Фармацевтична композиція, яка містить інгібітор гістондеацетилази

1. Фармацевтична композиція або комбінація, яка містить як активні інгредієнти: (а) щонайменше одну з похідних бензаміду, яка є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною або її фармацевтично прийнятною сіллю, представлену формулою (1): R1 A-X-Q-(CH2)n R3 H N С R2 O , (1) де А позначає необов'язково заміщену фенільну групу або необов'язково заміщену моноциклічну 5або 6-членну гетероциклічну або біциклічно 2 UA 1 N С (CH2)m , N С (CH2)m 3 81499 де e дорівнює цілому числу від 1 до 4; g і m дорівнюють незалежно цілому числу від 0 до 4; R4 позначає атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, або ацильну групу, представлену формулою (3) O С O O N N С N С , С , N R7 S С O 2 C С 2 N H C С O , (5) H N H N NH2 O С С O N N H H2 C С H N NH2 O , (7) H2 C O R7 N , R8 NH2 , (6) С R7 S N С N , , де R7 і R8 позначають незалежно атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; R1 і R2 позначають незалежно атом водню, атом галогену, гідроксильну групу, аміногрупу, алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкоксигрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, аміноалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкіламіногрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, ацильну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, ациламіногрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкілтіогрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкілоксигрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, карбоксильну або алкоксикарбонільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; R3 позначає гідроксильну групу або аміногрупу, і (b) щонайменше одну з речовин, що є іншою протираковою активною речовиною, вибрану з групи, яка складається з цисплатіну, етопозиду, камптотецину, 5-фторурацилу, гемцитабіну, паклітакселу, доцетакселу, карбоплатину, оксаплатину, доксорубіцину і вінбластину. 2. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 1, яка відрізняється тим, що зазначена похідна бензаміду вибрана з формул (5)-(8) або їх фармацевтично прийнятної солі O H H N С H N O O S R7 R7 S N N H H2 C R6 , R7 O R8 N C H2 С N (3), де R6 позначає необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, фенільну групу або гетероциклічну групу; R5 позначає атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; n дорівнює цілому числу 0-4, за умови, що, коли Х позначає зв'язок, n не є нулем; Q позначає групу, що має структуру, вибрану зі структур (4) R7 O O R7 С 4 С N N H N O O , H2 C R7 С O N O С , С O S R7 N , H N С (4) O NH2 , (8). 3. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 1 або 2, яка відрізняється тим, що зазначена похідна бензаміду представлена формулою (5) або її фармацевтично прийнятною сіллю O H H 2 C N С 2 N H C С H N NH2 O (5). 4. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є цисплатин. 5. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 4, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 6. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є етопозид. 7. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 6, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку яєчника. 8. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є камптотецин. 5 9. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 8, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 10. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є 5фторурацил. 11. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 10, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку молочної залози або раку ободової кишки. 12. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є гемцитабін. 13. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 12, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 14. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є паклітаксел. 15. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 14, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку молочної залози, раку яєчника або раку передміхурової залози. 16. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є доцетаксел. 17. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 16, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози і раку передміхурової залози. 18. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є карбоплатин. 19. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 18, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку або яєчника раку підшлункової залози. 20. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є оксаліплатин. 81499 6 21. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 20, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку ободової кишки або раку яєчника. 22. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є доксорубіцин. 23. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 22, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку яєчника. 24. Фармацевтична композиція або комбінація за будь-яким з пунктів 1-3, яка відрізняється тим, що речовиною, вибраною із групи речовин, що представляє зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є вінбластин. 25. Фармацевтична композиція або комбінація за п. 24, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені. 26. Фармацевтична комбінація за будь-яким з пунктів 1-25, яка відрізняється тим, що її зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, і зазначений інгредієнт (b), який є іншою протираковою активною речовиною, уводять пацієнтам послідовно. 27. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є паклітаксел. 28. Фармацевтична комбінація за п. 27, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: паклітаксел, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 29. Фармацевтична комбінація за п. 28, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку яєчника або раку молочної залози. 30. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є цисплатин. 31. Фармацевтична комбінація за п. 30, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, а потім цисплатин. 32. Фармацевтична комбінація за п. 31, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 33. Фармацевтична комбінація за п. 30, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: цисплатин і потім зазначений інгредієнт (а), що є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 34. Фармацевтична комбінація за п. 33, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 7 35. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є камптотецин. 36. Фармацевтична комбінація за п. 35, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, а потім камптотецин. 37. Фармацевтична комбінація за п. 36, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені. 38. Фармацевтична комбінація за п. 35, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: камптотецин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 39. Фармацевтична комбінація за п. 38, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку ободової кишки або раку підшлункової залози. 40. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною речовиною, є гемцитабін. 41. Фармацевтична комбінація за п. 40, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, і потім гемцитабін. 42. Фармацевтична комбінація за п. 41, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені. 43. Фармацевтична комбінація за п. 40, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: гемцитабін, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 44. Фармацевтична комбінація за п. 43, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози або раку ободової кишки. 45. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є 5фторурацил. 46. Фармацевтична комбінація за п. 45, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: 5-фторурацил, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 47. Фармацевтична комбінація за п. 46, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку ободової кишки. 48. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є доцетаксел. 49. Фармацевтична комбінація за п. 48, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: доцетаксел, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 81499 8 50. Фармацевтична комбінація за п. 49, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози або раку передміхурової залози. 51. Фармацевтична комбінація за п. 26, де зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є карбоплатин. 52. Фармацевтична комбінація за п. 51, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: карбоплатин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 53. Фармацевтична комбінація за п. 52, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. 54. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є оксаліплатин. 55. Фармацевтична комбінація за п. 54, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: оксаліплатин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 56. Фармацевтична комбінація за п. 55, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку ободової кишки або раку яєчника. 57. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є доксорубіцин. 58. Фармацевтична комбінація за п. 57, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: доксорубіцин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 59. Фармацевтична комбінація за п. 58, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування раку яєчника. 60. Фармацевтична комбінація за п. 26, яка відрізняється тим, що зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою речовиною, є вінбластин. 61. Фармацевтична комбінація за п. 60, яка відрізняється тим, що послідовність її уведення є такою: вінбластин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. 62. Фармацевтична комбінація за п. 61, яка відрізняється тим, що її використовують для лікування недрібноклітинного раку легені. 63. Набір для лікування раку, який містить фармацевтичну комбінацію за будь-яким з пунктів 1-62, що складається з: (і) щонайменше одного із зазначених інгредієнтів (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, (іі) щонайменше одного із зазначених інгредієнтів (b), який є іншою протираковою активною речовиною, і (ііі) інструкції до схеми введення для одночасного або послідовного уведення відповідно до типу 9 81499 10 раку (для послідовного введення пацієнту при періодичних Даний винахід відноситься до фармацевтичної композиції або комбінації лікарських засобів для лікування раку, яка містить інгібітор гістондеацетилази й іншу протиракову активну речовину. В даний час рак є першою основною причиною смерті. Дотепер проводилося багато досліджень у відношенні раку і величезні гроші і час було витрачено на ці дослідження. Однак, незважаючи на дослідження, що стосуються способів лікування, які зачіпають різні галузі, такі як хірургія, радіотерапія і термотерапія, рак не був переборений. Серед них, хіміотерапія є головною частиною, а отже були досліджені багато протиракових лікарських засобів. Наприклад, як хіміотерапевтичні лікарські засоби для раку використовували цисплатин, етопозид, 5фторурацил, гемцитабін, паклітаксел, децетаксел, карбоплатин, оксаліплатин, доксорубіцин, вінбластин і т.д. [Публікація заявки Японії (Kokai) №10-152462], яка не проходила експертизу, описує похідну бензаміду. Розкрито наступний факт: зазначена похідна бензаміду проявляє індукуючу диференціювання дію, вона може застосовуватися як фармацевтичний засіб для лікування чи послаблення злоякісних пухлин, аутоімунних захворювань, шкірних хвороб і паразитарної інфекції, є особливо ефективною як протираковий лікарський засіб і є ефективною проти гемопоетичних раків і солідних раків. Патентний документ 1 Публікація, яка не проходила експертизу, заявки Японії (Kokai) №10-152462 Отже, протиракові лікарські засоби мають той недолік, що при дозі єдиного лікарського засобу вони сильно токсичні щодо нормальних клітин. За винятком деяких раків, лікування введенням єдиного лікарського засобу є недостатнім для досягнення достатньої ефективності. Даний винахід був виконаний з метою зменшення токсичності, що створює проблему в сучасній хіміотерапії, і одержання високої ефективності лікування. Таким чином, даний винахід забезпечує фармацевтичну композицію чи комбінацію, яка містить як активні інгредієнти: (а) щонайменше, одне з похідних бензаміду, представлених формулою (1): атома галогену, гідроксильної групи, аміногрупи, нітрогрупи, ціаногрупи, алкільної групи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкоксигрупи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, аміноалкільної групи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкіламіногрупи, яка містить 14 атоми вуглецю, ацильної групи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, ациламіногрупи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкілтіогрупи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкільної групи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкілоксигрупи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, карбоксильної групи, алкоксикарбонільної групи, яка містить 1-4 атоми вуглецю, фенільної групи і гетероциклічної групи; X позначає зв'язок або групу, яка має структуру, обрану зі структур (2): (1) де А позначає необов'язково заміщену фенільну групу чи необов'язково заміщену гетероциклічну групу, де замісником (замісниками) цієї фенільної групи або гетероциклічної групи є 14 замісника, обраних із групи, яка складається з інтервалах). (2) де є дорівнює цілому числу від 1 до 4; g і m незалежно дорівнюють цілому числу від 0 до 4; R4 позначає атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, або ацильну групу, представлену формулою (3) (3) де R6 позначає необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, фенільну або групу гетероциклічну групу; R5 позначає атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; n дорівнює цілому числу 0-4, за умови, що, якщо X позначає зв'язок, n не є нулем; Q позначає групу, яка має структуру, обрану зі структур (4) 11 81499 (4) де R7 і R8 позначають незалежно атом водню або необов'язково заміщену алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; R1 і R2 позначають незалежно атом водню, атом галогену, гідроксильну групу, аміногрупу, алкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкоксигрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, аміноалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкіламіногрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, ацильну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, ациламіногрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, алкілтіогрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, перфторалкілоксигрупу, яка містить 1-4 атоми вуглецю, карбоксильну групу або алкоксикарбонільну групу, яка містить 1-4 атоми вуглецю; R3 позначає гідроксильну групу або аміногрупу; або його фармацевтично прийнятну сіль як інгібуючу HDAC речовини, і (b) щонайменше, одну речовину як додаткову протиракову активну речовину, обрану з групи, що складається з цисплатіну, етопозиду, камптотецину, 5-фторурацилу, гемцитабіну, паклітакселу, доцетакселу, карбоплатіну, оксаплатіну, доксорубіцину і вінбластіну. Крім того, даний винахід забезпечує набір для лікування раку, що містить фармацевтичну комбінацію, яка містить: (і) щонайменше, один із зазначених інгредієнтів (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, (іі) щонайменше, один із зазначених інгредієнтів (b), який є іншою протираковою активною речовиною, і (ііі) інструкцію до схеми введення для одночасного або послідовного уведення відповідно до типу раку (для послідовного введення пацієнту при періодичних інтервалах). «Фармацевтична композиція» у даному винаході позначає комбінацію інгредієнта (а), що є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, і інгредієнта (b), що є іншою протираковою активною речовиною, де інгредієнт (а) і інгредієнт (b) уводять одночасно або в різні моменти часу (або послідовно). Даний винахід включає в себе спосіб лікування раку, який передбачає введення зазначеного інгредієнта (а) і зазначеного інгредієнта (b) пацієнтам одночасно або в різні моменти часу (або послідовно). У цій ситуації послідовність уведення зазначеного інгредієнта (а) і зазначеного інгредієнта (b) вибирають певним 12 чином відповідно до типу раку і типів зазначеного інгредієнта (а) і зазначеного інгредієнта (b). Далі, даний винахід включає в себе також застосування зазначеного інгредієнта (а) і зазначеного інгредієнта (b) для приготування фармацевтичної композиції або комбінації лікарських засобів даного винаходу для лікування раку і застосування зазначеного інгредієнта (а) і зазначеного інгредієнта (b) для одержання набору даного винаходу. Похідна бензаміду, яка є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, або її фармацевтично прийнятні солі бажано обрані з представлених наступними формулами (5) - (8) сполук (5) (6) (7) (8) Краще, коли похідна бензаміду представлена наступною формулою (5) або її фармацевтично прийнятною сіллю: (5) У фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b) , який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно цисплатин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку ободової кишки, недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. 13 Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b) , який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно етопозид, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку яєчника. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно камптотецин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку ободової кишки, недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно 5-фторурацил, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку молочної залози або раку ободової кишки. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно гемцитабін, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування недрібноклітинного раку легені, раку ободової або кишки раку яєчника. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно паклітаксел, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку молочної залози, раку передміхурової залози або раку яєчника. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b) , який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно доцетаксел, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози або раку передміхурової залози. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно карбоплатин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно оксаліплатин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку ободової кишки або раку яєчника. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно доксорубіцин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування раку яєчника. Далі, у фармацевтичній комбінації або композиції в даному винаході зазначеним 81499 14 інгредієнтом (b), який є іншою протираковою активною сполукою, є переважно вінбластин, бажано, щоб така комбінація або композиція була призначена для лікування недрібноклітинного раку легені. Далі, у даному винаході кращою вважається фармацевтична комбінація, при якій інгредієнт (а), що є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, і інгредієнт (b), що є іншою протираковою активною речовиною, послідовно вводяться пацієнтам. Зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно паклітаксел. Що стосується послідовності їхнього введення, бажано вводити паклітаксел, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку молочної залози або раку яєчника. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, бажано є цисплатин. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, а потім цисплатин. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування недрібноклітинного раку легені. Або, що стосується послідовності їхнього введення, переважно вводити цисплатин і потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку ободової кишки, недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно гемцитабін. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, а потім гемцитабін. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування недрібноклітинного раку легені, раку ободової кишки, раку прямої кишки або раку підшлункової залози. Або, що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити гемцитабін, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку ободової кишки, недрібноклітинного раку легені, раку яєчника або раку підшлункової залози. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно доцетаксел. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити доцетаксел, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози або раку передміхурової залози. 15 Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно карбоплатин. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити карбоплатин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування недрібноклітинного раку легені, раку яєчника, раку підшлункової залози. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно оксаліплатин. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити оксаліплатин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку ободової кишки або раку яєчника. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно доксорубіцин. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити доксорубіцин і потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку яєчника. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно вінбластин. Що стосується послідовності їхнього введення, краще уводити вінбластин, а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування недрібноклітинного раку легені. Далі, зазначеним інгредієнтом (b) фармацевтичної комбінації, який є іншою протираковою активною речовиною, є переважно 5-фторурацил. Що стосується послідовності їхнього введення, краще вводити 5-фторурацил; а потім зазначений інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною. Ця фармацевтична комбінація є кращою для лікування раку ободової кишки. У фармацевтичній композиції даного винаходу зазначений інгредієнт (а) і зазначений інгредієнт (b) можуть бути приготовлені у фармацевтичну композицію з використанням сполуки per se, якою є ці активні сполуки, можуть бути приготовлені у фармацевтичну .-композицію з використанням препарату, який містить зазначений інгредієнт (а) як активний інгредієнт, і препарату, який містить зазначений інгредієнт (b) як активний інгредієнт, або можуть бути приготовлені у фармацевтичну композицію з використанням сполуки per se, що є або зазначеним інгредієнтом (а), або зазначеним інгредієнтом (b), і препарату іншого інгредієнта, приготовленого заздалегідь. І у фармацевтичній комбінації даного винаходу звичайно окремо приготовлені препарати, тобто препарат, який містить інгредієнт (а) як активний інгредієнт, і препарат, який містить зазначений інгредієнт (b) як 81499 16 активний інгредієнт, уводять одночасно або в різний час (або послідовно). Фіг.1 є графіком, який показує принцип оцінки існування синергічної дії. Даний винахід відноситься до фармацевтичної композиції або комбінації, що містить похідну бензаміду, представлену формулою (1), яка є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною, і іншу протиракову активну речовину. У даному контексті, вираз «1-4 атоми вуглецю» означає кількість атомів вуглецю на один замісник; наприклад, для діалкільного заміщення це означає 2-8 атомів вуглецю. Гетероцикл у сполуці, представленій формулою (1), є моноциклічним 5 або 6 членним гетероциклом, який містить 1-4 атоми азоту, кисню або сірки, або біциклічно конденсованим гетероциклом. Моноциклічний гетероцикл містить у собі піридін, піразин, піримідин, піридазин, тіофен, фуран, пірол, піразол, ізоксазол, ізотіазол, імідазол, оксазол, тіазол, піперидин, піперазин, піролідин, хінуклідин, тетрагідрофуран, морфолін, тіоморфолін і т.і. Біциклічний конденсований гетероцикл містить у собі хінолін; ізохінолін; нафтирідин; конденсовані піридини, такі як,фуропіридин, тієнопіридин, піролопіридин, оксазолопіридин, імідазолопіридин і тіазолопіридин; бензофуран; бензотіофен; бензімідазол і т.і. Галогеном може бути фтор, хлор, бром або йод. Алкіл, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі метил, етил, н-пропіл, ізопропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил і тербутил. Алкокси, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі метокси, етокси, н-пропокси, ізопропокси, алілокси, н-бутокси, ізобутокси, вторбутокси, трет-бутокси і т.і. Аміноалкіл, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі амінометил, 1-аміноетил, 2амінопропіл і т.і. Алкіламіно, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі N-метиламіно, Ν,Νдиметиламіно, Ν,Ν-диетиламіно, N-метил-Nетиламіно, Ν,Ν-диізопропіламіно і т.і. Ацил, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі ацетил, пропаноіл, бутаноіл і т.і. Ациламіно, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі ацетиламіно, пропаноіламіно, бутаноіламіно і т.і. Алкілтіо, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі метилтіо, етилтіо, пропілтіо·і т.і. Перфторалкіл, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі трифторметил, пентафторетил і т.і. Перфторалкілокси, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у· собі трифторметокси, пентафторетокси і т.і. Алкоксикарбоніл, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі метоксикарбоніл і етоксикарбоніл. Необов'язково заміщений алкіл, який містить 1-4 атоми вуглецю, містить у собі метил, етил, нпропіл, ізопропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил і тер-бутил і ці радикали, що мають 1-4 замісника, обраних із групи, що складається з галогену, гідроксилу, аміно, нітро, ціано, фенілу і гетероциклу. Фармацевтично прийнятна сіль інгредієнта (а) як інгібуюча гістондеацетилазу речовина у даному винаході містить у собі солі з неорганічною 17 кислотою, такою як хлористоводнева кислота, бромисто-воднева кислота, сірчана кислота і фосфорна кислота; і з органічною кислотою, такою як оцтова кислота, молочна кислота, винна кислота, яблучна кислота, бурштинова кислота, фумарова кислота, малеїнова кислота, лимонна кислота, бензойна кислота, трифтороцтова кислота, п-толуолсульфонова кислота і метансульфонова кислота. Інгредієнт (а), який є інгібуючою гістондеацетилазу речовиною даного винаходу, може бути отриманий у відповідності зі способом публікації заявки, що не проходила експертизу Японії (Кокаі) № 10-152462. А інгредієнт (b), який є іншою протираковою речовиною, є комерційно доступним або може бути отриманий загальновідомими способами. Фармацевтична композиція або комбінація даного винаходу може бути застосована для лікування раку. Сама ця фармацевтична композиція може бути використана у формі звичайної фармацевтичної композиції. І комбінації інгредієнтів (а) і (b) можуть бути використані у формі звичайної фармацевтичної композиції. Фармацевтичну композицію, яка містить активний інгредієнт (а) і активний інгредієнт (b), готують зі звичайно використовуваними розріджувачем або ексципієнтом, таким як наповнювач, (сухий) розріджувач, зв'язуючий агент, зволожуючий агент, дезінтегратор, поверхнево-активна речовина і змащуюча речовина. І фармацевтичну комбінацію готують із застосуванням незалежних активних інгредієнтів, зі звичайно використовуваними розріджувачем або ексципієнтом, таким як наповнювач, (сухий) розріджувач, зв'язуючий агент, зволожуючий агент, дезінтегратор, поверхнево-активна речовина і змащуюча речовина. Ця фармацевтична композиція може мати різні дозовані форми, такі як таблетка, пігулка, порошок, розчин, суспензія, емульсія, гранула, капсула, ін'єкційний розчин (наприклад, розчин, суспензія) і супозиторій. Для приготування таблеток можуть бути використані різні носії, добре відомі в даній галузі. Такий носій містить у собі ексципієнти, такі як лактоза, глюкоза, крохмаль, карбонат кальцію, каолін, кристалічна целюлоза і кремнієва кислота; зв'язувальні речовини, такі як вода, етанол, пропанол, простий сироп, розчин глюкози, розчин крохмалю, розчин желатину, карбоксиметилцелюлоза, шелак, метилцелюлоза і полівінілпіролідон; дезінтегратори, такі як висушений крохмаль, альгінат натрію, порошкоподібний агар, кальцій-кармелоза, крохмаль, і лактоза; сповільнювачі дезинтеграцї, такі як сахароза, какао-олія і гідрогенізована олія; активатори всмоктування, такі як четвертинна амонієва основа і лаурилсульфат натрію; зволожуючі агенти, такі як гліцерин і крохмаль; адсорбенти, такі як крохмаль, лактоза, каолін, бентоніт, колоїдальна кремнієва кислота; і агенти ковзання, такі як тальк, стеарати і поліетиленгліколь. Цією таблеткою може бути, якщо необхідно, таблетка, покрита звичайним 81499 18 покриттям; наприклад, покрита цукром таблетка, покрита желатином таблетка, покрита ентеросолюбільним (кишковим) покриттям таблетка, покрита плівкою таблетка, двошарова таблетка і багатошарова таблетка. При виробництві пігулок можуть бути використані різні носії, добре відомі в даній галузі. Такий носій містить у собі ексципієнти, такі як кристалічна целюлоза, лактоза, крохмаль, гідрогенізована рослинна олія, каолін і тальк; зв'язувальні агенти, такі як порошкоподібна аравійська камедь, порошкоподібна трагакантова камедь і желатин; дезінтегратори, такі як кальційкармелоза й агар. Капсула може бути приготовлена змішуванням активного інгредієнта з різними вищевказаними носіями, як звичайно, і заповненням отриманою сумішшю, наприклад, твердої або м'якої желатинової капсули або т.п. Для приготування ін'єкційного розчину, розчин, емульсію і суспензію стерилізують і роблять бажано ізотонічним із кров'ю. Це може виконуватися з використанням розріджувачів, звичайно використовуваних у даній області; наприклад, води, етанолу, макроголу, пропіленгліколю, етоксильованого ізостеарилового спирту, поліоксиізостеарилового спирту й ефірів поліоксиетиленсорбітану і жирної кислоти. Фармацевтична композиція може містити хлорид натрію, необхідний для одержання ізотонічного розчину, глюкозу або гліцерин, а також звичайні солюбілізатори, буфери і пом'якшуючі агенти. Супозиторій може бути утворений з використанням різних добре відомих носіїв; наприклад, напівсинтетичного гліцериду, какаоолії, вищих спиртів, складних ефірів вищих спиртів і поліетиленгліколю. Крім того, фармацевтична композиція може містити забарвлюючі агенти, консерванти, віддухи, ароматизатори, підсолоджуючі речовини і/або інші агенти. Об'ємне відношення активних інгредієнтів (b) до (а) для включення у фармацевтичну композицію даного винаходу не обмежується і обирається певним чином із широкого діапазону об'ємних співвідношень. У випадку цисплатіну молярне відношення дорівнює 0,001-10000, краще 0,01-1000, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку етопозиду, молярне відношення дорівнює 0,001-10000, краще 0,01-100, до 1 похідного бензаміду. У випадку камптотецину, молярне відношення дорівнює 0,00001-10, краще 0,0001-1, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку 5-фторурацилу, молярне відношення дорівнює 0,01-100000, краще 0,1-10000, до 1 похідного бензаміду. У випадку гемцитабіну, молярне відношення дорівнює 0,00001-100, краще 0,0001-10, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку паклітакселу, молярне відношення дорівнює 0,000001-0,01, краще 0,00001-0,001, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). 19 У випадку доцетакселу, молярне Відношення дорівнює 0,0000001-1, краще 0,000001-0,1, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку карбоплатіну, молярне відношення дорівнює 0,001-1000, краще 0,01-1000, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку оксаліплатину, молярне відношення дорівнює 0,001г 10000, краще 0,01-1000, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку доксорубіцину, молярне відношення дорівнює 0,000001-1, краще 0,00001-0,1, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). У випадку вінбластіну, молярне відношення дорівнює 0,000001-1, краще 0,00001-0,1, до 1 похідного бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)). Спосіб введення фармацевтичної композиції або комбінації не обмежується і обирається залежно від їхньої дозованої форми, віку, статі пацієнта, ступеня тяжкості захворювання та інших обставин. Наприклад, таблетка, пігулка, розчин, суспензія, емульсія, гранула і капсула можуть бути введені перорально; ін'єкційний розчин може бути введений внутрішньовенно, окремо або в комбінації зі звичайною інфузійною рідиною, такою як глюкоза, амінокислоти, тощо, або, якщо необхідно, внутрішньом'язево, або підшкірно внутрішньочеревинно у вигляді єдиного препарату. Супозиторій може бути введений інтраректально. Доза фармацевтичної композиції або комбінації даного винаходу може бути обрана, залежно від їхньої дозованої форми, віку, статі пацієнта, ступеня тяжкості захворювання та інших обставин, як це необхідно, і кількість активних інгредієнтів у композиції звичайно може приблизно становити 0,0001-1000мг/кг на день. Бажано, щоб уніфікована дозована форма могла містити приблизно 0,001-1000мг активного інгредієнта (активних інгредієнтів). Далі, у випадку фармацевтичних комбінацій, кількість активного інгредієнта похідної бензаміду (зазначеного інгредієнта (а)) може становити приблизно 0,0001-1000мг на кг маси тіла. У випадку цисплатіну ця кількість може становити приблизно 0,01-50мг на кг маси тіла. У випадку етопозиду, ця кількість може становити приблизно 0,1-10мг на кг маси тіла. У випадку камптотецину, ця кількість може становити приблизно 0,1-10мг на кг маси тіла. У випадку 5-фторурацилу, ця кількість може становити приблизно 0,1-200мг на кг маси тіла. У випадку гемцитабіну, ця кількість може становити приблизно 1-300мг на кг маси тіла. У випадку паклітакселу, ця кількість може становити приблизно 0,1-100мг на кг маси тіла. У випадку доцетакселу, ця кількість може становити приблизно 0,1-50мг на кг маси тіла. У випадку карбоплатіну, ця кількість може становити приблизно 0,2-100мг на кг маси тіла. У випадку оксаліплатину, ця кількість може становити приблизно 0,1-50мг на кг маси тіла. У випадку доксорубіцину, ця кількість може становити приблизно 0,1-50мг на кг маси тіла. У випадку вінбластіну, ця кількість може становити приблизно 0,01-5мг на кг маси тіла. 81499 20 Для введення фармацевтичних комбінацій, у випадку одночасного введення, перший активний інгредієнт і другий активний інгредієнт вводять без будь-якого інтервалу часу. У випадку введення в різний час (послідовно), бажано вводити перший активний інгредієнт, а потім вводити другий активний інгредієнт пізніше, у часовому діапазоні від половини дня до 60 днів. Далі даний винахід буде пояснюватися більш конкретно з використанням прикладів. Приклади. Підтвердження синергічної дії між інгібітором гістондеацетилази і відомими протираковими активними речовинами на проліферацію ракових клітин. Синергічний ефект у комбінованому застосуванні інгібітору гістондеацетилази даного винаходу і різних типів відомих протиракових активних речовин на різні типи ракових клітинних ліній підтверджували прикладами. Тестовані речовини Як інгібітор гістондеацетилази даного винаходу використовували N-(2-амінофеніл)-4-[N(піридин-3ілметоксикарбоніл)амінометил]бензамід (MS-275), представлений формулою (5). (5) Як відомі речовини з протираковою активністю, застосовувані разом з вищевказаною сполукою MS-275, використовували паклітаксел (РТХ), камптотецин (СРТ), етопозид (VP-16), цисплатін (CDDP), гемцитабін (GEM), 5фторурацил (5-PU), доцетаксел (DTX), карбоплатин (CBDCA), оксаліплатин (ОХР), доксорубіцин (DOX) або вінбластин (VBL). Тестовані ракові клітини Серед ракових клітин, які проходили тестування, використовували наступні клітинні лінії: Лінію клітин раку ободової кишки: НТ-29 і/або НСТ116; Лінію клітин недрібноклітинного раку легені: NCI-H522, А549, Calu-1, Calu-3, NCI-H23 і/або NCIH460; Лінію клітин раку яєчника: SK-OV-3 і/або OVCAR-3; Лінію клітин раку підшлункової залози: PANC-1 і/або Сараn-1; Лінію клітин раку молочної залози:MCF-7 і/або Т47D. Лінію клітин раку простати: РС-3 Способи комбінованого використання В експериментах, для оцінки комбінованої дії MS-275, який є інгібітором гістондеацетилази, і іншої відомої протиракової активної речовини, вимірювали (і) дію одного MS-275, (іі) дію іншої відомої протиракової активної речовини і (ііі) дію комбінованого використання MS-275 і іншої протиракової активної речовини. Для вимірювання 21 впливу (ііі) використовували наступні два типи способів. Одночасно комбіноване використання: У цьому способі ракові тест-клітини інкубували протягом 72-120 годин у середовищі, яке містить суміш MS-275 і іншої відомої протиракової активної речовини, і потім вимірювали ракові клітини, що виживають. Послідовно комбіноване використання: У цьому способі ракові тест-клітини інкубували протягом 24 годин у середовищі, яке містить одну·з тест-речовин, і таке середовище, що містить зазначену тест-речовину, аспірували в цій точці часу. Потім ці клітини інкубували протягом 24 годин у середовищі, яке містить інше з тестречовин, і це середовище, яке містить зазначену тест-речовину, аспірували в цій точці часу, потім ці клітини інкубували протягом ще 72 годин у середовищі, яке не містить тест-речовин, і потім вимірювали ракові клітини, що виживають. У послідовно комбінованому використанні MS-275 давали діяти перші 24 години, а потім, протягом наступних 24 годин, давали діяти іншій відомій протираковій активній речовині. Цей експеримент виконували в зверненому порядку дії цих двох речовин. Крім того, у єдиному контролі введення для комбінованого використання тест-речовині давали діяти тільки протягом початкових 24 годин або тільки протягом наступних 24 годин. В іншому 24-годинному інтервалі часу і протягом кінцевих 72 годин ці клітини інкубували при відсутності тестречовини, і потім вимірювали ракові клітини, що вижили. Спосіб вимірювання ракових клітин, що виживають Після закінчення вищеописаної обробки (інкубації) ракових клітин тест-речовинами, клітини, які виживають, вимірювали одним із двох наступних способів. Аналіз з використанням нейтрального червоного: У цьому способі вимірювання використовували наступну властивість: тільки клітини, які вижили можуть поглинати всередину водорозчинний барвник, нейтральний червоний. Зазначену вище обробку ракових клітин тестречовиною виконували в лунках. Розчин нейтрального червоного (1мг/мл у ЗФР) додавали в лунки після кінця обробки (інкубації). Інкубація при 37°С протягом однієї години робила можливим поглинання нейтрального червоного клітинами. Розчин аспірували й у лунки додавали 100% етанол і 0,1Μ Na2HPO4. Нейтральний червоний, поглинений клітинами, екстрагувався з клітин, і потім екстрагований нейтральний червоний вимірювали мікропланшет-ридером при 540нм. Аналіз з використанням MTS: Цей спосіб призначений для дослідження виживання клітин з використанням того факту, що MTS (3-(4,5-диметилтіазол-2-іл)-5-(3карбоксиметоксифеніл)-2-(4-сульфофеніл)-2Нтетразолій) перетворюється у формазан мітохондріальною дегідрогеназою, яка є в клітинах, які вижили. У цьому способі експеримент виконували з використанням Cell Titer 96 81499 22 (товарний знак), водним аналізом Promega, який використовує проліферацію клітин в одному розчині відповідно до інструкцій, прикладеними до цих реагентів. Комбіноване відношення тест-речовин і оцінка синергізму Комбіноване відношення тест-речовин визначали в такий спосіб: у графіку Фіг.1 абсциса показує логарифм (Log M) концентрації тестречовин, а ордината показує відносне виживання у тому випадку, який позначений як виживання тестованих ракових клітин, у випадку нульової концентрації тест-речовин. Були побудовані графіки концентрації тест-речовин і відносного виживання ракових клітин у випадку, коли давали тільки тест-речовини. Розраховували концентрації тест-речовин у випадку відносного виживання 50%, ІС50· Що стосується ІС50 тест-речовин А та В, для яких було бажано визначити існування синергічної дії, у випадку, коли ІС5о тест-речовини А була 1мкМ і 0,01мкМ, коли ІС50 тест-речовини В була 0,01мкМ, оскільки протиракова дія тест-речовини В була в 100 разів більшою, ніж тест-речовини А, об'єднане відношення тест-речовини А і тестречовини В було встановлене як 100:1. Це відношення підтримували постійним при різних загальних концентраціях тест-речовин. Однак ІС50 тест-речовини розрізнялася відповідно до тестованих ракових клітин, так що комбіноване відношення було потрібно визначати для кожної тест-речовини і для кожного типу тестованих ракових клітин. На Фіг.1 «крива концентрація-виживання» тест-речовини А показана суцільною лінією, а «крива концентрація-виживання» тест-речовини В показана пунктирною лінією. Далі, за умови, що тест-речовину А та тест-речовину В використовували в постійному співвідношенні (наприклад, 100:1) і при різних загальних концентраціях і що об'єднана дія тест-речовин була «адитивною», отримана «крива концентрація - виживання» для випадку комбінованого використання. Наприклад, на Фіг.1 це показано в серії чорних точок. З іншого боку, «крива концентраціявиживання» може бути намальована з використанням розрахунку з фактично виміряних величин у випадку використання тест-речовини А і тест-речовини В при константному відношенні (наприклад, 100:1), та при різних загальних концентраціях. Коли ця крива присутня з лівої сторони від «кривої концентрація-виживання», намальованої за допомогою розрахунку при допущенні «адитивності дії», як показано, наприклад, серією чорних квадратів на Фіг.1, було оцінено, що об'єднані дії тест-речовини А і тестречовини В є «синергічними». Між тим, коли фактична «крива концентрація-виживання», намальована за допомогою розрахунку при допущенні «адитивності дії», як показано, наприклад, серією чорних трикутників на Фіг.1, оцінювали, що комбіновані дії тест-речовини А та тест-речовини В є «антагоністичними». 23 81499 Насправді, індекс комбінації (СІ) розраховували з результатів вимірювань у спосіб, [описаний в Chou ТС et al., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984) (Quantitative analysis of dost-effect relationships: the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors]. У цьому випадку, коли комбіновані дії тест-речовини А та тест-речовини В були адитивними, СІ=1. Коли СІ був менше 1, ці ефекти були синергічними. Далі, оцінювали наступне: чим менше величина, менша, ніж 1, тим вище був «синергізм». І чим більша величина, більша, ніж 1, тим вище був «антагонізм». Далі, взаємозв'язок між діапазоном величини СІ і ступенем синергізму й антагонізму виражають у такий спосіб: 24 Лінія раковихклітин НТ-29 Рак ободової кишки НСТ116 NCI-H522 А549 Недрібноклітинний рак легені, Таблиця 1 Діапазон величини СІ X->f» 200:1 обробку вказує 1:1 72 2000:1 200:1 1:1 Рак підшлункової залози PANC-1 MS-275 у початковому періоді обробки 24 години, 120 2000:1 400:1 1:1 200:1 1:1 72 400:1обробку іншою протираковою активною речовиною 1:10 Рак молочної залози MCF-7 120 400:1в наступному періоді обробки 24 години, потім 1:10 інкубування в середовищі, яке не містить тест72 100:1 1:40 Рак передміхурової залози РС-3 речовини, протягом 72 годин. Далі, «X->275->f» 120 10:1 1:50 вказує обробку іншою протираковою активною речовиною в початковому періоді обробки 24 Результати у випадку одночасного години, обробку MS-275 у наступному періоді комбінованого використання були наступними: обробки 24 години, потім інкубування в середовищі, яке не містить тест-речовини, Таблиця 3 протягом 72 годин. Далі, чисельні величини, що показують синергичну дію, показують величини СІ. Синергічна дія при комбінованому застосуванні MS-275 та інших протиракових активних речовин при одночасному комбінованому використанні РТХ Інша СРТ ++ +++ 25 81499 26 Синергічна дія при послідовному комбінованому застосуванні MS-275 та РТХ ракових клітин Лінія Порядок послідовного комбінованого Відношення Рак ободової кишки НСТ116 24+24+72 застосування 275:Х 275->X->f X->275->f NCI-H522 24+24+72 1,1X->f X->275->f Синергічна дія при послідовном 1,1< 0,48 комбінованому застосуванні MS-275 та DTX 200:1 +++ 0,75 1,1< 200:1 Відно ++ Лінія ракових клітин Час (год) 27 0,77 3000:1 ++ Недрібноклітинний рак легені А549 24+24+72 100 1,1< 0,69 100:1 +++ Рак яєчника SK-OV-3 24+24+72 200 1,1X->f X->275->f А549 24+24+72 0,63 0,95 24+24+72 1:8 Недрібноклітиннийрак легені +++ ± NCI-H522 24+24+72 0,89 24+24+72 4:1 + Рак яєчника SK-OV-3 24+24+72 0,55 0,69 24+24+72 1:1 +++ +++ Рак підшлункової Сараn-1 24+24+72 0,66 0,42 24+24+72 1:4 +++ +++ залози PANC-1 24+24+72 0,43 0,57 24+24+72 1:1 +++ +++ 0,77 0,61 24+24+72 1:1 ++ +++ 0,96 0,45 Синергічна дія при послідовном 24+24+72 8:1 ± +++ комбінованому застосуванні MS-275 та ОХР ( 0,53 0,63 24+24+72 1:1 +++ +++ Відношення Лінія ракових клітин Час (год) 275:Х Таблиця 7 Синергічна дія при послідовному кишки Рак ободової комбінованому застосуванні MS-275 та СРТ НТ-29 24+24+72 5:1 27 81499 Рак яєчника SK-OV-3 24+24+72 28 0,83 ++ 2:1 Таблиця 11 Синергічна дія при послідовному комбінованому застосуванні MS-275 та DOX (доксорубіцину) Лінія ракових клітин Час (год) Відношення 275:Х Порядок послідовного комбінованого застосування X->275->f 275->X->f Рак яєчника SK-OV-3 24+24+72 0,86 + 300:1 Таблиця 12 Синергічна дія при послідовному комбінованому застосуванні MS-275 та VBL (вінбластину) Час (год) Лінія ракових клітин Недрібноклітинний рак легені А549 Відношення 275:Х 24+24+72 300:1 Порядок послідовного комбінованого застосування 275->X->f X->275->f 0,89 + Таблиця 13 Синергічна дія при послідовному комбінованому застосуванні MS-275 та 5-FU (5-фторурацилу) Порядок послідовного комбінованого застосування Лінія ракових клітин Час (год) Відношення 275:Х X->275->f 275->X->f Рак ободової кишки НТ-29 24+24+72 У кожному випадку тестованих протиракових активних речовин детектували синергічні дії, обумовлені комбінованим застосуванням з MS275. Промислова застосовність Як пояснювалося вище, синергічні дії виявляються в тестах in vitro між інгібіторами гістондеацетилази, представленими MS-275, і іншими різними типами відомих протиракових активних речовин, і, таким чином, передбачається, що синергічні дії будуть отримані також у лікуванні пацієнта-людини хворого на рак. 2:3 0.79 ++