Комбінація, яка містить n-(3-метокси-5-метилпіразин-2-іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2-іл]феніл)піридин-3-сульфонамід і антимітотичний засіб, яким є таксан, для лікування злоякісного новоутворення

1. Комбінація, яка містить N-(3-метокси-5метилпіразин-2-іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2іл]феніл)піридин-3-сульфонамід і антимітотичний цитотоксичний засіб, який являє собою таксан. 2. Комбінація відповідно до пункту 1, у якій антимітотичним цитотоксичним засобом є паклітаксел. 3. Комбінація відповідно до пункту 1, у якій антимітотичним цитотоксичним засобом є доцетаксел. 4. Комбінація, як заявлено в будь-якому з пунктів 1-3, для застосування як лікарського засобу. 5. Фармацевтична композиція, яка являє собою комбінацію відповідно до будь-якого з пунктів 1-3 у сполученні з одним або декількома фармацевтично прийнятними розріджувачами або носіями. 2 (19) 1 3 92592 4 (SCLC), рак шлунка, рак голови й шиї, рак головного мозку, рак нирки, лімфому або лейкоз. 12. Застосування відповідно до пункту 10 або 11, де вказане злоякісне новоутворення являє собою рак передміхурової залози. 13. Комбінація, як заявлено в будь-якому з пунктів 1-3, для застосування для лікування злоякісного новоутворення. 14. Комбінація відповідно до пункту 13, де вказане злоякісне новоутворення являє собою рак стравоходу, мієлому, печінковоклітинний рак, рак підш лункової залози, рак шийки матки, дифузійну ендотеліому кісток, нейробластому, саркому Капоші, рак яєчника, рак молочної залози, рак прямої кишки, рак передміхурової залози, рак сечового міхура, меланому, рак легені - недрібноклітинний рак легені (NSCLC) і дрібноклітинний рак легені (SCLC), рак шлунка, рак голови й шиї, рак головного мозку, рак нирки, лімфому або лейкоз. 15. Комбінація відповідно до пункту 13 або 14, де вказане злоякісне новоутворення являє собою рак передміхурової залози. Даний винахід стосується комбінацій, які містять N-(3-метокси-5-метилпіразин-2-іл)-2-(4-[1,3,4оксадіазол-2-іл]феніл)піридин-3-сульфонамід, або його фармацевтично прийнятну сіль, надалі "Сполука (І)", і анти-мітотичний цитотоксичний засіб. Ці комбінації придатні для лікування або профілактики злоякісного новоутворення. Винахід також стосується фармацевтичної композиції, яка містить такі комбінації, і їх застосування для приготування лікарського засобу для застосування для лікування або профілактики злоякісного новоутворення, особливо раку передміхурової залози. Від злоякісних новоутворень, за приблизними підрахунками, страждають 10млн. людей в усьому світі. Ці дані включають захворюваність, поширення й смертність. В Азії виявлено більше 4,4млн. випадків злоякісних пухлин, включаючи 2,5млн. випадків у Східній Азії, який є регіоном світу з найвищим коефіцієнтом захворюваності. Для порівняння, у Європі виявлено 2,8млн. випадків, у Північній Америці 1,4млн. випадків і в Африці - 627 тисяч випадків. Наприклад, у Великобританії й у США більш ніж в однієї людини із трьох розвивається злоякісне новоутворення протягом життя. У США злоякісні новоутворення викликають смерть, відповідно до статистики, близько 600 тисяч людей у рік і є причиною смертності в одному із чотирьох випадків, посідаючи друге місце за рівнем смертності після серцевих захворювань, а також є другою причиною смертності дітей у віці від 1 до 14 років. У цей час у США щорічно виявляється близько 1 млн. 380 тисяч нових випадків захворювань, крім близько 900 тисяч випадків немеланомних новоутворень шкіри (базальних і сквамозних клітин). Рак також є основною причиною захворюваності у Великобританії, і в 1997 році було зареєстровано близько 260 тисяч нових випадків (крім немеланомного раку шкіри). Злоякісні пухлини є захворюванням, від якого страждають переважно люди літнього віку, близько 65% випадків захворювання виявляється в людей, старше 65. Оскільки очікується збільшення середньої тривалості життя у Великобританії майже у два рази в порівнянні із серединою дев'ятнадцятого століття, то ризик захворювання раком населення зростає. Коефіцієнт смертності від інших захворювань, які викликають смерть, таких як захворювання серця, в останні роки знижується, тоді як смертність від злоякісних новоутворень залишається відносно постійною. Це приведе до того, що в однієї людини із трьох протягом життя буде діагностовано злоякісне новоутворення і одна із чотирьох людей помре від раку. У людей до 75 років смертність від злоякісних новоутворень чисельно перевершує смертність від захворювань серцево-судинної системи, включаючи ішемічну хворобу серця й удар. В 2000 році було зареєстровано 151 тисяч 200 смертей від раку. Більше однієї п'ятої (22%) цих смертей було викликано раком легенів і четверта частина (26%) - раком ободової кишки, молочної залози й передміхурової залози. В усьому світі захворюваність і смертність внаслідок певних типів злоякісних новоутворень (шлунка, молочної залози, передміхурової залози, шкіри й т.д.) характеризуються значними територіальними відмінностями, які приписують расовим, культурним впливам і, особливо, впливу навколишнього середовища. Виявлено понад 200 різних типів злоякісних новоутворень, але чотири основних типи, а саме легенів, молочної залози, передміхурової залози й прямої кишки, становлять більше половини всіх діагностованих випадків рака у Великобританії й США. Рак передміхурової залози посідає четверте місце серед злоякісних захворювань у чоловіків в усьому світі й щорічно діагностується 400 тисяч нових випадків захворюваності, що становить 3,9% всіх нових виявлених випадків раку. Зараз для лікування злоякісних новоутворень застосовують хірургічне видалення, променеву терапію та/або системну хіміотерапію. При одних видах раку вони є значно ефективними, однак при інших видах вони не ефективні. Існує очевидна потреба в новому терапевтичному лікуванні. Останнім часом антагоністи рецептора ендотеліну А були ідентифіковані як ефективні засоби при лікуванні злоякісних новоутворень (Cancer Research, 56, 663-668, 15 лютого, 1996p., і Nature Medicine, том 1, №9, вересень 1999p., 944-949). Ендотеліни являють собою сімейство ендогенних пептидів, які складаються з 21 амінокисло 5 ти, що включає три ізоформи: ендотелій-1, ендотелін-2 і ендотелін-3. Ендотеліни утворюються шляхом розщеплення ендотелінперетворюючим ферментом зв'язку Trp -Val їх відповідних проендотелінів. Ендотеліни є одними з найбільш ефективних відомих судинозвужувальних засобів і характеризуються значною тривалістю дії. Також вони мають багато інших дій, включаючи стимулювання проліферації клітин і мітозу, інгібування апоптозу, транссудацію й хемотаксис, а також взаємодіють із багатьма іншими засобами, які впливають на судини. Ендотеліни секретуються багатьма тканинами й клітинами, включаючи ендотелій судин, гладенькі м'язи судин, нирки, печінку, матку, дихальні шляхи, кишечник і лейкоцити. Секреція може стимулюватися гіпоксією, вібраційним стресом, фізичною травмою й багатьма гормонами й цитокінами. Підвищені рівні ендотеліну були виявлені при багатьох хворобливих станах у людей, включаючи злоякісні новоутворення. Сполука (І) є специфічним антагоністом ендотеліну А, і ця властивість робить її особливо придатною для лікування злоякісних новоутворень (див. WO 2004/018044). Антимітотичні цитотоксичні засоби, які зв'язуються з тубуліном (білком, безпосередньо залученим у ділення клітин, і, отже, у розмноження ракових клітин і ріст пухлини), інгібують ріст клітин ссавців шляхом перешкоджання діленню клітин. На молекулярному рівні вони можуть або викликати стабілізацію (епотилони й таксани) або дестабілізацію (алкалоїди барвінку) мікротрубочок, задіяних у розходження хромосом при мітозі. Клітини, оброблені такими лікарськими засобами, затримуються на стадії мітозу, тобто вони перешкоджають процесу ділення клітин, що в остаточному підсумку може приводити до загибелі клітин внаслідок невдалого мітозу. Винахідниками даного винаходу несподівано було виявлено, що комбінація Сполуки (І) і антимітотичного цитотоксичного засобу може мати значні переваги та/або синергетичну дію при лікуванні злоякісного новоутворення. Отже, згідно із даним винаходом, забезпечується комбінація, яка містить Сполуку (І) і антимітотичний цитотоксичний засіб. У даному винаході під терміном "антимітотичний цитотоксичний засіб" мають на увазі будь-який хімічний аналог, який проявляє свою протиракову дію шляхом стабілізації або дестабілізації тубулінових мікротрубочок, залучених у ділення клітин. Прикладами "антимітотичних цитотоксичних засобів" є таксани, епотилони й алкалоїди барвінку. Кращими прикладами "антимітотичних цитотоксичних засобів" є: - ТАКСАНИ: такі як (2aR,3aR,4aR,6R,9S, 11S,12S,12aR,12bS)-6,12b-діатокси-9-[3(S)-третбутоксикарбоніламіно)-2R-гідрокси-3фенілпропіонілокси]-12-бензоилокси-11-гідрокси8,13,13-триметил-2а,3,3а,4,5,6,9,10,11,12,12а,12bдодекагідро-1Н-7,11-метаноциклодека [3,4]циклопропа[4,5]бенз[1,2-b]оксет-5-он дигідрат; Паклітаксел (Таксол), BMS 184476 (7метилтіометилпаклітаксел); 92592 6 BMS 188797; BMS 275183; CYC-3204 (кон'югат пенетратин-паклітаксел); Таксопрексин; DJ-927; Доцетаксел (Таксотер); XRP9881 (RPR-109881A); XRP6258 (RPR112658); Мілатаксел; MST 997; МВТ-206; NBT-287; ортатаксел; Протакс-3; PGTXL; PNU-166945; 106258; BMS-188797; 109881; BAY 598862 (IDN 5109; напівсинтетичний таксан); Протаксел і МАС-321 (Таксалог); - ЕПОТИЛОНИ: похідні й аналоги: 25 о епотилону А; епотилону В, такі як: ABJ879; BMS247550 (іксабепілон); ЕРО906 (патупілон); ZK ЕРО; епотилону С; і епотилону D, такі як:KOS 862; АНАЛОГИ Й ПОХІДНІ АЛКАЛОЇДІВ БАРВІНКУ: вінкристин; вінбластин; вінорелбін; вінфлунін; Ризоксин. - ІНШІ АНТАГОНІСТИ ТУБУЛІНУ: речовини, що зв'язують бета-тубулін /антагоністи бета-тубуліну, такі як: Т-138067; Т 900607; D 24851; STA 5312 антимикротрубочкові засоби, такі як: НТІ-286 (похідне геміастерліну) Доластатин похідні (ILX-651); аналоги галіхондрину, такі як Е7389; аналоги криптофіцину; і дискодермоліди (NVPXAA296). В одному варіанті здійснення, даний винахід стосується комбінації Сполука (І) і будь-якої з перерахованих вище сполук. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і таксан. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і епотилон. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і похідне епотилону А або його аналог. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і похідне епотилону В або його аналог. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і похідне епотилону С або його аналог. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і похідне епотилону D або його аналог. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується Сполука (І) і похідне алкалоїду барвінку або його аналог. У даному винаході під терміном "комбінація" мають на увазі одночасне, окреме або послідовне введення. В одному варіанті здійснення винаходу "комбінація" стосується одночасного введення. В іншому варіанті здійснення винаходу "комбінація" стосується окремого введення. В подальшому варіанті здійснення винаходу "комбінація" стосується послідовного введення. Якщо введення є послідовним або окремим, то часовий інтервал для введення другого компонента повинен бути достатнім для збереження корисної й/або синергетичної дії комбінації. В одному варіанті здійснення, посилання на сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль стосується лише сполуки. В іншому варіанті здійснен 7 ня це посилання стосується фармацевтично прийнятної солі сполуки. Посилання на злоякісне новоутворення переважно стосується раку стравоходу, мієломи, печінково-клітинного раку, раку підшлункової залози, раку шийки матки, дифузійної ендотеліоми кісток, нейробластоми, саркоми Капоши, раку яєчників, раку молочної залози, раку прямої кишки, раку передміхурової залози, раку сечового міхура, меланомі, раку легені - недрібноклітинного раку легені (NSCLC) і дрібноклітинного раку легені (SCLC), раку шлунка, раку голови й шиї, раку головного мозку, раку нирки, лімфоми й лейкозу. Більш переважно воно стосується раку передміхурової залози. Крім того, воно переважно стосується SCLC, NSCLC, раку прямої кишки, раку яєчників і/або раку молочної залози. Додатково, воно більш переважно стосується SCLC. Крім того, воно більш переважно стосується NSCLC. Додатково, воно переважно стосується раку прямої кишки. Крім того, воно більш переважно стосується раку яєчників. Додатково, воно більш переважно стосується раку молочної залози. Також воно більш переважно стосується раку сечового міхура, раку стравоходу, раку шлунка, меланомі, раку шийки матки й / або раку нирки. Додатково воно стосується раку ендометрію, печінки, шлунка, щитовидної залози, прямої кишки й / або головного мозку. В іншому варіанті здійснення винаходу, злоякісне новоутворення не являє собою меланому. В іншому варіанті здійснення винаходу переважно злоякісне новоутворення знаходиться на метастатичній стадії й більш переважно рак утворює метастази в кістках. В подальшому варіанті здійснення винаходу переважно злоякісне новоутворення знаходиться на метастатичній стадії й більш переважно рак утворює метастази в шкірі. В подальшому варіанті здійснення винаходу переважно злоякісне новоутворення знаходиться на метастатичній стадії й більш переважно рак утворює метастази в лімфатичній системі. В подальшому варіанті здійснення винаходу злоякісне новоутворення знаходиться на неметастатичній стадії. Лікування злоякісного новоутворення переважно стосується лікування тих злоякісних пухлин, які експресують ендотелій А. Це лікування полягає в подовженні одного або декількох критеріїв, таких як реакція-відповідь, ступінь реакції-відповіді, час прогресування захворювання й коефіцієнт виживання. Кращими комбінаціями згідно із даним винаходом є: - Сполука (І) і паклітаксел; - Сполука (І) і доцетаксел; - Сполука (І) і іксабепілон; - Сполука (І) і патупілон; - Сполука (І) і вінорелбін; - Сполука (І) і ХАА296; і - Сполука (І) і Т-138067. Підходящі фармацевтично прийнятні солі включають, наприклад, солі з лужним металом (таким як натрій, калій або літій), лужноземельними металами (такими як кальцій або магній), солі амонію й солі з органічними основами, які утворюють фізіологічно прийнятні катіони, такі як солі з 92592 8 метиламіном, диметиламіном, триметиламіном, піперидином і морфоліном. Крім того, для тих сполук, які є достатньо основними, підходящі фармацевтично прийнятні солі включають фармацевтично прийнятні кислото-адитивні солі з галогенідами водню, сірчаною кислотою, фосфорною кислотою й органічними кислотами, такими як лимонна кислота, малеїнова 10 кислота, метансульфонова кислота й n-толуолсульфонова кислота. Альтернативно, сполука можуть існувати у вигляді цвітеріона. Отже, відповідно до даного винаходу, забезпечується комбінація, яка містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб, для застосування як лікарський засіб. Відповідно до подальшого варіанту здійснення винаходу, забезпечується фармацевтична композиція, яка містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується фармацевтична композиція, яка містить Сполуку (І), у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, у комбінації з фармацевтичною композицією, яка містить анти-мітотичний цитотоксичний засіб у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм. Отже, відповідно до даного винаходу, забезпечується спосіб лікування злоякісного новоутворення, у теплокровної тварини, такої як людина, яка потребує такого лікування, що включає введення вказаній тварині ефективної кількості Сполуки (І) у комбінації з ефективною кількістю антимітотичного цитотоксичного засобу. Для запобігання невизначеності, при згадуванні лікування злоякісного новоутворення мається на увазі, що воно також стосується запобігання метастаз і лікування метастаз, тобто поширення раку. Таким чином, комбінація згідно із даним винаходом може застосовуватися для лікування пацієнта, у якого не виявлено метастаз для призупинення їх прояву або для збільшення періоду часу, протягом якого вони проявляються, а також для лікування пацієнта, у якого вже діагностовані метастази, для їх лікування. Крім того, лікування злоякісного новоутворення також стосується лікування первинної пухлини або пухлин, які вже сформувалися, і первинної пухлини або пухлин, які розвиваються. В одному варіанті здійснення винаходу лікування злоякісного новоутворення стосується запобігання метастаз. В іншому варіанті здійснення винаходу лікування злоякісного новоутворення стосується лікування метастаз. В іншому варіанті здійснення винаходу лікування злоякісного новоутворення стосується лікування первинної пухлини або пухлин, які вже сформувалися, або первинної пухлини або пухлин, які розвиваються. У даному винаході лікування злоякісного новоутворення також стосується запобігання злоякісного новоутворення per se. Додатково лікування злоякісного новоутворення також стосується забезпечення антиангіогенної дії в теплокровної тварини. 9 Додатково лікування злоякісного новоутворення також стосується забезпечення антипроліферативної дії в теплокровної тварини. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується 15 набір, який містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб; необов'язково із інструкціями для застосування. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується набір, який містить: а) Сполуку (І), у першій одиничній дозованій формі; б) анти-мітотичний цитотоксичний засіб; у другій одиничній дозованій формі; і в) ємність, у якій містяться вказані перша й друга дозовані форми; і необов'язково г) із інструкціями для застосування. Прикладом одиничної дозованої форми для Сполуки (І) може бути таблетка для перорального введення, яка описана надалі. Приклади одиничної дозованої форми для анти-мітотичного цитотоксичного засобу наведені в даному винаході нижче. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується набір, який містить: а) Сполуку (І), разом з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, у першій одиничній дозованій формі; б) анти-мітотичний цитотоксичний засіб, у другій одиничній дозованій формі; і в) ємність, у якій містяться вказані перша й друга дозовані форми; і необов'язково г) із інструкціями для застосування. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується фармацевтична композиція, яка містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується фармацевтична композиція, яка містить Сполуку (І), у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, у комбінації з фармацевтичною композицією, яка містить анти-мітотичний цитотоксичний засіб у сполученні з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Фармацевтичні композиції можуть знаходитися у формі, яка придатна для перорального введення, наприклад, у вигляді таблетки або капсули, для парентерального введення (включаючи внутрішньовенне, підшкірне, внутрішньом'язове, внутрішньосудинне введення або інфузію) у вигляді стерильного розчину, суспензії або емульсії, для місцевого введення у вигляді мазі або пасти, або для ректального введення у вигляді супозиторію. Загалом, вищенаведені композиції можуть бути приготовлені звичайним способом при використанні звичайних наповнювачів. 92592 10 Наприклад, сполука (І) може бути приготовлена у вигляді лікарської форми - таблетки, використовуючи наступні наповнювачі: Сполука (І); моногідрат лактози (наповнювач); натрійкроскармелоза (засіб, який розпадається); повідон (сполучне); стеарат магнію (змащувальна речовина); гіпромелоза (компонент плівкового покриття); поліетиленгліколь 300 (компонент плівкового покриття); і діоксид титану (компонент плівкового покриття). Антимітотичні цитотоксичні засоби можуть бути приготовлені у вигляді лікарських препаратів відповідно до відомих методик. Відомі, наприклад, різні лікарські препарати Паклітакселу. Вони включають Abraxane; Acusphere; AI-850; DO/NDR/02 (препарат паклітакселу без кремофору); EndoTag1; паклітаксел, інкапсулований у ліпосоми; LPE/PLP Паклітаксел; МРІ-5019; NK-105; OncoGel; Paclimer Microspheres; S-8184; ABI-007; NOVA12005; SP-1010C-O; Pacligel; SP-1010C; Paxoral, Xorane; Genexol; Tocosol; PacoExtra; Yewtaxan; Taxosomes; Atrigel; Xyotax (паклітаксел поліглумекс; поліглутамований паклітаксел) і SP 1010C. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується набір, який містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб; необов'язково із інструкціями для застосування; для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується набір, який містить: 10 а) Сполуку (І), у першій одиничній дозованій формі; б) анти-мітотичний цитотоксичний засіб у другій одиничній дозованій формі; і в) ємність, у якій містяться вказані перша й друга дозовані форми; і необов'язково г) із інструкціями для застосування; для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується набір, який містить: а) Сполуку (І), разом з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, у першій одиничній дозованій формі; б) анти-мітотичний цитотоксичний засіб у другій одиничній дозованій формі; і в) ємність, у якій містяться вказані перша й друга дозовані форми; і необов'язково г) із інструкціями для застосування; для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Відповідно до подальшого варіанта здійснення винаходу, забезпечується застосування Сполуки (І), у комбінації з антимітотичним цитотоксичним засобом для приготування лікарського засобу для застосування для лікування злоякісного новоутворення, у теплокровної тварини, такої як людина. Відповідно до подальшого варіанту здійснення винаходу, забезпечується застосування Сполуки 11 (І), у комбінації з анти-мітотичним цитотоксичним засобом для лікування злоякісного новоутворення, у теплокровної тварини, такої як людина. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу забезпечується комбінація, яка містить Сполуку (І) і анти-мітотичний цитотоксичний засіб, для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу забезпечується комбіноване лікування, яке передбачає введення ефективної кількості Сполуки (І), необов'язково разом з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм, у комбінації з ефективною кількістю антимітотичного цитотоксичного засобу необов'язково разом з фармацевтично прийнятним розріджувачем або носієм теплокровній тварині, такій як людина, що має потребу в такому терапевтичному лікуванні, для застосування для лікування злоякісного новоутворення. Кількості Сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі, яку вводять, повинно бути достатньо для забезпечення бажаної терапевтичної дії. Наприклад, Сполука (І) може вводитися теплокровній тварині перорально, в одиничній дозі, менше ніж 1г щодня, але більше ніж 2,5мг. Переважно, Сполука (І) може вводитися теплокровній тварині в одиничній дозі, менше 250мг у добу. В іншому варіанті здійснення винаходу, Сполука (І) може вводитися теплокровній тварині в одиничній дозі, менше 130мг у добу. В подальшому варіанті здійснення винаходу, Сполука (І) може вводитися теплокровній тварині в одиничній дозі, менше 50мг у добу. Антимітотичні цитотоксичні засоби можуть вводитися в кількостях відповідно до схвалених посібників. їх різновиди й схема введення залежать від їх максимально переносимо! дози. Дозування кожного з лікарських засобів і їх співвідношення повинні складатися таким чином, щоб забезпечити максимально можливу лікувальну дію, що визначається відповідно до національних і міжнародних посібників (які періодично рецензуються й перевидаються). Підписи до фігур На фігурі 1 наведені гістограми, які показують дії Сполуки (І) і Паклітакселу, окремо або в комбінації, на апоптоз у клітинних лініях раку яєчника HEY і OVCA 433. На фігурі 2 наведені гістограми, які показують дії Сполуки (І) і Паклітакселу, окремо або в комбінації, на ріст клітин карциноми яєчника HEY в умовах in vivo. На фігурі 3 наведені гістограми, які показують дії зростаючих доз двох цитотоксичних засобів (паклітакселу й доцетакселу), окремо або в комбінації з ендотеліном 1 або ендотеліном 1 + Сполукою (І) на кількість життєздатних клітин передміхурової залози (РРС-1) у культуральній системі in vitro (зростаючі значення оптичної густини вказують на зростання кількості живих клітин). Надалі винахід ілюструється з посиланням на нижчеподані приклади, які призначені для конкретизації окремих варіантів здійснення винаходу. Ці приклади не призначені й ніяким чином не можуть 92592 12 тлумачитися як такі, що обмежують обсяг винаходу. Є очевидним, що винахід може бути здійснено іншим чином, ніж переважно описано в даному описі. Можливі різні модифікації й варіації даного винаходу, виходячи із суті, розкритої в даному описі, і, отже, вони підпадають під обсяг винаходу. Приклади Експерименти, які демонструють підвищену активність Сполуки (І) у комбінації з антимітотичними цитотоксичними засобами (паклітакселом і доцетакселом). Вступ Для оцінки дії Сполуки (І) у комбінації з антимітотичним цитотоксичним засобом (паклітакселом) на ріст різних ракових клітин, нами використовувалися дві загальноприйняті лінії клітин яєчника людини (HEY і OVCA 433**), які експресують функціональні рецептори ендотеліну А (ЕТа) і секретують високі рівні ендотеліну-1 (ЕТ-1). ЕТ-1 являє собою антиапоптотичний фактор у клітинах різних типів, що проявляє цю дію за допомогою ЕТа рецепторів. ** OVCA 433 одержували з асцитів, отриманих від пацієнтів із прогресуючою серозною аденокарциномою яєчника (Tsa, SW і ін., (1995) Exp.Cell Res. 218: 499-507) і HEY одержували із ксенотрансплантата метастаз в очеревину цистоаденокарциноми яєчника (Buick, R.N. et al, (1985) Cancer Research 45: 3668-3676). Клітини РРС-1 первинно мали походження з пухлини передміхурової залози людини і їх одержували з лабораторії Dr. J. Nelson, University of Pittsburgh). Матеріали й методи Дослідження в умовах in vitro на клітинах яєчника: Клітинні лінії пухлини яєчника людини (OVCA 433 і HEY) підтримували в культуральному середовищі, яке містить сироватку, до одержання кількості клітин, достатньої для проведення експерименту. Після цього клітини переносили в середовище без сироватки. Через 24 години «збіднення» за сироваткою, клітини обробляли або Сполукою (І) (1мкМ) або паклітакселом (60нМ), або Сполукою (І) + паклітакселом. Після здійснення лікувальної обробки протягом 24 годин, вимірювали апоптоз за допомогою стандартного набору для виявлення клітин ELISA Plus (Boehringer Manheim). Дослідження в умовах in vitro на клітинах передміхурової залози: Клітини пухлини передміхурової залози людини (РРС-1) підтримували в культуральному середовищі, яке містить сироватку, до одержання кількості клітин, достатньої для проведення експерименту. Після цього клітини переносили в середовище без сироватки. Через 23 години «збіднення» за сироваткою, клітини обробляли або ендотеліном 1 (10-7М) або ендотеліном 1 + Сполукою (І) при концентрації 10-7М. Додаткова група клітин одержувала тільки контрольний наповнювач. Через 1 годину клітини обробляли паклітакселом або доцетакселом при концентрації 106 М, 10-8М або 10-10М протягом 24 годин. Після закінчення цього 24-х годинного періоду, кількість життєздатних клітин вимірювали за допомогою стандартного МТТ аналізу (Mossman, J Immunol Methods. (1983)65,55-63). 13 Дослідження в умовах in vivo: Атимічним мишам підшкірно вводили 1,5×10-6 клітин HEY у бік. Через 7 днів, після формування прищеплених пухлин, мишей рандомізували на 4 групи для лікування по 10 мишей у кожній групі. Одна група одержувала лікування Сполукою (І), яку вводили за допомогою щоденних внутрішньоочеревинних ін'єкцій (10мг/кг/день) протягом 21 дня. Друга група одержували внутрішньовенні ін'єкції паклітакселу (20мг/кг) кожні 4 дні за 3 прийоми. Третя група одержувала обидва засоби - паклітаксел і Сполука (І), а четвертій групі ін'єкували таким же шляхом тільки наповнювач. Всі експерименти здійснювали в трьох повторах. Результати Дослідження в умовах in vitro на клітинах яєчника: Додавання або Сполуки (І) або паклітакселу не робило істотного впливу на апоптоз. Однак при комбінуванні Сполуки (І) з паклітакселом виявили надзвичайно значне підвищення апоптозу в порівнянні із введенням наповнювача в контрольні клітини або окремим введенням сполуки. Результати наведені на фігурі 1, де "*" вказує на статистично значиме підвищення в порівнянні з контрольними значеннями. Дослідження в умовах in vitro на клітинах передміхурової залози: Додаткові зростаючі дози або паклітакселу або доцетакселу істотно зменшували 92592 14 кількість життєздатних клітин передміхурової залози, що залишилися в культурі клітин після проведення лікування протягом 24 годин. Це зменшення кількості життєздатних клітин відміняється при супутньому введенні ендотеліну-1, дії, яка блокується Сполукою (І). Див. фігуру 3. Дослідження в умовах in vivo: Сполука (І) у вигляді монотерапії приводить до істотного інгібування ксенотрансплантатованих клітин яєчника HEY. Ступінь інгібування є подібною до тієї, яка досягається при введенні паклітакселу у вигляді монотерапії. Спільне введення Сполука (І) з паклітакселом, викликає потенціюючу дію Сполуки (І) на протипухлинні дії паклітакселу, приводячи до часткової або повної регресії пухлини. Результати наведені на фігурі 2. Висновки Отримані дані свідчать про те, що Сполука (І), специфічний антагоніст рецептора ендотеліну, потенціює дії паклітакселу на апоптоз у клітинах яєчника в умовах in vitro і інгібуючі властивості паклітакселу на ріст пухлин яєчника в умовах in vivo. Крім того, сполука (І) скасовує інгібуючі дії ендотеліну-1 на клітинну загибель, викликану цитотоксичним засобом (паклітакселом або доцетакселом). Таким чином, Сполука (І) у комбінації з паклітакселом або доцетакселом потенційно придатна для лікування злоякісних новоутворень. 15 Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко 92592 Підписне 16 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601