Харчова композиція для контрольованого вивільнення глюкози, що містить глікоген

Реферат: Винахід належить до штучної харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози, що містить глікоген, що має молекулярну масу понад 2000000 Дальтон, а відсоток α-1,6глікозидних зв'язків - від 5 % до 15 % по відношенню до загального числа зв'язків та містить принаймні один їстівний компонент. Також винахід належить до застосування глікогену в підготовці штучної харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози. UA 106238 C2 (12) UA 106238 C2 UA 106238 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Галузь застосування винаходу Винахід відноситься до використання глікогену в підготовці харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози. Зокрема, винахід відноситься до використання глікогену із середньою молекулярною масою понад 2000000 Дальтон у підготовці штучної харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози. Рівень техніки Штучні харчові композиції, що містять джерело глюкози, добре відомі в цій галузі. Дані композиції можуть мати різні галузі застосування. Перша галузь застосування відноситься до застосування в якості харчових добавок для професійних спортсменів або любителів. Друга галузь застосування відноситься до застосування для парентерального введення, коли особа, яка потребує лікування, не може отримувати їжу через звичайний шлунковокишковий тракт. Третя галузь застосування відноситься до застосування для кишкового харчування, у вигляді рідини, що вводиться через катетер безпосередньо в шлунок або кишечник. Четверта галузь застосування відноситься до застосування в якості агентів, здатних викликати відчуття ситості (наповнювач) без надання значних калорій. Штучні харчові композиції, відомі в даній галузі, як правило, отримують шляхом гідролізу крохмалю або його похідних. Крохмаль - найбільш поширений полісахарид в рослинному світі і складається з полімерних ланцюгів глюкози. Крохмаль, в основному, складається з двох полімерів, амілози (приблизно 20 % за масою) і амілопектину (приблизно 80 % за масою). Амілоза є лінійним полімером, в якій глюкозні ланки зв'язані між собою α (1 → 4) глікозидними зв'язками. Амілопектин – розгалужений полімер, який містить основні ланцюги зі структурою, схожою на амілозу, на яких бічні ланцюги розгалужені через α (1 → 6) зв'язки кожні 24-30 ланки глюкози. Патентна заявка EP1548033 або США 2005/0159329 описує досить розгалужені полісахариди, отримані ферментативним гідролізом крохмалю з середньою молекулярною масою від 90000 до 150000 Дальтон. Подібні полісахариди із середньою молекулярною масою від 3500 до 20000 Дальтон також описані в заявці на патент EP1369432. Патентна заявка EP487187 описує харчову композицію, що містить мальтодекстрини з низьким вмістом калорій від 160 до 240 ккал на 100 г. Заявка на патент EP 514 528 описує розчинний харчовий продукт, що містить мальтодекстрини і бета-глюкани та/або пентозани. Мальтодекстрини відносяться до класу речовин, отриманих в результаті гідролізу крохмалю, що містить кілька десятків молекул глюкози, пов'язаних одна з одною α(1 → 4) глікозидними зв'язками. Залежно від ступеня, до якого крохмаль гідролізується, що проводиться хімічними/фізичними або ферментативними засобами або їх поєднанням, отримують різні види мальтодекстринів, що відрізняються за кількістю молекул глюкози, що утворюють їх, як правило, від 2 до 20 одиниць. Декстрозний еквівалент (DE), який може коливатися як мінімум від 4-6 до максимум 36-39, визначається на підставі їх довжини. Чим вище значення DE, тим більший ступінь гідролізу і тим коротша довжина ланцюга. Кінцевим результатом їх перетравлення організмом завжди є глюкоза, але швидкість, з якою цей процес відбувається і, як наслідок, виробництво енергії залежить від величини DE. Штучні харчові композиції, що містять джерело глюкози, містять інші важливі поживні елементи, наприклад, для відновлення водно/сольового балансу в тих ситуаціях, коли виробляється велика кількість поту, наприклад, після фізичного навантаження або активної спортивної активності. Ідеальна осмолярність цих композицій повинна мати значення, яке є ідентичним або трохи меншим, ніж у плазми (280-300 мOсмл/кг), тобто енергетичний розчин має бути гіпотонічним з кров'ю, за умови, що осмолярність впливає на швидкість спорожнення шлунка і, зокрема кишкове всмоктування води і розчинених молекул. З мальтодекстринами можна робити ізотонічні композиції, що містять інші поживні елементи на додаток до джерела глюкози. Штучні харчові композиції, відомі в даній області, включаючи низькомолекулярні полісахариди з α(1→4) зв'язками, забезпечують швидке надходження глюкози, яка швидко всмоктується і метаболізується. Це має два основні види недоліків. Перший недолік полягає в тому, що ці харчові композиції не можуть бути введені особам з діабетом, оскільки вони призведуть до швидкого зростання рівня глюкози в крові (глікемії). 1 UA 106238 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Другий недолік полягає в тому, що енергетичний ефект не є тривалим, якщо в організм потрапляють велика кількість речовин, що може привести до диспепсичного явища, пов'язаного з тим, що вода утилізується кишечником, в результаті надмірної осмолярності цих речовин. Композиції з високими молекулярними масами і зв'язками, які є більш важкими для гідролізу, були досліджені в спробі подолати дані недоліки. Патентна заявка WO 00/32064 описує композицію, що містить суміш вуглеводів, таких як крохмаль або похідні крохмалю і зшитих полісахаридів, таких як похідні целюлози, камеді, пектини і альгінати. Патентна заявка WO2004/023891 описує харчову композицію, що містить полісахариди з α(1 → 6) зв'язками, як правило, декстран, пуллулан і альтернан, що має молекулярну масу від 300 000 до 1000000 Дальтон. Патентна заявка EP153013 описує композиції на основі декстранів, полісахаридів з α (1 → 6)зв'язками з молекулярної масою від 50000 до 1000000 Дальтон, з невеликим кишковим всмоктуванням або без нього, які здатні виступати в ролі агентів, здатних викликати почуття насичення (наповнювачі). Штучні харчові композиції, відомі в даній області, що включають полісахариди з α(1 → 6)зв'язками, таким чином, як відомо, забезпечують поступове вивільнення глюкози, за умови, що довжина ланцюга не є надто довгою, і в цьому випадку всмоктування різко знижується. Глікоген являє собою полісахарид, в основному тваринного походження, який переважно складається з молекул D-глюкози, зв'язаних α-1-4 глікозидними зв'язками з розгалуженнями, що утворені α-1-6 глікозидними зв'язками через кожні п'ять-десять ланок глюкози. Кількість і ступінь розгалуження глікогену змінюється в залежності від виду тварин, з яких він отриманий. 6 7 Молекулярна маса природного глікогену - порядку 10 -10 Дальтон. У природі глікоген завжди зв'язаний з білком, глікогеніном, ферментом, що пов'язаний з процесом клітинного синтезу глікогену. Якість комерційного похідного глікогену залежить від наявності більшої чи меншої кількості залишків білка (вимірюється кількістю азоту, що виражається в проміле) і відновлюючих цукрів. Патент ЕР 654048 описує похідне глікогену вищої якості з низьким вмістом азоту та відновлюючи цукрів і молекулярною масою, що становить приблизно 2500000 Дальтон. Глікоген використовується у якості пом'якшувального засобу (як описано в JP-A-87-178505) і зволожуючого агента (як описано в JP-A-88-290809) в сфері косметики, у якості добавки в харчовій промисловості, і в якості зволожувача і мастильного засобу в офтальмологічних розчинах (як описано в патенті WO99/47120). Короткий опис винаходу На диво, заявник виявив, що глікоген, зокрема, глікоген, описаний в патенті EP654048, здатний забезпечити поступове вивільнення глюкози, подібне до того, що отримане з інших полісахаридів з низькою молекулярною масою, типу мальтодекстрину, системи in та in vitro, яка імітує шлунково-кишковий тракт. Даний винахід відноситься до використання глікогену в підготовці штучної харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози. Заявник виявив, що, незважаючи на свою високу молекулярну масу, більше 2000000 Дальтон, згаданий глікоген піддається деградації ферменту через ферменти, присутні в шлунково-кишковому тракті і дозволяє поступове вивільнення глюкози протягом 20-24 годин, система in та in vitro, яка імітує шлунково-кишковий тракт. На додаток до цього, заявник також зазначив, що, оскільки глікоген має високу молекулярну масу, більше 2000000 Дальтон, для такої ж кількості глюкози, що поглинається, осмолярність в порівнянні з введенням мальтодекстрину є набагато меншою, і це дозволяє уникнути проблем повернення води з диспепсичними ефектами, відомими в даній галузі. Заявник також зрозумів, що поступове і постійне вивільнення глюкози, що спостерігається при проходженні глікогену через шлунково-кишковий тракт, може вигідно надавати можливість використання відповідно дозованого глікогену в якості харчових продуктів чи напоїв для хворих на цукровий діабет осіб. В іншому аспекті цей винахід також відноситься до штучних харчових композицій для контрольованого вивільнення глюкозовмісного глікогену і включає принаймні один їстівний компонент, переважно принаймні один нутриційний елемент. Заявник виявив, що штучні харчові композиції згідно винаходу мають більше смакових властивостей, ніж композиції, відомі в даній галузі, що містять мальтодекстрини. Зокрема, заявник зазначив, що штучна харчова композиція згідно винаходу мала менш солодкий смак, що є приємнішим і добре переноситься піднебінням. 2 UA 106238 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Бажано, штучна харчова композиція відповідно до винаходу містить, щонайменше, один поживний елемент, вибраний з групи, що містить вуглеводи, білки, амінокислоти та їх похідні, ліпіди, фосфоліпіди, вітаміни і мінеральні солі. У ще одному аспекті даний винахід також відноситься до водної композиції для кишкового або парентерального введення глюкозовмісного глікогена і включає принаймні ще одну фармацевтично прийнятну допоміжну речовину. Заявник виявив, що низька осмолярність розчинів глікогену дозволяє підготувати ізотонічні водні композиції (300 мОсм/кг) з високим вмістом глюкози, вище вмісту глюкози відомих розчинів, що містять цукор або полісахариди з низькою молекулярною масою. Заявник також виявили, що, на відміну від інших полісахаридів з повільним вивільненням глюкози, розчини глікогену, описані вище, мають значення рН, близькі до фізіологічних значень навіть при високій концентрації полісахаридів. Детальний опис винаходу Зокрема, даний винахід відноситься до використання глікогену в підготовці штучної харчової композиції для контрольованого вивільнення глюкози. Глікоген, що використовуються в цьому винаході, отримують з природного глікогену, який може бути вилучений з тварин або грибів. Молюски, зокрема, мідії (Mytilus edulis і Mytilus gallus provincialis) є особливо корисним джерелом глікогену, тому що вони доступні у великих кількостях за низькою ціною і містять деяку кількість глікогену (в середньому від 2,5 % до 3,9 % за масою). Інші природні джерела глікогену включають інші двостулкові молюски, такі як двостулкові молюски, устриці, деякі види черевоногих молюсків і морських равликів, наприклад, крепідула (Crepidula fornicata), та органи хребетних тварин, які багаті на глікоген, такі як печінка і м'язи. Бажано глікоген, що використовується в цьому винаході, має молекулярну масу понад 2000000 Дальтон, бажано від 2000000 до 5000000 Дальтон. Бажано, глікоген, що використовуються в даному винаході, має відсоток α-1-6 глікозидних зв'язків від 5 % до 15 %, бажано від 8 % до 12 %, в залежності від загальної кількості зв'язків. Глікоген, що використовуються в цьому винаході, може бути використаний у тому вигляді, як отриманий з процесів екстракції або може бути оброблений в наступних процедурах очистки. Як уже зазначалося раніше, якість комерційного похідного глікогену залежить від наявності більшої чи меншої кількості залишків білків (вимірюється кількістю азоту, що виражається в проміле) і відновлюючих цукрів. Для цілей цього винаходу бажано використовувати похідне глікогену з низьким вмістом відновлюючих цукрів і азоту. Приклади комерційних продуктів, що бажано використовуються в цьому винаході, включають похідні глікогену, що виробляються і поширюються Sigma-Aldrich. Бажано, похідне глікогену, що використовується в цьому винаході, включає менше 1 % за масою, більш бажано менше ніж на 0,25 % за масою відновлюючих цукрів, що визначаєтьється за допомогою методу F. D. Snell and Snell, "Colorimetric Methods of Analysis", New York, 1954, Vol. Ill, p. 204). Бажано, щоб похідне глікогену, що використовується в даному винаході, включало менше ніж 3000 частин на мільйон азоту, більш бажано менше ніж 1 000 і навіть більш бажано менше ніж 100 частин на мільйон азоту, що визначається за методом К'єльдаля. Бажано, похідне глікогену, що використовуються в даному винаході, являло собою Polglumyt™ Glycogen, торгова назва депротеїнованого глікогену з низьким вмістом відновлюючих цукрів, що розповсюджується компанією A.C.R.A.F. S.p.A. Рим, Італія, отримується за процедурою очистки, описаної в патенті ЕР 654048B1. Бажано, похідне глікогену, що використовується в цьому винаході, має молекулярну масу, що становить більше 2000000 Дальтон, бажано від 2000000 до 5000000 Дальтон і відсоток від α-1-6 глікозидних зв'язків від 5 % до 15 %, бажано від 8 % до 12 % по відношенню до загального числа зв'язків. Харчова композиція для контрольованого вивільнення глюкози відповідно до цього винаходу містить глікогену і принаймні один їстівний компонент, бажано принаймні один поживний елемент. Бажано, щоб харчова композиція відповідно до цього винаходу включала в себе принаймні один поживний елемент, вибраний з групи, що містить вуглеводи, білки, амінокислоти та їх похідні, ліпіди, фосфоліпіди, вітаміни і мінеральні солі. Бажано, споживання вуглеводів в харчовій композиції відповідно до цього винаходу задовольняється наявністю глікогену. Проте харчова композиція відповідно до цього винаходу може додатково включати інші види вуглеводів додатково до глікогену. Білки, що використовуються в харчовій композиції згідно винаходу, можуть бути отримані з різних природних джерел, таких як, наприклад, білки молока, яєчні білки або білки крові. Білки 3 UA 106238 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 можуть також бути присутніми у гідролізованій формі пептидів або окремих амінокислот. Бажано не менше половини вмісту білка представлене інтактними білками. Ліпіди, що використовуються в харчовій композиції згідно винаходу, можуть бути тригліцеридами насичених і ненасичених жирних кислот, що містять від 12 до 18 атомів вуглецю. Бажано, використовуються тригліцериди довголанцюгових поліненасичених жирних кислот, такі як, наприклад, ко-3, ко-6 і ко-9 жирних кислот. Тригліцериди олеїнової кислоти, лінолевої кислоти (LA), α-ліноленової кислоти (ALA), арахідонової кислоти, ейкозапентаєнової кислоти (EPA), докозагексаєнової кислоти (DHA) та докозапентаєнової кислоти (DPA) є особливо бажаними. Фосфоліпіди можуть, бажано, являти собою лецитин або його еквіваленти. Лецитин може бути тваринного або рослинного походження і бажано містить фосфорну кислоту, холін, жирні кислоти, гліцерин, гліколіпіди, тригліцериди і фосфоліпіди, такі як фосфатидилхолін, фосфатидилетаноламін і фосфатидилінозітол. Вітаміни, що використовуються в харчовій композиції відповідно до цього винаходу, особливо не обмежуються і можуть являти собою будь-який з відомих вітамінів, таких як, наприклад, водорозчинні вітаміни групи В (В1, В2, В3, В5, В6, В8, В9 і В12) і C, або жиророзчинні вітаміни груп А, D, Е і К. Псевдовітаміни, такі як холін, антранілова кислота, ліпоєва кислота, біофлавоноїди, убіхінони і метилметіонін також можуть використовуватися. Вміст вітамінів композиції зазвичай виражається у відсотках від рекомендованої денної норми або RDA% (Recommended Daily Allowance). Мінеральні солі, як правило, класифікуються на основі добової потреби, так як макроелементи (більше 100 мг), мікроелементи (1 і 100 мг) і олігоелементи (менше 1 мг). Макроелементи – солі, що включають кальцій, хлор, фосфор, магній, калій, натрій і/або сірка. Мікроелементи – солі, що включають мідь, цинк, фтор, йод, селен, хром, кобальт, марганець, молібден, кремній, нікель, ванадій. Олігоелементи – солі, що включають олово, нікель, германій, ванадій і вольфрам. Харчова композиція може бути у вигляді повноцінного продукту харчування, харчової добавки, поживного розчину для шлунково-кишкового введення, наприклад, для кишкового годування, що вводиться через назогастральну і назокишкову трубку, поживний розчин для парентерального введення, або продукт харчування або добавка для хворих на цукровий діабет. Повноцінний продукт харчування включає в себе всі поживні речовини, необхідні для задоволення щоденних потреб користувачів з точки зору споживання речовин та енергії. Таким чином, композиції повинні містити вуглеводи, в тому числі глікоген, в кількості від 30 % до 70 % за масою, білки в кількості від 10 % до 30 % за масою та ліпіди від 20 % до 40 % за масою. На додаток до цього композиції повинні бути здатні забезпечити від 2000 до 2900 ккал на добу, і може бути у вигляді твердої речовини, для розчинення або диспергування у воді або іншому напої, або рідини, у формі, яка готова до використовувати або у вигляді концентрату. Більше чи менше споживаної енергії може бути передбачено для конкретної ситуації (дієтичний або спортивний режим). Харчова добавка містить тільки деякі з поживних речовин, необхідних для задоволення щоденних потреб користувачів щодо білків і споживання енергії. Таким чином, композиції будуть здатні забезпечити менше ніж 1500 ккал, бажано від 100 до 1000 ккал на добу. І в цьому випадку композиції можуть бути у твердій або рідкій формі, як описано вище, для включення в нормальний режим харчування або як компонент нормальної дієти. Харчові композиції відповідно до цього винаходу можуть містити додаткові звичайні харчові добавки, щоб поліпшити її зовнішній вигляд, привабливість і збереження, такі як, наприклад, барвники, консерванти, антиоксиданти, регулятори кислотності, загусники, стабілізатори, емульгатори, підсилювачі смаку, ароматизатори, зволожувачі і підсолоджувачі. Наступні приклади ілюструють винахід, але не обмежуючи його. ПРИКЛАД 1 Модель, що імітує травну систему, що складається з першої стадії - інкубації зі слинною альфа-амілазою, другої фази - інкубації з пепсином і третьої стадії - інкубації з панкреатином, амілоглюкозидазою і бичачою жовчю при рН приблизно 7, була підготовлена в лабораторії. 6 г субстрату розчинили в 250 мл пляшках пірекс з гвинтовими кришками, в 100 мл фосфатного буфера. Температура розчину була підвищена до 37 °C, а потім додавали 0,1 мл розчину людської альфа-амілази (розчин А). Отриманий розчин інкубували протягом 15 хвилин у бані, термостатованій до 37 °C, з магнітною мішалкою. 4 UA 106238 C2 5 10 15 Розчин доводять до рН = 2 з 2,50 мл 1 М розчину HCl, а потім додавали 0,25 мл суспензії Sigma P7012 пепсину в розчині NaCl (розчин В). Отриманий розчин інкубували протягом 30 хвилин при 37 °C, знову з магнітною мішалкою. Розчин доводили до рН = 6,9 з 8,67 мл 1 М розчину NaHCO 3, а потім додавали 2 мл розчину панкреатину і амілоглюкозидази в 25 мМ CaCl2 (Розчин C) і 2,4 г бичачо-баранячої жовчі (Sigma B8381). Отриманий розчин інкубують протягом 5 хвилин при 37 °C, при перемішуванні. Розчин переносили в пробірки для діалізу (змішані ефіри целюлози, відсічення 3500), які були поміщені в 1000 мл контейнери пристрою для розчинення USP XIII, що містять приблизно 900 мл буферного розчину при температурі 37 °C, готують наступним чином. 800 мл фосфатного буфера і 0,8 мл 1 мМ розчину CaCl2 * 2H2O змішували між собою. Їх доводили до рН 2 за допомогою 20 мл 1 М HCI, додавали 2 мл розчину NaCl (9 г/л), рН доводили до 6,9 за допомогою 70 мл 1 М розчину NaHCO 3 і додавали 16 мл 25 мМ розчину CaCl2 * 2H2O. Протягом 24-годинного періоду відбирали 1 мл проби з буферного розчину в періоди, зазначені в таблицях 2-5. Тестування проводилося у дублікаті з використанням Polglumyt™ Glycogen і Maltodextrin DE 16.5-19.5 у якості субстрату. 6 г зразка Polglumyt™ Glycogen - еквівалент 5,220 г глюкози, а 6 г зразка Maltodextrin DE 16.5-19.5 - еквівалент 5,748 г глюкози. Фосфатний буфер і розчин A, B і C мають склад, зазначений в таблиці 1 нижче. 20 Таблиця 1 Фосфатний буфер Розчин A 20 мМ, рН=6,9, Na2HPO4 1,42 г/л, KH2PO4 1,36 г/л, NaCl 0,58 г/л Sigma A1031 людська альфа-амілаза, 10 мг/мл в 1 М CaCl2 * 2H2O Sigma P7012 пепсин зі свинячої шлункової слизової оболонки, 1 мг/мл в 9 г/л розчину NaCl Sigma P7545 панкреатин, 0,5 мг/мл, Sigma A9228 амілоглюкозидаза (від Rhizopus SP) 840 О/мл в 25 мМ розчині CaCl2 * 2H2O Розчин В Розчин С 25 30 Зразки були проаналізовані, щоб визначити кількість вивільненої глюкози з використанням двох комерційних наборів: набір Sigma GAGO20 Glucose (GO) Assay Kit і набір Sigma GAHK20 Glucose (HK) Assay Kit (що поставляються Sigma-Aldrich Co.). Перший тест заснований на реакції окислення D-глюкози в D-глюконову кислоту та перекис водню за допомогою глюкозо-оксидази. Вивільнений перекис водню реагує з о-діанізідином в присутності пероксидази для утворення коричневого продукта окислення, які в присутності сірчаної кислоти дають продукт окислення рожевого кольору. Інтенсивність забарвлення, що вимірюється при 540 нм, пропорційна концентрації глюкози. Отримані результати представлені в таблицях 2-5 нижче. Таблиця 2 Години 0 2 3 4 6 20 21 24 Maltodextrin DE 16.5-19.5 – Тест 1 Мг/мл глюкози 0,00 0,81 1,52 1,99 2,58 3,85 3,96 4,02 5 % вивільненої глюкози 0 14 27 35 46 68 70 71 UA 106238 C2 Таблиця 3 Години 0 2 3 4 6 20 21 24 Maltodextrin DE 16.5-19.5 – Тест 2 мг/мл глюкози 0,00 0,89 1,79 2,28 2,96 4,22 4,08 4,10 % вивільненої глюкози 0 16 32 40 53 75 73 73 Таблиця 4 Години 0 2 3 4 6 20 21 24 Polglumyt™ Glycogen – Тест 1 Мг/мл глюкози 0,00 0,74 1,16 1,90 2,57 4,12 4,14 4,12 % вивільненої глюкози 0 14 23 37 50 80 81 81 Таблиця 5 Години 0 2 3 4 6 20 21 24 5 10 Polglumyt™ Glycogen – Тест 2 Мг/мл глюкози 0,00 0,82 1,23 2,08 2,43 4,14 4,05 4,01 % вивільненої глюкози 0 16 24 41 47 81 79 78 Другий тест заснований на фосфорилюванні глюкози в присутності АТФ за допомогою гексокінази. Глюкозо-6-фосфат потім окислюється до 6-фосфоглюконату в присутності НАД (нікотинамід аденін динуклеотид), реакція, що каталізується глюкозо-6-фосфатдегідрогеназою. В процесі окислення еквімолярна кількість НАД відновлюється до НАДH. Подальше збільшення абсорбції при довжині хвилі 340 нм прямо пропорційне концентрації глюкози. Отримані результати представлені в таблицях 6-9 нижче. Таблиця 6 Години 0 2 3 4 6 20 Maltodextrin DE 16.5-19.5 – Тест 1 Мг/мл глюкози 0,00 0,96 1,60 2,21 2,73 4,09 6 % вивільненої глюкози 0 17 28 39 49 73 UA 106238 C2 Таблиця 7 Години 0 2 3 4 6 20 Maltodextrin DE 16.5-19.5 – Тест 2 Мг/мл глюкози 0,00 0,89 1,82 2,30 3,04 4,49 % вивільненої глюкози 0 16 32 41 54 80 Таблиця 8 Години 0 2 3 4 6 20 24 Polglumyt™ Glycogen – Тест 1 Мг/мл глюкози 0,00 0,83 1,44 2,03 2,75 4,07 4,14 % вивільненої глюкози 0 16 28 40 54 80 81 Таблиця 9 Години 0 2 3 4 6 20 5 10 Polglumyt™ Glycogen – Тест 2 Мг/мл глюкози 0,00 0,83 1,44 2,03 2,75 4,07 % вивільненої глюкози 0 16 28 40 54 80 ПРИКЛАД 2 Шість розчинів Polglumyt™ Glycogen тa Maltodextrin DE 16.5-19.5 були підготовлені у дистильованій воді, в зростаючих концентраціях (10, 14, 18, 22, 26 і 30 % за масою). Отримані розчини було проаналізовані для визначення в'язкості, рН, електропровідності та осмолярності. Результати представлені в таблицях 10 і 11 нижче, разом з часом розчиненням. Вимірювання в'язкості проводилися за допомогою реометра Bohlin Gemini 150, забезпеченого 2755-мм конусо-пластншетною конфігурацією. Визначення осмолярності проводилися з використанням осмометра Кнауера. Перед аналізом розчини були відфільтровані за допомогою 0,2 мкм фільтра Millipore. Таблиця 10 Polglumyt™ Glycogen Концентрація Час розчинення В'язкість (мПа) рН (% м/м) (хв.) 10 15 2,3 6,76 14 20 2,7 7,15 18 30 3,8 7,34 22 45 4,0 7,47 26 60 6,0 8,22 30 60 19,1 8,34 15 7 Провідність (мкС/см) 92,4 98,7 113,7 129,7 142,3 151,2 Осмолярність (мОсм/кг) -2,00 -2,66 1,00 0,50 5,66 6,33 UA 106238 C2 Таблиця 11 Maltodextrin DE 16.5-19.5 Концентрація Час розчинення В'язкість (мПа) рН (% м/м) (хв.) 10 1 1,96 5,41 14 1 2,15 4,65 18 1 2,33 4,56 22 1,5 2,71 4,22 26 2 2,98 4,46 30 2 3,53 4,41 5 Провідність (мкС/см) 560 707 792 850 916 937 Осмолярність (мОсм/кг) 110,30 152,00 193,30 236,00 290,66 335,00 ПРИКЛАД 3 У наведених нижче таблицях 12, 13 і 14 ілюструються приклади штучних харчових композицій, що включають глікоген відповідно до цього винаходу. Таблиця 12 ілюструє харчову композицію для здорових осіб, Таблиця 13 - для хворих на цукровий діабет і Таблиця 14 - для введення через шлунково-кишкову трубку. Таблиця 12 Компоненти Polglumyt™ Glycogen Декстроза Білки Bсаа Креатин етиловий ефір Аргінін Орнітин Цитрулін Глютамін Тирозин Таурин Магній Натрій Калій Хлориди Альфа-ліпоєва кислота Кофеїн Tribulus Terrestris Ex Глюкозамін Куркума Лонга Ex Вітамін B1 Вітамін B2 Вітамін B5 Вітамін B6 Вітамін В12 Вітамін А Вітамін C Вітамін Е 10 F1 15 5 20 3 F2 30 10 10 3 г г г г г г г г г г г мг мг мг мг мг мг мг мг мг % RDA % RDA % RDA % RDA % RDA % RDA % RDA % RDA F3 15 5 2 1,5 3 2 1 0,25 0,5 0,5 0,5 25 345 145 130 200 60 300 200 100 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 200 % 200 % 200 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 200 % 200 % 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 50 % 100 % 100 % RDA: рекомендована добова доза Polglumyt™ Glycogen: Депротеїнований глікоген зі зниженим вмістом відновлюючих цукрів, що розповсюджуються компанією A.C.R.A.F. S.p.A., Рим, Італія. 8 UA 106238 C2 Таблиця 13 Компоненти Polglumyt™ Glycogen Фруктоза Білки Рослинні ліпіди Дієтична клітковина Вітаміни Мінеральні солі г г г г г г мг F4 12 1 4 3,7 1,5 100 % RDA 600 Таблиця 14 Компоненти Polglumyt™ Glycogen Декстроза Білки Рослинні ліпіди Дієтична клітковина Вітаміни Мінеральні солі 5 г г г г г г мг F5 15 5 6 6 2 100 % RDA 600 ПРИКЛАД 4 Таблиця 15 ілюструє приклад композиції для парентерального введення, що включає глікоген відповідно до цього винаходу. Таблиця 15 Активні компоненти Polglumyt™ Glycogen Декстроза Очищена соєва олія Аланін Аргінін Аспартамова кислота Глютамінова кислота Гліцин Гістидин Ізолейцин Лейцин Лізин Метіонін Фенілаланін Пролін Серин Треонін Триптофан Тирозин Валін Кальцію хлорид Магнію сульфат Калію хлорид Натрію ацетат 10 Кількість на 100 мл 6г 1г 3,5 г 0,33 г 0,23 г 0,07 г 0,11 г 0,16 г 0,14 г 0,11 г 0, 16 г 0,18 г 0,11 г 0,11 г 0,14 г 0,09 г 0,11 г 0,04 г 0,004 г 0,15 г 0,01 г 0,03 г 0,12 г 0,1 г ПРИКЛАД 5 Таблиця 16 ілюструє приклад композиції в порошку для розчинення в 100 мл води для ін'єкцій, що включає глікоген відповідно до цього винаходу. 9 UA 106238 C2 ТАБЛИЦЯ 16 Активні компоненти Polglumyt™ Glycogen Декстроза Аланін Аргінін Гліцин Гістидин Ізолейцин Лейцин Лізин Метіонін Фенілаланін Пролін Серин Треонін Триптофан Валін 5 Кількість на 100 мл 6г 1г 0,77 г 0,61 г 0,92 г 0,25 г 0,92 г 1,13 г 0,62 г 0,10 г 0,10 г 0,82 г 0,51 г 0,46 г 0,08 г 0,86 г ПРИКЛАД 6 Таблиця 17 нижче показує значення осмолярності для 5 % розчинів глюкози, мальтодекстрина (DE 16.5-19.5) і Polglumyt™ Glycogen. Таблиця 17 Вуглеводень Глюкоза Мальтодекстрин Polglumyt™ Glycogen 10 15 Кількість г/100 мл 5 5 5 Осмолярність мОсм/кг 280 55