы контролировать состояаменорею можно использовать прогестиние зависимости от гонадо-стероида, можно легко ны(аналоги), которые имитируют биологическую определить простым наблюдением внешних проактивность самого прогестерона явлений состояния Например, отсутствие боли указывает на то, что дозировка антагониста GnRH Применение компонентов, композиций и спобыла достаточной, чтобы справиться с эндометсобов этого изобретения для лечебного и/или риозом Чтобы определить, является ли дозировфармацевтического использования, которые опика подходящей для того, чтобы оптимизировать саны в этом тексте, можно реализовать любыми тоническую концентрацию эстрадиола, проводят клиническими, медицинскими или фармацевтичетест на введение прогестерона Сам тест и процескими методами или способами, которые в надура его проведения хорошо известны Смотри, стоящее время или перспективно известны спенапример, Abbasi et al, Predicting the Predisposition циалистам данной области to Osteoporosis, JAMA, 255 1600(1986) and Kletzky Впервые настоящее изобретение осуществet al , "Clinical categorization of patients with seconляет лечение состояний зависимости от гонадоdary ammenorrhea using progesterone-induced uterстероидов с одновременным поддержанием выine bleeding and measurement of serum gonadotroработки достаточного количества эндогенного pm levels", Am J Obstet Gynecol , 121 695(1975) В эстрогена, чтобы смягчить побочные действия общем, в течение короткого периода времени истощения эстрогена Настоящее изобретение вводят дозу прогестерона или синтетического пропредлагает некастрационную дозу антагониста гестина, например, 7 - 14 дней, и когда прогестин GnRH, которую титруют с тем, чтобы обеспечить снимают, отмечают наличие или отсутствие кродостаточное снижение эндогенного эстрогена для вотечения после прекращения введения Наличие торможения пролиферации внутриматочнои ткани тении, можно назначать в форме фармацевтически приемлемых нетоксических солей или комплексов Соли включают соли кислотного присоединения, такие, как, например, гидрохлорид, гидробромид, сульфат, фосфат, нитрат, оксалат, фумарат, глюконат, таннат, малеат, ацетат, бензоат, сукцинат, алгинат, малат, аскорбат, тартрат и прочие Комплексы могут быть с металлами, такими, как, например, цинк, барий, кальций, магний, алюминий и другие Можно применять любой известный антагонист GnRH Режим назначения, используемый до сих пор для подобных терапевтических средств, т е агонистов GnRH можно также применять в практике настоящего изобретения, заменяя антагонистом ранее применяемый агент Таким образом, способ назначения может быть любым традиционным способом, в котором аналог активен, например, перорально, внутривенно, подкожно, внутримышечно, подъязычно, чрезкожно, ректально, внутриназально или внутривагинально Таким же образом форма назначения может быть таблеткой, драже, капсулой, пастилкой, ингаляционной средой, аэрозолем и прочим На практике, количество введенного первоначального антагониста гормона, высвобождающего гонадотропин, должно быть достаточным, чтобы отрегулировать циркулирующий эстроген до величины в намеченном диапазоне порядка 25 50пг/мл, В зависимости от применяемого конкретного антагониста первоначальная доза обычно составляет около 0,001 - 0,5мг/кг в день при внутримышечном введении, но она может широко варьироваться в зависимости от режима назначения и конкретного соединения Введение может быть периодическим, например, раз в неделю или в месяц, либо непрерывным, например, ежедневно Ежедневное введение более предпочтительно, так как пациентам легче следовать режиму лечения и они не забывают и не пропускают дни приема лекарств Удобным и приемлемым для пациента может быть введение лекарственного средства в виде депо 12 11 51627 у менструирующей женщины, но которое неэфже 30пг/мл Соответственно, диапазон дозы Nalфективно, чтобы значительно задержать выработGlu антагониста GnRH снизили в Части II исследоку эндогенного эстрогена Эта доза может быть вания эффективной, чтобы обеспечить содержание эстПосле 60-дневного интервала и по выведению рогена в сыворотке в пределах от около 30 до 50, лекарства приступили к Части II эксперимента, а предпочтительно около 35 - 45пг/мл, которое которая ставила две задачи 1) попытаться титросмягчает симптомы менопаузы, такие, как остеовать дозу антагониста GnRH индивидуально для пороз, приливы и т п Это титрование дозы антаобезьян, так, чтобы остаточная секреция эстрогегониста GnRH впервые проводили способом, опина яичниками часто была в пределах намеченного санным выше, с помощью теста на кровотечение диапазона(35 - 45мг/мл эстрадиола) как можно в после снятия прогестина Отсутствие кровотечебольшем количестве проб крови, и 2) провести ния после снятия прогестина указывает врачу на периодические тесты на введение прогестерона, в то, что антагонист GnRH был введен в достаточкоторых кровотечение после снятия прогестерона ном количестве, чтобы замедлить выработку энуказывает на значительную эндометриальную догенного эстрогена до уровня, достаточно низкопролиферацию, вызванную эстрогеном(т е избыго для торможения пролиферации точное эстрогенное влияние) в отличие от аменовнутриматочной ткани Как уровни циркулирующереи(отсутствие кровотечения после снятия прого в крови эстрогена, так и ответная реакция пагестерона), как индикатора того, что доза циента на остаточную(базальную) выработку эстантагониста GnRH и, в свою очередь, тоническая рогена яичниками укажут на удовлетворительное выработка эстрогена яичниками указывают на поступление эндогенного эстрогена контролируемую эстрогенную среду Чтобы далее проиллюстрировать настоящее изобретение, было проведено исследование, как описано ниже Однако, следует принимать во внимание, что это исследование является только иллюстративным, и его не следует рассматривать как ограничивающее объем изобретения Исследование проводили на одиннадцати взрослых самках обезьян cynomolgus с регулярными и предположительно овуляторными менструальными циклами Взвешивание проводили ежемесячно Менструальное кровотечение и кровяные выделения регистрировали ежедневно визуальным осмотром наружных половых органов и введением вагинальных тампонов, смоченных в физрастворе, с помощью апликатора с хлопковой тканью на конце Пробы крови брали из бедренных сосудов и сыворотку оставляли для последующего радиоиммунанализа(РИА) эстрадиола и прогестерона Коэффициенты вариации для этих проб были 7,4 и 11,1, и 7,0 и 10,9%, соответственно, в пробах и в промежутках между взятием проб Применяемым антагонистом GnRH(GnRHant) был Nal-Glu [Ac-D2NAL, 4CIDPhe2, 5 6 D3Pal , Arg , DGIu (AA), DAIa™]-GnRH В Части 1 исследования была поставлена цель провести краткое исследование по определению дозы, которое указало бы остаточные уровни эстрадиола в сыворотке у здоровых приматов, ранее имевших регулярные менструальные циклы Конкретно, пытались определить приблизительную минимальную ежедневную дозу NalGlu, достаточную, чтобы снизить уровни циркулирующего в крови эстрадиола до намеченного диапазона менее 45пг/мл, но больше, чем 35пг/мл Начиная со 2-го дня менструального цикла, NalGlu, суспендированный в кунжутном масле, вводили с 9 до 10 часов утра в дозах 0,1(п = 5) и 0,Змг/кг(п = 6) на протяжении 14 дней Кровь из бедренной вены брали ежедневно под анастезиеи кетамином РИА эстрадиола сыворотки показал, что если доза 0,1мг/кг часто давала концентрации циркулирующего в крови эстрадиола близкие к намеченному диапазону(35 - 45пг/мл), доза в 0,Змг/кг была слишком высокой, т е сывороточные уровни эстрадиола устойчиво держались ни По схеме эксперимента все одиннадцать обезьян, начиная со второго дня менструального цикла, вначале получали Nal-Glu антагонист GnRH ежедневно с дозировкой 0,05мг/кг до тех пор, пока результаты теста на введение прогестерона и уровни эстрадиола в циркуляции крови не показали необходимость поднять дозу Одновременно с введением антагониста с 20 и 30 дня курса вживляли пару силастиковых имплантатов с прогестероном подкожно, а затем их удаляли Если на следующей неделе после снятия прогестерона менструация имела место, индивидуальную дозу Nal-Glu поднимали до 0,1мг/кг ежедневно На 50 день введения антагониста GnRH для всех обезьян повторили 10-дневный тест на прогестерон Те приматы, которые проявляли аменорею, оставались на этой дозе Nal-Glu, других с проявлением кровотечений перевели на более высокую дозу антагониста GnRH 0,2мг/кг ежедневно по 90-ый день эксперимента, и последний тест на прогестерон провели на всех обезьянах с 80 по 90 дни И вновь регистрировали аменорею или кровотечение после снятия лекарства Для определения, кровотечение после снятия засчитывалось, если на внешних половых органах кровь была в течение двух или более последующих дней на следующей неделе после снятия прогестерона Кровяные выделения засчиты вались, если кровь была видна только на тампоне после его введения во влагалище Пробы крови из бедренной вены брали каждые 10 дней на РИА эстрадиола и прогестерона Данные, показанные на фиг 1, отображают действие двух доз Nal-Glu антагониста GnRH на уровни циркулирующего в крови эстрадиола у обезьян в течение 14-дневного периода проведения эксперимента, начиная со 2-го дня менструального цикла Следует отметить, что дозировка в 0,1мг/кг ежедневно давала почти все средние величины в намеченной зоне 35 - 45пг/мл тонического эстрадиола Хотя эта доза Nal-Glu представляется почти оптимальной, средние величины скрывают важные индивидуальные величины, в которых некоторые данные указывают, что антагонист GnRH с дозой 0,1мг/кг внутримышечно(в/м) 13 51627 14 очень сильно действует на некоторых приматов, у подкожно силастических имплантатов, в течение которых сывороточные уровни эстрадиола доми10 дней В последний день трех курсов обработки нировали с величиной < 25пг/мл А в других слуколичество сывороточного прогестерона составичаях обезьянам требовалась более высокая доза ло 6,4 ± 0,6нг/мл На 31 день дозы Nal-Glu для антагониста GnRH, чтобы достичь устойчивых других девяти обезьян были подняты до 0,1мг/кг уровней эстрадиола ниже 45пг/мл Кроме того, внутримышечно ежедневно В результате провеисследование по установлению этой дозы ясно дения второго теста на введение прогестерона у 8 показывает, что ежедневная доза Nal-Glu антагоиз девяти обезьян после снятия была достигнута ниста GnRH в 0,Змг/кг слишком высока Действиаменорея, одна показала явное менструальное тельно, сывороточные уровни эстрадиола сразу кровотечение Две, которые оставались на дозе же снижались ниже намеченной зоны(даже < антагониста GnRH 0,05мг/кг, после снятия прогес20пг/мл) и продолжали снижаться еще в течение терона были в состоянии аменореи На фиг 2 по14 дней курса лечения казано, что повышение дозы Nal-Glu для этих 8 обезьян снизило их средние сывороточные конНа основании этих предварительных резульцентрации эстрадиола приблизительно до татов были составлены индивидуальные перспек40 п г/мл тивные схемы лечения антагонистом GnRH, чтобы титровать каждую обезьяну до оптимальной ежеДозу для единственной устойчивой к эксперидневной дозы Nal-Glu Начиная с дозы 0,05мг/кг менту обезьяны довели до 0,2мг/кг Nal-Glu ежевнутримышечно, только два примата показали дневно(см фиг 2) Результатом было сильное аменорею после снятия после первого теста на подавление эстрадиола, в конечном итоге до вевведение прогестерона(см Таблицу 1 ниже) На личин ниже 20пг/мл После третьего теста на профиг 2 показано, что их средние сывороточные гестерон все одиннадцать обезьян достигли или уровни эстрадиола находятся в намеченной зоне поддерживали состояние аменореи при средних или приближаются к ней У других девяти обезьян циркулирующих уровнях эстрадиола в намеченной после снятия кровотечение было значительным зоне или близко к ней, при этом одна получала Эти результаты подтверждают приемлемость об0,2мг/кг в/м ежедневно работки прогестероном посредством вживленных Таблица 1 Неделя снятия прогестерона (дни) 31 - 3 7 61 - 6 7 91 -97 Кол-во обезьян на дозу (мг/кг в/м ежедневно) 0,05 0,1 0,2 11 2 2 8 8 1 Результаты, полученные из этого исследования приматов, демонстрируют полезность титрования для определения индивидуальных доз антагониста GnRH для достижения аменореи с одновременным поддержанием тонической секреции эстрадиола из яичников в среде, приемлемой для длительных схем лечения Например, эстрогенную зависимость эндометриоза можно контролировать поддержанием сывороточного эстрадиола на уровнях, которые не стимулируют пролиферацию клеток эндометрия(митогенез) ни в матке, ни эктопически В то же время, снижение уровня эстрадиола в циркуляции крови не очень резкое и его можно титровать до около 40пг/мл или несколько ниже путем индивидуального регулирования дозы антагониста GnRH, в зависимости от того, дает ли тест на введение прогестерона состояние аменореи после снятия прогестерона Эту схему проводят до достижения состояния аменореи с наименьшей эффективной дозой антагониста GnRH, с обеспечением невысоких уровней эндогенного эстрогена, и избегая явной недостаточности эстрогена Соответственно, здесь оправданы длительные периоды лечения, действительно, только титрование дозы антагониста GnRH требует несколько лет лечения вместо 6месячного срока ограничения из-за резкого недостатка эстрогена, как это происходит с применением агониста GnRH и почти со всеми другими инги Достижение состояСледы кровяных ния аменовыделений(дни) реи (обезьяны) 2/11 13 10/11 12 11/11 0 биторами Данные явно указывают на необходимость сугубо индивидуализированной схемы лечения антагонистом GnRH Этот новый терапевтический подход более благоприятен, чем лечение только агонистом GnRH или агонистом GnRH плюс "компенсация" по схеме лечения с компенсацией гормона во-первых, потому что он избегает сложности и стоимости накладки двух схем лечения, вовторых, он избавляет от потенциальных вредных действий лечения экзогенным эстрогеномпрогестином на обмен веществ Следует отметить, что при титровании каждого отдельного примата до состояния аменореи, отсутствие эндометриальных митогенных симптомов избавляет от необходимости проведения лечения прогестином для борьбы с воздействием избыточного количества эстрогена, и в свою очередь, позволяет противостоять связанной с этим опасности появления внутриматочной гиперплазии или внутриматочной карциномы Отсюда следует, что ряд гинекологических нарушений, которые в значительной степени зависят от секреции эстрогена, можно терапевтически лечить титрованием пациентов до наинизшей дозы антагониста GnRH, необходимой для достижения индивидуального порога для аменореи Эта схема сохраняет значительную степень секреции эндогенного эстрогена из яичников, которая может поддержать плотность кости и 51627 16 15 здоровье сердечно-сосудистой системы, а также на поддержание здоровья женщины в целом. смягчить приливы. Соответственно, титрование Настоящее изобретение допускает введение индивидуализированных доз антагониста GnRH различных изменений и модификаций, не выходо состояния аменореи с поддержанием тоничедящих за рамки его сущности и объема. Различского эстрадиола в циркуляции крови может поные варианты, которые были описаны и проиллюзволить проведение длительных курсов лечения, стрированы выше, следует рассматривать только при которых не пострадает ни терапевтическая как иллюстративные примеры, которые никоим эффективность контролируемой эстрогенной среобразом не ограничивают изобретение. ды, ни положительные аспекты влияния эстрогена Целевая зона для тонической секреции ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул. Сім'їХохлових, 15, м. Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул. Артема, 77, м. Київ, 04050, Україна (044)216-32-71