Сполуки хіноліну та хіноксаліну, фармацевтична композиція на їх основі, спосіб інгібування клітинної проліферації, диференціювання або вивільнення медіатору у пацієнта, спосіб лікування запалення

1. Застосування інгібуючої рестенозефективної кількості сполуки хіноліну або хіноксаліну формули І C2 2 (19) 1 3 74536 4 R1с являє собою водень, С1-С10-алкільну групу, яка 11. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що необов’язково заміщена однією або більше групаR3 у сполуці формули І являє собою водень, ортоми, вибраними з С1-С10-алкокси, галогено, карбокабо пара-фтор, або мета-метил, трифторметил, си, гідрокси або R5R6N- (де R5 та R6 приймають метокси, фтор, хлор, бром або карбамоїл. значення, визначені вище), або С1-С1012. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що алкоксигрупу, яка необов’язково заміщена однією Za у сполуці формули І являє собою N. або більше групами, вибраними з С1-С10-алкокси, 13. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що карбокси, С1-С10-алкоксикарбонілу, карбокси-С6Za у сполуці формули І являє собою СН. С10-арилу або R5R6N- (де R5 та R6 приймають зна14. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що чення, визначені вище); Zb у сполуці формули І являє собою NH. R2 являє собою 15. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що Zb у сполуці формули І являє собою O. 16. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що сполука формули І вибрана з групи, яка включає: R3 2-аніліно-6-хіноксалінол; 2-аніліно-6-ізопропоксихіноксалін; ; 2-фенокси-6-метоксихіноксалін; R3 являє собою водень або орто- або пара-фтор, 2-(3-карбамоїлфеніламіно)-6-метоксихіноксалін; або мета-С1-С3-алкіл, С1-С3-алкокси, галоген або 2-(2-фторфеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; карбамоїл; 2-(3-трифторметилфеніламіно)-6,7Za являє собою N або CH; та діетоксихіноксалін; Zb являє собою NH або O; або феніл-[6-(тетрагідрoфуран-3(R)-ілокси)хіноксалінїї N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її 2-іл амін; солі (6-метоксихіноксалін-2-іл)-(3-метилфеніл)-амін; для виготовлення полімерного покриття для стен2-aніліно-6-етоксихіноксалін; та. 2-(3-метоксифеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; 2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що 2-(4-фторфеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; R1a у сполуці формули І являє собою С1-С36,7-діетокси-2-феноксихіноксалін; алкоксигрупу, яка необов’язково заміщена, як вка2-феніламіно-6,7-діетоксихіноксалін; зано у п. 1, моноциклічну С3-С7(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-(3-фторфеніл)-амін; циклоалкілоксигрупу, яка необов’язково заміщена, 2-(3-фторфеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; як вказано у п. 1, або моноциклічну оксагетероци(3-бромфеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-амін; клілоксигрупу, що має від 4 до 7 членів циклу, яка (6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-феніламін; та необов’язково заміщена, як вказано у п. 1. (3-хлорфеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-амін; 3. Застосування за п. 2, яке відрізняється тим, що або R1a у сполуці формули І являє собою С1-С3її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її алкоксигрупу, яка необов’язково заміщена, як вкафармацевтично прийнятної солі. зано у п. 1, або моноциклічну оксагетероциклілок17. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що сигрупу, що має від 4 до 7 членів циклу, яка неополімерне покриття включає один або більше побов’язково заміщена, як вказано у п. 1. лімерів, вибраних із групи, яка включає полікапро4. Застосування за п. 3, яке відрізняється тим, що лактон, полі(етилен-ко-вінілацетат), поR1a у сполуці формули І являє собою метокси, етолі(вінілацетат) та кремнієорганічний полімер. кси, 2-(етокси)етокси, 2-(4-морфолініл)етокси або 18. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що фуранілокси. полімерне покриття включає один або більше по5. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що лімерів, вибраних із групи, яка включає латекси, R1b у сполуці формули І являє собою водень, С1уретани, полісілоксани та стирол-етилен/бутиленС3-алкоксигрупу, яка необов’язково заміщена, як стирол блокспівполімери. вказано у п. 1, моноциклічну С3-С719. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що циклоалкілоксигрупу, яка необов’язково заміщена, полімерне покриття включає один або більше пояк вказано у п. 1, або моноциклічну оксагетероцилімерів, вибраних із групи, яка включає полі-DLклілоксигрупу, що має від 4 до 7 членів циклу, яка молочну кислоту, полі-L-молочну кислоту, поліорнеобов’язково заміщена, як вказано у п. 1. тоестери, поліімінокарбонати, аліфатичні полікар6. Застосування за п. 5, яке відрізняється тим, що бонати та поліфосфазени. R1b у сполуці формули І являє собою водень або 20. Застосування за п. l, яке відрізняється тим, що С1-С3-алкоксигрупу, яка необов’язково заміщена, полімерне покриття додатково включає порозиген. як вказано у п. 1. 21. Застосування за п. 20, яке відрізняється тим, 7. Застосування за п. 6, яке відрізняється тим, що що порозиген вибраний з групи, яка включає мікR1b у сполуці формули І являє собою метокси- або рогранули хлориду натрію, лактози або гепаринату етоксигрупу. натрію. 8. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що 22. Застосування за п. 20, яке відрізняється тим, R1a і R1b у сполуці формули І являють собою С1-С3що порозиген вибраний з групи, яка включає поліалкоксигрупу. етиленгліколь та поліетиленок9. Застосування за п. 8, яке відрізняється тим, що сид/поліпропіленоксид співполімери. R1a і R1b у сполуці формули І являють собою мето23. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що кси- або етоксигрупу. на полімерне покриття нанесена мембрана регу10. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що лювання швидкості, для обмеження швидкості R1c у сполуці формули І являє собою водень. 5 74536 6 вивільнення сполуки формули I з полімерного покполімери, такі як полівінілхлорид; полівінілові ефіриття. ри, такі як полівінілметиловий ефір; полівініліден24. Застосування за п. 23, яке відрізняється тим, галогеніди, такі як полівініліденфторид та полівініщо мембрана регулювання швидкості включає ліденхлорид; поліакрилонітрил, полівінілкетони, порозиген, вибраний з групи, яка включає хлорид полівінілароматичні сполуки, такі як полістирол, натрію, лактозу, гепаринат натрію, поліетиленгліполівінілові естери, такі як полівінілацетат; співпоколь, поліетиленоксид/поліпропіленоксид співполімери вінілових мономерів один з одним та олелімери та їх суміші. фінами, такі як етилен-метилметакрилатні співпо25. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що лімери, акрилонітрил-стирольні співполімери, ABS сполука формули І включена в полімерне покриття смоли, та етилен-вінілацетатні співполімери; полішляхом нанесення сполуки формули І на принайаміди, такі як Нейлон 66 та полікапролактам; алкімні одну поверхню стента, для утворення біоактильні смоли, полікарбонати; поліоксиметилени; повного шару, і потім нанесення одного або більше лііміди, поліефіри; епоксидні смоли, поліуретани; покриттів пористого полімерного матеріалу поверх віскозу; триацетат-віскозу, целюлозу, ацетат цебіоактивного шару. люлози, бутират целюлози; ацетат бутират целю26. Застосування за п. 25, яке відрізняється тим, лози; целофан, нітрат целюлози; пропіонат целющо пористий полімерний матеріал включає поліалози; ефіри целюлози; та мід, парилен або похідну парилену. карбоксиметилцелюлозу. 27. Застосування за п. 25, яке відрізняється тим, 34. Фармацевтична композиція, що включає фарщо пористий полімерний матеріал нанесений за мацевтично прийнятний носій та ефективну кільдопомогою плазмового осадження. кість сполуки хіноліну або хіноксаліну формули І 28. Застосування за п. 27, яке відрізняється тим, R 1c що пористий полімерний матеріал вибраний з групи, яка включає полі(етиленоксид), поZ bR2 Za R 1b лі(етиленгліколь), полі(пропіленоксид) та полімери метану, силікону та тетрафторетилентетраметилдисілоксану. R 1a N 29. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що I, полімерне покриття одержане з додаткового, здав якій: тного до фотополімеризації, поліетиленоненасиR1a і R1b являють собою С1-С3-алкоксигрупу; ченого естеру акрилової або метакрилової кислоR1с являє собою водень; ти, що містить дві або більше акрилатних або R2 являє собою метакрилатних груп на молекулу, або їх суміші. 30. Застосування за п. 29, яке відрізняється тим, що мономер вибраний з групи, яка включає етилеR3 нглікольдіакрилат, етиленглікольдиметакрилат; триметилпропантриакрилат, триметилпропантри; метакрилат, пентаеритринолтетраакрилат, пентаR3 являє собою водень або мета-галоген; еритринолтетраметакрилат, 1,6Za являє собою N або CH; та гександіондиметакрилат та діетиленглікольдимеZb являє собою NH або O; або такрилат. її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її 31. Застосування за п. 29, яке відрізняється тим, солі. що мономер вибраний з групи, яка включає н35. Спосіб інгібування клітинної проліферації, дибутилакрилат, н-бутилметакрилат, 2ференціювання або вивільнення медіатору у паціетилгексилакрилат, лаурилакрилат та 2єнта, що страждає від захворювання, яке характегідроксипропілакрилат. ризується такою проліферацією та/або 32. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що диференціюванням та/або вивільненням медіатополімерне покриття включає полімер, вибраний з ру, який відрізняється тим, що вказаному пацієнту групи, яка включає: полі(L-молочну кислоту), полівводять фармацевтично ефективну кількість спокапролактон, полі(лактид-когліколід), полуки хіноліну або хіноксаліну формули І лі(гідроксибутират), полі(гідроксибутиратR 1c ковалерат), полідіоксанон, поліортоестер, поліангідрид, полі(гліколеву кислоту), полі(D,L-молочну Z bR2 Za R 1b кислоту), полі(гліколеву кислотукoтриметиленкарбонат), поліфосфоестер, поліфосфоестеруретан, полі(амінокислоти), ціаноакрилати, полі(триметиленкарбонат), полі(імінокарбонат), R 1a N I, полі(ефір-естери), поліалкіленоксалати, поліфосфазени, фібрин, фібриноген, целюлозу, крохмаль, в якій: колаген та гіалуронову кислоту. R1a і R1b являють собою С1-С3-алкоксигрупу; 33. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що R1с являє собою водень; полімерне покриття включає полімер, вибраний з R2 являє собою групи, яка включає: поліуретани, силікони, поліестери, поліолефіни, поліізобутилен та етиленальфаолефіновий співполімер; акрилові полімери та співполімери, вінілгалогенідні полімери та спів 7 74536 8 пластичних операцій на судинах, вкритого гідрoфільною плівкою, насиченою вказаною сполукою. R3 40. Спосіб за п. 37, який відрізняється тим, що вказану сполуку вводять за допомогою катетера, що ; включає інфузійну камеру, яка містить розчин вкаR3 являє собою водень або мета-галоген; заної сполуки. Za являє собою N або CH; та 41. Спосіб за п. 37, який відрізняється тим, що вкаZb являє собою NH або O; або зану сполуку вводять за допомогою покриття на її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її стенті. солі. 42. Спосіб за п. 36, який відрізняється тим, що па36. Спосіб лікування пацієнта з патологією, тологією, пов’язаною з гіперпроліферативним запов’язаною з гіперпроліферативним захворюванхворюванням, є рак, чутливий до лікування шляням, який відрізняється тим, що вказаному пацієнхом інгібування PDGF тирозинкінази. ту вводять фармацевтично ефективну кількість 43. Спосіб за п. 42, який відрізняється тим, що рак сполуки хіноліну або хіноксаліну формули І є раком мозку, раком яєчника, раком товстої кишR 1c ки, раком передміхурової залози, раком легенів, саркомою Капоші або злоякісною меланомою. Z bR2 Za R 1b 44. Спосіб лікування запалення у пацієнта, що страждає на таке запалення, який відрізняється тим, що вказаному пацієнту вводять фармацевтично ефективну кількість сполуки хіноліну або хіноR 1a N I, ксаліну формули І в якій: R 1c R1a і R1b являють собою С1-С3-алкоксигрупу; R1с являє собою водень; Z bR2 Za R 1b R2 являє собою R3 ; R3 являє собою водень або мета-галоген; Za являє собою N або CH; та Zb являє собою NH або O; або її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її солі. 37. Спосіб за п. 36, який відрізняється тим, що вказаною патологією є рестеноз. 38. Спосіб за п. 36, який відрізняється тим, що вказане гіперпроліферативне захворювання знаходиться у місці механічного пошкодження стінки артерії, отриманого при лікуванні атеросклеротичного пошкодження шляхом пластичної операції на судинах. 39. Спосіб за п. 37, який відрізняється тим, що вказану сполуку вводять за допомогою балончика для Даний документ є продовженням патентної заявки США №09/198716, поданої 21 листопада 1998p., яка, у свою чергу, є частковим продовженням Міжнародної патентної заявки № PCT/US98/10999, поданої 28 травня 1998p., яка, у свою чергу, є частковим продовженням патентної заявки США №08/972614, поданої 18 листопада 1997p., нині абандонованої, яка, у свою чергу, є частковим продовженням патентної заявки США №08/864455, поданої 18 травня 1997p., нині абандонованої. Даний винахід стосується інгібування розмноження клітин та/або утворення клітинного матриксу та/або руху клітин (хемотаксису) та/або активі R 1a N I, в якій: R1a і R1b являють собою С1-С3-алкоксигрупу; R1с являє собою водень; R2 являє собою R3 ; R3 являє собою водень або мета-галоген; Za являє собою N або CH; та Zb являє собою NH або O; або її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків або її солі. зації та розмноження Т-клітин з застосуванням сполук хіноліну/хіноксаліну, які використовують як інгібітори тирозинкінази (ТКІ). Клітинний сигнал опосередковується через систему взаємодій, яка включає міжклітинний контакт або контакт клітина-матрикс або позаклітинний контакт рецептор-субстрат. Позаклітинний сигнал часто передається в інші частини клітини через опосередковане тирозинкіназою фосфорилювання, яке впливає на субстратні білки нижче від зв'язаного клітинною мембраною сигнального комплексу. Прикладами ферментів тирозинкіназ, які беруть участь у клітинному сигналі, є специфічні рецептори-ферменти, такі, як інсуліновий ре 9 74536 10 цептор, рецептор фактора росту епідермісу (EGF241-260]. R) або рецептор тромбоцитарного фактора росту До відомих інгібіторів активності PDGF-R тиро(PDGF-R). Аутофосфорилювання ферменту вимазинкінази належать інгібітори на основі хіноліну, гається для ефективного опосередкованого ферпро які повідомляється у роботі Maguirc et al. [J. ментом фосфорилювання білків-субстратів, що Med. Chem. 1994, 37, 2129] та Dolle et al. [J Med. містять залишки тирозину. Цими субстратами поChem. 1994, 37, 2627]. Про клас інгібіторів на осяснюють різні клітинні події, включаючи клітинне нові феніламінпіримідину останнім часом повідомрозмноження, утворення клітинного матриксу, клілялося у патенті Traxler et al., EP 564409, та роботинну міграцію та апоптоз. тах Zimmerman, J. and Traxler, P. et al. [Biorg. & Зрозуміло, що велика кількість захворювань Med. Chem. Lett. 1996, (6(11), 1221-1226] і спричинюється неконтрольованим відтворенням Buchdunger, E. et al. [Proc Nat Acad Sei. 1995, 92, клітин або надмірним утворенням матриксу або 2558]. Незважаючи на прогрес у цій галузі, агентів погано регульованою запрограмованою смертю з цих класів сполук, ухвалених для застосування у клітин (апоптозом). Ці захворювання поширюються лікуванні проліферативних хвороб у людей, не на різні типи клітин і включають такі хвороби, як існує. лейкемія, рак, гліобластома, псоріаз, запальні хвоВзаємозв'язок між багатофакторною хворобою роби, хвороби кісток, фіброзні хвороби, атерорестенозу з PDGF та PDGF-R широко задокуменсклероз та рестеноз, які трапляються внаслідок товано у науковій літературі. Однак останнім чапластичної операції коронарних, стегнових або сом прогрес у дослідженні фіброзних хвороб легениркових артерій або фібропроліферативні хворонів [Antomades, Η.Ν., et al. J. Clin. Invest. 1990, 86, би, такі, як артрит, фіброз легенів, нирок та печін1055], нирок та печінки [Peterson, Т.С. Hepatology, ки. Крім того, нерегульоване розмноження клітин 1993, 17, 486] вказує також на роль PDGF та виникає внаслідок коронарного шунтувуання. ВваPDGF-R. Наприклад, гломерулонефрит є основжають, що інгібування активності тирозинкінази ною причиною ниркової недостатності, a PDGF можна використовувати для контролювання невиявив себе потужним мітогеном для мезангіальконтрольованого відтворення клітин або надмірноних клітин in vitro, що було продемонстровано у го утворенням матриксу або погано регульованої роботі Shultz et al. [Am. J. Physiol. 1988, 255, F674] запрограмованої смерті клітин (апоптозу). та Floege, et al. [Clin. Exp. Immun. 1991, 86, 334]. У Відомо також, що деякі інгібітори тирозинкінароботі Thornton, S. С; et al. [Clin. Exp. Immun. 1991, зи можуть взаємодіяти з кількома типами тирозин86, 79] повідомляється, що TNF-альфа та PDGF кінази. Кілька тирозинкіназ відіграють ключову (взяті у пацієнтів з ревматичним артритом) є оснороль у нормальному функціонуванні організму. вними цитокінами, які беруть участь у розмноженні Наприклад, інгібування активності інсуліну є небасиновіальних клітин. Крім того, було ідентифіковажаним у більшості звичайних обставин. Отже, споно конкретні типи пухлинних клітин [див. Silver, луки, які інгібують активність PDGF-RВ.J., BioFacfors 1992, 3, 217], такі, як гліобластома тирозинкінази при концентраціях, менших за конта саркома Капоші, які надекспресують або білок центрації, ефективні для інгібування інсулінорецеPDGF, або рецептор, таким чином, призводячи до пторної кінази, можуть бути цінними агентами для неконтрольованого росту ракових клітини через селективного лікування від хвороб, які характериаутокринний або паракринний механізм. Отже, зуються розмноженням клітин та/або утворенням можна очікувати, що інгібітор тирозинкінази PDGF клітинного матриксу та/або рухом клітин (хемотакможе бути корисним для лікування різних, здавасисом), таких, як рестеноз. лося б, нічим не зв'язаних захворювань людини, Даний винахід стосується модуляції та/або інякі можуть бути охарактеризовані участю в їхній гібування клітинного сигналу, розмноження клітин, етіології PDGF та/або PDGF-R. утворення позаклітинного матриксу, хемотаксису, Роль різних нерецепторних тирозинкіназ, таконтролювання аномального росту клітин та запаких, як р56lck (далі - "Lck"') у пов'язаних із запаленльної реакції клітин. Точніше, цей винахід стосунями захворюваннях, які включають активізацію та ється застосування заміщених сполук хіноксаліну, розмноження Т-клітин, розглядалася у роботах які виявляють селективне інгібування диференціаHanke, et al. [Inflamm Res. 1995, 44, 357] та Boten ції, розмноження або вивільнення медіатора через and Brugge [Ann. Rev. Immunol., 1997, 15, 371]. До ефективне інгібування активності тирозинкіназицих запальних захворювань належать алергія, рецептора тромбоцитарного фактора росту аутоімунна хвороба, ревматичний артрит та відто(PDGF-R) та/або активності тирозинкінази Lck. ргнення трансплантатів. В іншій з нещодавно опуУ багатьох літературних джерелах описано інблікованих робіт дається огляд різних класів інгібігібітори тирозинкінази, які є селективними для реторів тирозинкінази, включаючи сполуки, які мають цепторних тирозинкіназ, таких, як EGF-R або інгібіторну активність щодо Lck [Groundeoda et al. PDGF-R, або нерецепторних цитозольних тирозиProgress in Медичної хімії, 1996, 33, 233]. До інгібінкіназ, таких, як v-abl, p561ck або c-src. В останніх торів активності тирозинкінази Lck належать кілька роботах Spada and Myers [Exp. Opin. Then Patents природних продуктів, які зазвичай є неселектив1995, 5(8), 805] та Bridges [Exp. Opin. Then Patents ними інгібіторами тирозинкінази, такі, як стаурос1995, 5(12), 1245] дається загальний огляд літерапорин, геністеїн, деякі флавони та ербстатин. Нетурних джерел, відповідно, інгібіторів тирозинкінащодавно було повідомлено, що низькомолярним зи та селективних інгібіторів FGF-R. Крім того, Law (нМ) інгібітором Lck [Faltynek, et al., Biochemistry, and Lydon роблять висновки щодо протиракового 1995, 34, 12404] є дамнакантол. Приклади синтепотенціалу інгібіторів тирозинкінази [Emerging тичних інгібіторів Lck включають низку дигідроксиіDrugs: The Prospect For Improved Medicines 1996, зохінолінових інгібіторів, про які повідомляється, 11 74536 12 що вони мають активність від низькомікромолярної R5 та R6 незалежно один від одного є воднем до субмікромолярної [Burke, et al., J. Med. Chem. або алкілом, або R5 та R6, взяті разом з атомом 1993, 36, 425], та похідна хіноліну, яка виявилася азоту, до якого приєднуються R5 та R6, утворюють значно менш активною, маючи Lck IC50 610 мікроазагетероцикліл; молів. Дослідниками також було виявлено серію 4Za є N або СН; і заміщених хіназолінів, які інгібують Lck у діапазоні Zb є NH або О, або від низькомікромолярного до субмікромолярного її N-оксиду, її гідрату, її сольвату, її проліків [Myers et al., WO95/15758 та Myers, et al., Bioorg. або її солі, за умови, що R1a та R1b не є обидва за Med. Chem. Lett. 1997, 7, 417]. Дослідники фірми бажанням заміщеним алкілом. Pfizer [Hanke, et al. J. Biol. Chem. 1996, 277, 695] Інший аспект винаходу спрямовано на фармавиявили два спеціфічні піразолопіримідинові інгібіцевтичну композицію, яка включає фармацевтично тори, відомі як РР1 та РР2, які мають низьконаноефективну кількість сполуки формули І та фармамолярну ефективність проти Lck та. Fyn (ще одна цевтично прийнятний носій. Винахід також спрякіназа з Src-родини). Ні про яке інгібування Lck не мовано на проміжні сполуки, які застосовують при повідомляється стосовно сполук на основі хіноліну одержанні сполук формули І, способи одержання або хіноксаліну. Отже, можна очікувати, що інгібіпроміжних сполук та сполук формули І, і застосутори активності тирозинкінази Lck на основі хінолівання сполуки формули І для лікування пацієнта, ну або хіноксаліну можуть бути корисними у лікуякий страждає або є схильним до захворювань, ванні здавалося б, нічим не зв'язаних захворювань пов'язаних з диференціацією та розмноженням людини, які можуть бути охарактеризовані участю клітин, утворенням позаклітинного матриксу та в їхній етіології сигналу тирозинкінази Lck. вивільненням медіатора. Даний винахід стосується сполуки формули І: Застосовані вище й по всьому опису винаходу, нижчеподані терміни, якщо спеціально не вказано іншого, мають тлумачитись як такі, що мають нижчевказані значення. Визначення "Пацієнт" означає ссавця, включаючи людину. "Ефективна кількість" означає кількість сполуки згідно з даним винаходом, ефективну для інгібування активності PDGF-R тирозинкінази та/або активності Lck тирозинкінази, а отже, отримання де потрібного терапевтичного ефекту. R1a є за бажанням заміщеним алкілом, гідрок"Алкіл" означає групу аліфатичних вуглеводси, ацилокси, за бажанням заміщеним алкокси, за нів, яка може мати розгалужений або лінійний лабажанням заміщеним циклоалкілокси, за бажаннцюг і має від приблизно 1 до приблизно 10 атомів ням заміщеним оксагетероциклілокси, за бажанвуглецю. Оптимальним алкілом є "нижчий алкіл", ням заміщеним гетероциклілкарбонілокси або гаякий має від приблизно 1 до приблизно 3 атомів ло, вуглецю: перевагу віддають метилові. "РозгалужеR1b є воднем, за бажанням заміщеним алкіний" означає, що до лінійного алкільного ланцюга лом, гідрокси, ацилокси, за бажанням заміщеним приєднано одну або кілька груп нижчих алкілів, алкокси, за бажанням заміщеним циклоалкілокси, таких, як метил, етил або пропіл. Алкільна група за бажанням заміщеним оксагетероциклілокси, за також може бути за бажанням заміщеною алкокси, бажанням заміщеним гетероциклілкарбонілокси гало, карбокси, гідрокси або R5R6N- (де R5 та R6 або гало, незалежно один від одного є воднем або алкілом, R1c є воднем, за бажанням заміщеним алкіабо R5 та R6, взяті разом з атомом азоту, до якого лом, за бажанням заміщеним арилом, за бажанприєднано R5 та R6, утворюють азагетероцикліл); ням заміщеним гетероарилом, гідрокси, ацилокси, краще - за бажанням фторзаміщеною. Прикладаза бажанням заміщеним алкокси, за бажанням ми алкілу є метил, фторометил, дифторометил, заміщеним циклоалкілокси, за бажанням заміщетрифторометил, етил, н-пропіл, ізопропіл, бутил, ним гетероциклілокси, за бажанням заміщеним втор-бутил, трет-бутил, аміл та гексил. арилокси, за бажанням заміщеним гетероарилок"Циклоалкіл" означає неароматичну, моноцикси, за бажанням заміщеним гетероциклілкарбонілічну кільцеву систему від приблизно 3 до приблилокси, гало, ціано, R5R6N- або aцилR5N-; зно 7 атомів вуглецю. Оптимальними моноциклічними циклоалкільними кільцями є циклопентил, циклогексил та циклогептил, краще - циклогексил R2 є або та циклопентил. "Арил" означає ароматичний карбоциклічний радикал, який містить від приблизно 6 до приблизно 10 атомів вуглецю. Прикладами арилу є феніл або нафтил, або феніл або нафтил, заміщений одним або кількома замісниками арильних груп, які можуть бути однаковими або різними, причому "замісник арильної групи" включає водень гідрокR3 є воднем, або орто або парафторо, або меси, галоалкіл, алкокси, карбокси, алкоксикарбоніл та-нижчим алкілом, нижчим алклкси, гало або карабо Y1Y2NCO-, де Y1 та Y2 незалежно один від бамоїлом; одного є воднем або алкілом. R4 є воднем або нижчим алкілом; 13 74536 14 "Гетероарил" означає приблизно 5-10-членну "Ацилокси" означає ацил-О-групу, у якій ациароматичну моноциклічну або мультициклічну вугльна група є такою, як описано вище. леводневу кільцеву систему, у якій один або кілька "Карбокси" означає НО(О)С-(карбонова кислоатомів вуглецю у кільцевій системі не є вуглецем, та) групу а є, наприклад, азотом, киснем або сіркою. "Гете"R5R6N-" означає заміщену або незаміщену роарил" також може бути заміщений одним або аміногрупу, де R5 та R6 є такими, як описано вище. кількома з вищезгаданих "замісників арильних Приклади включають аміно (N2H-), метиламіно, груп". Прикладами гетероарильних груп є заміщені етилметиламіно, диметиламіно та діетиламіно. піразиніл, фураніл, тієніл, піридил, піримідиніл, "R5R6NCO-" означає заміщену або незаміщену ізоксазоліл, ізотіазоліл, оксазоліл, тіазоліл, піразокарбамоїльну групу, де R5 та R6 є такими, як опиліл, фуразаніл, піроліл, імідазо[2,1-b]тіазоліл, бенсано вище. Прикладами груп є карбамоїл (H2NCO) зофуразаніл, індоліл, азаіндоліл, бензімідазоліл, та диметиламінокарбамоїл (H2NCO). бензотієніл, хінолініл, імідазоліл та ізохінолініл. "AцилR5N-" означає ациламіногрупу, де R5 та "Гетероцикліл" означає приблизно 4-7-членну ацил є такими, як визначено у даному документі. моноциклічну кільцеву систему, де один або кілька "Гало" означає фтор, хлор, бром або йод. Опз атомів у кільцевій системі не є вуглецем, а є тимальним є фтор, хлор або бром, краще - фтор елементом, вибраним з-поміж азоту, кисню або або хлор. сірки. Указування аза- або окса- як префікса перед "Проліки" означає форму сполуки формули І, гетероциклілом означає присутність як атома кільпридатну для введення пацієнтові без небажаної ця принаймні атома азоту або кисню, відповідно. токсичності, подразнення, алергічної реакції та ін., Прикладами моноциклічних гетероциклілових груп і ефективну для призначеного застосування, є піперидил, піролідиніл, піперазиніл, морфолініл, включаючи форму кеталю, естеру та цвітер-іона. тіоморфолініл, тіазолідиніл, 1,3-діоксоланіл, 1,4Проліки перетворюються in vivo для одержання діоксаніл, тетрагідрофураніл, тетрагідротіофеніл, вихідної сполуки вищевказаної формули, напритетрагідротіопіраніл та ін. Прикладами гетероцикклад, шляхом гідролізу у крові. Докладне обговолілових компонентів є хінуклідиніл, пентаметиленрення представлено у роботах [Т. Higuchi and V. сульфід, тетрагідропіраніл, тетрагідротіофеніл, Stella. Pro-drugs as Novel Delivery Systems. Vol.14 піролідиніл, тетрагідрофураніл або 4of the A. C. S. Symposium Series, та Edward B. піперидинопіперидин. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, "Гетероциклілкарбонілокси" означає гетероциAmerican Phaimaceutical Асоціаці and Pergamon кліл-С(О)О-групу, де гетероцикліл є таким, як виPress, 1987], на обидві з яких нами робиться посизначено у даному документі. Прикладом гетероцилання. клілкарбонілоксигрупи є [1,4']-біпіперидин-1"Сольват" означає фізичну асоціацію сполуки ілкарбонілокси (4-піперидинопіперид-1даного винаходу з однією або кількома молекулаилкарбонілокси). ми розчинника. Ця фізична асоціація включає ва"Ацил" означає Η-CO- або алкіл-СО-групу, у ріювання ступеня іонного та ковалентного зв'язку, якій алкільна група є такою, як описано вище. Опвключаючи водневий зв'язок. У деяких прикладах тимальні ацили включають нижчий алкіл. Прикласольват є здатним до відокремлення, наприклад, ди ацильних груп включають форміл, ацетил, проколи одна або кілька молекул розчинника є вклюпаноїл, 2-метилпропаноїл, бутаноїл та капроїл. ченими у кристалічну решітку кристалічної твердої "Алкокси" означає алкіл-О-групу, у якій алкільречовини. Термін "сольват" включає сольвати як у на група є такою, як описано вище. Оптимальним фазі розчину, так і здатні до відокремлення сольалкокси є "нижчий алкокси", який має від приблизвати. Прикладами сольватів є етанолати, метаноно 1 до приблизно 3 атомів вуглецю, краще - метолати та ін. "Гідрат" є сольватом, у якому молекукси. Алкокси може бути за бажанням заміщеним лою(ами) розчинника є Н2О. одним або кількома алкокси, карбокси, алкоксикаОптимальною сполукою в аспекті винаходу є рбоніл, карбоксиарил або R5R6N- (де R5 та R6 є сполука формули І, де R1а є за бажанням заміщетакими, як визначено вище). Прикладами алкоксиним нижчим алкокси, за бажанням заміщеним могруп є метокси, етокси, н-пропокси, і-пропокси, нноциклічним циклоалкілокси, за бажанням заміщебутокси, гептокси, 2-(морфолін-4-іл)етокси та 2ним гетероциклілкарбонілокси або за бажанням (етокси)етокси. заміщеним моноциклічним оксагетероциклілокси; в "Циклоалкілокси" означає циклоалкіл-О-групу, оптимальному варіанті R1a є за бажанням заміщеу якій циклоалкільна група є такою, як описано ним нижчим алкокси або за бажанням заміщеним вище. Прикладами циклоалкілоксигруп є циклопемоноциклічним оксагетероциклілокси; у ще крантилокси або циклогексилокси. щому варіанті R1a є метокси, етокси, 2"Гетероциклілокси" означає гетероцикліл-О(етокси)етокси, 2-(4-морфолініл)етокси або фурагрупу, у якій гетероциклілова група є такою, як нілокси. описано вище. Прикладами гетероциклілоксигруп Іншою оптимальною сполукою в аспекті винає пентаметиленсульфідокси, тетрагідропіранілокходу є сполука формули І, де R1b є воднем, за баси, тетрагідротіофенілокси, піролідинілокси або жанням заміщеним нижчим алкокси, за бажанням тетрагідрофуранілокси. заміщеним моноциклічним циклоалкілокси, за ба"Арилокси" означає арил-О-групу, у якій арижанням заміщеним гетероциклілкарбонілокси або льна група є такою, як описано вище. за бажанням заміщеним моноциклічним оксагете"Гетероарилокси" означає гетероарил-О-групу, роциклілокси; в оптимальному варіанті R1b є воду якій гетероарильна група є такою, як описано нем або за бажанням заміщеним нижчим алкокси; вище. у ще кращому варіанті R1b є метокси або етокси. 15 74536 16 Іншою оптимальною сполукою в аспекті винадіетоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де R1a та R1b є нижчим 2-Бензиламіно-6,7-діетоксихіноксалін; алкокси, в оптимальному варіанті нижчий алкокси (6-Метоксихіноксалін-2-іл)-(3-метилфеніл)є метокси або етокси. амін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина6-Метокси-2-феніламіно-хіноксалін; ходу є сполука формули І, де R1с є воднем або за 2-Аніліно-6-етоксихіноксалін; бажанням заміщеним нижчим алкокси, в оптима2-(3-Метоксифеніламіно)-6,7льному варіанті R1с є воднем, метокси або етокси. діетоксихіноксалін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина2-(4-Фторофеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де R2 є 6,7-Діетокси-2-феноксихіноксалін; 2-Феніламіно-6,7-діетоксихіноксалін; (6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-(3-фторофеніл)амін; 2-(3-Фторофеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; (3-Бромофеніл)-(6,7-Диметоксихіноксалін-2іл)-амін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина(6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-феніл-амін; і ходу є сполука формули І, де R2 є 3-Хлорофеніл)-(6-7-диметоксихіноксалін-2-іл)амін; Найкращими є такі сполуки: Феніл-[6-(тетрагідрофуран-3(R)ілокси)хіноксалін-2-іл]амін; Бензил-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-амін; 2-((S)- -Метилбензил-аміно)-6,7Іншою оптимальною сполукою в аспекті винадіетоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де R3 є воднем, орто 2-Бензиламіно-6,7-діетоксихіноксалін; або парафторо, або метаметилом, трифторомети(6-Метоксихіноксалін-2-іл)-(3-метилфеніл)лом, метокси, фторо, хлоро, бромо або карбамоїамін; лом. 6-Метокси-2-феніламіно-хіноксалін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина2-Аніліно-6-етоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де R4 є воднем або ме2-(3-Метоксифеніламіно)-6-7тилом; діетоксихіноксалін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина2-(4-Фторофеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де Za є N. 6,7-Діетокси-2-феноксихіноксалін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина2-Феніламіно-6,7-діетоксихіноксалін; ходу є сполука формули І, де Za є СН. (6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-(3-фторофеніл)Іншою оптимальною сполукою в аспекті винаамін; ходу є сполука формули І, де Zb є NH. 2-(3-Фторофеніламіно)-6,7-діетоксихіноксалін; Іншою оптимальною сполукою в аспекті вина(3-Бромофеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)ходу є сполука формули І, де Zb є О. амін; Оптимальні сполуки згідно з винаходом виби(6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-феніл-амін; і рають з таких сполук: (3-Хлорофеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)2-аніліно-6-хіноксалінол; амін. 2-((R)- -Метилбензил-аміно)-6,7Слід розуміти, що даний винахід охоплює всі діетоксихіноксалін; прийнятні комбінації згаданих нами конкретних і 2-аніліно-6-ізопропоксихіноксалін; оптимальних груп. 2-Фенокси-6-метоксихіноксалін; Сполуки даного винаходу можуть бути одер(3-Бромобензил)-(6,7-диметоксихіноксалін-2жані з застосуванням процедур, відомих з літераіл)-амін; тури, виходячи з відомих сполук або готових про2-(3-Карбамоїлфеніламіно)-6міжних сполук. Нижче подано приклади загальних метоксихіноксалін; процедур. 2-(2-Фторофеніламіно)-6-7-діетоксихіноксалін; Крім того, сполуки формули І одержують згідно 2-(3-Трифторометилфеніламіно)-6,7з представленими нижче Схемами I-VI, де змінні є діетоксихіноксалін; такими, як описано вище, за винятком змінних, які Феніл-[6-(тетрагідрофуран-3(R)спеціаліст вважатиме такими, що не відповідають ілокси)хіноксалін-2-іл]амін; описаному способові. Бензил-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-амін; 2-((S)- -Метилбензил-аміно)-6,7 17 74536 18 19 74536 20 21 де R1a, R1b або R1c, які відповідають вищевказаним нижчим алкокси, є ацилокси, за бажанням заміщеним алкокси, за бажанням заміщеним цик 74536 22 лоалкілокси, за бажанням заміщеним оксагетероциклілокси або за бажанням заміщеним гетероциклілкарбонілокси. 23 І. Загальні процедури: 1. Реакція 2-хлоро-заміщеного хіноксаліну та амінів або анілінів. Суміш 2-хлоро-6,7-диметоксихіноксаліну (1екв.) та аміну (від приблизно 1 до приблизно 5екв.) нагрівають до температури від приблизно 160 до приблизно 180°С і тримають від приблизно трьох годин до цілої ночі. Залишок темнокоричневого кольору розчиняють у метанолі/метиленхлориді (0%-10%) і піддають хроматографії на силікагелі з елююванням гексаном/етилацетатом або метанолом/метиленхлоридом (0%-100%) для одержання потрібного продукту. Потрібний продукт далі очищають через рекристалізацію у метанолі, метиленхлориді або метанолі/воді. 2. Реакція 2-хлоро-заміщеного хіноксаліну та спиртів або фенолів. Суспензію спирту або меркаптан (1екв.) та гідриду натрію (приблизно від 1 до приблизно 3екв.) у безводному DMF/THF (0%-50%) нагріва 74536 24 ють зі зворотним охолодженням протягом 1 години перед додаванням 2-хлоро-6,7диметоксихіноксаліну (1екв.). Одержану в результаті суміш нагрівають зі зворотним охолодженням приблизно від однієї до чотирьох годин. Суспензію нейтралізують до приблизно pH 5-8 і розподіляють між метиленхлоридом та соляним розчином. Залишок після концентрування метиленхлориду піддають хроматографії на силікагелі з елююванням гексаном/етилацетатом або метанол/метиленхлоридом (0%-100%) для одержання потрібного продукту. 3. Відновна реакція амінування з амінохінолінами та альдегідами або кетонами. Відповідним чином заміщений 3-амінохінолін (1екв.) перемішують з 1екв. відповідного альдегіду або кетону у метанолі (або іншій підходящій суміші розчинників), доки TLC не показуватиме завершення утворення іміну. Додають надлишкову кількість NaCNBH4 або NaBH4 або іншого підходящого відновника й суміш перемішують, доки 25 74536 26 TLC не показуватиме витрату проміжного іміну. вищеній температурі. Суміш концентрують і залишок піддають хромаСполуки даного винаходу застосовують у тографії на силікагелі з гексаном/етилацетатом формі вільної основи або кислоти, або у формі її (0-100%) або хлороформом/метанолом (0-20%) фармацевтично прийнятної солі. Усі форми входля одержання потрібного продукту. дять в об'єм винаходу. 4. Реакція 3-аміно-заміщених хінолінів та Якщо сполуку згідно з даним винаходом засполук бромофенілу. міщено основним компонентом, утворюються Відповідним чином заміщений 3-аміно хінолін кислі адитивні солі, які просто є більш зручною (1екв.) перемішують з ~1,4екв. сильної основи, формою для застосування; а на практиці застотакої, як трет-бутоксид натрію, 1екв. відповідної сування у формі солі по суті є рівнозначним засполуки бромофенілу та каталітичної кількості стосуванню у формі вільної основи. До оптима2,2'-біс(дифенілфосфіно)-1-1'-бінафтилу (Sльних кислот, які застосовують для одержання BINAP) і біс(дибензиліденацетон)-паладію кислих адитивних солей, належать кислоти, які (Pd(dba)2), змішують в інертному органічному при поєднанні з вільною основою утворюють фарозчиннику, такому, як толуол, в інертній атмосрмацевтично прийнятні солі, тобто, солі, аніони фері, такій, як аргон, і нагрівають до приблизно яких є нетоксичними для пацієнта у фармацевти80°С до наступного дня. Суміш охолоджують, чних дозах солей, щоб сприятливому інгібіторнорозводять розчинником, таким, як етер, фільтруму впливові на PDGF, характерному для вільної ють, концентрують і піддають хроматографії з основи, не шкодили побічні ефекти, які припису50% ЕtOАс/гексаном для одержання потрібного ють аніонам. Хоча оптимальними є фармацевтипродукту. чно прийнятні солі вищезгаданих основних спо5. Утворення етеру з 3-гідрокси-заміщених хілук, усі кислі адитивні солі можуть нолінів в умовах Міцунобу. застосовуватись як джерела форми вільної осноРозчин у THF відповідним чином заміщеного ви, навіть якщо сама по собі конкретна сіль є погідроксихіноксаліну (при приблизно від 0 до 25°С) трібною лише як проміжний продукт, наприклад, обробляють 1екв. потрібного спирту, 1екв. триколи сіль утворюють лише з метою очищення та фенілфосфіну і, нарешті, 1екв. діетилазодикарідентифікації, або коли її застосовують як промібоксилату (DEAD) або відповідним еквівалентом. жну сполуку при одержанні фармацевтично приЗа ходом реакції спостерігають через TLC і по йнятної солі шляхом іонообмінних процедур. Фазавершенню реакції (приблизно від 1 до 24 годин) рмацевтично прийнятними солями, які входять в суміш концентрують і залишок піддають хроматооб'єм винаходу, є солі, які походять від таких киграфії на силікагелі для одержання потрібного слот: з мінеральних кислот - хлороводнева киспродукту. лота, сірчана кислота, фосфорна кислота та су6. Деалкілування заміщеного нижчим алкокси льфамінова кислота; з органічних кислот - оцтова хіноліну або хіноксаліну з наступним алкілуванкислота, лимонна кислота, молочна кислота, ням. винна кислота, малонова кислота, метансульфоЗаміщений відповідним нижчим алкокси хінонова кислота, етансульфонова кислота, бензоллін або хіноксалін (1екв.) у DMF обробляють надсульфонова кислота, п-толуолсульфонова кислолишковою кількістю етантіолату натрію (як прата, циклогексилсульфамінова кислота, хінна вило, приблизно 2 або більше екв.) і реакційну кислота та ін. До відповідних кислих адитивних суміш перемішують при нагріванні приблизно від солей належать такі: гідрогаліди, наприклад, гід1 до 24 годин. Суміш розподіляють між водою та рохлорид та гідробромід, сульфат, фосфат, нітетилацетатом. Екстрагування з наступною хрорат, сульфамат, ацетат, цитрат, лактат, тартрат, матографією, якщо необхідно, забезпечує відпомалонат, оксалат, саліцилат, пропіонат, сукцинат, відний гідроксизаміщений хінолін або хіноксалін. фумарат, малеат, метилен-біс-пГідроксизаміщений хінолін або хіноксалін алгідроксинафтоати, гентизати, мезилати, ізетіонакілують, застосовуючи умови для реакції Міцуноти та ди-п-толуоїлтартратметансульфонат, етанбу, докладно описані вище. В альтернативному сульфонат, бензолсульфонат, пваріанті просте алкілування з застосуванням спотолуолсульфонат, циклогексилсульфамат та хісобів, добре відомих спеціалістам, з реактивним нат, відповідно. алкіл- або бензилгалідом з застосуванням NaH Згідно з іншою особливістю винаходу, кислі або іншої відповідної основи у підходящому розадитивні солі сполук даного винаходу одержують чиннику забезпечує потрібний алкілований прошляхом реакції вільної основи з відповідною кисдукт. лотою, з застосуванням або пристосуванням ві7. Окиснення азоту у хіноліні або хіноксаліні домих способів. Наприклад, кислі адитивні солі до відповідного N-оксиду. сполук даного винаходу одержують або шляхом Імінний (=N-) компонент у сполуках хіноліну розчинення вільної основи у водному або водноабо хіноксаліну формули (І) перетворюють на спиртовому розчині або інших підходящих розвідповідну сполуку, у якій імінний компонент окичинниках, що містять відповідну кислоту, та видіснюють до N-оксиду, в оптимальному варіанті лення солі шляхом упарювання розчину, або шляхом реакції з перкислотою, наприклад пероцшляхом реакції вільної основи та кислоти в оргатовою кислотою в оцтовій кислоті або мнічному розчиннику, і у цьому разі сіль відокремхлорпероксибензойною кислотою в інертному люють безпосередньо або одержують шляхом розчиннику, такому, як дихлорметан, при темпеконцентрації розчину. ратурі приблизно від кімнатної до температури Сполуки даного винаходу регенерують з кисдефлегмації, в оптимальному варіанті - при підлих адитивних солей з застосуванням або прис 27 74536 28 тосуванням відомих способів. Наприклад, вихідні продуктами та/або вихідними матеріалами, спосполуки винаходу регенерують з їхніх кислих собами, добре відомими спеціалістам. адитивних солей шляхом обробки лугом, наприСполуки згідно з даним винаходом можуть клад, водним розчином бікарбонату натрію або містити асиметричні центри. Ці асиметричні водним розчином аміаку. центри незалежно можуть мати R або S конфігуЯкщо сполуку винаходу заміщено кислотним рацію. Спеціалістові стане зрозуміло, що певні компонентом, можуть утворюватися основні адисполуки формули І можуть виявляти геометричну тивні солі, які просто є більш зручною формою ізомерію. Геометричні ізомери включають цис- та для застосування; а на практиці застосування у транс-форми сполук винаходу, тобто, сполук, що формі солей є рівноцінним застосуванню у формі мають алкенільні компоненти або замісники на вільних кислот. До оптимальних основ, які застокільцевих системах. Крім того, біцикло-кільцеві совують для одержання основних адитивних сосистеми включають ендо- та екзо-ізомери. Даний лей, належать основи, які утворюють, у поєднанні винахід охоплює окремі геометричні ізомери, з вільною кислотою, фармацевтично прийнятні стереоізомери, енантіомери та їх суміші. солі, тобто, солі, катіони яких є нетоксичними для Такі ізомери відокремлюють від їх сумішей з організму тварини у фармацевтичних дозах созастосуванням або пристосуванням відомих сполей, щоб сприятливому інгібіторному впливові на собів, наприклад, способів хроматографії та споPDGF, характерному для вільної кислоти, не собів рекристалізації, або окремо одержують з шкодили побічні ефекти, які приписують катіонам. відповідних ізомерів їх проміжних сполук, наприФармацевтично прийнятними солями, які вклюклад, з застосуванням або пристосуванням опичають, наприклад солі лужних та лужноземельсаних нами способів. них металів, у межах винаходу є солі, які похоВихідні матеріали та проміжні сполуки одердять від таких основ: гідриду натрію, жують з застосуванням або пристосуванням вігідрохлориду натрію, гідроксиду калію, гідроксиду домих способів, наприклад способів, описаних у кальцію, гідроксиду алюмінію, гідроксиду літію, Прикладах для посилання, або їх очевидних хімігідроксиду магнію, гідроксиду цинку, аміаку, тричних еквівалентів, або описаних нами способів метиламіаку, триетиламіаку, етилендіаміну, нзгідно з винаходом. метил-глюкаміну, лізину, аргініну, орнітину, холіДаний винахід далі пояснюється, але не обну, Ν,Ν'-дибензилетилендіаміну, хлоропрокаїну, межується нижчеподаними прикладами, які опидіетаноламіну, прокаїну, н-бензилфенетиламіну, сують одержання сполуки згідно з винаходом. діетиламіну, піперазину, трис(гідроксиметил)Крім того, нижчеподані приклади представамінометану, гідроксиду тетраметиламонію та ін. ляють способи, застовані для синтезу сполук Металічні солі сполук згідно з даним винаходаного винаходу. дом одержують шляхом контакту гідриду, гідрокПриклад 1 2-(3-Фторофеніламіно)-6,7сиду, карбонату або подібної реактивної сполуки діетоксихіноксалін вибраного металу у водному або органічному До 0,25г (0,989ммоль) 2-хлоро-6,7розчиннику з вільною кислотною формою сполудіетоксихіноксаліну додають 2мл mки. Застосованим водним розчинником може бути фmороаніліну. Цю суміш нагрівають в атмосфері вода або суміш води з органічним розчинником, в азоту протягом ночі до 120°С. Одержану в реоптимальному варіанті - спиртом, таким, як метазультаті суміш піддають хроматографії (30:1 нол або етанол, кетоном, таким, як ацетон, аліСН2СІ2: EtOH) для одержання частково очищенофатичним етером, таким, як тетрагідрофуран, го продукту. Цю тверду речовину порошкують з або естером, таким, як етилацетат. Такі реакції етилацетатом для одержання 0,175г продукту у зазвичай здійснюють при температурі навколишвигляді твердої буро-жовтої речовини у вихідній нього середовища, але, якщо потрібно, здійснюкількості 54,1% (т. пл. 193°С). Анал. розрах. для ють і при нагріванні. C18H18N3O2F·0,25 Н2О: С, 65,15; Н, 5,62; N, 12,66 Амінні солі сполук згідно з даним винаходом Виявл.: С,65,30; Н, 5,30; N, 12,41. одержують шляхом контакту аміну у водному або Приклад 2 2-Аніліно-6-метокси-хіноксаліну гіорганічному розчиннику з вільною кислотною дрохлорид формою сполуки. Підходящими водними розчинДо 2-хлоро-6-метокси-хіноксаліну (0,93г, никами є вода та суміші води зі спиртами, таки4,8ммоль) в атмосфері аргону додають анілін ми, як метанол або етанол, етерами, такими, як (1,3мл, 14,3ммоль). Реакційну суміш нагрівають тетрагідрофуран, нітрилами, такими, як ацетонепри 120°С протягом 2 годин, а потім при 150°С трил, або кетонами, такими, як ацетон. Подібним протягом 5 годин. Суміш охолоджують і додають чином одержують солі амінокислот. СН2СІ2. Одержану в результаті суспензію переСполуки даного винаходу регенерують з осмішують і оранжеву тверду речовину відфільтроновних адитивних солей з застосуванням або вують, промивають CH2CI2/Et2О, потім інтенсивно пристосуванням відомих способів. Наприклад, перемішують в Н2О протягом 40 хвилин, фільтвихідні сполуки винаходу регенерують з їх основрують і промивають Et2O для одержання яскравоних адитивних солей шляхом обробки кислотою, жовтої твердої речовини. наприклад, хлороводневою кислотою. Вказані нижче сполуки одержують подібним Крім того, що вони можуть застосовуватися чином з відповідного вихідного матеріалу. самі по собі як активні сполуки, солі сполук вина2-(3-Карбамоїлфеніламіно)-6ходу застосовують з метою очищення сполук, метоксихіноксалін, т. пл. 247°С, Анал. розрах. наприклад, користуючись різницею розчинності для C16H14N4O2O·0,25 Н2О: С, 64,31; Н, 4,89; N, між солями та вихідними сполуками, побічними 18,75. Виявл.: С, 64,24; Н, 5,04; N, 18,75; 29 74536 30 2-(2-Фторофеніламіно)-6,7(3-Бромобензил)-(6,7-диметоксихіноксалін-2діетоксихіноксалін, т. пл. 184°С. Анал. розрах. іл)-амін, т. пл. 199-206°С, Анал. розрах. для для C18H18FN3O2: С, 66,04; Η, 5,54; F, 5,80; Ν, C17H16BrN3O2: С, 54,56; Η, 4,31; Br, 21,35; Ν, 12,84. Виявл.: С, 65,75; Η, 5,61; Ν, 12,68; 11,23. Виявл.: С, 49,90; Η, 4,00; Ν, 10,14. 2-(3-Тгіфторометилфеніламіно)-6,7Бензил-(6,7-диметоксихіноксалін-2-іл)-амін, т. діетоксихіноксалін, т. пл. 158°С, Анал. розрах. пл. 210-214°С, Анал. розрах. для C17H17N3O2: С, для C19H18F3N3O2: С, 60,47; Η, 4,81; F, 15,10; Ν, 69,14; Η, 5,80; Ν, 14,23. Виявл.: С, 61,78; Η, 5,47; 11,14. Виявл.: С, 60,27; Η, 4,84; Ν, 10,97; Ν, 12,64; і (6-Метоксихіноксалін-2-іл)-(3-метилфеніл)2-Бензиламіно-6,7-діетоксихіноксалін, т. пл. амін, т. пл. 133-135°С. Анал. розрах. для 136°С, Анал. розрох. для C19H21N3O2: С, 70,57; Η, C16H13N3O: С, 72,43; Η, 5,70; Ν, 15,84. Виявл.: С, 6,55; Ν, 12,99. Виявл.: С, 70,54; Η, 6,66; Ν, 12,80. 72,43; Η, 5,79; Ν, 15,77; Приклад 4 2-((R)- -Метилбензиламіно-6,76-Метокси-2-феніламіно-хіноксалін, т. пл. діетоксихіноксалін 152-153°С. Анал. розрах. для C15H13N3O: С, До 0,3г (1,19ммоль) 2-хлоро-6,771,70; Н, 5,21; N, 16,72. Виявл.: С, 71,70; Н, 5,16; діетоксихіноксаліну додають 2мл (R)-(+)- N, 16,80; метилбензиламіну. Цю суміш нагрівають протя2-Аніліно-6-етоксихіноксалін, т. пл. 118гом трьох днів в атмосфері азоту до 120°С. Оде120°С. Анал. розрах. для C16H15N3O·0,63 Н2О: С, ржану в результаті суміш розподіляють між СНСІ3 69,48; Н, 5,92; N, 15,19. Виявл.: С, 69,24; Н, 5,97; та насиченим розчином NaHCO3. Органічний шар N, 15,14; концентрують і залишок піддають хроматографії 2-(3-Метоксифеніламіно)-6,7(30:1 СН2СІ2: EtOH) для одержання 0,118г продудіетоксихіноксалін, т. пл. 173°С, Анал. розрах. кту у вигляді твердої речовини жовтого кольору у для C19H21N3O3: С, 67,24; Н, 6,24; N, 12,8. Виявл.: вихідній кількості 29,4% (т. пл. 53-56°С). Анал. С, 67,02; Н, 6,23; N, 12,21. розрах. для C20H23N3O2·0,25 Н2О: С, 70,26; Н, 2-(4-Фторофеніламіно)-6,76,93; N, 12,29. Виявл.: С, 70, 56; Н, 6,80; N, 12,35. діетоксихіноксалін, т. пл. 242°С, Анал. розрах. Вказані нижче сполуки одержують подібним для C18H18FN3O2·0,50 Н2О: С, 64,27; Н, 5,69; N, чином з відповідних вихідних матеріалів. 12,49. Виявл.: С , 64,21; Н, 5,39; N, 12,24; 2-((S)- -Метилбензил-аміно)-6,72-Феніламіно-6,7-діетоксихіноксалін, т. пл. діетоксихіноксалін, т. пл. 55-58°С. Анал. розрах. 239°С; для C20H23N3O2·0,25 Н2О: С, 70,26; Н, 6,93; N, (6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-(312,29. Виявл.: С, 70,49; Н, 6,89; N, 12,23. фторофеніл)-амін, т. пл. 99-100°С, Анал. розрах. Приклад 5 2,7-Біс-циклогексилокси-6для C16H14FN3O2: С, 64,21; Н, 4,71; F, 6,35; N, метокси-хіноксалін 14,04. Виявл.: С, 64,35; Н, 4,61; N, 13,84; До розчину у DMF (5мл ) NaH (0,32г, 8ммоль) 2-(3-Фторофеніламіно)-6,7в атмосфері аргону по краплях додають циклогедіетоксихіноксалін, т. пл. 193°С. Анал. розрах. ксанол (0,7мл, 6,7ммоль). Суміш перемішують для C18H18FN3O2·0,25 Н2О: С, 65,15; Н, 5,62; N, при кімнатній температурі протягом 25 хвилин, 12,66 Виявл.: С, 65,30; Н, 5,30; N, 12, 41; потім порціями додають 2-хлоро-6,7(3-Бромофеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2диметоксихіноксалін. Реакційну суміш перемішуіл)-амін, т. пл. 197-198°С, Анал. розрах. для ють протягом 15 хвилин при кімнатній температуС16Н14ВrN3O2: С, 53,35; Н, 3,92; Вr, 22,18; Ν, рі, при 90°С протягом 2 годин і при 110°С протя11,67. Виявл.: С, 53,39, Н, 3,82; N,11,64; гом 1 години. Суміш охолоджують, додатково (6,7-Диметоксихіноксалін-2-іл)-феніл-амін, т. охолоджують Н2О і розподіляють між ЕtOАс/Н2О. пл. 88-90°С, Анал. розрах. для C16H15N3O2: С, Органічний шар промивають Н2О та соляним ро68,31; Н, 5,37; N, 14,94. Виявл.: С, 68,02; Н, 5,52; зчином, висушують (MgSO4) і піддають хроматогN, 14,91; і рафії (10% ЕtOАс/гексани) для одержання воско(3-Хлорофеніл)-(6,7-диметоксихіноксалін-2подібної твердої речовини білого кольору (т. пл. іл)-амін, т. пл. 187-188°С. Анал. розрах. для 75-78°С) Анал. розрах. для C21H28N2O3: С, 70,76; C18H14CIN3O2: С, 60,86; Η, 4,47; СІ, 11,23; Ν, Н, 7,92; N, 7,86; Виявл.: С, 70,81; Н, 7,79; N, 7,70. 13,31. Виявл.: С, 60,85; Η, 4,59; Ν, 13,26. Вказані нижче сполуки одержують подібним Приклад 3 2-Бензиламіно-6,7чином з відповідних вихідних матеріалів. діетоксихіноксалін 2-Фенокси-6-метоксихіноксалін, т. пл. 79До 0,3г (1,19ммоль) 2-хлоро-6,781°С; і діетоксихіноксаліну додають 2мл бензиламіну. 6,7-Діетокси-2-феноксихіноксалін, т. пл. 130Цю суміш нагрівають в атмосфері азоту протягом 131°С, Анал. рохрах. для C18H18N2O3: С, 69,66; Η, ночі до 120°С. Одержану в результаті суміш роз5,85; Ν, 9,03. Виявл.: С, 69,53; Η, 5,82; Ν, 8,91. поділяють між СН2СІ2 та насиченим розчином Приклад 6 Циклогексил-(6,7NaHCO3. Органічний шар концентрують і залишок диметоксихіноксалін-2-ілметил)-амін піддають хроматографії (30:1 СН2СІ2; EtOH) для До 0,067Μ розчину 6,7-диметокси-2одержання 0,337г продукту у вигляді твердої рехіноксалінкарбоксальдегіду у 2:1 МеОН/1,2човини жовтого кольору у вихідній кількості 87,6% дихлоретані (7,5мл, 0,5ммоль) додають циклоге(т. пл. 136°С) Анал. розрах. для C19H21N3O2: С, ксиламін (0,11мл, 0,9ммоль). Реакційну суміш 70,57; Η, 6,54; Ν, 12,99. Виявл.: С, 70,54; Η, 6,66; залишають перемішуватися при кімнатній темпеΝ, 12,80. ратурі протягом ночі, потім додають NaBH4 Вказані нижче сполуки одержують подібним (0,038г, 1ммоль) і реакційну суміш перемішують чином з відповідних вихідних матеріалів. протягом ночі. Суміш після цього концентрують і 31 74536 32 піддають хроматографії (50% ЕtOАс/гексанів Приклад 10 Феніл-[6-(тетрагідрофуран-3-(R)приблизно 5% МеОН у 50% ЕtOАс/гексанів). Олію іл-окси)хіноксалін-2-іл]амін розчиняють в EtOAc/гексанах і обробляють НСІ в До розчину THF при 0°С в атмосфері аргону EtOH. Одержаний в результаті розчин концентдодають 2-аніліно-6-хіноксалінол (0,23г, рують і тверді речовини порошкують з ізопропа0,97ммоль), (S)-(+)-3-гідрокситетрагідрофуран нолом для одержання твердої речовини білого (0,086мл, 1,3ммоль) та трифенілфосфін (0,31г, кольору після висушування in vacuo при 60°С (т. 1,2ммоль). Порціями додають DEAD (0,18мл, пл. 185-190°С, dec). Анал. розрах. для 1,2ммоль). Реакційній суміші дають нагрітися до C17H23N3O2HCI: С, 60,44; Н, 7,16; N, 12,44; Виявл.: кімнатної температури й перемішують протягом С, 60,48; Н, 6,88; N, 12,07. 1,5 години. Суміш концентрують і розподіляють Приклад 7 Циклогексил-(6-метокси 7між EtOAc та Н2О. Органічний шар промивають морфолін-4-іл-хіноксалін-2-іл)-амін Н2О, соляним розчином, висушують (MgSO4) і В основі одержання цієї сполуки лежить приконцентрують. Одержану в результаті олію жовстосування способу, описаного у роботі того кольору піддають хроматографії (50% [Buchwald, et aI, J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, ЕtOАс/гексани) і захоплюють в EtXVlPA (ізопро7215]. До розчину у толуолі 2-циклогексиламінопанол). По краплях додають розчин HCI/Et2O і 6-метокси-7-бромо-хіноксаліну (0,1г, 0,3ммоль) в одержаний в результаті порошок червоноатмосфері аргону додають морфолін (0,1г, оранжевого кольору висушують in vacuo. Поро0,3ммоль) трет-бутоксид натрію (0,04г, шок перемішують у МеОН з промитою (3Х H2O, 0,42ммоль), S-(-)-BINAP (кат., 0,001г) та Pd(dba)2 5Х МеОН) основною іонообмінною смолою. Су(кат., 0,001г). Реакційну суміш нагрівають до 80°С міш перемішують протягом 30 хвилин, фільтрупротягом ночі. Суміш охолоджують, розводять ють, концентрують і рекристалізують з Et2O, фільтрують, концентрують і піддають хроЕtOАс/гексанів для одержання двома порціями матографії (50% ЕtOАс/гексани). Продукт рекриспродукту (т. пл. 173-175°С). Анал. розрах. для талізують з ЕtOАс/гексанів двома порціями для C18H17N3O2: С, 70,35; Η, 5,57; Ν, 13,67; Виявл.: С, одержання твердої речовини жовтого кольору (т. 70,19; Η, 5,60; Ν 13,66. пл. 194-196°С) Анал. розрах. для C19H26N4O2: С, Приклад 11 2-Аніліно-6-ізопропокси66,64; Н, 7,65; N, 16,36; Виявл.: С, 66,60; Н, 7,60; хіноксалінгідрохлорид N, 16,51. До NaH (0,033г, 0,84ммоль) в атмосфері арПриклад 8 3-Циклогексилокси-6,7гону додають 1мл DMF. Порціями додають 2диметоксихінолін аніліно-6-хіноксалінол (0,1г, 0,42ммоль) у 15мл До розчину THF (30мл) при 0°С додають 3DMF. Через 30 хвилин по краплях додають 2гідрокси-6,7-диметоксихінолін (0,237г, бромопропан і розчин нагрівають до 50°С протя1,15ммоль), циклогексанол (0,347г, 3,46ммоль), гом 1,5 години. Охолоджену реакційну суміш доPh3P (0,908г, 3,46ммоль). Порціями додають діедатково охолоджують водою й розподіляють між тилазодикарбоксилат, доки розчин не стане збеЕtOАс та Н2О, промивають Н2О (3Х), соляним рігати темно-червоний колір (0,663г, 3,81ммоль). розчином, висушують (MgSO4) і концентрують. Через 4 години розчин концентрують і залишок Одержаний в результаті залишок піддають хропіддають хроматографії (50% EtOAc у гексанах). матографії (30% ЕtOАс/гексани) для одержання Продукт рекристалізують з ізопропанолу/гексанів 0,05г діалкілованого продукту та 0,1г названої як сіль НСІ у вигляді твердої речовини білого сполуки. Аналітичний зразок солі НСІ одержують кольору (т. пл. 229-232°С). шляхом додавання ІРА/НСІ до розчину в Et2O/IPA Приклад 9 2-Аніліно-6-хіноксалінол вільної основи для одержання солі НСІ (т. пл. Способом, описаним у роботі [Feutrill, G. I., 205-210°С dec.) Анал. розрах. для C17H17N3O2HCI: Mirrington, R. N. Tel Lett. 1970, 1327], арилметиC, 64,65; Н, 5,74; N, 13,31; Виявл.: С, 64,51; Н, ловий етер перетворюють на похідну фенолу. До 5,90; N, 13,09. 2-аніліно-6-метокси-хіноксаліну (0,27г 1,07ммоль) Приклад 12 3-Циклогексилокси-6,7в атмосфері аргону у DMF додають натрієву сіль диметоксихіноксалін 1-оксид етантіолу (0,19г, 2ммоль). Реакційну суміш нагріСуміш 2 циклогексилокси-6,7вають до 110°С протягом ночі. Суміш концентрудиметоксихіноксаліну (110мг, 0,38ммоль) та меють і розподіляють між ЕtOАс та НгО/5% винною та-хлоробензойної перкслоти (70%, 113мг, кислотою таким чином, щоб рівень pH водного 0,46ммоль) у 10мл метиленхлориду перемішують шару становив приблизно 4. Органічний шар при кімнатній температурі протягом доби. Розчин промивають Н2О (4Х), потім 2,5% NaOH (4X). після фільтрації концентрують і залишок піддаОсновні шари об'єднують, промивають ЕtOАс ють хроматографії на силікагелі (20% етилаце(2Х), підкисляють 5% винною кислотою і промитат/нексан) для одержання потрібного продукту вають кількома порціями ЕtOАс. Органічні шари (т. пл. 167-169°С). Подібним чином одержують об'єднують, промивають соляним розчином, витранс-4-(6,7-Диметокси-4-окси-хіноксалін-2сушують (Na2SO4) і концентрують. Одержану в іламіно)-циклогексанол (т. пл. 220-222°С). Анал. результаті тверду речовину піддають хроматогрозрах. для C16H21N3O4·0,2 Н2О: С, 59-42; Н, 6,69; рафії (50% ЕtOАс/гексани). Аналітичний зразок N, 12,99. Виявл.: С, 59,43; Н, 6,64; N, 12,95. одержують шляхом порошкування продукту з Проміжний приклад 1 4-Бромо-5-метоксиEt2O для одержання порошку жовтого кольору (т. бензол-1,2-діаміндигідрохлорид пл. 211-213°С) Анал. розрах. для C14H11N3O: С, До розчину ЕtOАс (50мл) та 5-бромо-470,88; Н, 4,67; N, 17,71; Виявл.: С, 70,64; Н, 4,85; метокси-2-нітро-феніламіну (2,5г, 10ммоль) в N, 17,58. атмосфері аргону додають 5% Pd/C (0,5г). Реак 33 74536 34 ційну суміш гідрогенізують при 50 фунтах на ква20 хвилин, а потім порціями додають розчин 45% дратний дюйм протягом 1 години. Суміш фільтетилгліоксалату в толуолі (2,1г, 9,3ммоль). Реакрують крізь целіт у розчин HCI/IPA/EtOAc і проційну суміш нагрівають до кімнатної температури, кладку промивають додатковим ЕtOАс. нагрівають зі зворотним охолодженням протягом Одержаний в результаті осад відфільтровують 1,5 години, потім охолоджують, додають воду, для одержання твердої речовини білого кольору. потім суспензію фільтрують і послідовно промиПроміжний приклад 2 7-Бромо-6-метоксивають Н2О, ІРА та Et2O для одержання порошку хіноксалін-2-ол та 6-Бромо-7-метокси-хіноксалінсвітло-жовтого кольору. Продукт кілька разів під2-ол дають азеотропній обробці толуолом і перед заДо розчину МеОН (15мл) в атмосфері аргону стосуванням висушують in vacuo. додають розтерті у порошок гранули NaOH (0,86г, Проміжний приклад 7 2,7-Дихлоро-б-метокси21ммоль) та 4-бромо-5-метокси-бензол-1,2хіноксалін та 2,6-дихлоро-7-метокси-хіноксалін діаміну дигідроксихлорид (2,7г, 9,3ммоль). Суміш До суміші 7-хлоро-6-метокси-хіноксалін-2-олу перемішують протягом 10 хвилин, потім порціями та 6-хлоро-7-метокси-хіноксалін-2-олу (1г, додають розчин 45% етилгліоксилату у толуолі 4,7ммоль) під СаСІ2 осушувальним патроном (2,7г, 12ммоль). Реакційну суміш нагрівають зі додають РОСІ3 (5мл). Реакційну суміш нагрівазворотним охолодженням протягом 1 години, ють зі зворотним охолодженням 30 хвилин, вилипотім охолоджують. Додають воду, потім суспенвають у холодний насичений розчин NaHCO3, зію фільтрують. Одержану в результаті тверду фільтрують, потім промивають водою для одерречовину послідовно промивають Н2О, МеОН, жання твердої речовини. Визначене шляхом 1Н ІРА та Et2O для одержання порошку жовтого коЯМР співвідношення 2,7-дихлоро-6-метоксильору. хіноксаліну : 2,6-дихлоро-7-метокси-хіноксаліну Проміжний приклад 3 7-Бромо-2-хлоро-6становить приблизно 6:1. метокси-хіноксалін та 6-Бромо-2-хлоро-7Сполуки формули І, описані у даному докуметокси-хіноксалін менті, інгібують інгібування розмноження клітин До суміші 7-бромо-6-метокси-хіноксалін-2-олу та/або утворення клітинного матриксу та/або рух та 6-бромо-7-метокси-хіноксалін-2-олу (1г, клітин (хемотаксис) через інгібування активності 3,9ммоль) додають РОСI3 (5мл). Реакційну суміш PDGF-R тирозинкінази. Велика кількість захвонагрівають зі зворотним охолодженням протягом рювань спричинюється або неконтрольованим 1 години, виливають у льодяну воду, фільтрують, відтворенням клітин або надмірним утворенням а потім промивають водою для одержання тверматриксу, або погано регульованою запрограмодої речовини жовто-коричневого кольору. Визнаваною смертю клітин (апоптозом). Ці захворю1 чене шляхом Н ЯМР співвідношення 7-бромо-2вання поширюються на різні типи клітин і вклюхлоро-6-метокси-хіноксаліну : 6-бромо-2-хлоро-7чають такі хвороби, як лейкемія, рак, метоксихіноксаліну становить приблизно 7:1. гліобластома, псоріаз, запальні хвороби, хвороби Проміжний приклад 4 5Хлоро-4-метокси-2кісток, фіброзні хвороби, атеросклероз та захвонітроанілін рювання внаслідок пластичних операцій на короДо розчину N (5-хлоро-4-метокси-2нарних, стегнових або ниркових артеріях, або нітрофеніл)-ацетаміду (2г, 8,2ммоль) у 5N НСІ фібропроліферативні хвороби, такі, як артрит, (20мл) додають 1,4-діоксан (10мл) і суміш перефіброз легенів, нирок та печінки. Зокрема, повімішують при 60°С протягом 1,5 години. Реакційну домлялося, що PDGF та PDGF-R є пов'язаними з суміш концентрують і розподіляють між EtOAc/2N певними типами раку та пухлин, такими, як рак NaOH. Водні шари промивають ЕtOАс (3Х), солямозку, рак яєчника, рак товстої кишки, рак передним розчином, висушують (MgSO4) адсорбують міхурової залози, рак легенів, саркома Капоші та на силікагель і піддають хроматографії (70% злоякісна меланома. Крім того, нерегульоване ЕtOАс/гексани) для одержання порошку оранжерозмноження клітин виникає внаслідок коронарвого кольору. ного шунтувуання. Існує думка, що інгібування Проміжний приклад 5 4-Хлоро-5-метоксиактивності тирозинкінази можна використовувати бензол-1,2-діамін дигідрохлорид для контролю неконтрольованого відтворення До розчину ЕtOАс (25мл) та 5-хлоро-4клітин або надмірного утворення матриксу, або метокси-2-нітрофеніламіну (1,6г, 7,9ммоль) в атпогано регульованої запрограмованої смерті клімосфері аргону додають 5% Pd/C (0,5г). Реакційтин (апоптозу). ну суміш гідрогенізують при 50 фунтах на квадраДаний винахід стосується модуляції та/або інтний дюйм протягом 1 години. Суміш фільтрують гібування клітинного сигналу, розмноження клітин в атмосфері N2 крізь целіт у розчин 1N HCI/Et2O в та/або утворення позаклітинного матриксу та/або ЕtOАс і прокладку промивають додатковим руху клітин (хемотаксису), контролювання аноЕtOАс. Одержаний в результаті осад відфільтромального росту клітин та запальної реакції клітин. вують для одержання твердої речовини білого Точніше, цей винахід стосується застосування кольору. заміщених сполук хіноліну або хіноксаліну, які Проміжний приклад 6 7-Хлоро-6-метоксивиявляють селективне інгібування диференціації, хіноксалін-2-ол та 6Хлоро-7-метокси-хіноксалін-2розмноження, утворення матриксу, хемотаксису ол або вивільнення медіатора через ефективне інгіДо розчину 4-хлоро-5-метокси-бензол-1,2бування активності тирозинкінази похідного від діаміну дигідрохлориду (1,8г, 7,2ммоль) в EtOH тромбоцитів рецептора фактора росту (PDGF-R). (15мл) в атмосфері аргону додають TEA (2,5мл, Ініціювання аутофосфорилювання, тобто, 18ммоль) при 0°С. Суміш перемішують протягом фосфорилювання самого рецептора фактора 35 74536 36 росту, та фосфорилювання хазяїна внутрішньоктрішньовенний, внутрішньом'язовий, підшкірний, літинних субстратів є біохімічними подіями, які внутрішньоочний, внутрішньосиновіальний, кишберуть участь у клітинному сигналі, розмноженні ковий, внутрішньочеревинний, трансепітеліальклітин, продукуванні матриксу, хемотаксисі та ний, включаючи крізьшкірний, очний, під'язиковивільнення медіатора. вий, щічний, шкірний, назальна інгаляція через Завдяки ефективному інгібуванню активності нагнітання та аерозоль. Lck тирозинкінази сполуки даного винаходу також Сполуки формули можуть існувати у формах, можна застосовувати у лікуванні резистентності які дозволяють введення через найбільш підходо трансплантації та аутоімунних хвороб, таких, дящий маршрут, і винахід також стосується фаряк ревматичний артрит, розсіяний склероз та сисмацевтичних композицій, що містять принаймні темний червоний вовчак, при відторгненні трансодну сполуку згідно з винаходом, яка є підходяплантатів, при хворобах хазяїна, спричинених щою для застосування як медикамент. Ці компопересадженими тканинами, при гіперпроліферазиції можуть бути одержані традиційними спосотивних захворюваннях, таких, як пухлини та псобами, з застосуванням одного або кількох ріаз, та при хворобах, у яких клітини отримують фармацевтично прийнятних ад'ювантів або інерсигнали перед запаленням, таких, як астма, затних наповнювачів. Ад'юванти включають, крім палення кишечника та панкреатит. У лікуванні іншого, розріджувачі, стерильні водні середовища резистентності до трансплантації сполука даного та різні нетоксичні органічні розчинники. Комповинаходу може бути застосована профілактично зиції можуть існувати у формі таблеток, пілюль, або у відповідь на негативну реакцію з боку люгранул, порошків, водних розчинів або суспензій, дини на пересаджений орган або тканину. При розчинів для ін'єкцій, еліксирів або сиропів і може профілактичному застосуванні сполуку даного містити один або кілька агентів, вибраних з групи, винаходу вводять пацієнтові або у тканину або що включає підсолоджувачі, такі, як цукроза, лакорган, призначені для трансплантації, перед опетоза, фруктоза, сахарин або Nutrasweet , аромарацією з трансплантації. Профілактика також мотизатори, такі, як олія перцевої м'яти, олія гаульже включати введення медикаменту після оператерії, або вишневі або апельсинові ції з трансплантації, але до виникнення будь-яких ароматизатори, барвники або стабілізатори, такі, ознак негативної реакції на трансплантацію. При як метил- або пропілпараамінобензойна кислота введенні у відповідь на негативну реакцію сполуз метою одержання фармацевтично прийнятних ку даного винаходу вводять безпосередньо пацікомпозицій. єнтові з метою подолання резистентності до траВибір зв'язувального матеріалу та вміст акнсплантації після виявлення зовнішніх ознак тивної речовини у зв'язувальному матеріалі, як резистентності. правило, визначають згідно з розчинністю та хіміЗгідно з іще однією ознакою винаходу, прочними властивостями продукту, конкретним спопонується спосіб інгібування активності PDGF собом введення та умовами, яких слід дотримутирозинкінази, що включає контакт сполуки за п.1 ватися у фармацевтичній практиці. Наприклад, з композицією, що містить PDGF тирозинкіназу. для одержання таблеток, пілюль, капсул та ін. Згідно з іще однією ознакою винаходу, проможуть застосовуватися інертні наповнювачі, понується спосіб інгібування активності Lck тиротакі, як лактоза, цитрат натрію, карбонат кальцію, зинкінази, що включає контакт сполуки за п.1 з вторинний кислий фосфорнокислий кальцій, та композицією, що містить Lck тирозинкіназу. дезінтегратори, такі, як крохмаль, альгінові кисЗгідно з іще однією ознакою винаходу, пролоти та деякі складні силікагелі разом з мастилапонується спосіб лікування пацієнта, який стражми, такими, як стеарат магнію, лаурилсульфат дає або є схильним до стану, який може бути натрію та тальк. Для одержання капсул краще покращений, або якого можна запобігти шляхом застосовувати лактозу та рідкий носій, такий, як введення інгібітора активності PDGF-R тирозинкіполіетиленгліколі з високою молекулярною манази та/або активності Lck тирозинкінази, наприсою. Для покриття або іншої зміни фізичної форклад, описаних вище захворювань, який включає ми дозованої одиниці застосовують різні інші мавведення пацієнтові ефективної кількості сполуки теріали. Наприклад, таблетки, пілюлі або капсули формули І або композиції, що містить сполуку можуть бути вкриті шелаком, цукром або і тим, і формули І або її фармацевтично прийнятну сіль. іншим. Якщо застосовують водні суспензії, вони Згадане нами лікування має розумітися як таможуть містити емульгатори або агенти, які сприке, що включає профілактичну терапію, а також яють суспендуванню. Також застосовують розрілікування виявлених захворювань. джувачі, такі, як цукроза, етанол, поліоли, такі, як Обсяг даного винаходу також включає фарполіетиленгліколь, пропіленгліколь та гліцерин та мацевтичні композиції, які містять фармацевтичхлороформ, або їх суміші. Крім того, активна споно прийнятну кількість принаймні однієї зі сполук лука може бути включена до композицій тривалоформули І разом з фармацевтично прийнятним го вивільнення. носієм, наприклад, ад'ювантом, розріджувачем, Для перорального введення активна сполука покриттям та інертним наповнювачем. може бути введена, наприклад, з інертним розріНа практиці сполуки або композиції для лікуджувачем або з придатним для засвоєння харчовання згідно з даним винаходом можуть вводивим носієм, або може бути включена у тверді або тись у будь-якій прийнятній формі, наприклад, м'які желатинові капсули, або може бути спресошляхом інгаляції, за місцем, перентерально, реквана у таблетки, або може міститись безпосеретально або перорально, краще - перорально. дньо у дієтичній їжі, або може бути включена в Більш конкретними маршрутами введення є внуінертний наповнювач і може застосовуватися у 37 74536 38 формі засвоюваних організмом таблеток, щічних Для введення шляхом інгаляції сполуки витаблеток, капсул, еліксирів, суспензій, сиропів, находу розчиняють або суспендуютть у підходягалет та ін. щому носії для застосування у розпилювачі або Для парентерального введення застосовують аерозолі суспензії або розчину, або абсорбують емульсії, суспензії або розчини сполук згідно з або адсорбують у підходящий твердий носій для винаходом у рослинній олії, наприклад, кунжутозастосування в інгаляторі сухого порошку. вій олії, арахісовій олії або оливковій олії, або у До твердих композицій для ректального ввеводно-органічних розчинах, таких, як вода та дення належать супозиторії, складені згідно з пропіленгліколь, органічних естерах для ін'єкцій, відомими способами, що містять принаймні одну таких, як етилолеат, а також у стерильних водних сполуку формули І. розчинах фармацевтично прийнятних солей. ФоКомпозиції згідно з винаходом також складарми для ін'єкцій мають бути рідкими настільки, ють таким чином, щоб перешкоджати їх швидкощоб їх можна було легко набирати у шприц, і має му усуненню зі стінок судин (артерій або вен) підтримуватися належна плинність, наприклад, шляхом конвекції та/або дифузії, таким чином, через застосування покриття, такого, як лецитин, збільшуючи час перебування вірусних частинок у через підтримання потрібного розміру частинок (у потрібному місці дії. Для тривалого вивільнення разі дисперсії) та застосування поверхневоможе бути застосоване периадвентиційне депо, активних речовин. Тривала абсорбція композицій що включає сполуку згідно з винаходом. Одним з для ін'єкцій може бути викликана застосуванням таких депо для введення сполуки згідно з винаагентів, які затримують абсорбцію, наприклад, ходом може бути співполімерна основа, така, як моностеарату алюмінію та желатину. Розчини етиленвініловий ацетат або полівініловий спирсолей продуктів згідно з винаходом є особливо товий гель, оточений силастиковою оболонкою. В придатними для введення через внутрішньом'яальтернативному варіанті сполука згідно з виназові або підшкірні ін'єкції. Розчини активної споходом може вводитися за місцем з полісилоксалуки як вільної основи або фармацевтично прину, імплантованого в адвентицію. йнятної солі приготовляють у воді, відповідним Альтернативний підхід до зведення до мінічином змішаній з поверхнево-активною речовимуму вимивання сполуки згідно з винаходом під ною, такою, як гідроксипропілцелюлоза. Також час підшкірного, крізьсудинного введення вклюможуть бути одержані дисперсії у гліцерині, рідчає застосування мікрочастинок, які елююють ких поліетиленгліколях та їх сумішах та оліях. медикамент і не піддаються дифузії. Ці мікрочасВодні розчини, які також, що включають розчини тинки можуть складатися з різних синтетичних солей у чистій дистильованій воді, застосовують полімерів, таких, як, наприклад, полілактид, або для внутрішньовенного введення за умови, що їх природних речовин, включаючи білки або полісарівень pH є відповідно відрегульованим, що вони хариди. Такі мікрочастинки дозволяють оператиє належно буферованими і є ізотонічними, з досвно маніпулювати змінними, включаючи загальну татньою кількістю глюкози або хлориду натрію, і дозу медикаменту та динаміку його вивільнення. що вони є стерилізованими нагріванням, опроміМікрочастинки ефективно вводять шляхом ін'єкції ненням, мікрофільтрацією та/або різними антиміу стінки артерій або вен через пористий катетер з кробними та протигрибковими агентами, наприбалончиком або балончик зі стентом і утримують клад, параамінобензойними кислотами, у стінці судин та периадвентиційній тканині прихлоробутанолом, фенолом, сорбіновою кислонаймні приблизно два тижні. Композиції та метотою, тимерозалом та ін. дологія для місцевого внутрішньосудинного сайтСтерильні розчини для ін'єкцій одержують специфічного введення терапевтичних агентів шляхом включення активної сполуки у необхідній обговорюються у роботі [Reissen et al., (J. Am. кількості у відповідний розчинник з різними іншиColl. Cardiol. 1994, 23: 1234-1244)], на яку нами ми інгредієнтами, переліченими вище, після чого робиться посилання в її повному обсязі. здійснюють стерилізацію фільтруванням. Як праКомпозиція згідно з винаходом також може вило, дисперсії одержують шляхом включення включати гідрогель, який одержують з будь-якого різних стерилізованих активних інгредієнтів у біологічно сумісного або нецитотоксичного (гомостерильний зв'язувальний матеріал, який містить або гетеро) полімеру, такого, як полімер гідрофіосновне дисперсійне середовище та інші необльної поліакрилової кислоти, який може діяти як хідні інгредієнти з перелічених вище. У разі стегубка, що абсорбує медикамент. Такі полімери рильних порошків для одержання стерильних описано, наприклад, у заявці WO93/08845, на яку розчинів для ін'єкцій оптимальними способами нами робиться посилання в її повному обсязі. одержання є сушіння у вакуумі та сублімаційне Деякі з них, наприклад ті, які одержують з етиленсушіння, які забезпечують порошок активного та/або пропіленоксиду, випускаються серійно. інгредієнта плюс будь-який додатковий потрібний У застосуванні сполук згідно з винаходом для інгредієнт з його попередньо стерильно фільтролікування патологій, пов'язаних з гіперпроліфераваного розчину. тивними захворюваннями, сполуки згідно з винаДля місцевого введення застосовують гелі ходом вводять різними шляхами. Для лікування (на основі води або спирту), креми або мазі, що рестенозу сполуки винаходу вводять безпосеремістять сполуки винаходу. Сполуки винаходу тадньо у стінки кровоносних судин за допомогою кож можуть бути включені у гель або матеріал балончика для пластичної операції на судинах, основи для нанесення з пластиром, який забезвкритого гідрофільною плівкою (наприклад, гідропечує регульоване вивільнення сполуки через гелем), насиченою сполукою, або за допомогою крізьшкірний бар'єр. будь-якого іншого катетера, що містить інфузійну 39 74536 40 камеру для сполуки, яка може бути застосована лікуванню, наприклад під час хірургічного втруточно у місці, яке потребує лікування, і забезпечання. Полоксамер має практично ті ж самі перечує ефективне вивільнення сполуки за місцем ваги, що й гідрогель, маючи нижчу в'язкість. розташування клітин, які мають бути піддані лікуЗастосування канального катетера з балонванню. Цей спосіб уведення вигідний тим, що чиком з полоксамером, просоченим сполукою забезпечує швидкий контакт сполуки з клітинами, згідно з винаходом є особливо вигідним. У цьому які потребують лікування. разі одночасно досягаються переваги утримуванСпосіб лікування згідно з винаходом в оптиня балончика у роздутому стані протягом довшомальному варіанті полягає у введенні сполуки го періоду часу зі збереженням властивостей згідно з винаходом у місці, яке має бути піддане полегшеного ковзання, та сайт-специфічності лікуванню. Наприклад, гідрогель, що містить комполоксамеру. позицію, може бути відкладений безпосередньо Відсоток активного інгредієнта у композиціях на поверхні тканини, яка має бути піддана лікувинаходу може змінюватися, необхідно лише, ванню, наприклад під час хірургічного втручання. щоб він становив таку пропорцію, щоб можна Вигідним є те, що гідрогель вводять у потрібне було отримати потрібну дозу. Зрозуміло, що примісце всередині судини шляхом покриття катетеблизно одночасно можуть бути введені кілька ра, наприклад, катетера з балончиком, та ввеодиничних доз. Дозу для введення визначає лідення у стінку судини, в оптимальному варіанті кар або кваліфікований професіонал-медик, і під час пластичної операції на судинах. В особвона залежить від потрібного терапевтичного ливо вигідному варіанті насичений гідрогель ввоефекту, маршруту введення та тривалості лікудять у місці, яке має бути піддане лікуванню, за вання, а також від стану пацієнта. Для дорослого допомогою катетера з балончиком. Балончик при пацієнта доза, як правило, становить від приблипросуванні катетера до потрібної судини може зно 0,001 до приблизно 50, в оптимальному варісупроводжуватися захисною оболонкою, щоб анті - від приблизно 0,001 до приблизно 5, мг/кг звести до мінімуму вимивання медикаменту після маси тіла на день при інгаляції, від приблизно введення катетера у кровотік. 0,01 до приблизно 100, в оптимальному варіанті Інший варіант втілення винаходу забезпечує від 0,1 до 70, ще краще - від 0,5 до 10, мг/кг маси введення сполуки згідно з винаходом за допомотіла на день при пероральному введенні, і від гою перфузійних балончиків. Ці перфузійні балоприблизно 0,001 до приблизно 10, в оптимальнончики, які дозволяють підтримувати кровотік, а му варіанті - від 0,01 до 10, мг/кг маси тіла на отже, знижують ризик ішемії міокарда, після роздень при внутрішньовенному введенні. У кожнодування балончика також дозволяють вводити му конкретному випадку дозу визначають згідно з сполуку за місцем при нормальному тиску протячинниками, характерними для пацієнта, який має гом відносно довгого часу, більш, ніж двадцять бути підданий лікуванню, такими, як вік, маса, хвилин, що може бути необхідним для його оптизагальний стан здоров'я та інші характеристики, мальної дії. В альтернативному варіанті може які можуть впливати на ефективність сполуки бути застосований спрямований катетер з балонзгідно з винаходом. чиком ["спрямований катетер з балончиком для Сполуки/композиції згідно з винаходом мопластичної операції на судинах", Mansfield жуть вводитись з необхідною частотою для одеMedical, Boston Scientific Corp., Вотертаун, Масаржання потрібного терапевтичного ефекту. Деякі чусетс]. Останній складається з традиційного пацієнти можуть реагувати швидко на більш вибалончика, вкритого шаром з 24 перфорованих соку або більш низьку дозу, і значно нижчі підтканалів, які заповнюються через незалежний римуючі дози для них можуть бути достатніми. просвіт через додатковий інфузійний отвір. Різні Для інших пацієнтів може бути необхідним довготипи катетерів з балончиком, такі, як подвійний тривале лікування у межах від 1 до 4 доз на день, балончик, пористий балончик, мікропористий базгідно з фізіологічними потребами кожного конклончик, канальний балончик, балончик зі стентом ретного пацієнта. Взагалі, активний продукт може та гідрогелевий катетер, усі з яких можуть бути вводитись перорально від 1 до 4 разів на день. застосовані для здійснення винаходу, описано у Звичайно, для інших пацієнтів необхідна норма роботі [Reissen et al., (1994)], на яку нами робитьстановить не більше, ніж одна або дві дози на ся посилання в її повному обсязі. день. Застосування перфузійного катетера з балоСполуки згідно з даним винаходом також мончиком є особливо вигідним, оскільки одночасно жуть складатися для застосування у поєднанні з має переваги утримування балончика у роздутоіншими терапевтичними агентами або у зв'язку з му стані протягом довшого періоду часу зі зберезастосуванням методів терапії для фармакологіженням властивостей полегшеного ковзання, та чних умов, які можуть бути поліпшені через засайт-специфічності гідрогелю. стосування сполуки формули І, таких, як нижчеІнший аспект даного винаходу стосується вказані: фармацевтичної композиції, яка включає сполуку Сполуки згідно з даним винаходом можуть згідно з винаходом та полоксамер, такий, як застосовуватися у лікуванні рестенозу після плаPoloxamer 407, який є нетоксичним, біологічно стичної операції на судинах з застосуванням сумісним поліолом промислового виробництва будь-якого засобу, такого, як балончик, ампутація (BASF, Парсиппені, Нью-Джерсі). або лазерні технології. Сполуки згідно з даним Полоксамер, просочений сполукою згідно з винаходом можуть застосовуватися у лікуванні винаходом, може бути відкладений безпосередрестенозу після розміщення стента у судинній ньо на поверхні тканини, яка має бути піддана мережі або як 1) попереднє лікування при заку 41 74536 42 порюванні судин, або 2) у разі, коли операція з нуванням. Нанесена на полімерний матеріал застосуванням будь-яких засобів не забезпечує мембрана, що регулює швидкість, може бути прохідності артерії. Сполуки даного винаходу утворена таким чином, щоб мати рівномірний можуть застосовуватися перорально, парентерарозподіл порозигену у мембрані, що регулює льно, або наноситись за місцем через застосушвидкість, і порозиген у регулюючій швидкість вання спеціального засобу, або як відповідним мембрані може розчинятися, залишаючи по собі чином рецептоване покриття на стенті. у регулюючій швидкість мембрані пори розміром, Для місцевого нанесення як покриття на стенаприклад, 10 мікронів або 1 мікрон, хоча пори нті вкритий стент виготовляють, наносячи політакож можуть бути меншими за 1 мікрон. Порозимерний матеріал, який включає сполуку винахоген у регулюючій швидкість мембрані може бути, ду, принаймні на одну поверхню стента. наприклад, хлоридом натрію, лактозою, гепариДо полімерних матеріалів, придатних для ном, поліетиленгліколем, співполімерами поліевключення у сполуку винаходу, включають політиленоксид/поліпропіленоксид та їх сумішами. мери, які мають відносно низьку температуру В іншому аспекті покриття на стенті може буобробки, такі, як полікапролактон, полі(етилен-коти утворене шляхом нанесення сполуки винаходу вінілацетат) або полі(вінілацетат), або ненаповна принаймні одну поверхню стента для утвореннений кремнійорганічний вулканізат та полімери, ня біологічно активного шару з наступним нанещо мають подібну відносно низьку температуру сенням одного або кількох шарів пористого поліобробки. До інших підходящих полімерів налемерного матеріалу на біологічно активний шар жать нездатні до розкладу полімери, які здатні таким чином, щоб пористий полімерний матеріал нести та доставляти терапевтичні медикаменти, мав товщину, достатню для забезпечення регутакі, як латекси, уретани, полісилоксани, стиролльованого вивільнення сполуки. етилен/бутилен-стирол-блокспівполімери (SEBS) Пористий полімерний матеріал складається з та здатні до біологічного розкладу біологічно абполіаміду, парилену або похідної парилену, які сорбовані полімери, здатні нести й доставляти наносять на стент осадженням з газової фази без терапевтичні медикаменти, такі, як полі-DLкаталізатора. "Парилен" означає полімер на осмолочна кислота (DL-PLA) та полі-L-молочна кинові п-ксилілену, одержаний шляхом полімеризаслота (L PLA), поліортоестери, поліімінокарбонації газової фази, як описано у патенті США ти, аліфатичні полікарбонати та поліфосфазоли. №5,824,049, на який нами робиться посилання. У полімер, що несе медикамент, також може В альтернативному варіанті пористий полібути включений порозиген шляхом додавання мерний матеріал наносять шляхом плазмового порозигена до полімеру разом з терапевтичним осадження. Прикладами полімерів, придатних медикаментом для утворення пористої полімердля плазмового осадження, є полі(етиленоксид), ної мембрани, що несе медикамент. "Порозиген" полі(етиленгліколь), полі(пропіленоксид) та поліозначає будь-який компонент, наприклад, мікрогмери метану, силікону, тетрафтороетилену, тетранули хлориду натрію, лактози або гепарину, раметилдисилоксану та ін. який, наприклад, розчиняється або іншим чином Інші підходящі полімерні системи включають розкладається при потраплянні у рідини організполімери, які походять від мономерів, що піддаму, залишаючи після себе пористу мережу у поються фотополімеризації, таких, як рідкі мономелімерному матеріалі. Пори, які залишаються пісри, які в оптимальному варіанті мають принаймні ля таких порозигенів, як правило, мають розмір два здатні до зшивання С-С (вуглець-вуглець) 10 мікронів. Пори, утворені такими порозигенами, подвійні зв'язки, є негазоподібними адитивними як поліетиленгліколь (PEG), поліетиленокетиленненасиченими сполуками, які піддаються сид/поліпропіленоксид (РЕО/РРО) співполімери, полімеризації і мають температуру кипіння вище наприклад, можуть мати розмір менше одного 100°С при атмосферному тиску, молекулярну мікрона, хоча й інші подібні матеріали, які виклимасу приблизно 100-1500, і є здатними до швидкають відокремлення фаз від основного полімеркого утворення адитивних полімерів з високою ного матеріалу, що несе медикамент, і згодом молекулярною масою. В оптимальному варіанті можуть вимиватися рідинами організму, також мономер є адитивним поліетиленненасиченим можуть бути придатними для утворення пор, естером акрилової або метакрилової кислоти, що менших за один мікрон. Полімерний матеріал піддається фотополімеризації і містить два або наносять на стент, тоді як терапевтичний медибільше акрилатних або метакрилатних групи на камент та порозигенний матеріал містяться у молекулу, або його суміші. Прикладами таких полімерному матеріалі, дозволяючи порозигенові багатофункціональних акрилатів є етиленглікорозчинятися або розкладатися рідинами організльдіакрилат, етиленглікольдиметакрилат, тримему при розміщенні стента у кровоносній судині, тилпропантриакрилат, триметилопропантриметаабо ж, порозиген може бути розчинений і видакрилат, пентаеритриттетраакрилат або лений з полімерного матеріалу для утворення пентаеритриттетраметакрилат, 1,6пор у полімерному матеріалі перед поміщенням гександіолдиметакрилат та діетиленглікольдимеполімерного матеріалу разом зі стентом у кровотакрилат. носну судину. У деяких особливих випадках також можуть Якщо потрібно, на полімер, що несе медиказастосовуватися моноакрилати, такі, як нмент, також наносять регулюючу швидкість мембутилакрилат, н-бутилметакрилат, 2брану для обмеження швидкості вивільнення етилгексилакрилат, лаурилакрилат та 2сполуки винаходу. Мембрану, що регулює швидгідроксипропілакрилат. У невеликій кількості мокість, наносять як покриття з розчину, або ламіжуть застосовуватися також аміди (мет)акрилової 43 74536 44 кислоти, такі, як нтів. Наприклад, на стент наносять розчин полімеметилолметакриламідбутиловий етер. Придатру і розчинникові дають випаритися, таким чином, ними є також н-вінілові сполуки, такі, як нзалишаючи на поверхні стента покриття з полівінілпіролідон, вінілові естери аліфатичних мономеру та терапевтичної речовини. Як правило, карбонових кислот, такі, як вінілолеат, вінілові розчин наносять на стент або напиленням розчиетери діолів, такі, як бутандіол-1,4-дивініловий ну на стент, або зануренням стента у розчин. етер і аліловий етер та аліловий естер. ПридатСполуки згідно з даним винаходом можуть ними є також інші мономери, такі, як продукти застосовуватися у лікуванні рестенозу у поєдреакції ди- або полікпоксидів, таких, як бутандіолнанні з будь-яким антикоагулянтом, антитромбо1, 4-дигліцидилового етеру або бісфенол А диглітичним або профібринолітичним агентом. Часто цидилового етеру з (мет)акриловою кислотою. пацієнтів одночасно піддають лікуванню до, під Характеристики рідкого дисперсійного середовичас та після процедур втручання агентами цих ща, яке піддається фотополімеризації, можуть класів або з метою безпечного виконання процебути змінені для конкретних цілей шляхом вибору дури втручання, або для запобігання негативного відповідних мономерів або їх сумішей. впливу утворення тромбів. Прикладами класів До інших застосовуваних полімерних систем агентів, відомих як антикоагулянти, антитромбоналежить полімер, який є біологічно сумісним і тичні або профібринолітичні агенти є будь-які мінімізує подразнення стінок судин при імплантокомпозиції гепарину, гепарини низької молекуляваному стенті. Полімер може бути або біологічно рної маси, пентасахариди, антагоністи рецептостійким, або біологічно абсорбованим полімером, рів фібриногену, інгібітори тромбіну, інгібітори залежно від потрібної швидкості вивільнення або Фактора Ха або інгібітори Фактора VIla. потрібного ступеня стабільності полімеру. До Сполуки згідно з даним винаходом можуть біологічно абсорбованих полімерів, які можуть застосовуватися у комбінації з будь-яким протигібути застосовані, належать полі(L-молочна киспертонічним агентом або холестерин- або ліпідолота), полікапролактон, полі(лактид-ко-гліколід), регулюючим агентом у лікуванні рестенозу або полі(гідроксибутират), полі (гідроксибутират-коатеросклерозу одночасно з лікуванням підвищевалерат), полідіоксанон, поліортоестер, поліангіного кров'яного тиску або атеросклерозу. Прикдрид, полі(гліколева кислота), полі(D,L-молочна ладами агентів, які застосовують у лікуванні підкислота), полі(гліколева кислота - котриметиленвищеного кров'яного тиску, є сполуки таких карбонат), поліфосфоестер, поліфосфоестерурекласів: бетаблокатори, інгібітори АСЕ, антагоністан, полі(амінокислоти), ціаноакрилати, поти кальцієвих каналів та антагоністи альфалі(триметиленкарбонат), полі(імінокарбонат), рецепторів. Прикладами агентів, які застосовують кополі(етер-естери) (наприклад, PEO/PLA), поліу лікуванні підвищеного рівня холестерину або алкіленоксалати, поліфосфазоли та біомолекули, нерегульованого рівня ліпідів є сполуки, які є інгітакі, як фібрин, фібриноген, целюлоза, крохмаль, біторами HMGCoA-редуктази, сполуки класу фібколаген та гіалуронова кислота. Також можуть ратів. застосовуватися біологічно стійкі полімери з відСполуки згідно з даним винаходом можуть носно низькою хронічною тканинною реакцією, застосовуватися у лікуванні різних форм раку, такі, як поліуретани, силікони та поліестери, а або окремо, або у комбінації зі сполуками, які також інші полімери, якщо вони можуть бути розтрадиційно застосовують у лікуванні раку. чинені й затверджені або полімеризовані на стенЗрозуміло, що даний винахід включає комбіті, такі, як поліолефіни, поліізобутилен та співпонації сполук згідно з даним винаходом з одним лімери етилен-альфаолефін; акрилові полімери або кількома агентами вищезгаданого терапевта співполімери, вінілгалідні полімери та співпотичного класу. лімери, такі, як полівінілхлорид; полівінілові етеСполуки, які входять в об'єм даного винахори, такі, як полівінілметиловий етер; полівінілідеду, виявляють помітну фармакологічну активність нгаліди, такі, як полівініліденфторид та згідно з випробуваннями, описаними в літературі, полівініліденхлорид; поліакрилонітрил, полівінілі результати цих випробувань співставляються з кетони, полівінілові ароматичні сполуки, такі, як фармакологічною активністю в організмах людиполістирол, полівінілові естери, такі, як полівініни та інших ссавців. Представлені нижче резульлацетат; співполімери вінілових мономерів один з тати фармакологічних in vitro та in vivo випробуодним та олефіни, такі, як співполімери етилен вань є типовими для характеристики сполук метиловий етер метакрилової кислоти, співполізгідно з даним винаходом. мери акрилонітрил-стирол, ABS-смоли та співпоОдержання фармацевтичних композицій та лімери етилен - вінілацетат; поліаміди, такі, як фармакологічні випробування Nylone 66 та полікапролактам; алкільні смоли, Сполуки, які входять в об'єм даного винахополікарбонати; поліоксиметилени; полііміди, поду, виявляють значну активність як інгібітори акліетери; епоксидні смоли, поліуретани; віскоза; тивності тирозинкінази і мають терапевтичну цінтриацетат віскози; целюлоза, ацетат целюлози, ність як клітинні антипроліферативні агенти для бутират целюлози; ацетатбутират целюлози; целікування певних захворювань, включаючи псорілофан, нітрат целюлози; пропіонат целюлози; аз, атеросклероз та рестенозні пошкодження. етери целюлози та карбоксиметилцелюлоза. Сполуки, які входять в об'єм даного винаходу, виявляють модуляцію та/або інгібування клітинКрім плазмового осадження та осадження ганого сигналу та/або розмноження клітин та/або зової фази, можуть бути застосовані й інші споутворення матриксу та/або хемотаксису та/або соби нанесення різних покрить на поверхні стензапальної реакції клітин і можуть застосовуватися 45 74536 46 у запобіганні або затриманні випадків або рецилячої сироватки. Після центрифугування клітини дивів таких захворювань, або лікування таких промивають ще раз і ресуспендуютть у тому сазахворювань іншим чином. мому буфері без ембріональної телячої сироватДля визначення ефективності сполук даного ки при 30000клітин/50мл. Клітини інкубують з різвинаходу застосовують описані нижче фармаконими концентраціями сполуки формули І (кінцева логічні випробування, прийняті серед спеціалістів концентрація DMSO = 1%) протягом 30хв. при і визнані такими, що співставляються з фармако37°С. Для дослідження хемотаксису застосовулогічною активністю у ссавців. Сполуки, які вхоють 96-лункові модифіковані камери Boyden дять в об'єм даного винаходу, піддавали цим (Neuroprobe, Inc.) та полікарбонатну мембрану з різним випробуванням, і отримані результати розміром пор 8мм (Poretics, СА). Мембрану вкривважають порівнюваними з активністю посередвають колагеном (Sigma C3657, 0,1мг/мл). PDGFника диференціації клітин. Результати цих ви(3нг/мл) у буфері зі сполукою формули І і без пробувань дають достатню інформацію спеціалінеї поміщують у нижню камеру. Клітини (30000) з стам у галузі фармакології та медичної хімії для інгібітором і без нього поміщують у верхню камевизначення параметрів для застосування досліру. Клітини інкубують протягом 4 годин. Мембраджуваних сполук в одному або кількох описаних ну фільтра забирають і забирають клітини з вернами способах терапії. хнього боку мембрани. Після висушування 1. ELISA-аналіз аутофосфорилювання PDGFвизначають флуоресценцію на мембрані з застоR тирозинкінази суванням Citofluor II (Millipore) при збудженЗазначений аналіз здійснюють, як описано у ні/довжині емісійної хвилі 485/530нм. У кожному роботі [Dolle et al., (j. Med. Chem. 1994, 37, 2627)], експерименті середню міграцію клітин визначали на яку нами робиться посилання, за винятком на основі шістьох зразків. Відсоток інгібування застосування лізатів клітин гладеньких м'язів аовизначають за значеннями для оброблених рти людини (HAMSC), як описано нижче. DMSO контрольних зразків. З п'яти точок розра2. Загальна процедура аналізу матогенезу ховували залежне від концентрації інгібування а. Культура клітин ІС50. Результати представлено як середнє знаКлітини гладеньких м'язів аорти людини (пачення ± SEM (стандартна похибка) з п'яти таких саж 4-9) поміщують у 96-лункові планшети у жиекспериментів. вильному середовищі, 6000 клітин на лунку, і за4. Очищення EGF-рецептора лишають для розвитку на 2-3 дні. В основі очищення EGF-рецептора лежить При приблизно 85% злитті ріст клітин зупипроцедура Ярдена та Шлессінгера (Yarden and няють середовищем, що не містить сироватки Schlessinger). A431 клітини вирощують у пляшках 2 7 (SFM). 80см до злиття (2 10 клітин на пляшку). Клітини б. Аналіз мітогенезу двічі промивають PBS і збирають з PBS, що місЧерез 24 години недостатності сироватки сетить 110ммоль EDTA (протягом 1 години при редовище забирають і замінюють на сполуку для 37°С і центрифугують при 600г протягом 10 хвивипробування / зв'язувальний матеріал у SFM лин. Клітини солюбілізують у 1мл на 2 107 клітин (200мкл на лунку). Сполуки солюбілізують у кульхолодного солюбілізаційного буфера (50ммоль турі клітин DMSO при концентрації 10мМ і здійсHepes- буфера, pH 7,6, 1% Triton Х-100, нюють подальші розведення у SFM. 150ммоль NaCI, 5ммоль EGTA, 1ммоль PMSF, Через 30хв попередньої інкубації зі сполукою 50мг/мл апротиніну, 25ммоль бензамідину, клітини стимулюють PDGF при 10нг/мл. Підраху5мг/мл leupeptic та 10мг/мл інгібітора трипсину нки здійснюють двічі зі стимульованими та несої) протягом 20 хвилин при 4°С. Після центристимульованими лунками при кожній концентрації фугування при 100000г за 30 хвилин спливаючий сполуки. шар подають на WGA-агарозну колонку (100мл Через чотири години додають 1мкКі 3Н тимізгущеної смоли на 2 107 клітини) і збовтують дину на лунку. протягом 2 годин при 4°С. Неабсорбований маКультури термінують через 24 годин після теріал забирають і смолу промивають двічі HTN додавання фактора росту. Клітини піднімають буфером (50ммоль Hepes, pH 7,6, 0,1% Triton Хтрипсином і збирають на плоский фільтр, засто100, 150ммоль NaCI), двічі HFN буфером, що совуючи автоматичний збирач клітин (Wallac містить 1Μ NaCI, і двічі HTNG буфером (50ммоль Machll96). Плоский фільтр поміщують у сцинтиHepes, pH 7,6, 0,1% Triton Х-100, 150ммоль NaCI і ляційний лічильник (Wallac Betaplate) для визна10% гліцерину). LGF рецептор елююють партіями чення включеної у ДНК мітки. HTKG буфером, що містить 0,5Μ н-ацетил-D3. Аналіз хемотаксису глюкозаміну (200мл на 2 107 клітин). Елюйований Клітини гладенького м'яза аорти людини матеріал зберігають в аліквотних кількостях при (HASMC) у ранніх пасажах одержують з АТСС. 70°С і розводять перед застосуванням TMTNG Клітини вирощують у середовищах Clonetics буфером (50ммоль Tris-Mes буфера, pH 7,6, 0,1% SmGM 2 SingleQuots і застосовують у пасажах 4Triton Х-100, 150ммоль NaCI, 10% гліцерину). 10. При 80% злитті клітин до середовища дода5. Інгібування EGF-R аутофосфорилювання ють флуоресцентний зонд, кальцеїн AM (5мМ, А431 клітини вирощують до злиття у кюветах Molecular Piobe) і клітини інкубують протягом 30 з культурою вкритої фібропектином тканини люхвилин. Після промивання буферним соляним дини. Після 2-разового промивання PBS крижаної розчином HEPES клітини піднімають трипсином і температури клітини розчиняють додаванням нейтралізують буфером MCDB 131 (Gibco) з 0,1% 500мл на кювету лізисного буфера (50ммоль, BSA, 10мМ глутаміну та 10% ембріональної теHepes, pH 7,5, 150ммоль NaCI, 1,5ммоль МgСІ2, 47 74536 48 1ммоль EGTA 10% гліцерину, 1% тритон X 100, Загальний реакційний об'єм становить 50мМ, і 1ммоль PMSF, 1мг/мл апротиніну, 1мг/мл лейпереакцію здійснюють у чорному 96-лунковому птину) та інкубуванням протягом 5 хвилин при планшеті. Реакцію зупиняють шляхом додавання 4°С. Після стимулювання EGF (500мг/мл 10 хви150мл інгібуючого буфера (100мМ Hepes, pH 7,5, лин при 17°С) здійснюють імунопреципітацію за KF 400мМ, EDTA 133мМ, BSA 1г/л ), що містить допомогою анти-CGF-R (від 108) та реакцію ауспеціально вибране антитіло проти тирозину, тофосфорилювання (аліквоти 50мл, 3мКі [гмічене криптатом європію (PY20-K), 0,8мкг/мл, та 32 Р]АТР) у присутності 2 або 10мМ сполуки згідно мічений алофікоціаніном стрептавідин (XL665), з даним винаходом протягом 2 хвилин при 4°С. 4мг/мл. Мічення стрептавідину та антитіл проти Реакцію зупиняють додаванням гарячого буфера тирозину здійснювали у Cis-Bio International для зразка для електрофорезу. Після аналізу (Франція). Суміш підраховували, застосовуючи SDA-PAGE (7,5% els) здійснюють авторадіогралічильник Packard Discovery, здатний вимірювати фію та кількісний аналіз денситометричним скагомогенне перенесення флуоресценції з часовим нуванням рентгенівських плівок. розділенням (збудження при 337нм, зчитування а. Культура клітин при 620нм та 665нм). Співвідношення сигналу Клітини HER 14 та К721А одержують шляхом при 665нм та сигналу при 620нм є мірою концентренсфекції NIH3T3 клітин (клон 2,2) (С. Fryling, трації фосфорилованого тирозину. Контроль NCI, NIH), які не мають ендогенних EGFодержують шляхом заміщення фермента буферецепторів, з послідовностями кДНК EGFром. Специфічний сигнал є різницею між співвідрецептора тикого типу або мутантним EGFношенням, одержаним без інгібітора, та співвідрецептором, який не має активності тирозинкінаношенням з контролем. Розраховують відсоток зи (де Lys 721 у місці зв'язування АТР заміщено специфічного сигналу. IC50 розраховують при 10 Ala-залишком відповідно). Усі клітини вирощують концентраціях інгібітора двічі для кожної, застоу DMFM з 10% бичачою сироваткою (Hyclone, совуючи програму Xlfit. Еталонною сполукою є Logan, Юта) стауроспорин (Sigma), який виявляє ІС50 30±6нМ 6. Селективність до РКА та РКС визначають, (n=20). застосовуючи комплекти серійного виробництва: 8. Вимірювання інгібування пухлин In vitro а. Комплект для аналізів Pierce Colorimetric Інгібування росту пухлин in vitro сполуками РКА, Spinzyme Format даного винаходу визначають так. Короткий протокол: Лінію клітин гліоми щура С6 (надану АТСС) РКА фермент (бичачого серця) 1U на пробірвирощують як моношари у модифікованому секу редовищі Дульбекко (Dubelcco's Modified Eagle Kemptide-пептидний (мічений барвником) Medium), що містить 2мМ L-глутаміну, 200U/мл субстрат пеніциліну, 200мкг/мл стрептоміцину, разом з 45 хвилин @ 30°С 10% (об'єм/об'єм) термоінактивованої ембріонаОптична густина при 570нм льної телячої сироватки. Клітини в експоненційній б. Комплект для аналізів Pierce Colorimetric фазі росту обробляють трипсином, промивають PKA, Spinzyme Format PBS і розводять до кінцевої концентрації Короткий протокол: 6500клітин/мл у повному середовищі. До суспенPKC фермент (мозку щура) 0,02511 на пробізії клітин (2,5мл) додають медикамент, який має рку бути підданий випробуванню, або контрольний Neurogranin-пептидний (мічений барвником) розчинник в об'ємі 50мкл та 0,4мл 2,4% агару субстрат Noble Difco, який тримають при 45°С, і перемішу30 хвилин @ 30°С ють. Суміш відразу виливають у чашки Петрі й Оптична густина при 570нм залишають стояти на 5 хвилин при 4°С. Кількість 7. Вимірювання інгібування активності р56lck клітинних клонів (>60 клітин) вимірюють через 12 тирозинкінази днів інкубації при 37°С в атмосфері 5% СО2. КоІнгібування активності р56lck тирозинкінази жен медикамент двічі випробують при 10, 1, 0,1 визначають згідно з процедурою, описаною у та 0,01мкг/мл (кінцева концентрація в агарі). Репатенті США №5,714,493, на який нами робиться зультати виражають як відсоток інгібування клопосилання. ногенності відносно необроблених контрольних В альтернативному варіанті інгібування актизразків. ІС50 визначають графічно за напівлогавності тирозинкінази визначають згідно з таким рифмічними графіками середнього значення, способом. Субстрат (субстрат, що містить тировизначеного для кожної концентрації медикаменту. зин, Biot-( Ala)3-Lys-Val-Glu-Lys-lle-Gly-Glu-Gly9. Вимірювання інгібування пухлин In vivo Thr-Tyr-Glu-Val-Val-Tyr-Lys-(NH2), розпізнаний Інгібування росту пухлини in vivo сполуками Р56lck, 1мкМ) попередньо фосфорилують у приданого винаходу визначають, застосовуючи підсутності або за відсутності певної концентрації шкірний ксенотрансплантат, як описано у патенсполуки для випробування, певною кількістю фетах США №5700823 та 5760066, у яких мишам рмента (фермент одержують шляхом експресії пересаджували клітини гліоми С6, і ріст пухлин С56lck-гена у послідовності дріжджів), очищеного вимірювали мікрометром. від клонованих дріжджів (очищення від фермента Результати, одержані вищевказаними експездійснюють класичними способами) у присутності риментальними способами, свідчать про те, що АТР (10мкМ) МgСІ2 (2,5мМ), МnСІ2 (2,5мМ), NaCI сполуки, які входять в об'єм даного винаходу, (25мМ), DTT (0,4мМ) у Hepes 50мМ, pH 7,5, 10хв. мають корисні властивості інгібування рецепторпри температурі навколишнього середовища. 49 74536 50 ної PDGF тирозинкінази або властивості інгібудля конкретного способу терапії. вання р56lck тирозинкінази, а отже, мають тераДаний винахід може бути втілений в інших певтичне значення. Результати вищезгаданих конкретних формах без відхилення від його сутфармакологічних випробувань можуть застосовуності та характерних ознак. ватися для визначення дози та режиму введення Комп’ютерна верстка О. Гапоненко Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601