Штам бактерій campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов серологічний варіант іі, що використовується для виготовлення кампілобактерійного антигену та кампілобактерійної діагностичної сироватки

Винахід належить до ветеринарної мікробіології та стосується штаму Campylobacter fetus subspecies fetus 5ов серологічний варіант II, що використаний для виготовлення антигену та діагностичної кампілобактерійної сироватки. Існує штам (Ac. № SU 1294009Al, C12N1/20, А61К39/106 від 09.04.1985 "Штамм бактерій Campylobacter fetus subspecies intestinalis, используемый для изготовлення диагностикума и вакцины против кампилобактериоза крупного рогатого скота"), цей штам ізольований з аборт-плоду корови та використовують в Росії. Необхідно мати вітчизняні діагностакуми з штамів, ізольованих від тварин на території України. В основу винаходу "поставлено задачу селекціонувати штам бактерій Campylobacter fetus subspecies fetus 5ов серологічний варіант II, що використовується для виготовлення кампілобактерійного антигену та кампілобактерійної діагностичної сироватки, щоб забезпечити високу антигенну активність, широку спорідненість з культурами кампілобактерій серологічного варіанту II. Штам Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов виділений з аборт-плоду вівці в 1975 році в Золотоношському районі Черкаської області. Штам знаходиться на зберіганні в лабораторії вивчення хвороб рогатої худоби ІЕКВМ. Штам Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов серологічний варіант II характеризується наступними ознаками. Морфологічні ознаки. При мікроскопічному дослідженні 1-2 добових культур на стандартному напіврідкому агарі бактеріальні клітини характеризуються вираженим поліморфізмом. Форма клітин в вигляді "коми", латинських літер "S" та "V". Спіралевидні форми зустрічаються в кількості 1-2 в полі зору. Розмір клітин 1,5-8,0´0,2-0,5мкм, довжина завитка 0,5-1,75мкм, висота 0,3-0,7мкм. При фарбуванні основним фуксіном мають блідо-рожеве забарвлення. Культуральні ознаки. Добре росте на стандартному напіврідкому агарі, щільному м'ясо-пептонно-печінковому агарі (МППА) з доданням 10% сироватки крові великої рогатої худоби, на бульоні Хотінгера та переварі Мартена в ексікаторі при температурі 37,5±0,5°С. 1-2 добові культури штаму на напіврідкому агарі утворюють зону росту в вигляді кільця товщиною 2-4мм біля самої поверхні середовища. На щільному агарі ростуть в вигляді мілких росинчатих голубувато-сірих колоній діаметром до 1-2мм або в вигляді нашарувань. В рідких середовищах при рості утворює опалесценцію рідини га осад. Біохімічні властивості. Штам є катапазопозитивним, утворює сірководень при рості на напіврідкому агарі з додаванням 0,03% цистіну, росте на напіврідкому агарі з додаванням 1% гліцину, 4% жовчі ВРХ. Не дає росту на НРА з 3,5% NaCl. Добре росте при температурах 25 та 37°С. Дає слабкий ріст ж 2-3 добу культивування при 42,5°С. Антигенні властивості. Згідно класифікації Berg et al. (1971p.) штам Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов відноситься до групи '"В" з набором поверхнево-оболонкових (термолабільних) антигенів 2, 6, 7. Штам має широку антигенну амплітуду та спорідненість з штамами сероваріанту 11, що викликають захворювання у овець та великої рогатої худоби. Патогенні властивості. Штам має відношення до захворювання на кампілобактеріоз з однаковими клінічними ознаками захворювання (аборти, вагініти, затримки послідів, безплідність) у овець, корів, нетелів. Імуногенні властивості. Використано як антиген для імунізації кролів з метою отримання діагностичної сироватки, яка не дає перехресної реакції аглютинації з біофабричним антигеном Campylobacter fetus subspecies venerealis серологічного варіанту І і тому не потребує адсорбції при отриманні сироватки. Приклад. Виготовлення антигену для імунізації кролів; вирощували розплодку культури штаму Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов серологічний варіант II на напіврідкому агарі в пробірках та флаконах місткістю 20-100см3 в ексікаторах з підвищеним вмістом вуглекислого газу в атмосфері при температурі 37,5±0,5°С на протязі двох діб. Культуру змивали фізіологічним розчином з додаванням 0,5% розчину форматну та шляхом центрифугування відмивали від часток гелю та доводили до робочої концентрації 5млрд мікробних клітин в 1см. Перед імунізацією суспензію бактеріальних клітин відмивали від формаліну, проводили контрольне дослідження на стерильність шляхом висіву на живильне середовище. Імунізацію проводили шляхом внутрішньовенного введення бактеріальної суспензії з інтервалом 3 доби в дозі від 5 до 20млрд мікробних клітин на голову. Через 14 днів після імунізації у кролів відбирали кров та отримували сироватку з титром антитіл 1:1600-1:3200. В реакції аглютинації сироватка реагувала з антигеном Campylobacter fetus subspecies fetus серологічний варіант II та не реагувала з антигенами Campylobacter fetus subspecies venerealis серологічний варіант І та Campylobacter sputorum subspecies bubulus серологічний варіант III. Використання штаму Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов для виготовлення кампілобактерійного антигену та кампілобактерійної діагностичної сироватки, яка не дає перехресної реакції аглютинації з штамами Campylobacter fetus subspecies venerealis в нерозведеному стані і отже не потребує додаткової адсорбції буде сприяти діагностиці кампілобактеріозу та ідентифікації епізоотичних штамів кампілобактерій. Штам бактерій Campylobacter fetus subspecies fetus 5-ов мас високу антигенну активність, а також антигенну спорідненість з культурами кампілобактерій сероваріанту II, які циркулюють у овець та великої рогатої худоби. Використання штаму буде сприяти швидкій діагностиці та ідентифікації штамів збудника кампілобактерійної інфекції та оперативно попереджувати захворювання на кампілобактеріоз.