Спосіб одержання родоспецифічної r-бруцелаовісної аглютинуючої сироватки

Спосіб одержання родоспецифічної Rбруцелаовісної аглютинуючої сироватки шляхом підшкірної імунізації тварин-продуцентів специфічними шактивованими імуногенними препаратами з масляним ад'ювантом з подальшим відбором крові та відокремленням цільового продукту, який відрізняється тим, що для імунізації використовують специфічний шактивований імуногенний бактерии зі штаму Brucella ovis 76/982 Ціль зазначеного способу досягається одержанням сироватки шляхом використання різних схем імунізації тварин-продуцентів культурами бруцел в R- формі Але, в запропонованих способах при отриманні бруцельозних R- сироваток використовують культуру Brucella abortus в R- формі Найбільш близьким до винаходу, що запропонований, є спосіб одержання аглютинуючої Rбруцельозної сироватки В даному способі для одержання R- бруцельозної сироватки використовують кролів, яких заражають підшкірно інактивованою культурою Brucella abortus триразове з інтервалом 3 дні в дозах 7,5, 16,5 та 22,5 млрд м к Недоліками цього способу є використання культури Brucella abortus, в R- формі, яка характеризується нестабільністю властивостей і антигенною МІНЛИВІСТЮ в бік S- форм Крім того, одержані сироватки мають низьку активність в РА, що може приводити до сумнівних і негативних результатів при індикації культур В основу винаходу, що передбачається, поставлено завдання розробити спосіб одержання родоспецифічної R- бруцелаовісної аглютинуючої сироватки шляхом підшкірної імунізації тваринпродуцентів специфічним, шактивованим імуногенним бактерином, зі штаму Brucella ovis 76/982, щоб забезпечити отримання високоактивної аглютинуючої родоспецифічної R- бруцелаовісної сироватки придатної для виявлення R- та RS- форм В abortus, В mehtensis, В suis та В ovis Для цього використовують КЛІНІЧНО здорових кролів, вагою не менше 2,5 - Зкг, яких імунізують підшкірно, дворазово, з інтервалом 12 днів специ со Ю 53910 фічними імуногенними препаратами Через 12 - 14 днів після останнього введення імуногену, проводять відбір крові для дослідження та подальшого тотального знекровлення Порівняльний аналіз з прототипом дозволяє зробити висновок про те, що заявлений спосіб відрізняється від відомого використанням для імунізації шактивованого бактерину із штаму Brucella ovis 76/982, який характеризується стабільною Rформою і високою бруцельозною родоспецифічною антигенною активністю, завдяки чому забезпечується активність і стабільна родова бруцельозна R-специфічність сироватки та и діагностична ЦІННІСТЬ, що відповідає критерію "новизна" Спосіб пояснюється такими прикладами Приклад 1 Виготовляють специфічний імуногенний препарат, який являє собою суспензію бактеріальних клітин попередньо звільнених від поверхневих антигенів з культури Brucella ovis штам 76/982 з додаванням масляного ад'юванта у співвідношенні 1 1 Відбирають КЛІНІЧНО здорових кролів вагою не менше 2,5 - Зкг, яких імунізують даним препаратом дворазово, з інтервалом 12 днів, підшкірно в однакових дозах Через 12 - 14 днів після останньої ін'єкції проводять відбір крові з виділенням сироватки 4 та визначають специфі чність та активність сироватки в пластинчатій реакції аглютинації (РА) до R та S бруцельозних антигенів При наявності позитивної реакції з Rантигеном не менш як на ++ в розведенні сироватки 1 20 і вище, та відсутності позитивної реакції з S- антигеном, проводять повне знекровлення тварин-продуцентів з наступним відокремленням сироватки Приклад 2 Отримані сироватки (приклад 1) перевіряють на специфічність і активність з живими культурами бруцел (В abortus, В mehtensis, В suis, В ovis), ЯКІ знаходяться в S-, R- і RS- формах (табл) Сироватка вважається специфічною, якщо вона аглютинує культури бруцел всіх видів в R- формі, а також дисоційовані культури в RSформі і не аглютинує культури бруцел в S- формі (В abortus, В mehtensis, В suis) Робочим титром сироватки вважається подвоєний граничний титр в РА з R-бруцелаовісним антигеном Таким чином, застосування запропонованого способу одержання родоспецифічної R- бруцелаовісної аглютинуючої сироватки дозволяє отримувати специфічну R- родову бруцельозну сироватку, яка виявляє культури бруцел в R- та RSформах і не виявляє S - форми бруцел Таблиця Штами В abortus 10/19-770 В abortus 88/7-26 В abortus 160/528 В mehtensis Rev- la В suis 152/11-2 В suis 172/112 В ovis 76/982 В ovis 156/7807 В ovis 157/4151 В ovis 1-156/7807 В ovis 67/"Б" В ovis 65/65939 Контрольний R-антиген Контрольний S-антиген Стан культури S RS S RS S RS RS RS RS R R R R-бруцелаовісна родова сироватка* +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ - сироватка одержана на штам В ovis, * - сироватка одержана на штам В abortus ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044) 236 - 47 - 24 Контрольні сироватки S R** ++++ ++++ + ++++ ++++ ++Ч-+ ++++ ++++ ++++ ++ ++ ++++ ++++ +++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++