3-метил-7-n-фторбензил-8-(a-метил)-n-метоксибензиліденгідразиноксантин, який проявляє антиоксидантну дію

Корисна модель відноситься до біологічно активних сполук і може бути використана у фармації та медицині. Однією з ланок патогенезу захворювань, обумовлених ішемією органів є накопичення в клітинах тканин продуктів перекисного окиснення ліпідів, зокрема малонового діальдегіду, що призводить до значної модифікації біомолекул (білків, НК, фосфоліпідів мембран) та порушення функцій клітин. Відомо, що ішемія органів призводить до суттєвого зниження активності антиоксидантних ферментів (каталази, суперперосиддисмутази, глутатіонпероксидази) на тлі різкого падіння вмісту макроергічних фосфатів. В ци х умовах важливе значення набуває корекція патологічних змін препаратами-антиоксидантами, близькими за структурою до ендогенних субстратів. До арсеналу сучасних антиоксидантів входять як природні сполуки (a-токоферолу ацетат, убінон), так і синтетичні препарати (дибунол, емоксипін, мексидол) [Машковский М.Д, Лекарственные средства. - Изд. 15-е, перераб., испр. и доп. - М.: ООО "Издательство Новая Волна", 2005. - с.729-734]. Всі зазначені препарати виявляють ряд побічних ефектів - є алергогенними, призводять до диспептичних розладів (нудота, блювота, діарея), порушень нервової регуляції (збудження) та інші. Препарати мають ряд протипоказань (вагітність, порушення функції нирок, рак сечового міхура). Токоферол та убінон нестійкі при тривалому зберіганні. Сучасна фармацевтична галузь відчуває гострий дефіцит вітчизняних антиоксидантних препаратів, більшість з яких (за винятком токоферолу) імпортуються в Україну. Аналогом за дією сполуки, що заявляється може служити 1-п-метилбензил-8-мметоксибензиліденгідразинотеобромін [Патент України №18713, МПК C07D 473/00. 1-п-метилбензил-8-мметоксибензиліден-гідразинотеобромін, який виявляє антиоксидантну дію / Романенко M.I., Іванченко Д.Г., Жмурін Р.В., Белєнічев І.Ф. - №u200605854; Заявл. 29.05.06; Опубл. 15.11.06]: O N H 3C CH3 CH3 O N O N N NH N CH3 Сполука, що заявляється відрізняється від аналога наявністю інших замісників в положенні 1,7,8 ксантинової молекули та на відміну від аналога сполука, що заявляється, виявляє значно вищу антиоксидантну дію в концентрації 10-7моль/л. Структурним прототипом сполуки, що заявляється може служити 3-метил-7-п-фторбензил-8бензиламіноксантин [Романенко M.I., Прийменко Б.О., Шкода О.С., Носаченко B.I. Синтез та ПМР-спектроскопічне вивчення 7-п-F-бензилпохідних 3-метилксантину // Актуальні питання фарм. та мед. науки та практики (збірник наук. статей). - Вип. ХII. - Том 2. - Запоріжжя. - 2004. - С. 84-88]: O HN O N N F NH N На відміну від прототипу сполука, що заявляється, виявляє антиоксидантну дію та відрізняється замісником у положенні 8. В основу корисної моделі поставлена задача створення оригінальних вітчизняних препаратів антиоксидантної дії, які можуть бути використані для лікування серцево-судинних захворювань, корекції різноманітних вікових дисфункцій та інш. Вказана задача може бути вирішена синтезом 3-метил-7-п-фторбензил-8-(a-метил)-пметоксибензиліденгідразиноксантину: O HN O N N N F NH N O На відміну від інших препаратів-антиоксидантів, в тому числі аскорбінової кислоти, тіотриазоліну [Лек. препараты Украины под ред. В.П. Черных, И.А. Зупанца. - Харьков: Изд-во НФаУ "Золотые страницы", 2005. - с. 48-50; 383-384] та прототипу, сполука, що заявляється, виявляє значно вищу антиоксидантну дію. Одержують сполуку, що заявляється, взаємодією 8-бром-3-метил-7-п-фторбензилксантину (І) з гідразингідратом з подальшим нагріванням 8-гідразино-3-метил-7-п-фторбензилксантину (II) з п-метоксіацетофеноном. Приклад 1. Етап 1. Синтез 8-гідразино-3-метил-7-п-фторбензил-ксантину (II). Суміш 35,3г (0,1моль) 8-бром-3-метил-7-п-фторбензилксантину (І) [Романенко M.I., Прийменко Б.О., Шкода О.С., Носаченко B.I. Синтез та ПМР-спектроскопічне вивчення 7-п-F-бензилпохідних 3-метилксантину // Актуальні питання фарм. та мед. науки та практики (збірник наук. статей). - Вип. XII. - Том 2. - Запоріжжя. - 2004. - С. 84-88], 40мл (0,8моль) гідразингідрату, 150мл води та 350мл діоксану кип'ятять 4 години. В гарячому вигляді фільтрують, фільтрат охолоджують, розводять водою до 1л. Осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою та метанолом, сушать. Ви хід 82,4%, Ттопл. 226-8°С. С13Н3FN6O 2. Знайдено, %: С - 51,2; Н - 4,2; N - 27,5. Розраховано, %: С - 51,3; Н - 4,3; N - 27,6. ПМР спетр (d-шкала, м.д., розчинник - ДМСО): 10,52 (с., 1Н) - N1H; 8,19 (пош. с., 1Н) - C8NH; 7,41-7,0 (м., 4Н) С6Н4-F-п; 5,31 (с, 2Н) - N 7CH2; 4,39 (пош. с., 2Н) – NH 2; 3,35 (с, ЗН) - N3CH3. Етап 2. Синтез 3-метил-7-п-фторбензил-8-(a-метил)-п-метокси-бензиліденгідразиноксантину (III) - сполука, що заявляється. При нагріванні розчиняють 1,5г (0,05моль) 8-гідразино-3-метил-7-п-фторбензил-ксантину (II) у суміші 20мл води, 20мл діоксану та 5 крапель НСlконц. і до гарячого розчину додають 0,9г (0,06моль) п-метоксіацетофенону. Суміш кип'ятять 10 хвилин, охолоджують. Осад, що утворився, відфільтровують, промивають водою, ацетоном, ефіром, сушать. Вихід 64,2%, Ттопл. 268-9°С. С22Н21FN6О3 . Знайдено, %: С - 60,8; Н - 4,7; N -19,1. Розраховано, %; С - 60,5; Н - 4,9; N - 19,3. ПМР спетр (d-шкала, м.д., розчинник - ДМСО): 10,37 (с., 1Н) - NH; 7,41-6,65 (м., 8Н) - СНаром.; 5,3 (с., 2Н) N7CH2; 3,79 (с., 3Н) - ОСН3; 3,32 (с., 3Н) - N 3СН3; 2,24 (с., 3Н) - ССН 3. Приклад 2. Антиоксидантну активність (АОА) 3-метил-7-п-фтор-бензил-8-(a-метил)-п-метоксибензиліденгідразиноксантину вивчали in vitro методом неферментного ініціювання вільнорадикального окиснення [Pat. 5726063 USA, G01N 33/52. Method of colorimetric analysis of malonic dialdehydes and 4-hydroxy-2-enaldehydes as indexes of lipid peroxidation, kits for use m said mathod and their preparation / D. Gerard-Monnier, I. Erdelmeir, J Chaudiere, J. Yadan. - appl. №702197, date of patent Mar. 10, 1998.]. В якості субстрату використано суспензію яєчних ліпопротеїдів (СЯЛ). СЯЛ готується шляхом гомогенізації яєчного жовтка з фосфатним буфером (рН 7,4). До суспензії додають досліджувані сполуки в концентрації 10 -3, 10-5, 10-7моль/л. Реакцію вільнорадикального окиснення ініціюють додаванням 25мМ розчину FeSO4·7H2O. С уміш інкубують 60 хвилин при 37°С. Реакцію зупиняють 50% розчином трихлороцтової кислоти з грилоном Б. Після центрифугування протягом 30 хвилин до розчину тіобарбітурової кислоти (ТБК) додають надосадочну рідину і кип'ятять на водяній бані протягом 60 хвилин. Забарвлений комплекс малонового діальдегіду з ТБК вилучають додаванням н-бутанолу. Методом спектрофотометрії визначають концентрацію малонового діальдегіду, яка свідчить про інтенсивність процесів вільнорадикального окиснення. Антиоксидантну активність (у відсотках) визначають за формулою: АОА=(СK1-С0/СK1-СK2)100%, де СK1, СK2 - вміст ТБК-реактантів у контрольних пробах, моль/л; C0 - вміст ТБК-реактантів у дослідній пробі, моль/л. Дані АОА сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та аналога наведені в Таблиці 1. Таблиця 1 АОА сполуки, що заявляється, еталонів порівняння та прототипу № п/п Сполука 1 3-метил-7-п-фторбензил-8-(a-метил)-пметоксибензиліденгідразиноксантин (сполука, що заявляється) 2 Аналог (1-п-метилбензил-8-м-метоксибензиліденгідразино-теобромін) 3 4 5 6 Аскорбінова кислота Тіотриазолін a-Токоферолу ацетат Дибунол М.м. 436 379 176 246 472 220 С, моль/л 10-3 10-5 10-7 10-3 10-5 10-7 10-3 10-3 10-3 10-3 АОА, % 70,39 60,78 67,27 93,33 60,95 47,62 65,00 33,90 10,16 25,20 Як видно із наведених в Таблиці 1 даних, сполука, що заявляється, має значно вищі показники АОА ніж еталони порівняння. За даним показником 3-метил-7-п-фторбензил-8-(a-метил)-пметоксибензиліденгідразиноксантин в концентрації 10-3моль/л перевищує аскорбінову кислоту, тіотриазолін, aтокоферолу ацетат, дибунол на 5,39%, 36,49%, 60,23%, 45,19% відповідно та поступається лише аналогу на 22,94%. У концентрації 10-5моль/л сполука, що заявляється, за показником АОА майже дорівнює аналогу, а в концентрації 10-7моль/л - перевищує на 19,65%. Таким чином, наведені вище дані свідчать про те, що після поглиблених фармакологічних досліджень сполука, що заявляється, може бути використана в якості антиоксиданту в медичній практиці.