Алкоголяти металів для отримання похідних таксану

1. Алкоголяты металлов общей формулы (I) 2 Благодаря этой многообещающей активности таксол в настоящее время подвергается клиническим испытаниям как во Франции, так и в Соединенных Штата х. Поставка таксола для клинических испытаний в настоящее время обеспечивается за счет получения коры Taxus brevifblia (Тис тихоокеанский). Однако таксол найден в коре этих медленно рас 3 41287 4 тущи х вечно зеленых растений лишь в незначительных количествах, что вызывает существенное беспокойство из-за ограниченной поставки таксола, которая не удовлетворит спрос. Вследствие этого химики в последние годы попытались найти устойчивый синтетический способ получения таксолов. До настоящего времени результаты не были полностью удовлетворительными. R1 обозначает атом водорода или ацетил и Один способ, который был предложен, наодин из радикалов R" и R'" обозначает оксигруппу. правлен на синтез тетрациклического ядра таксаА другой обозначат третбутоксикарбониламино и на из рыночных химикатов. Синтез таксузина, их стереоизомерные формы, а также их смеси. аналогичного таксолу, был изложен авторами HolСогласно патенту США 4.418.470 авторов ton, et al. в JACS 110,6558 (1988). Несмотря на Colin et al. продукты общей формулы (III) получают прогресс, достигнутый при этом подходе, конечпосредством воздействия натриевой соли третбуный полный синтез таксола, тем не менее, предтил-N- хлоркарбамата на продукт общей формуставляет собой многоступенчатый, утомительный лы: и дорогостоящий процесс. Альтернативный подход к получению таксола был описан авторами Greene, et al. в JACS 110, 5917 (1988) и включает в себя использование аналога таксола, 10-деацетил-баккатина III, который имеет структур у формулы II, приведенной ниже: в которой R' обозначает ацетил или 2,2,2трихлорэтоксикарбонильный радикал, с последующим замещением группы или групп 2,2,2трихлорэтоксикарбонила атомом водорода. Однако в патенте США № 4.924,011 авторами Denis et al. сообщается, что этот процесс ведет к получению смеси изомеров, которая должна быть разделена, и как результат не весь баккатин III или 10деацетилбаккатин III, используемый для получения продукта общей формулы (IV), может быть преобразован в продукт общей формулы(ІІІ). Стремясь внести усовершенствования в работу авторов Colin et al., Denis et al., описывают иной процесс получения производных баккатина III или 10- деацетилбаккатина III общей формулы V 10-деацетил-баккатин III более доступен, чем таксол, так как он может быть получен из игл Taxus baccata. Согласно методу Greene et al., 10деацетилбаккатин III превращают в таксол путем присоединения С-10 ацетильной группы и путем присоединения боковой цепи сложного С-13-βамидо-эфира путем этерификации С-13 спирта при помощи звена β-амидокарбоновой кислоты. Хотя этот подход требует относительно мало этапов, синтез звена β-амидокарбоновой кислоты представляет собой многоэтапный процесс, сопровождающийся низким выходом, и реакция сочетания является трудоемкой и также приводит к низкому выходу. Однако эта реакция сочетания представляет собой ключевой этап, который требуется при каждом рассмотренном синтезе таксола или биологически активного производного таксола, так как авторами Wani et al. в JACS 93,2325 (1971) было показано, что присутствие боковой цепи сложного β-амидоэфира в С13 требуется для обеспечения противоопухолевой активности. Позднее в патенте США авторами Colin etal. N 4.814.470 сообщалось, что производные таксола формулы III, приведенной ниже, обладают значительно большей активностью, чем производные таксола (I). в которой R' обозначает атом водорода или ацетил, где кислота общей формулы VI в которой R1 обозначает окси-защитную гр уппу, конденсируется при помощи производного таксана общей формулы VII: 2 5 41287 6 защитную гр уппу, а М обозначает металл, предпочтительно Li, Mg, Na, К или Ті, a Ph обозначает фенил, для применения при получении производных таксана. Алкоголяты металлов (1) представляют собой активированные производные баккатина III и/или 10-деацетил-баккатина III й имеют особую полезность для процесса получения таксола, таксатора и други х биологически активных производных такв которой R2 обозначает ацетильную оксисана. Согласно изобретению алкоголяты металзащитную гр уппу, а R3 обозначает окси-защитную лов (1) вводят в реакцию р-лактамом (2) для полугруппу, и защитные группы R1, R3 и там, где имеет чения промежуточного соединения в виде место, R2, замещают атомом водорода. Однако сложного р-амидоэфира. Затем промежуточное этот способ требует относительно суровые услосоединение преобразуется в биологически активвия, проходит с плохим превращением и обеспеное производное таксана. Р-лактам (2) имеет обчивает вы ходы ниже оптимальных. щую формулу: Основная трудность, остающаяся при синтезе таксола и други х потенциальных Противоопухолевых ве ществ, состоит в отсутствии баккатина III и производных 10-деа-цетил-баккатина III, которые были активированы в положении кислорода С-13. Благодаря созданию таких производных было бы возможным прикрепление боковой цепи сложного β-амидоэфира с высоким выходом и таким образом облегчило бы синтез таксола, также как и относящихся к нему противоопухолевы х веществ, имеющих модифицированный набор заместителей по ядру или модифицированную боковую цепь С-13. Другая важная трудность, возникающая при синтезе таксола, состоит в том, что известные процессы присоединения боковой цепи сложного β-амидоэфира в положении С-13 обычно недостаточно диастереоселективны. Поэтому предшественник боковой цепи должен быть приготовлен в оптически активной форме для получения требуемого диастереоизомера во время присоединения. Задачей изобретения, следовательно, является получение активированных производных баккатина III и 10-деацетил-баккатина III, которые позволяют присоединять боковую цепь сложного Р-амидоэфира с высоким выходом, получение таких производных, которые позволяют использовать рацемическую смесь предшественника боковой цепи, устраняя необходимость дорогостоящего, длительного способа разделения этого предшественника на его соответствующие изомерные формы, и получение таких производных, которые позволяют получать таксаны, имеющие большее разнообразие в боковой цепи. Поставленная задача решена тем, что получают алкоголяты металлов общей формулы I: в которой R1 обозначает-OR6,-SR7 или -NR8R9; R2 обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил; R3 и R4 независимо друг от друга обозначают атом водорода, алкил, алкенил, алкинил,арил, гетероарил или ацил, при условии, однако, что R3 и R4 оба не являются ацилом; R5 обозначает –COR10, -COOR 10, -COSR10 , CONR8R10, -S02R11 или –POR 12R 13; R6 обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил или оксизащитную гр уппу; R7 обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил или сульфгидрил-защитную гр уппу; R8 обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил; R9 обозначает амино-защитную группу; R10 обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил; R11 обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, -OR10 или – NR 8 R14; R12 и R13 независимо друг от друга обозначают алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, OR10 или –NR8R14 ; и R14 обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил. Согласно изобретению R5 из β-лактама (2) предпочтительно обозначает –COR10, при этом R10 обозначает арил, n-замещенный фенил или низший алкоксил, и наиболее предпочтительно фенил, метокси, этокси, третбутокси ("tBuO": (СН3)3-СО-) или группа где Х обозначает СІ, Br, F, СН3 О- или N02-. Предпочтительно R2 и R4 обозначают атом водорода пли низший алкил Rз предпочтительно обозначает арил, наиболее предпочтительно нафтол,фенил, в которой Ті обозначает атом водорода или окси-защитную гр уппу, Z обозначает -ОТ2 или ОСОСНз, T2 обозначает атом водорода или окси 3 7 41287 8 ит.д. Фенил является наиболее предпочтительным арилом. Как отмечено выше, R1 из β-лактама (2) может представлять собой –OR6, где Rб обозначает алкил, ацил, этоксиэтил ("ЕЕ"), триэтилсилил ("TES"), 2,2,2-трихлорэтокси-метил или другую гидрокси-защитную гр уппу, такую как ацетали и простые эфиры, т.е. метоксиметил ("MOM"), бензилоксиметил; сложные эфиры, такие как ацетаты; карбонаты, такие как метилкарбонаты; и алкил и арилсилил, такой как триэтилсилил, триметилсилил, диметилтретбутилсилил, диметиларилсилил, диметилгетероарилсилил и триизопропилсилил и тому подобное. Ряд различных защитных групп для гидроксильной группы и синтез могут быть найдены в работе "Protective Goups in Organic Synthesis" автора T.W.Greene, изд. John Wiley and Sons, 1981. Выбранная гидроксизащитная группа должна легко удаляться при достаточно мягких условиях, например, в 48% HF, ацетонитриле, пиридине или 0,5% HCl/воде/этаноле и/или цинке, уксусной кислоте, с тем чтобы не разрушать связь сложного эфира или други х заместителей промежуточного соединения таксола. где X имеет указанные выше значения, Me Также, как отмечено ранее, R7 может предобозначает метил и Ph обозначает фенил. Представлять собой сульфгидрилзащитную гр уппу, a почтительно R1 выбирают из –OR6, -SR7 или – R9 может являться амино-защитной группой. NR8R9, где R6, R7 и R9 обозначают окси-группу, Сульфгидрилзащитные группы включают в себя сульфгидрил и амино-защитные группы соответгемитиоацетали, такие как 1-этоксйэтил и метокственно, a R8 обозначает атом водорода, алкил, симетил, сложные тиоэфиры или тиокарбонаты. алкенил, алкинил, арил или гетероарил. Наиболее Амино-защитные группы включают карбаматы, предпочтительно, R1 обозначает –OR6, где R6 обонапример, 2,2,2-трихлорэтилкарбамат или третбузначает триэтилсилил ("TES"), 1-этоксиэтил ("ЕЕ"), тил-карбамат. Ряд сульфгидрил- и аминоили 2,2,2-трихлорэтоксиметил. защитных групп может быть найден в вышеукаβ-лактам-алкильные группы либо в чистом визанном тексте автора T.W.Greene. де, либо с различными заместителями, опредеβ-лактамы (2) могут быть приготовлены из ленными выше, предпочтительно представляют легкодоступных материалов, как это показано на собой низший алкил, содержащий от одного до схемах А и В, приведенных в конце описания. Реашести атомов углерода в основной цепи и до 15 генты: (а) триэтиламин, СН2СІ2, 25°С, 18 ч; (Ь) 4 атомов углерода. Они могут иметь прямую или эквивалента церий-аммоний-нитрата, CH3CN, разветвленную цепь и включать метил, этил, про10°С, 10 мин; (с) КОН, ТГФ, Н2O, 0°С, 30 мин; (d) пил, изопропил, бутил, изобутил, третбутил,арил, простой этил-виниловый эфир, ТГФ, толуолсульгексил и тому подобное. фокислота (кат.), 0°С, 1,5 ч; (е) n-бутиллитий, проβ-лактам-алкенильные группы в чистом виде стой эфир, -78°С, 10 мин; хлористый бензоил, или с различными указанными выше заместите78°С, 1 ч; (f) литий-диизопропил-амид, ТГФ, -78°С лями представляют собой низший алкенил, содо - 50°С; (g) литий-гексаметилдисилазид, ТГФ, держащий от двух до шести атомов углерода в 78°С до 0°С; (h) ТГФ, - 78°С до 25°С, 12ч. главной цепи и до 15 атомов углерода. Они могут Исходные материалы легко доступны. На схеиметь прямую или разветвленную цепь и вклюме А α-ацетокси-ацетил-хлорид получают из гличать этенил, пропенил, изопропенил, бутенил, колевой кислоты и в присутствии третичного амиизобутенил, арил, гексенил и тому подобное. на циклоконденсируют с иминами, полученными β-лактам-алкинильные группы в чистом виде из альдегидов и n-метоксианилина, для получения или с различными заместителями, указанными l-N-метоксифенил-3-ацилокси-4-арилазетидин-2выше, предпочтительно представляют собой низонов. N-метоксифенильная группа может быть ший алкинил, содержащий от двух до шести атолегко удалена путем окисления церий-аммониймов углерода в главной цепи и до 15 атомов угленитратом, а ацилокси-группа может быть гидролирода. Они могут иметь прямую или разветвленную зована при стандартных условиях, известных для цепь и включать этинил, пропинил, бутинил, изоспециалистов в данной области, для получения 3бутинил, арил, гексенил и тому подобное. окси-4-арилазетидин-2-онов. 3-гидроксильная Описанные β-лактам-арильные составляющие группа защищена 1-этоксиэтилом, но она может в чистом виде или с различными заместителями быть защищена рядом стандартных защитных содержат от б до 15 атомов углерода и включают групп, таких, как триэталсилильная группа или в себя фенил, α-нафтил или β-нафтил и т.д Замедругие триалкил (или арил) силильные группы. На стители включают алканоксигруппу, защищенную схеме В этил- α-триэтилсилилоксиацетат легко оксигруппу, атом галогена, алкил, арил, алкенил, получают из гликолевой кислоты. ацил, ацилокси-, нитро-, амино-, амидо- группу Рацемический β-лактам может быть раство 4 9 41287 10 рен в чистых энантиомерах до защиты путем петаком растворителе, как тетрагидрофуран (ТГФ), рекристаллизации соответствующи х сложных 2для получения производного алкоголята металла метокси-2- (трифторметил) эфиров фенилуксус13-О-литий-7-О-триэтилсилил-баккатина III (5b, 5с ной кислоты. Однако описанная ниже реакция, в или 5d), как показано на схеме II реакции, привекоторой присоединяется боковая цепь сложного βденной в конце описания. амидо-эфира, имеет то преимущество, что облаКак показано в следующей схеме III реакции, дает высокой диастереоселективностью, позволяя приведенной в конце описания, производное 13-Oтаким образом использовать рацемическую смесь литий-7-O-триэтилсилил-баккатина III (5b, 5с или предшественника боковой цепи. 5d) реагирует с β -лактамом (2) для получения 3- (1 -этоксиэтокси) -4-фенилазетидин-2-он со промежуточного соединения (6b, 6с или 6d), в косхемы А и 3-(1триэтилсилилокси)-4тором гидроксильные группы С-7 и С-2' защищены фенилазетидин-2-он со схемы В могут быть прегруппой триэтилсилила. Триэтилсилильные и образованы в β-лактам (2) путем обработки осноэтоксиэтильные группы затем гидролизуют при ванием, предпочтительно n-бутиллитием, и ацилмягких условиях так, чтобы не разрушить связь хлоридом, сульфонилхлоридом, сложного эфира или заместителей таксана, Ті фосфинилхлоридом, фосфорилхлоридом или алобозначает оксизащитную группу; М обозначает килхлорформиатом при -78°С или ниже. атом металла; Ph обозначает фенил; Ас обознаПредпочтительно алкоголяты металлов получает ацетил; и радикалы R1-R5 имеют указанные чают путем введения в реакцию спирта, имеющего выше значения. от двух до четырех колец ядра таксана и гидроЗаместитель металла М из алкоголята металксильной группы С-13 с металлоорганическим сола, (3) представляет собой лантанид или актиноид единением в подходящем растворителе. Наибоили элемент группы IA, IIА, IIIA или переходный лее предпочтительно, спирт представляет собой металл, т.е. металл групп IIIA, IVA, VA или VIA. защищенный баккатин III, в частности, 7-0Предпочтительно он представляет собой металл триэтилсилил-баккатин III (который может быть группы IA, IIА или переходный металл, наиболее получен согласно описанию авторов Greene et al., предпочтительно литий, магний, натрий, калий в JACS 110, 5917 (1988) или другими способами), или титан. или 7,10-бис-О-триэтил-силил-баккатин III. Как преобразование спирта в алкоголят меКак изложено в работе авторов Greene et al., талла, так и последующий синтез производного 10-деацетил-баккатин III преобразуют в 7-Отаксана могут происходить в том же самом реактриэтилсилил-10-деацетил-баккатин III согласно ционном сосуде. Предпочтительно, β-лактам досхеме реакции (3) (4а), приведенной в конце опибавляют в реакционный сосуд после образования сания. в нем алкоголята металла. При так называемых тщательно оптимизироМеталлоорганическое соединение nванных условиях 10-деацетилбаккатин III вводят в бутиллития предпочтительно используется для реакцию с 20 эквивалентами (C2H5)SiCl при 23°С в преобразования баккатина III или 10-деацетилатмосфере аргона в течение 20 ч в присутствии 50 баккатина III в соответствующий алкоголят металмл пиридина/ммоль 10-деацетил-баккатина III I ла, но также могут быть использованы другие исдля получения 7-триэтилсилил-10-деацетил- бакточники металлического заместителя, такие как катина III (4а) в виде продукта реакции с выходом литий-диизопропиламид, другие амиды лития или 84-86% после очистки. магния, этилмагний бромид, метилмагний бромид, Продукт реакции (4а) затем ацетилируют с другие литий-органические соединения, другие помощью 5 эквивалентов СН3СОС! и 25 мл пиримагний-органические соединения, натрийдина/ммоль 4а при 0°С в атмосфере аргона в теорганическое соединение, титан-органическое чение 48 ч для получения с выходом 86% 7-Осоединение, цирконий-органическое соединение, триэтилсилил-баккатина III (4b), как сообщается цинк-органическое соединение, кадмийавторами Greene et al. в JACS 110, 5917органическое соединение или калий-органическое 5918(1988). соединение или соответствующие амиды. МеталВ качестве альтернативы 7-триэтилсилил- 10лоорганические соединения доступны или могут деацетил-баккатин III (4а) может быть защищен быть получены известными методами, включая кислородом на С-10 с помощью кислотовосстановление органических соединений галогенеустойчивой гидрокси-защитной группы. Напринидов металлом. Предпочтительны низшие алкилмер, после обработки n-бутиллитием в ТГФ с погалогениды. Например, бромистый бутил может следующей обработкой триэтилсилилхлоридом быть введен в реакцию с металлическим литием в (1,1 мол. экв.) при 0°С получают 7,10-бис-Опростом диэтиловом эфире для получения растриэтилсилил-баккатин III (4с) с вы ходом 95%. твора n-бутиллития следующим образом: Таким же образом (4а) может быть преобразован в 7-0-триэтилсилил-10-(1-этоксиэтил)- баккатин III (46) с выходом 90% путем обработки избытком В качестве альтернативы алкоголят лития мопростого этилвинилового эфира и каталитического жет быть подвергнут обмену с галоидами металколичества метанолсульфо-кислоты. Эти способы лов для образования алкоголятов алюминия, бополучения изображены на схеме I реакции, привера, церия, кальция, циркония или цинка. денной в конце описания. Хотя ТГФ является предпочтительным расПроизводные 7-0-триэтилсилил-баккатина III творителем для реакционной смеси, также могут (4b, 4с или 4d) вводят в реакцию с металлооргаподойти другие эфирные растворители, такие как ническим соединением, таким как n-бутиллитий, в 5 11 41287 12 диметоксиэтан, или же ароматические растворивсех отношениях. Пробу объемом в 5 мг 2',3'тели. Некоторые растворители, включая некотоэпи(2'8,3'Р)-2'-этоксиэтил-7-триэтилсилил-таксола рые галогенсодержащие растворители и некоторастворяют в 2 мл этанола и добавляют 0,5 мл рые прямоцепные углеводороды с прямой цепью, 0,5%-ного водного раствора НСl. Смесь перемев которых реагенты слишком малорастворимы, шивают при 0°С в течение 30 ч и разбавляют 50 непригодны. Другие растворители непригодны по мл этилацетата. Раствор экстрагируют при помодругим причинам. Например, сложные эфиры нещи 20 мл насыщенного водного раствора бикарпригодны для использования с некоторыми мебоната натрия, суша т на суль фате натрия и конталлоорганическими соединениями, такими как nцентрируют. Остаток очищают при помощи бутиллитий из-за несовместимости с ними. быстрой хроматографии для получения 4,5 мг Хотя приведенная схема реакции идеально (примерно 90%) 2',3'-эпитаксола.. направлена на синтез таксола, таксатора и других Пример 2. Получение 2',7производных таксана, примеры которых приведе(бис)триэтилсилилтаксола и впоследствии таксоны здесь, она может быть использована с модила, из рацемического β-лактама. К раствору, софикациями в отношении β-лактама или тетрацикдержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, лического алкоголята металла для получения 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45°С по каплям додруги х соединений. Так, бета-лактам и тетрацикбавляют 0,087 мл 1663М раствора nBuLi в гексане. лический алкоголят металла могут быть получены Спустя 1 ч при -45°С к смеси по каплям добавляют из природных или искусственных источников для раствор цис-1 -бензоил-3-триэтилсилилокеи-4получения других синтетических таксолов, произфенила зетидин-2-она (274 мг, 0,715 ммоля) в 1 водных таксола, 10-деацетилтаксолов и энантиомл ТГФ. Раствору дают нагреться до 0°С и вымеров и их диастереомеров, рассматриваемых в держивают при 0°С в течение 1 ч. Добавляют 1 мл рамках изобретения. 10 %-кого раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют Способ согласно изобретению также имеет на насыщенный водный NaHCО3 и 60/40 этилважное преимущество в том, что обладает высоацет/гексан. После выпаривания органического кой диастереоселективностью. Поэтому могут слоя получают остаток, который очищают при побыть использованы рацемические смеси предшемощи быстрой хроматографии с последующей ственников боковой цепи. Может быть достигнута перекристаллизацией для получения 131 мг (85%) значительная экономия стоимости, так как здесь (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола и 15мг не требуется разлагать рацемические бета(10%) 2',3'-эпи (2'S,3'R)-2',7лактамы на их чистые энантиомеры. Дополни(бис)триэтисилилтакеола. К раствору, содержательная экономия стоимости может быть достигщему 121,3 мг (0,112 ммоля) (2'R, 3'S)-2',7нута благодаря тому, что требуе тся меньше (бис)триэтилсилилтаксола в 6 мг ацетонитрила и предшественника боковой цепи, например, на 600,3 мл пиридина при 0°С добавляют 0,9 мл 48%70% по отношению к предшествующим процесного водного HP. Смесь перемешивают при 0°С в сам. течение 8 ч, затем при 25°С в течение 6 ч. Смесь Пример 1. Получение 2'-этоксиэтил-7разделяют между насыщенным водным раствотриэтилсилил-таксола и потом таксола из рацемиром бикарбоната натрия и этилацетатом. После ческого β-лактама. К раствору 7-три-этилсилилвыпаривания раствора этилацетата получают 113 баккатина III (20 мг, 0,028 ммоля) в 1 мл ТГФ при мг материала, который очищают при помощи бы78°С добавляют по каплям 0,17 мл 0,164 М расстрой хроматографии и перекристаллизации для твора nBuLi в гексане. Спустя 30 мин при -78°С к получения 94 мг (98%) таксола, который идентисмеси по каплям добавляют раствор цис-1чен подлинной пробе во всех отношениях. К расбензоил-З- (1 -этоксиэтокси) -4-фенилазетидин-2твору из 5 мг (2'R,3'S)-2',7она (47,5 мг, 0,14 ммоля) в 1 мл ТГФ. Этому рас(бис)триэтилсилилтаксола в 0,5 мл ацетонитрила твору дают медленно нагреться (в течение 1,5 ч) и 0,03 мл пиридина при 0°С добавляют 0,09 мл до 0°С и затем его перемешивают при 0°С в тече48%-ного водного HF. Смесь перемешивают при ние 1 ч и добавляют 1 мл 10%-ного раствора 0°С в течение 8 ч, затем при 25°С в течение 6 ч. АсОН в ТГФ. Смесь делят между насыщенным Смесь разделяют на насыщенный водный бикарводным NaHCO3 и 60/40 этилацетатом/гексаном. бонат натрия и этилацетат. Выпаривание органического слоя дает остаток, После выпаривания раствора этилацетата покоторый очищают при помощи быстрой хроматолучают 5 мг материала, который очищают при графии для получения 23 мг (80%) (2'R,3'S)-2'помощи быстрой хроматографии и перекристалэтоксиэтил-7-триэтилсилилтаксола и 3,5 мг (13%) лизации для получения 4,6 мг (примерно 95%) 2',3'-эпи (2'S,3'R) -2'-этоксисилил-72',3'-эпитаксола. триэтилсилилтаксола. 5 мг пробы (2 'R, 3 'S) -2' Пример 3. Получение таксатора. К раствору, этоксиэтил-7-триэтилсилилтаксола растворяли в 2 содержащему 7,10-бис-триэтилсилил-баккатин III мл этанола и добавляют 0,5 мл 0,5%-ного водного (200 мг, 0,248 ммоля) в 2 мл ТГФ, при -45°С по раствора HСІ. Смесь перемешивают при 0°С в каплям добавляют 0,174 мл 1,63 М раствора nBuLi течение 30 ч и разбавляют 50 мл этилацетата. в гексане. После выдерживания в течение 0,5 ч Раствор экстрагируют при помощи 20 мл насыпри -45° С к смеси добавляют по каплям раствор щенного водного раствора бикарбоната натрия, цис-1- (трет.бутоксикарбонил) -3- триэтилсилилоквысушивают на сульфате натрия и концентрируси-4-фенилазетедин-2-она (467 мг, 1,24 ммоля) в ют. Остаток очищают при помощи быстрой хрома2 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0°С и выдержитографии для получения 4,5 мг (примерно 90%) вают при этой температуре в течение 1 ч, после таксола, который идентичен аутентичной пробе во чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора АсОН в 6 13 41287 14 1 ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный Н-ЯМР (СDСІ3, 300 МГц) d 8,14 (d, J=7,3 Гц, NaHCO3 и 60/40 этилацетат/гексан. После выпа2Н, бензоат орто), 7,96 (m, -1Н, ароматический), ривания органического слоя получают остаток, 7,90 (m, 1H, ароматический), 7,85 (m, 2H, аромакоторый очищают фильтрованием через силикатический), 7,76 (m, 2Н, ароматический), 7,60 (m, гель для получения 280 мг сырого 2',7,10-трисЗН, ароматический), 7,52 < m, 4H, ароматический), триэтилсилилтаксотера. К раствору из 280 мг сы7,41 (m, 2H, ароматический), 7,01 (d, J=8,8 Гц, 1H, рого продукта, полученного при предшествующей NH), 6,27 (s, 1H, Н10), 6,26 (dd, J=9,2,9,2 Гц, 1H, реакции, в 12 мл ацетонитрила и 0,6 мл пиридина Н13), 5,97 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H, НЗ'), 5,68 (d, J=7,1 при 0°С добавляют 1,8 мл 48%-ного водного HP. Гц, 1H, H20α), 4,93 (m, 1H, H5), 4,92 (m, 1H, H2'), Смесь перемешивают при 0°С в течение 3 ч, за4,39 (m, 1H, Н7), 4,30 (d, J=8,5 Гц, 1H, H20 α), 4,20 тем при 25°С в течение 13 ч и разделяют на на(d, J=8,5 Гц, 1H, H20 бета). 3,81 (d, J=7,1 Гц, 1H, сыщенный водный раствор бикарбоната натрия и НЗ), 3,60 (d, J= 5 Гц, 1H, 2'ОН), 2,48 (m, 1H, Н6α), этилацетат. После выпаривания раствора этил2,45 (br, 1H, 70Н), 2,39 (s, ЗН, 4Ас), 2,30 (m, 2H, ацетата получают 215 мг материала, который Н14), 2,24 (s, ЗН, 10Ac), 1,83 (m, 1H, H6 бета), 1,82 очищают при помощи быстрой хроматографии для (br, ЗН, Ме18), 1,68 (s, 1H, 10Н), l,68(s,3H,Me19), получения 190 мг (95%) таксатора, который пере1,24(s,3H,Me17), 1,14(s,3H, Me16). кристаллизуют из метанола/воды. Все аналитичеПример 5. Получение 2',7-окси-защищенного ские и спектральные данные идентичны данным, таксола с использованием алкоголята магния. К приведенным для таксатора в пат. США 4.814.470. раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин Пример 4. III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45°С по каплям добавляют 0,048 мл 3,ОМ раствора метилмагний-бромида в простом эфире. После выдерживания в течение 1 ч при -45°С к смеси добавляют по каплям раствор (+)-цис-1-бензоил-3триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0°С и выдерживают при этой температуре в течение 4 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NаНСОз и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 148 мг (96%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола; Пример 6. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с применением алкоголята калия. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45°С по каплям добавляют 0,286 мл 0,5М раствора калийгексаметилдисилазида в толуоле. После выдерживания в течение 1 ч при -45°С к смеси по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0°С и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO3 и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 139 мг (90%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола. Пример 7. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с применением алкоголята лития из гексаметилдисилазида лития. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45°С по каплям добавляют 0,143 мл 1,ОМ раствора гексаметилдисилазида лития в ТГФ. После выдерживания в течение 1 ч при -45°С к смеси по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммолей) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0°С и выдерживают при этой температуре в течение 2 ч, после чего где Np2 обозначает Получение З'-десфенил-3'-(2-нафтил)-таксола. К раствору, содержащему 7-триэтилсилилбаккатин III (200 мг, 0,286 ммоля) в 2 мл ТГФ, при 45°С по каплям добавляют 0,174 мл 1.63М раствора nBuli в гексане. После выдерживания в течение 0,5 ч при -45°С к смеси по каплям добавляют раствор цис-1 -бензоил-3-триэтилсилилокси-4(2-нафтил)азетидин-2-она (620 мг, 1,43 м молей) в 2 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0°С и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO3 и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают фильтрованием через силикагель для получения 320 мг смеси, содержащей (2'R,3'S)-2',7-(биc)тpиэтилcилил-3'-дecфeнил-3'- (2нафтил)-таксола и небольшого количества изомера (2'S,3'R). К раствору из 320 мг (0,283 ммоля) смеси, полученной в результате предшествующей реакции, в 18 мл ацетонитрила и 0,93 мл пиридина при 0°С добавляют 2,8 мл 48%-ного водного раствора HF. Смесь перемешивают при 0°С в течение 3 ч, затем при 25°С в течение 13 ч и разделяют на насыщенный водный бикарбонат натрия и этилацетат. После выпаривания раствора этилацетата получают 255 мг материала, который очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 166 мг (64%) З'-десфенил-3'-(2нафтил)-таксола, который перекристаллизовьгвают из метанола/воды. Т.пл. 164-165°С; [α]25Na-52,6° (с 0,005,СНСlз). 7 15 41287 16 добавляли 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на Смесь разделяют на насыщенный водный NаНнасыщенный водный раствор NаНСО3 и смесь СОз и 60/40 этилацетат/гексан. После выпариваэтилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органия органического слоя получают остаток, котонического слоя дает остаток, который очищают рый очищают при помощи быстрой выходом непрореагировавшие исходные матехроматографии с последующей перекристаллизариалы. цией для получения 151 мг (98%) (2'R,3'S)-2',7Контрольный пример, соответствующий при(бис)триэтилсилилтаксола. меру 5. В раствор 200 мг (0,286 ммол.) 7Пример 8. Получение таксола с использоватриэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45°С по нием алкоголята лития (из гексаметилдисилазида каплям добавляют раствор 620 мг цис-1 -бензоиллития). К раствору, содержащему 7-триэтилсилил3-триэтил-силилокси-4-(1-нафтил)-азетвдин-2баккатин III (100 мг, 0 143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при она(1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают 45°С по каплям добавляют 0,143 мл 1,0 М растводо 0°С и выдерживают при этой температуре в ра гексаметилдисилазида лития в ТГФ. После вытечение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного держивания в течение 1 ч при -45°С к смеси по раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыкаплям добавляют раствор (+)-цис-1 -бензоил-3щенный водный раствор NаНСО3 и смесь этил(2- метокси-2-пропилокси) -4-фенилазетадин-2ацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органичеона (58 мг, 0,172 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор наского слоя дает остаток, который очищают гревают до 0°С и выдерживают при этой темперафильтрованием через силикагель, получая с полтуре в течение 2 ч, после чего добавляют 1 мл ной рекуперацией непрореагировавшие исходные 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют материалы. на насыщенный водный NаНСОз и 60/40 этилацеКонтрольный пример, соответствующий притат/гексан. После выпаривания органического меру 4. В раствор 200 мг (0,286 ммол.) 7слоя получают остаток, который очищают перетриэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45°С по кристаллизацией для получения 147 мг (99%) каплям добавляют раствор 620 мг цис-1-бензоил(2'R,3'S)-2'-(2-метокси-2-пропилокси)-73-триэтилсилилокси-4- (2-нафтил) -азетидин-2-она триэтилсилилтаксола. К раствору, содержащему (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают до 116 мг (0,112 ммоля) (2'R,3'S)-2'-(2-метокси-20°С и выдерживают при этой температуре в течепропилокси)-7-триэтилсилилтаксола в 6 мл ацетоние 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раснитрила и 0,3 мл пиридина, при 0°С добавляют 0,9 твора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насымл 48%-ного водного HF. Смесь перемешивают щенный водный раствор NаНСО3 и смесь при 0°С в течение 8 ч, затем при 25°С в течение этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание орга10 ч. Смесь разделяли на насыщенный водный нического слоя дает остаток, который очищают бикарбонат натрия и этилацетат. После выпарифильтрованием через силикагель, получая с кования этилацетатного раствора получают 113 мг личественной рекуперацией непрореагировавшие материала, который очищают при помощи переисходные материалы. кристаллизации для получения 95 мг (99%) таксоКонтрольный пример, соответствующий прила, который идентичен с подлинной пробой во мера 6. В раствор 200 мг (0,286 ммол.) 7всех о тношениях. триэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45°С по Пример 9. Получение 2',7-окси-защищенного каплям добавляют раствор 590 мг цис-1-бензоилтаксола с применением алкоголята натрия. К рас3-триэтилсилилокси-4(4-метоксифенил)твору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III азетидин-2-она (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45°С по подогревают до 0°С и выдерживают при этой темкаплям добавляют 0,143 мл 1М раствора гексамепературе втечение 1 ч перед добавлением 1 мл тилдисилазида натрия в ТГФ. После выдержива10%-ного раствора АсОН в ТГФ Смесь разделяют ния в течение 1ч при -45°С к смеси добавляют по на насыщенный водный раствор NaHCO3 и смесь каплям раствор (+)-цис-1-бензоил-3этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание оргатриэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, нического слоя дает остаток, который очищают 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до фильтрованием через силикагель, получая с ко0°С и выдерживают при этой температуре в течеличественной рекуперацией непрореагировавщие ние 3 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного расисходные материалы. твора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыКонтрольный пример, соответствующий прищенный водный раствор NaНСО3 и 60/40 меру 7. В раствор 200 мг (0,286 ммол.) 7этилацетат/гексан. После выпаривания органичетриэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45°С по ского слоя получают остаток, который очищают каплям добавляют раствор 595 мг цис-1 -бензоилпри помощи быстрой хроматографии с последуюЗ-триэтилсилилокси-4- (4-хлорфенил)-азетидин-2щей перекристаллизацией для получения 108 мг она (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают (70%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола. до 0°С и выдерживают при этой температуре в Контрольный пример, соответствующий притечение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного меру 1. В раствор 100мг(0,143ммол.) 7раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насытриэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45°С по щенный водный раствор NaHCO3 и смесь этилкаплям добавляют раствор 274 мг (0,715 ммол.) ацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органичецис-1бензоил-3-триэтилсилилокси-4ского слоя дает остаток, который очищают фенилазетидин-2-она в 1 мл ТГФ. Раствор подогфильтрованием через силикагель, получая с коревают до 0°С и выдерживают при этой темпераличественной рекуперацией непрореагировавшие туре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%исходные материалы. 8 17 41287 18 Пример 10. Получение 2',7в смесь по каплям добавляют раствор (+)-циг-1гидроксиблокированного таксола с использованибензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2ем алкоксида магния. В раствор 100 мг (0,143 она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор пеммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при ремешивают при 0°С в течение 3 ч перед добав-45°С по каплям добавляют 0,048 мл 3,0 М раслением 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. твора метилмагнийбромида в диэтиловом эфире. Смесь разделяют между насыщенным водным По истечении 1 ч выдержки при -45°С в смесь по раствором NаНСО3 и смесью этилацетата с гексакаплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3ном 60/40. Выпаривание органического слоя дает триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, остаток, который очищают высокоскоростной хро0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до матографией с последующей перекристаллизаци0°С и выдерживают при этой температуре в течеей, получая 131 мг (85%) (2'R.,3'S)-2',7ние 4 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного рас(бис)триэтилсилилтаксола. твора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насы(2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсидилтаксол с исщенный водный раствор NaHCO3 и смесь пользованием алкоксида натрия. Раствор 100 мг этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание орга(0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл нического слоя дает остаток, который очищают ТГФ при -45°С по каплям добавляют в суспензию высокоскоростной хроматографией с последую3,5 мг гидрида натрия в 0,5 мл ТГФ. Раствор пощей перекристаллизацией, получая 148 мг (96%) догревают до 0°С в течение 6 ч, затем охлаждают (2'R,3'S)-2',7- (бис)триэтилсилилтаксола. до -45°С и в смесь по каплям добавляют раствор Пример 11. Получение 2',7(+) -цис-1 -бензоил-3-триэтилсилилокси-4гидроксиблокированного таксола с использованифенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ем алкоксида калия. В раствор 100 мг (0,143 ТГФ. Раствор подогревают до 0°С и выдерживают ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при при этой температуре в течение 10 ч перед до-45°С по каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М расбавлением 1 мл 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. твора калийгексаметилдисилазида в толуоле. По Смесь разделяют на насыщенный водный раствор истечении 1 ч выдержки при -45°С в смесь по капNaHCO3 и смесь этилацетата с гексаном 60/40. лям добавляют раствор (+) -цис-1 -бензоил-3Выпаривание органического слоя дает остаток, триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, который очищают высокоскоростной хроматогра0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до фией с последующей перекристаллизацией, полу0°С и выдерживают при этой температуре в течечая 98 мг (64%) (2'R,3'S)-2',7- (бис) триэтилсилилние 3 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного растаксола. твора АсОН в ТГФ. Смесь разделяю на насыщен(2 'R ,3 'S) -2' ,7- (бис) триэтилсилилтаксол с ный водный раствор NaHCO3 и смесь этилацетата использованием алкоксида титана. В раствор 100 с гексаном 60/40. Выпаривание органического мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 слоя дает остаток, который очищают высокоскомл ТГФ при -45°С по каплям добавляют 0,087 мл ростной хроматографией с последующей пере1,63 М раствора BuLi в гексане. После выдержки в кристаллизацией, получая 1,39 мг (90%) (2 'R, 3'S) течение 1 ч при -45°С раствор охлаждают до -78°С -2' ,7- (бис) триэтилсилилтаксола. и добавляют в него 0,140 мл 1,0 раствора четыТаксол с использованием алкоксида цинка. В реххлористого титана в хлористом метилене. Расраствор 10,0 мг (0,143 ммол.) 7твор подогревают до -45°С и в смесь по каплям триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45°С по добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М раствора калийтриэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, гексаметилдисилазида в толуоле. По истечении 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 15 мин добавляли 32 мг (0,143 ммол.) цинкхло0°С и выдерживают при этой температуре в течериддиметоксиэтанового комплекса. По истечении ние 8 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного расдополнительного 1 ч выдержки при-45°С смесь твора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют на насыподогревают до 0°С и в смесь по каплям добавщенный водный раствор NaHCO3 и смесь ляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триээтилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание оргатилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, нического слоя дает остаток, который очищают 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор перемешивают высокоскоростной хроматографией с последуюпри 0°С в течение 3 ч перед добавлением 1 мл щей перекристаллизацией, получая 129 мг (84%) 10%-ного раствора АсОН в ТГФ. Смесь разделяют (2'R,3'S)-2',7 -(бис)-триэтилсилилтаксола. на насыщенный водный раствор NaHCO3 и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 139 мг(90%) (2'R, 3'S) -2', 7-(бис) триэтилсилилтаксола. Таксол с использованием алкоксида кадмил. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45°С по каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М раствора калийгексаметилдисилазида в толуоле. По истечении 15 мин добавляли 26 мг (0,143 ммол.) безводного хлорида кадмия. По истечении дополнительного 1 ч выдержки при -45°С смесь подогревают до 0°С и 9 19 41287 20 ________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2001 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 10