Застосування кортикотропін-рилізинг фактора для лікування раку

Реферат: Винахід стосується застосування кортикотропін-рилізинг фактора (CRF) у комбінації із бевацизумабом для запобігання прогресуванню пухлини – раку молочної залози, раку товстої кишки, раку головного мозку. UA 102098 C2 (12) UA 102098 C2 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 1. Пріоритет За даною заявкою вимагається пріоритет за попередньою заявкою США № 61/049292, поданою 30 квітня 2008 року, і попередньою заявкою США № 61/094806, поданою 5 вересня 2008 року. 2. Галузь винаходу У даному документі представлені способи застосування кортикотропін-рилізинг фактора (CRF) для лікування раку. 3. Передумови У попередньому рівні техніки описана велика кількість композицій для лікування раку. 4. Сутність винаходу Заявники знайшли, що сам по собі CRF може чинити значний сприятливий вплив при лікуванні пухлин. Відомі з попереднього рівня способи застосування CRF включають дослідження, що вивчає застосування CRF як ад'юванта до дексаметазону для зменшення набряку головного мозку. У ході дослідження дійшли висновку, що «лікування кортикореліну ацетатом було пов'язано зі зниженням впливу дексаметазону і зменшенням побічних ефектів, викликаних застосуванням стероїдів, у пацієнтів з перитуморальним набряком» (Mechtler et al., th 11 Annual Meeting of the Society For Neuro-Oncology (SNO) Orlando, Florida, November 15-19, rd 2006 and Mechtler et al. 43 Annual Meeting of the American Society of Clinical Oncology (ASCO), Chicago, Illinois, June 1-5, 2007). На відміну від попередніх застосувань CRF заявник знайшов, що сам по собі CRF може запобігати розвитку або росту пухлини і може навіть зменшувати розмір пухлини. Зокрема, заявник знайшов, що в пацієнтів, що лікувалися тільки CRF, не тільки зберігався розмір пухлини, але також спостерігалося зменшення розміру пухлин головного мозку, і виявлені пролонговані рівні виживаності. Заявник також знайшов, що пацієнти з метастатичними пухлинами були особливо чутливими до лікування за допомогою CRF. Таким чином, у першому аспекті в даному документі наведені способи лікування або контролю раку шляхом введення CRF людині. Термін «рак» у тому значенні, у якому він використовується, стосується новотвору або пухлини, утвореної в результаті аномального неконтрольованого клітинного росту. Необмежені приклади включають ті раки, що описано в Розділі 4, див. нижче. Термін «рак» має на увазі захворювання при участі як передракових, так і злоякісних клітин. У деяких варіантах здійснення винаходу рак стосується локалізованого надмірного росту клітин, що не поширюється на інші частини суб'єкта, наприклад, доброякісної чи злоякісної пухлини. «Суб'єктом» у тому значенні, у якому він використовується, є людина, наприклад, пацієнт. В інших варіантах здійснення винаходу рак стосується злоякісної пухлини, що впроваджується і руйнує прилеглі структури тіла і поширюється на віддалені ділянки. Терміни «лікувати», «піддавати лікуванню» або «лікування» у тому значенні, у якому вони використовуються, означають, що важкість патологічного стану суб'єкта зменшена або щонайменше частково поліпшена або полегшена, і/або що деяке полегшення, пом'якшення або часткове зменшення щонайменше одного з клінічних симптомів досягається, і/або існує інгібування або затримка прогресування патологічного стану і/або затримка прогресування патологічного процесу або захворювання. Термін «ведення хворого» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, означає запобігання рецидиву визначеного патологічного процесу або розладу в пацієнта, що на нього страждає, збільшуючи час ремісії патологічного процесу або розладу, на який страждає пацієнт, зменшуючи коефіцієнт смертності пацієнтів і/або підтримуючи зменшення важкості або запобігання симптому, пов'язаного із захворюванням або патологічним станом. У зв'язаному аспекті способи винаходу можуть бути використані для запобігання прогресування пухлини. Термін «прогресування пухлини» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, означає триваючий ріст пухлини, збільшення розміру або об'єму пухлини і/або утворення метастазів. Термін «запобігання прогресування пухлини» і будь-які його граматичні еквіваленти в тому значенні, у якому вони використовуються, якщо не позначено інакше, означають, що ріст пухлини пригнічений, зупинений або повністю змінений, що розмір або об'єм пухлини залишається незмінним або зменшується, і/або що ніяких додаткових метастазів пухлини не утворюється в інших частинах організму. Термін додатково може також включати подовження часу ремісії пухлинного захворювання, на яке страждає пацієнт, зменшуючи відсотоксмертності пухлинних хворих, запобігаючи погіршення симптому, пов'язаного з пухлинним захворюванням, і/або підтримуючи зменшення важкості або запобігання симптому, пов'язаного з пухлинним захворюванням. В одному аспекті в даному документі наводиться спосіб запобігання прогресування пухлини в людини шляхом введення їй більше трьох днів композиції, що включає CRF у загальній добовій дозі не менше приблизно 1 мг, людині з діагностованою або потенційно наявною 1 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 пухлиною. В іншому аспекті в даному документі наводиться спосіб запобігання прогресування пухлини в людини шляхом введення їй більше трьох днів композиції, що включає CRF, де CRF вводять у дозі, ефективній для інгібування прогресування пухлини, людині з діагностованою чи потенційно наявною пухлиною. Термін «людина з діагностованою пухлиною» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, стосується людини, у якої існує і/або був виявлений неопластичний ріст тканини, що може бути або доброякісною, або злоякісною. У деяких варіантах здійснення винаходу термін стосується хворого на рак. Термін «людина з потенційно наявною пухлиною» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, стосується людини з симптомами або аномальним ростом тканини, які пов'язані з пухлиною в такої людини, у якої пухлина можливо була діагностована, або в лікаря є обґрунтоване припущення про існування пухлини на підставі клінічної картини. В іншому аспекті винахід описує спосіб запобігання прогресування пухлини в людини шляхом введення композиції, що включає CRF, людині, що має метастазуючу пухлину. В іншому аспекті винахід описує спосіб профілактичного запобігання розвитку метастазів у людини шляхом введення композиції, що включає CFR, людині. Більш того, у даному документі наведена схема лікування для запобігання прогресування пухлини в людини шляхом застосування більше трьох днів композиції, що включає CRF, людині з потенційно наявною пухлиною; і моніторинг прогресування пухлини в людини. Термін «моніторинг» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, стосується способів, що можуть бути використані для визначення росту пухлини, збільшення розміру або об'єму пухлини, і/або утворення метастазів. Ці способи включають способи одержання зображень, включаючи рентгенографію, комп'ютерну томографію і магнітнорезонансну томографію (МРТ); виявлення біомаркерів; методику проведення біопсії; і будь-який інший спосіб, відомий фахівцям у даній галузі техніки, що може бути використаний для визначення росту пухлини, збільшення розміру або об'єму пухлини і/або утворення метастазів. В іншому аспекті винахід описує спосіб лікування злоякісних пухлин у людини, що включає введення CRF таким чином, щоб біологічна активність пухлини змінилася. Приклади біологічної активності пухлини, що може бути змінена згідно з винаходом, включають, без обмеження, продукування гормонів, стимуляцію ангіогенезу, росту пухлини, метаболічну активність, продукування цитокінів, імуногенність, стимулювання локального скупчення рідини, зміну позаклітинного матриксу, включаючи хрящ, швидкість клітинного розподілу, продукування токсинів і інших цитотоксичних молекул і зміну апоптозу. Згідно з будь-яким з наведених у даному документі способів CRF може бути введений у період часу, що перевищує три дні, як, наприклад, п'ять днів або більше, від семи до чотирнадцяти днів або більше, два або три тижні або більше або рік або більше. Згідно з сутністю винаходу CRF може вводитися безупинно протягом даного періоду часу або періодично протягом даного періоду часу. Призначена доза CRF може бути введена у вигляді однократної дози (наприклад, однократна болюсна ін'єкція) або періодично шляхом багаторазових ін'єкцій або інфузій. Альтернативно, призначена доза CRF вводиться протягом періоду часу (наприклад, безупинна інфузія). Введення CRF може бути безупинним або повторюватися доти, поки в пацієнта не з'явиться стабілізація захворювання або регресія, або доти, поки в пацієнта не знайдуть прогресування захворювання або неприйнятну токсичність. CRF може вводитися або підшкірно, або внутрішньовенно. В одному варіанті здійснення винаходу CRF вводять внутрішньовенно. У деяких варіантах здійснення винаходу CRF вводять у вигляді внутрішньовенної інфузії зі швидкістю від 0,01 мкг/кг/год. до 40 мкг/кг/год.; від 0,05 мкг/кг/год. до 30 мкг/кг/год.; від 1,0 мкг/кг/год до 20 мкг/кг/год.; від 2 мкг/кг/год. до 15 мкг/кг/год. і від 5 мкг/кг/год. до 10 мкг/кг/год. В інших варіантах здійснення винаходу CRF вводять у вигляді підшкірних ін'єкцій. Кількість CRF, що вводиться ін'єкцією, може варіювати. У визначених варіантах здійснення винаходу кількість CRF, що вводиться підшкірно або внутрішньовенно, може знаходитися в діапазоні від 0,01 мкг/кг/год. до 1 мг/кг/год.; від 0,05 мкг/кг/год. до 500 мкг/кг/год.; від 1,0 мкг/кг/год. до 200 мкг/кг/год.; від 2 мкг/кг/год. до 150 мкг/кг/год.; від 5 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год.; від 10 мкг/кг/год. до 150 мкг/кг/год.; від 20 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год.; від 30 мкг/кг/год. до 50 мкг/кг/год.; від 20 мкг/кг/год. до 30 мкг/кг/год.; і від 10 мкг/кг/год. до 15 мкг/кг/год. У визначених варіантах здійснення винаходу кількість CRF, що вводиться підшкірно, внутрішньовенно, місцево, внутрішньошкірно, трансдермально, інтраназально або через легеню, може бути 1 мкг/кг, 2 мкг/кг, З мкг/кг, 4 мкг/кг, 5 мкг/кг, 6 мкг/кг, 10 мкг/кг, 15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, 50 мкг/кг, 60 мкг/кг, 70 мкг/кг, 80 мкг/кг, 90 мкг/кг, 100 мкг/кг, 200 мкг/кг, 300 мкг/кг, 400 мкг/кг, 500 мкг/кг, 600 мкг/кг, 700 мкг/кг, 800 мкг/кг, 900 мкг/кг і 1 мг/кг. 2 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 CRF може також вводитися підшкірним, внутрішньовенним, місцевим, внутрішньошкірним, трансдермальним, інтраназальним або легеневим способом. Загальна добова доза CRF, що вводиться пацієнту з діагностованою пухлиною, може перевищувати 100 мг. У деяких варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF знаходиться в діапазоні від 0,1 мг до 20 мг. У деяких варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF знаходиться в діапазоні від 1 мг до 20 мг. У визначених варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF знаходиться в діапазоні від 2,5 мг до 10 мг. У визначених варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF знаходиться в діапазоні від 4 мг до 10 мг. У конкретному варіанті здійснення винаходу пухлиною є пухлина головного мозку. Пухлиною головного мозку може бути гліобластома, гліома, епендимома, астроцитома, медулобластома, нейрогліома, олігодендрогліома або менінгіома. Альтернативно, пухлиною головного мозку може бути вторинна пухлина головного мозку або метастаз у головний мозок. Інші види раку і пухлин, що можуть бути піддані лікуванню у відповідності зі способами, наведеними в даному документі, включають, без обмеження, рак сечового міхура, рак молочної залози, рак шийки матки, рак товстої кишки (включаючи рак ободової і прямої кишки), рак стравоходу, рак шлунково-кишкового тракту, рак голови і шиї, рак печінки, рак легені (як дрібноклітинний, так і недрібноклітинний), меланома, мієлома, нейробластома, рак яєчника, рак підшлункової залози, рак простати, рак нирки, саркома (включаючи остеосаркому), рак шкіри (включаючи плоскоклітинну карциному), рак шлунка, рак яєчка, рак щитовидної залози і рак матки. В одному варіанті здійснення винаходу способи полягають у лікуванні або менеджменті раку товстої кишки, підшлункової залози, молочної залози, мезотеліоми, холангіокарциноми, лейоміосаркоми, ліпосаркоми, меланоми, носоглоткового, нейроендокринного раку, раку яєчника, нирки, слинної залози, дрібноклітинного раку легені або веретеноклітинної карциноми. У деяких варіантах здійснення винаходу способи, описані в даному документі, включають лікування метастазів, що виникають в результаті раку сечового міхура, раку молочної залози, раку шийки матки, раку товстої кишки (включаючи рак ободової і прямої кишки), раку стравоходу, раку голови і шиї, раку печінки, раку легені (як дрібноклітинного, так і недрібноклітинного), меланоми, мієломи, нейробластоми, раку яєчника, раку підшлункової залози, раку простати, раку нирки, саркоми (включаючи остеосаркому), раку шкіри (включаючи плоскоклітинну карциному), раку шлунка, раку яєчка, раку щитовидної залози, раку матки, мезотеліоми, холангіокарциноми, лейоміосаркоми, ліпосаркоми, носоглоткового раку, нейроендокринного раку, раку яєчника, раку нирки, раку слинної залози, дрібноклітинного раку легені або веретеноклітинної карциноми. У деяких варіантах здійснення винаходу способи, описані в даному документі, можуть включати лікування метастатичної пухлини головного мозку, що виникає в результаті раку сечового міхура, раку молочної залози, раку шийки матки, раку товстої кишки (включаючи рак ободової і прямої кишки), раку стравоходу, раку голови і шиї, раку печінки, раку легені (як дрібноклітинного, так і недрібноклітинного), меланоми, мієломи, нейробластоми, раку яєчника, раку підшлункової залози, раку простати, раку нирки, саркоми (включаючи остеосаркому), раку шкіри (включаючи плоскоклітинну карциному), раку шлунка, раку яєчка, раку щитовидноїзалози, раку матки, мезотеліоми, холангіокарциноми, лейоміосаркоми, ліпосаркоми, носоглоткового раку, нейроендокринного раку, раку яєчника, раку нирки, раку слинної залози, дрібноклітинного раку легені або веретеноклітинної карциноми. Способи також включають профілактичні способи по запобіганню метастазів, що виникають в результаті раку сечового міхура, раку молочної залози, раку шийки матки, раку товстої кишки (включаючи рак ободової і прямої кишки), раку стравоходу, раку голови і шиї, раку печінки, раку легені (як дрібноклітинного, так і недрібноклітинного), меланоми, мієломи, нейробластоми, раку яєчника, раку підшлункової залози, раку простати, раку нирки, саркоми (включаючи остеосаркому), раку шкіри (включаючи плоскоклітинну карциному), раку шлунка, раку яєчка, раку щитовидної залози, раку матки, мезотеліоми, холангіокарциноми, лейоміосаркоми, ліпосаркоми, носоглоткового раку, нейроендокринного раку, раку яєчника, раку нирки, раку слинної залози, дрібноклітинного раку легені або веретеноклітинної карциноми. Способи також включають профілактичні способи по запобіганню метастазів пухлини головного мозку, що виникає в результаті раку сечового міхура, раку молочної залози, раку шийки матки, раку товстої кишки (включаючи рак ободової і прямої кишки), раку стравоходу, раку голови і шиї, раку печінки, раку легені (як дрібноклітинного, так і недрібноклітинного), меланоми, мієломи, нейробластоми, раку яєчника, раку підшлункової залози, раку простати, раку нирки, саркоми (включаючи остеосаркому), раку шкіри (включаючи плоскоклітинну карциному), раку шлунка, раку яєчка, раку щитовидної залози, раку матки, мезотеліоми, холангіокарциноми, 3 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 лейоміосаркоми, ліпосаркоми, носоглоткового раку, нейроендокринного раку, раку яєчника, раку нирки, раку слинної залози, дрібноклітинного раку легені або веретеноклітинної карциноми. У деяких варіантах здійснення винаходу пухлина або рак, що підлягають лікуванню, рецидивували або виникли знову. Термін «рецидивуючий» або «виниклий знову» стосується ситуації, коли в пацієнтів, у яких була ремісія раку після терапії, знову з'явилися ракові клітини. В інших варіантах здійснення винаходу пухлина або рак, що підлягають лікуванню, стали рефрактерними або резистентними. Термін «рефрактерний» або «резистентний» стосується стану, коли пацієнти навіть після інтенсивного лікування мають залишкову кількість ракових клітин в організмі. У визначених варіантах здійснення винаходу способи, описані в даному документі, можуть включати введення CRF, кон'югованого з біополімером або з біосумісним полімером. Термін «кон'югат CRF» у тому значенні, у якому він використовується, стосується поліпептиду CRF, що був модифікований з метою включення молекули, що приводить до поліпшення фармакокінетичного профілю в порівнянні з немодифікованим CRF. Поліпшення фармакокінетичного профілю може виявлятися у вигляді поліпшення одного або декількох наступних параметрів: активності, стабільності, площі під кривою і часу напівжиття в циркулюючій крові. У конкретному варіанті здійснення винаходу CRF кон'югований з поліетиленгліколем (PEG). 5. Короткий опис фігур На фіг. 1 представлені криві виживаності Каплана-Мейєра для мишей, що мають пухлину головного мозку U87 Flue, яких або не лікували (Ctrl), або їм було введено підшкірно (s.c.) 0,3 мг/кг (низька доза DEX) або 1 мг/кг (висока доза DEX) дексаметазону двічі на добу, або вони лікувалися 30 мкг/кг (низька доза hCRF) або 100 мкг/кг (висока доза hCRF) кортикореліну ацетату підшкірно двічі на добу. На фіг. 2 представлені криві виживаності Каплана-Мейєра для мишей, що мають пухлину головного мозку U87 Flue, які або не лікувалися (Ctrl), або їм було введено 20 мг/кг кармустину (BiCNU) або 40 мг/кг темозоломіду (TMZ) внутрішньоочеревинно 5 днів на тиждень. На фіг. 3 представлені графіки фотонного випромінювання пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яким було введено 100 мкг/кг кортикореліну ацетату (висока доза hCRF) підшкірно двічі на добу (лікування, панель 3В), у порівнянні з фотонним випромінюванням пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яких не лікували (контроль, панель 3А). На фіг. 4 представлені графіки фотонного випромінювання пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яким було введено 30 мкг/кг кортикореліну ацетату (низька доза hCRF) підшкірно двічі на добу (лікування, панель 4В), у порівнянні з фотонним випромінюванням пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яких не лікували (контроль, панель 4А). На фіг. 5 представлені графіки фотонного випромінювання пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яким вводили 1 мг/кг дексаметазону (висока доза DEX) підшкірно (s.c.) двічі на добу (лікування, панель 5В), у порівнянні з фотонним випромінюванням пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яких не лікували (контроль, панель 5А). На фіг. 6 представлені графіки фотонного випромінювання пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яким було введено 20 мг/кг карму стану (BiCNU) внутрішньоочеревинно 5 днів на тиждень (лікування, панель 6В), у порівнянні з фотонним випромінюванням пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яких не лікували (контроль, панель 6А). На фіг. 7 представлені графіки фотонного випромінювання пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яким було введено 40 мг/кг темозоломіду (TMZ) внутрішньоочеревинно 5 днів на тиждень (лікування, панель 7В), у порівнянні з фотонним випромінюванням пухлин головного мозку U87 Flue у мишей, яких не лікували (контроль, панель 7А). На фіг. 8 представлений графік процентної зміни розміру пухлини головного мозку, вимірюваного в ході МРТ у хворих на рак головного мозку, що одержують 2 мг на добу (доза 1 мг, двічі на добу) людського CRF підшкірно протягом щонайменше 3-6 місяців. На фіг. 9 представлений графік процентної зміни розміру пухлини головного мозку, вимірюваного в ході МРТ у хворих на рак головного мозку, що одержують 2 мг на добу (доза 1 мг, двічі на добу) людського CRF підшкірно протягом щонайменше 3-6 місяців. На фіг. 10 представлений графік процентної зміни розміру пухлини головного мозку, вимірюваного в ході МРТ у пацієнтів з метастатичними пухлинами, що одержують 2 мг на добу (доза 1 мг, двічі на добу) людського CRF підшкірно протягом щонайменше 3-6 місяців. 6. Докладний опис 6.1 Кортикотропін-рилізинг фактор Кортикотропін-рилізинг фактор (CRF) є ендогенним 41 амінокислотним пептидом, вперше ідентифікованим у 1981 році як один з основних гормонів гіпоталамуса, відповідального за 4 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 стимуляцію гіпофізарно-адреналової системи (Vale, W., et al., Science 213:1394-1397 (1981)). У певних варіантах здійснення винаходу пептиди CRF, використовувані в лікарських формах даного винаходу, синтезують, використовуючи твердо- або рідкофазні технології пептидного синтезу. Однак інші джерела пептиду CRF легкодоступні для звичайного фахівця в даній галузі. Терміни «кортикотропін-рилізинг фактор» і «CRF» також охоплюють біологічно активні еквіваленти CRF; наприклад, пептиди, що відрізняються за однією або декількома амінокислотами у всій амінокислотній послідовності, а також заміщені, делеційні, інсерційні і модифіковані амінокислотні варіанти CRF, що у значній мірі зберігають біологічну активність, звичайно асоціюються з інтактним пептидом CRF. CRF може бути отриманий із природних джерел, експресований рекомбінантно або синтезований синтетичним чином. CRF також відомий у даній галузі техніки як кортикотропінрилізинг гормон (CRH), кортиколіберин, кортикорелін і CRF-41. Терміни «кортикотропін-рилізинг фактор», «CRF», «кортикотропін-рилізинг гормон», «CRH», «кортиколіберин», «кортикорелін», «CRF-41» або їхні граматичні еквіваленти в тому значенні, у якому вони використовуються, мають функціональне визначення і належать до пептидів, що розділяють одну або декілька біологічних активностей з нативним, інтактним пептидом CRF. Такі біологічні активності включають, наприклад, здатність стимулювати вивільнення АСТН, здатність інгібувати набряк in vivo і здатність зв'язуватися з CRF рецепторами, включаючи CRF рецептор 1 і CRF рецептор 2. Кожний з перерахованих вище термінів призначений для позначення 41 амінокислотних пептидів кортикотропін-рилізинг фактора людини, щура, барана, вівці, кози, свині і риби і пептидів CRF з інших ссавців, будь вони виділені екстракцією й очищенням природного джерела, із систем рекомбінантних клітинних культур або синтезовані з використанням технології пептидного синтезу. Ці терміни також призначені для позначення інших пептидів, які належать до CRF, що розділяють одну або декілька біологічних активностей з нативними пептидами CRF, такими як урокортин (Vaughan, J., et al., Nature 378:287-292 (1995), Donaldson, C.J., et al., Endocrinology 137(5):2167-2170 (1996) and Turnbull, A.V., et al., Eur. J. Pharm. 303:213216 (1996)), уротензин I (Lederis, K., et al., Science 218:162-164 (1982)) і саувагін (Montecucchi, P.C., et al., Int. J. Pep. Prot. Res. 16:191-199 (1980)). Було показано, що CRF має периферичну, неендокринну функцію, опосередковану біологічною активністю як потенційний інгібітор набряку і запалення (Wei, E.T. et al., Ciba Foundation Symposium 172:258-276 (1993)). Це було підтверджено в ряді експериментів, у яких було показано, що системне введення CRF інгібує судинну проникність для компонентів плазми і пов'язаний набряк тканин у відповідь на ушкодження або медіатори запалення (Wei, Е.Т. et al., European J. of Pharm. 140:63-67 (1987), Serda, S.M. et al., Pharm. Res. 26:85-91 (1992) and Wei, E.T. et al., Regulatory Peptides 33:93-104 (1991)). У деяких варіантах здійснення способів винаходу, описаних у даному документі, CRF є синтетичним продуктом, наприклад, кортикореліну ацетатом. У визначених варіантах здійснення винаходу використовуваний CRF є XERECEPT™. У визначених варіантах здійснення винаходу способів, описаних у даному документі, можуть бути використані похідні, аналоги і кон'югати CRF. Прикладом кон'югату CRF є CRF, кон'югований з PEG (CRF-PEG), описаний у заявці США № 60/931786, включеній в даний документ як посилання. У деяких варіантах здійснення винаходу кон'югати CRF вводять людині як спосіб лікування або менеджменту ракових пухлин. Кон'югати CRF мають поліпшений фармакокінетичний профіль у порівнянні з немодифікованим CRF. Кон'югати CRF можуть демонструвати поліпшення за одним або декількома параметрами фармакокінетичного профілю, включаючи AUC, Cmax, кліренс (CL), час напівжиття і біодоступність, у порівнянні з немодифікованим CRF. У певних варіантах здійснення винаходу CRF вводять у формі фармацевтично прийнятної солі. Термін «фармацевтично прийнятна сіль» у тому значенні, у якому він використовується, якщо не позначено інакше, включає; без обмеження, солі кислих або основних груп, що можуть бути присутніми у сполуках, наведених у даному документі. При певних кислих умовах сполука може утворювати велику розмаїтість солей з різними неорганічними й органічними кислотами. Кислоти, що можуть бути використані для приготування фармацевтично прийнятних солей таких основних сполук, є такими, що утворюють солі, що включають фармакологічно прийнятні аніони, включаючи, без обмеження, ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бікарбонат, бітартрат, бромід, кальцію едетат, камзилат, карбонат, хлорид, йодид, цитрат, дигідрохлорид, едетат, едисилат, естолат, езилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глутамат, гліколіларсанілат, гексилрезорцинат, гідрабамін, гідроксинафтоат, ізетіонат, лактат, лактобіонат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилсульфат, мускат, напсилат, нітрат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полігалактуронат, саліцилат, стеарат, сукцинат, сульфат, танат, тартрат, теоклат, триетйодид і памоат. При певних основних умовах сполука може утворити основні солі з різними 5 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 фармакологічно прийнятними катіонами. Приклади таких солей включають, без обмеження, солі лужних металів або лужноземельних металів і, зокрема, солі кальцію, магнію, натрію, літію, цинку, калію і заліза. У конкретному варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятною сіллю CRF є кортикореліну ацетат. У визначених варіантах здійснення винаходу кон'югати CRF включають CRF з немодифікованою амінокислотною послідовністю, де один або декілька залишків ковалентно зв'язані з поліетиленгліколем. CRF може бути модифікований шляхом ковалентного зв'язування полімеру поліетиленгліколю з однією або декількома з 41 амінокислоти, включаючи, без обмеження, лізин, гістидин, аргінін, аспарагінову кислоту, глутамінову кислоту, серин, а також Nкінцеву -аміно і С-кінцеву карбоксильну групу білка. Кон'югати CRF також включають варіанти, що містять цистеїн, CRF, де один або декілька цистеїнових залишків були вставлені в одну з амінокислотних послідовностей CRF або заміщали один або декілька залишків однієї з амінокислотних послідовностей CRF. Термін «цистеїн-вмісний варіант CRF» у тому значенні, у якому він використовується, стосується CRF, що був модифікований шляхом вставки одного або декількох цистеїнових залишків у немодифіковану послідовність CRF або заміщенням одного чи декількох амінокислотних залишків у поліпептидній послідовності CRF на цистеїнові залишки. Кон'юговані варіанти, що містять цистеїн, CRF включають послідовності CRF з цистеїновими залишками, доданими на N-кінець, С-кінець або як на N-кінець, так і на С-кінець однієї з амінокислотних послідовностей. Ланки полімеру поліетиленгліколю можуть бути лінійними або розгалуженими. Кон'югат CRF-PEG може бути введений внутрішньовенно або підшкірно за допомогою ін'єкції. Існує ряд аналогів CRF, відомих у даній галузі техніки. Патент США № 4415558, опублікований 15 листопада 1983 року, розглядає овечий CRF, аналоги і виділення oCRF з екстрактів гіпоталамуса вівці. Було виявлено, що синтетичний oCRF знижує кров'яний тиск. У цілому аналогічний пептид, саувагін, був описаний у Melchiorri and Negri, «Action of sauvagine on the mesenteric vascular bed of the dog», Regulatory Peptides 2:1-13 (1981). Саувагін являє собою 40 амінокислотний пептид і, як було опубліковано, має біологічну активність у зниженні кров'яного тиску в ссавців і стимуляції секреції АСТН і -ендорфіну. Патент США № 4528189, опублікований 9 липня 1985 року, і патент США № 4533654, опублікований 6 серпня 1985 року, розглядають пептиди, подібні до CRF щура і вівці, і їхні аналоги, і знайшли, що уротензин білого чукучана і коропа стимулюють АСТН і знижують цукор, що міститься в крові, відповідно. Ling et al., «Isolation and characterization of caprine corticotropin-releasing factor», Biochem Biophys Res Commun. 122:1218-1224 (1984) розглядає структуру CRF кози, що є такою самою, як у CRF вівці. Esch et al., «Isolation and characterization of the bovine hypothalamic corticotropinreleasing factor», Biochem Biophys Res Commun. 122:899-905 (1984) розглядає структуру бичачого CRF, що відрізняється від CRF вівці і кози тільки по одному амінокислотному залишку (номеру 33, що є аспарагіном, а не серином під номером 33 у CRF кози і вівці). CRF свині був виділений і охарактеризований Patthy et al., «Isolation and amino acid sequence of corticotrophinreleasing factor from pig hypothalami», Proc Natl Acad Sci USA 82:8762-8766 (1985). CRF свині має у своєму розпорядженні амінокислотну послідовність (залишки 1-39), спільну з CRF щура/людини, і відрізняється від них тільки в позиціях 40 і 41. Залишок 40 може бути або аспарагіном, або ізолейцином, і залишок 41 є фенілаланінамідом. Під «CRF» розуміють у даному документі кортикотропін-рилізинг фактор ссавців, включаючи такий, що виділяється з щура, людини, корови, кози, свині або вівці. Аналоги CRF включають саувагін, уротензин коропа й уротензин чукучана (усі з яких були виділені з нижчих хребетних) і структури синтетичних пептидів, аналогічні CRF і розглянуті в патентах США №№ 4415558, 4489163, 4553654 і 4528189, включені в даний документ як посилання. 6.2 Дозування і введення лікарського препарату В одному варіанті здійснення винаходу загальна добова доза CRF, що вводиться пацієнту з метою лікування або менеджменту раку або запобігання прогресування пухлини, може знаходитися в діапазоні від 1 мкг до 100 мг; від 2 мкг до 50 мг; від 5 мкг до 25 мг; від 10 мкг до 20 мг; від 50 мкг до 10 мг; від 100 мкг до 5 мг; від 500 мкг до 3 мг; від 1 мг до 2 мг. В іншому варіанті здійснення винаходу доза CRF, що міститься у фармацевтичній композиції, може знаходитися в діапазоні від 1 мкг до 10 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRF може знаходитися в діапазоні від 0,1 мг до 5 мг або від 0,3 мг до 2 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRP може складати приблизно 0,3 мг, приблизно 0,5 мг, приблизно 1 мг, приблизно 2,5 мг, приблизно 4 мг або приблизно 5 мг. У певних варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF може складати від 4 мг до 10 мг. Наприклад, загальна добова доза CRF може складати приблизно 1 мг, приблизно 2 мг, приблизно 2,5 мг, приблизно 3,0 мг, 6 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 приблизно 4 мг, приблизно 6 мг, приблизно 8 мг, приблизно 10 мг, приблизно 12 мг, приблизно 15 мг, приблизно 17 мг або приблизно 20 мг. В одному варіанті здійснення винаходу CRF вводять у вигляді підшкірної ін'єкції в кількості від 0,1 мкг/кг до 1000 мкг/кг. CRF може бути введений підшкірно, внутрішньовенно, місцево, внутрішньошкірно, трансдермально, інтраназально або через легеню в кількості від 1 мкг/кг до 500 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 100 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 80 мкг/кг, від 4 мкг/кг до 40 мкг/кг або від 5 мкг/кг до 20 мкг/кг. Наприклад, CRF може бути введений у дозі 3 мкг/кг, 10 мкг/кг, 30 мкг/кг, 60 мкг/кг, 100 мкг/кг і 300 мкг/кг. В іншому варіанті здійснення винаходу CRF вводять у вигляді внутрішньовенної інфузії зі швидкістю від 0,1 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год. Наприклад, CRF може бути введений внутрішньовенно зі швидкістю від 1 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год. або від 2 мкг/кг/год. до 80 мкг/кг/год. або від 2 мкг/кг/год. до 50 мкг/кг/год. або від 4 мкг/кг/год. до 40 мкг/кг/год. або від 5 мкг/кг/год. до 20 мкг/кг/год. Доза CRF, що вводиться, може бути доставлена у вигляді однократної дози (наприклад, однократної болюсної ін'єкції) або протягом 24-годинного періоду (наприклад, безупинна інфузія протягом часового періоду або дробні болюсні дози протягом часового періоду), і повторюють її введення до появи в пацієнта стабілізації захворювання або регресії або до виявлення в пацієнта прогресування захворювання або неприйнятної токсичності. Наприклад, стабілізація захворювання для солідних пухлин, як правило, означає, що перпендикулярний діаметр вимірюваних пухлинних вогнищ не збільшився на 25% або більше від останнього вимірювання. Див., наприклад, Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) Guidelines, Journal of the National Cancer Institute 92(3): 205-216 (2000). Стабілізація захворювання або його відсутність визначається способами, відомими в даній галузі техніки, такими як оцінка симптомів у пацієнта, фізикальне дослідження, візуалізація пухлини у вигляді зображень з використанням рентгенограми, CAT, ПЕТ або MPT і інших загальноприйнятих методів оцінки. В інших варіантах здійснення винаходу CRF вводять у комбінації з іншим лікарським засобом («другою активною речовиною») або з іншою терапією для лікування і менеджменту раку. Другі активні речовини включають малі молекули і великі молекули (наприклад, білки й антитіла), приклади яких наведені в даному документі, а також стовбурові клітини або пуповинна кров. Методи, або способи лікування, що можуть бути використані в комбінації з введенням CRF, включають, без обмеження, хірургічну операцію, імунотерапію, біологічну терапію, променеву терапію й інші не медикаментозні способи лікування, використовувані в даний час для лікування або менеджменту раку. Різні схеми дозування для введення CRF окремо і/або в комбінованій терапії обговорюються в даному документі. Терміни «спільне введення» або «у комбінації з» включають введення двох терапевтичних засобів (наприклад, CRF і іншого протиракового засобу або другої речовини) або одночасно, паралельно, або послідовно без визначених часових обмежень. В одному варіанті здійснення винаходу обидва засоби присутні в клітині або в організмі пацієнта в той самий час або проявляють свій біологічний або терапевтичний вплив у той самий час. В одному варіанті здійснення винаходу два терапевтичних засоби знаходяться в одній і тій самій композиції або дозованій лікарській формі. В іншому варіанті здійснення винаходу два терапевтичних засоби знаходяться в окремих композиціях або дозованих лікарських формах. Також наведені фармацевтичні композиції (наприклад, дозовані лікарські форми для однократного введення), що можуть бути використані в способах, описаних у даному документі. Специфічні фармацевтичні композиції включають CRF і другу активну речовину. В одному варіанті здійснення винаходу кон'югати CRF можуть бути використані для лікування раку шляхом введення пацієнтам, що їх потребують, терапевтично прийнятної кількості кон'югату CRF. В іншому варіанті здійснення винаходу спосіб лікування раку включає введення пацієнту, що цього потребує, фармацевтичної композиції, що включає CRF, хімічно модифікованого поліетиленгліколем, і фармацевтично прийнятний розріджувач, ад'ювант або носій. Термін «фармацевтично прийнятний» у тому значенні, у якому він використовується стосовно композицій за даним винаходом, означає, що композиція не приводить до неприйнятного рівня іритації в суб'єкта, якому введена композиція за будь-якою відомою схемою введення лікарського препарату. Те, що являє собою неприйнятний рівень іритації, буде легко визначений фахівцями в даній галузі техніки, і буде прийнято до уваги утворення еритеми і струпу, а також ступінь набряку, зв'язані з введенням композиції. 6.3. Схема дозування лікарського препарату У кожному зі згаданих вище способів CRF може бути введений один раз на день або багаторазово в день. Наприклад, дозування CRF може вводитися щогодини, кожні дві години, кожні три години, кожні чотири години, кожні шість годин, кожні вісім годин, кожні 12 годин або 7 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 кожні 24 години. Альтернативно, CRF може вводитися один раз у два, три, чотири, п'ять або шість днів. У певних варіантах здійснення винаходу CRF може вводитися один раз на тиждень, один раз у кожні дві, три або чотири тижні або один раз на місяць. Крім того, було показано, що CRF добре переноситься при застосуванні протягом тривалих періодів часу. Тому пацієнту, якому призначений CRF, може бути призначена схема дозування лікарського препарату, де пацієнт застосовує, наприклад, кортикореліну ацетат протягом тривалого періоду часу. У певних варіантах здійснення винаходу пацієнт може застосовувати CRF протягом 3 днів, 4 днів, 5 днів, 1 тижня, 2 тижнів, 3 тижнів або 4 тижнів або більше. В інших варіантах здійснення винаходу пацієнт може застосовувати CRF протягом 1 місяця, 2 місяців, 3 місяців, 4 місяців, 5 місяців, 6 місяців або більше. У деяких випадках пацієнт може застосовувати CRF протягом 1 року або довше. В одному варіанті здійснення винаходу за будь-яким зі способів, описаних вище, загальна добова доза CRF може знаходитися в діапазоні приблизно від 0,01 мг до приблизно 100 мг. В іншому варіанті здійснення винаходу загальна добова доза CRF, що міститься у фармацевтичній композиції, може знаходитися в діапазоні від 1 мкг до 10 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRF може знаходитися в діапазоні від 0,1 мг до 5 мг або від 0,3 мг до 2 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRF може складати приблизно 0,3 мг, приблизно 0,5 мг, приблизно 1 мг, приблизно 2 мг, приблизно 4 мг або приблизно 5 мг. У певних варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF може складати від 4 мг до 10 мг. Наприклад, загальна добова доза CRF може складати приблизно 1 мг, приблизно 2 мг, приблизно 2,5 мг, приблизно 3 мг, приблизно 4 мг, приблизно 6 мг, приблизно 8 мг, приблизно 10 мг, приблизно 12 мг, приблизно 15 мг, приблизно 17 мг або приблизно 20 мг. CRF може бути введений один раз на день або багаторазово на день доти, поки не буде досягнута бажана добова доза CRF. Наприклад, 0,5 мг або 1,0 мг CRF можуть бути введені два рази на день для досягнення загальної добової дози в 1 мг або 2 мг CRF. Альтернативно, 0,5 мг або 1,0 мг CRF можуть бути введені 4 рази на день для досягнення загальної добової дози в 2 мг або 4 мг CRF. У певних варіантах здійснення винаходу CRF вводять два рази на день. У певних варіантах здійснення винаходу CRF вводять два рази на день при загальній добовій дозі в 1 мг. CRF може також вводитися в комбінації з додатковою протираковою терапією. Протиракові способи лікування включають радіотерапію, хіміотерапію, фото динамічну терапію, хірургічну операцію або ще імунотерапію. Хіміотерапія може включати введення антинеопластичних, антипроліферативних, антимітотичних речовин як, наприклад, обговорюваних у Розділі 6.2. В іншому переважному варіанті здійснення винаходу CRF вводять пацієнту, що одержує променеву терапію для лікування раку. При променевій терапії радіоактивне випромінювання може являти собою гамма-випромінювання або рентгенівське випромінювання. Способи містять у собі введення CRF пацієнту, що одержує променеву терапію, таку як зовнішня дистанційна променева терапія, інтерстиціальна імплантація радіоізотопів (1-125, паладій або іридій), радіоізотопів, таких як стронцій-89, торакальну променеву терапію, інтраперитонеальну променеву терапію Р-32 і/або загальну абдомінальну і тазову променеву терапію. Для загального огляду по променевій терапії див. Hellman, Chapter 16: Principles of Cancer th Management: Radiation Therapy, 6 edition, 2001, DeVita et al, eds., J.B. Lippencott Company, Philadelphia. У випадку введення CRF із протираковими засобами, CRF і протираковий засіб можуть бути введені послідовно або одночасно. У випадку послідовного введення порядок введення є нестрогим. У певних варіантах здійснення винаходу CRF, описаний у даному документі, вводять у вигляді підшкірної ін'єкції в кількості від 0,1 мкг/кг до 1000 мкг/кг. CRF може бути введений підшкірно в кількості від 1 мкг/кг до 500 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 100 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 80 мкг/кг, від 4 мкг/кг до 40 мкг/кг або від 5 мкг/кг до 20 мкг/кг. Наприклад, CRF може бути введений у дозі 10 мкг/кг, 30 мкг/кг, 60 мкг/кг, 100 мкг/кг і 300 мкг/кг. В інших варіантах здійснення винаходу CRF, описаний у даному документі, може бути введений у вигляді підшкірної ін'єкції в кількості від 1 мкг до 100 мг. CRF може бути введений підшкірно в кількості від 1 мкг до 80 мг, від 10 мкг до 50 мг, від 100 мкг до 40 мг, від 300 мкг до 10 мг, від 600 мкг до 1 мг і від 800 мкг до 1 мг. Наприклад, CRF може бути введений підшкірно в дозі 100 мкг, 300 мкг, 600 мкг, 1 мг, 2 мг, 2,5 мг, 3 мг, 4 мг і 5 мг. CRF, введений підшкірно, може вводитися один раз на день або багаторазово в день. Наприклад, дозування CRF для підшкірного застосування можна проводити щогодини, кожні дві години, кожні три години, кожні чотири години, кожні шість годин, кожні вісім годин або кожні 12 годин. Альтернативно, CRF може бути введений один раз у кожні два, три, чотири, п'ять або шість днів. У певних варіантах здійснення винаходу CRF може бути введений один раз на 8 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 тиждень, один раз у кожні два, три або чотири тижні або один раз на місяць. Дозування CRF, що призначене один раз на тиждень або довше, може бути призначене у вигляді лікарського депо. Наприклад, даний опис винаходу включає методи менеджменту або лікування пухлин, що включають уведення пацієнту, що потребує цього, переважно людині, терапевтично ефективного кількості, наприклад, кортикореліну ацетату у вигляді підшкірної ін'єкції. Терміни «терапевтично ефективна кількість» і «ефективна кількість» лікарського препарату в тому значенні, у якому вони тут використовуються, якщо не зазначене інше, стосується кількості, достатньої для забезпечення терапевтичного ефекту в лікуванні, запобіганні і/або менеджменті захворювання, щоб сповільнити або мінімізувати прояв одного або декількох симптомів, пов'язаних із захворюванням або порушенням, що підлягає лікуванню. Терміни «терапевтично ефективна кількість» і «ефективна кількість» можуть означати кількість, що поліпшує терапію в цілому, зменшує або запобігає прояву симптомів або причини захворювання або порушення або підвищує терапевтичну ефективність іншого терапевтичного засобу. Кортикорелін можна також застосовувати іншими парентеральними способами, такими як, без обмеження, внутрішньошкірні і внутрішньом'язові ін'єкції, і внутрішньовенні і внутрішньокісткові інфузії. Наприклад, CRF можна застосовувати у вигляді внутрішньовенної інфузії зі швидкістю від 0,1 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год. Наприклад, CRF можна застосовувати внутрішньовенно із швидкістю від 1 мкг/кг/год. до 100 мкг/кг/год., або від 2 мкг/кг/год. до 80 мкг/кг/год., або від 2 мкг/кг/год. до 50 мкг/кг/год., або від 4 мкг/кг/год. до 40 мкг/кг/год., або від 5 мкг/кг/год. до 20 мкг/кг/год. В інших варіантах здійснення винаходу CRF може бути введений внутрішньовенно в кількості від 1 мкг/кг до 1000 мкг/кг. Наприклад, CRF може бути введений внутрішньовенно в кількості від 1 мкг/кг до 100 мкг/кг, або від 2 мкг/кг до 80 мкг/кг, або від 2 мкг/кг до 50 мкг/кг, або від 4 мкг/кг до 40 мкг/кг, або від 5 мкг/кг до 20 мкг/кг. Наприклад, CRF може бути введений у дозі від 0,5 мкг/кг до 1 мкг/кг, або від 2 мкг/кг до 8 мкг/кг, або від 4 мкг/кг до 8 мкг/кг, або 5 мкг/кг. CRF можна вводити внутрішньовенно протягом однієї години або менше однієї години. У певних варіантах здійснення винаходу CRF можна вводити внутрішньовенно протягом однієї години або більше. Наприклад, дозування CRF для внутрішньовенного введення, обговорене вище, можна проводити протягом 10 хв., 30 хв., 45 хв., однієї години, двох годин, чотирьох годин, восьми годин, 12 годин, 24 годин, 48 годин або 72 годин. У певних варіантах здійснення винаходу схеми дозування включають введення CRF разом зі стероїдом. CRF і стероїд можуть бути введені послідовно або одночасно. При послідовному введенні порядок застосування нестрогий. У конкретному варіанті здійснення винаходу CRF вводять підшкірно. В іншому конкретному варіанті здійснення винаходу стероїд, такий як дексаметазон, вводять перорально. 6.4 Другі активні речовини У способах і композиціях, наведених у даному документі, CRF може бути використаний разом або у комбінації з іншими фармакологічно активними сполуками («другими активними речовинами»). Вважається, що певна комбінація працює синергічно при лікуванні певних видів ракової пухлини. CRF може також зменшувати побічні ефекти, пов'язані з визначеними другими активними речовинами, і деякі другі активні речовини можуть бути використані для зменшення побічних ефектів, зв'язаних з CRF. Один або декілька других активних компонентів або речовин можуть бути використані в способах і композиціях, наведених у даному документі, разом з CRF. Другі активні речовини можуть бути молекулами з великою молекулярною вагою (наприклад, білками) або молекулами з невеликою молекулярною вагою (наприклад, синтетичними неорганічними, металорганічними або органічними молекулами). Приклади високомолекулярних активних речовин включають, без обмеження, гемопоетичні ростові фактори, цитокіни, моноклональні і поліклональні антитіла, зокрема, терапевтичні антитіла до антигенів ракової пухлини. Типові високомолекулярні активні речовини являють собою біологічні молекули, такі як зустрічаються в природі або штучно створені білки. Білки, що особливо придатні в способах і композиціях, наведених у даному документі, включають білки, що стимулюють виживання і/або проліферацію гемопоетичних клітин-попередників і імунологічно активних поетичних клітин in vitro або in vivo. Інші стимулюють розподіл і диференціювання комітованих еритроїдних клітин-попередників in vitro або in vivo. Специфічні білки включають, без обмеження: інтерлейкіни, такі як IL-2 (включаючи рекомбінантний IL-II («rIL2») і канарипокс IL-2), IL-10, IL-12 і IL-18; інтерферони, такі як інтерферон альфа-2а, інтерферон альфа-2b, інтерферон альфа-n1, інтерферон альфа-n3, інтерферон бета-la і інтерферон гамма-Ib; GM-CF і GM-CSF; і ЕРО. 9 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Специфічні білки, що можуть бути використані в способах і композиціях, включають, без обмеження: філграстим, що продається в США під торговою маркою NEUPOGEN® (Amgen, Thousand Oaks, CA); сарграмостим, що продається в США під торговою маркою LEUKINE® (Immunex, Seattle, WA); і рекомбінантний ЕРО, що продається в США під торговою маркою EPOGEN® (Amgen, Thousand Oaks, СА). Рекомбінантні і мутовані форми GM-CSF можуть бути приготовлені, як описано в патентах США №№ 5391485; 5393870 і 5229496; усі з яких включені в даний документ як посилання. Рекомбінантні і мутовані форми G-CSF можуть бути приготовлені, як описано в патентах США №№ 4810643; 4999291; 5528823 і 5580755; усі з яких включені в даний документ як посилання. Також призначені для використання в комбінації з CRF нативні, що зустрічаються в природі, і рекомбінантні білки. Далі розглядаються мутанти і похідні (наприклад, модифіковані форми) білків, що зустрічаються в природі, що проявляють, in vivo щонайменше частину фармакологічної активності білків, що лежать у їхній основі. Приклади мутантів включають, без обмеження, білки, що мають один або декілька амінокислотних залишків, що відрізняються від відповідних залишків у формах білків, що зустрічаються в природі. Також під терміном «мутанти» розглядаються білки, у яких відсутні вуглеводні молекули, у нормі присутні в їхніх природних формах (наприклад, неглікозильовані форми). Приклади похідних включають, без обмеження, пегільовані похідні і химерні білки, такі як білки, утворені шляхом сполучення IgG1 або IgG3 з білком або активною частиною білка, що представляє інтерес. Див., наприклад, Penichet, M.L. and Morrison, S.L., J.Immunol. Methods 248:91-101 (2001). Антитіла, що можуть бути використані в комбінації з CRF, включають моноклональні і поліклональні антитіла. Приклади антитіл включають, без обмеження, трастузумаб (HERCEPTIN®), ритуксимаб (RITUXAN®), бевацизумаб (AVASTIN™), пертузумаб (OMNITARG™), тозитумомаб (BEXXAR®), едреколомаб (PANOREX®), і G250. CRF також може бути скомбінований з або використовуватися в сполученні з анти-TNF- антитілами. Високомолекулярні активні речовини можуть застосовуватися у вигляді протиракових вакцин. Наприклад, вакцини, що секретують або викликають секрецію цитокінів, таких як IL-2, GCSF і GM-CSF, можуть бути використані в наведених способах або фармацевтичних композиціях. Див., наприклад, Emens, L.A., et аl., Curr. Opinion Моl. Ther. 3(1):77-84 (2001). Другі активні речовини, що є малими молекулами, можуть також бути використані для зменшення побічних ефектів, пов'язаних із введенням CRF. Однак, подібно до деяких великих молекул, багато які з них, як думають, здатні чинити синергічну дію при застосуванні разом (наприклад, до, після або одночасно) з CRF. Приклади низькомолекулярних других активних речовин включають, без обмеження, протиракові речовини, антибіотики, імунодепресанти і стероїди. Приклади протиракових речовин включають, без обмеження: ацивіцин; акларубіцин; акодазолу гідрохлорид; акронін; адозелезин; алдеслейкін; алтретамін; амбоміцин; аметантрону ацетат; амсакрин; анастрозол; антраміцин; аспарагіназа; асперлін; азацитидин; азетепа; азотоміцин; батимастат; бензодепа; бікалутамід; бізантрену гідрохлорид; біснафіду димезилат; бізелезин; блеоміцину сульфат; натрій бреквінар; бропіримін; бусульфан; кактиноміцин; калустерон; карацемід; карбетимер; карбоплатин; кармустин; карубіцину гідрохлорид; карзелезин; цедефінгол; целекоксиб (СОХ-2 інгібітор); хлорамбуцил; циролеміцин; цисплатин; кладрибін; криснатолу мезилат; циклофосфамід; цитарабін; дакарбазин; дактиноміцин; даунорубіцину гідрохлорид; децитабін; дексормаплатин; дезагуанін; дезагуаніну мезилат; діазиквон; доцетаксел; доксорубіцин; доксорубіцину гідрохлорид; дролоксифен; дролоксифену цитрат; дромостанолону пропіонат; діазоміцин; едатрексат; ефлорнітину гідрохлорид; елсамітруцин; енлоплатин; енпромат; епіпропідин; епірубіцину гідрохлорид; ербулозол; езорубіцину гідрохлорид; естрамустин; естрамустину фосфат натрію; етанідазол; етопозид; етопозиду фосфат; етоприн; фадрозолу гідрохлорид; фазарабін; фенретинід; флоксуридин; флударабіну фосфат; фторурацил; флуроцитабін; фоскуїдон; натрій фостріецин; гемцитабін; гемцитабіну гідрохлорид; гідроксисечовина; ідарубіцину гідрохлорид; іфосфамід; ілмофозин; іпроплатин; іринотекан; іринотекану гідрохлорид; ланреотиду ацетат; летрозол; леупроліду ацетат; ліарозолу гідрохлорид; натрій лометрексол; ломустин; лозоксантрону гідрохлорид; мазопрокол; майтанзин; мехлоретаміну гідрохлорид; мегестролу ацетат; меленгестролу ацетат; мелфалан; меногарил; меркаптопурин; метотрексат; натрій метотрексат; метоприн; метуредепа; мітиндомід; мітокарцин; мітокромін; мітогилін; мітомалцин; мітоміцин; мітоспер; мітотан; мітоксантрону гідрохлорид; мікофенолова кислота; нокодазол; ногаламіцин; ормаплатин; оксисуран; паклітаксел; пегаспаргаза; пеліоміцин; пентамустин; пепломуцину сульфат; перфосфамід; піпоброман; піпосульфан; піроксантрону гідрохлорид; плікаміцин; пломестан; натрій порфімер; порфіроміцин; преднімустин; прокарбазину гідрохлорид; 10 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 пуроміцин; пуроміцину гідрохлорид; піразофурин; рибоприн; сафінгол; сафінголу гідрохлорид; семустин; симтразен; натрій спарфозат; спарсоміцин; спірогерманію гідрохлорид; спіромустин; спіроплатин; стрептонігрин; стрептозоцин; сулофенур; талісоміцин; текогалан натрію; таксотер; тегафур; телоксантрону гідрохлорид; темопорфін; теніпозид; тероксирон; тестолактон; тіаміприн; тіогуанін; тіотепа; тіазофурин; тирапазамін; тореміфену цитрат; трестолона ацетат; трицирибіну фосфат; триметрексат; триметрексату глукуронат; трипторелін; тубулозолу гідрохлорид; урацилу іприт; уредепа; вапреотид; вертепорфін (VISUDYN™); фотодинамічна терапія вертепорфіном; вінбластину сульфат; вінкристину сульфат; віндезин; віндезину сульфат; вінепідину сульфат; вінгліцинату сульфат; вінлеурозину сульфат; вінорелбіну тартрат; вінрозидину сульфат; вінзолідину сульфат; ворозол; зенішіатин; зиностатин; і зорубіцину гідрохлорид. Інші протиракові лікарські засоби включають, без обмеження: 20-епі-1,25 дигідроксивітамін D3; 5-етинілурацил; абіратерон; акларубіцин; ацилфульвен; адеципенол; адозелезин; альдеслеукін; антагоністи ALL-TK; альтретамін; амбамустин; амідокс; аміфостин; амінолевулінова кислота; амрубіцин; амсакрин; анагрелід; анастрозол; андрографолід; інгібітори ангіогенезу; антагоніст D; антагоніст G; антарелікс; антидорзалізуючий морфогенетичний білок-1; антиандроген, карциному простати; антиестроген; антинеопластон; антисмислові олігонуклеотиди; афідиколіну гліцинат; генні модулятори апоптозу; регулятори апоптозу; апуринову кислоту; ara-CDP-DL-PTBA; аргініндеаміназу; асулакрин; атаместан; атримустин; аксинастатин 1; аксинастатин 2; аксинастатин 3; азасетрон; азатоксин; азатирозин; похідні бакатину III; баланол; батимастат; антагоністи BCR/ABL; бензохлорини; бензоїлстауроспорин; похідні бета-лактаму; бета-алетин; бетакламіцин У; бетулінову кислоту; інгібітор bFGF; бікалутамід; бісантрен; бісазиридинілспермін; біснафід; бістратен А; бізелезин; брефлат; бропіримін; будотитан; бутіоніну сульфоксимін; кальципотриол; калфостин С; похідні камптотецину; капецитабін; карбоксамід-аміно-триазол; карбоксіамідотриазол; CaRest М3, CARN 700; інгібітор, отриманий із хряща; карзелезин; інгібітори казеїнкінази (ICOS); кастаноспермін; цекропин В; цетрорелікс; хлорини; хлорхіноксаліну сульфонамід; цикапрост; цис-порфірин; кладрибін; аналоги кломіфену; клотримазол; колісміцин А; колісміцин В; комбретастатин А4; аналог комбретастатину; конагенін; крамбесцидин 816; криснатол; криптофіцин 8; похідні криптофіцину А; курацин А; циклопентантрахінони; циклоплатам; ципеміцин; цитарабина окфосфат; цитолітичний фактор; цитостатин; дакліксимаб; децитабін; дегідродидемнін В; деслорелін; дексаметазон; дексифосфамід; дексразоксан; дексверапаміл; діазихіон; дидемнін В; дидокс; діетилнорспермін; дигідро-5-азацитидин; дигідротаксол, 9-; діоксаміцин, дифенілспіромустин; доцетаксел; докозанол; доласетрон; доксифлуридин; доксорубіцин; дролоксифен; дронабінол; дуокарміцин SA; ебселен; екомустин; еделфозин; едреколомаб; ефлорнітин; елемен; емітефур; епірубіцин; епристерид; аналог естрамустину; агоністи естрогену; антагоністи естрогену; етанідазол; етопозиду фосфат; ексеместан; фадрозол; фазарабін; фенретинід; філграстим; фінастерид; флавопіридол; флезеластин; флуастерон; флударабін; фтордауноруніцину гідрохлорид; форфенімекс; форместан; фостріецин; фотемустин; гадоліню тексафірин; галію нітрат; галоцитабін; ганірелікс; інгібітори желатинази; гемцитабін; інгібітори глутатіону; гепсульфам; герегулін; гексаметилену бісацетамід; гіперицин; ібандронова кислота; ідарубіцин; ідоксифен; ідрамантон; ілмофозин; іломастат; іматиніб (наприклад, GLEEVEC®); іміхімод; імуностимулюючі пептиди; інгібітор рецептора інсуліноподібного ростового фактора 1; агоністи інтерферону; інтерферони; інтерлейкіни; іобенгуан; йододоксорубіцин; іпомеанол, 4-; іроплакт; ірсогладин; ізобенгазол; ізогомогалікондрин В; ітасетрон; джасплакінолід; кагалалід F; ламеларин-N триацетат; ланреотид; леїнаміцин; ленограстим; лентинану сульфат; лептолстатин; летрозол; фактор інгібування лейкозу; лейкоцитарний альфа-інтерферон; леупролід + естроген + прогестерон; леупрорелін; левамізол; ліарозол; аналог лінійного поліаміну; ліпофільний дисахаридний пептид; ліпофільні сполуки платини; лісоклінамід 7; лобаплатин; ломбрицин; лометрексол; лонідамін; лозоксантрон; локсорибін; луртотекан; лютецію тексафірин; лізофілін; літичні пептиди; майтанзин; маностатин А; маримастат; мазопрокол; маспін; інгібітори матрилізину; інгібітори матриксних металопротеїназ; меногарил; мербарон; метерелін; метіоніназу; метоклопрамід; інгібітор MIF; міфепристон; мілтефозин; міримостим; мітогуазон; мітолактол; аналоги мітоміцину; мітонафід; мітотоксин; фібробластний ростовий фактор - сапорин; мітоксантрон; мофаротен; молграмостим; ербітукс, хоріонічний гонадотропін людини; монофосфориловий ліпід А+мікобактеріальна клітинна стінка мікобактерій sk; мопідамол; іпритна протиракова речовина; мікапероксид В; екстракт мікобактеріальної клітинної стінки; міріапорон; N-ацетилдиналін; N-заміщені бензаміди; нафарелін; нагрестип; налоксон+пентазоцин; напавін; нафтерпін; нартограстим; недаплатин; неморубіцин; 11 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 неридронову кислоту; нілутамід; нізаміцин; модулятори оксиду азоту; нітроксильний 6 антиоксидант; нітрулін; облімерсен (GENASENSE®); О -бензилгуанін; октреотид; окиценон; олігонуклеотиди; онапристон; ондансетрон; орацин; індуктор цитокінів для перорального застосування; ормаплатин; озатерон; оксаліплатин (ELOXATN ); оксауноміцин; паклітаксел; аналоги паклітакселу; похідні паклітакселу; палауамін; пальмітоїлризоксин; памідронову кислоту; панакситриол; паноміфен; парабактин; пазеліптин; пегаспаргазу; пелдезин; пентосану полісульфат натрію; пентостатин; пентрозол; перфлуброн; перфосфамід; периліловий спирт; феназиноміцин; фенілацетат; інгібітори фосфатази; піцибаніл; пілокарпіну гідрохлорид; пірарубіцин; піритрексим; плацетин А; плацетин В; інгібітор активатора плазміногену; платиновий комплекс; сполуки платини; комплекс платина-триамін; порфімер натрію; порфіроміцин; преднізон; пропіл-біс-акридон; простагландин J2; інгібітори протеасоми; імунний модулятор на основі білка А; інгібітор протеїнкінази С; інгібітори протеїнкінази С; мікроалгал; білкові інгібітори тирозинфосфатази; інгібітори пуриннуклеозидфосфорилази; пурпурини; піразолоакридин; піридоксильований кон'югат гемоглобіну з поліоксіетиленом; антагоністи raf; ралтитрексед; рамосетрон; інгібітори фарнезилпротеїнтрансферази ras; інгібітори ras; інгібітор ras-GAP; деметилований ретелліптин; етидронат ренію Re 186; ризоксин; рибозими; ретинамід RII; рогітукін; ромуртид; рохінімекс; рубігінон В1; рубоксил; Сафінгол; саїнтопін; SarCNU; саркофітол А; сарграмостим; міметики Sdi 1; семустин; одержуваний при старінні інгібітор 1; смислові олігонуклеотиди; інгібітори сигнальної трансдукції; сизофіран; собузоксан; борокаптат натрію; фенілацетат натрію; солверол; білок, що зв'язує соматомедин; сонермін; спарфозиву кислоту; спікаміцин D; спіромустин; спленопентин; спонгістатин 1; скваламін; стипіамід; інгібітори стромелізину; сульфінозин; суперактивний антагоніст вазоактивного інтестинального пептиду; сурадиста; сурамін; сваїнсонін; талімустин; тамоксифену метйодид; тауромустин; тазаротен; натрій текогалан; тегафур; теллурапірилій; інгібітори теломерази; темопорфін; теніпозид; тетрахлородекаоксид; тетразомін; талібластин; тіокоралін; тромбопоетин; міметик тромбопоетину; тималфазин; агоніст рецептора тимопоетину; тимотринан; тироїд-стимулюючий гормон; олово-етил-етіопурпурин; тирапазамін; титаноцену біхлорид; топсентин; тореміфен; інгібітори трансляції; третиноїн; триацетилуридин; трицирибін; триметрексат; трипторелін; тропісетрон; туростерид; інгібітори тирозинкінази; тирфостини; інгібітори UBC; убенімекс; інгібіторний фактор росту урогенітального синуса; антагоністи рецептора урокінази; вапреотид; варіолін В; веларезол; верамін; вердини; вертепорфін; вінорелбін; вінксалтин; вітаксин; ворозол; занотерон; зеніплатин; зиласкорб; і зиностатинстималамер. Специфічні другі активні речовини включають, без обмеження, ритуксимаб, облімерсен (GENASENSE®), ремікад, доцетаксел (TAXOTERE®), целекоксиб, мелфалан, дексаметазон (DECADRON®), стероїди, гемцитабін, цисплатину, темозоломід, етопозид, циклофосфамід, темозоломід (TEMODAR®), карбоплатин, прокарбазин, гліадел, тамоксифен, топотекан, метотрексат, ARISA®, таксол, таксотер, фторурацил, 5-фторурацил, лейковорин, іринотекан, кселоду, СРТ-11, інтерферон альфа, пегільований інтерферон альфа (наприклад, PEG INTRON-A), капецитабін, цисплатин, тіотепу, флударабін, карбоплатин (PARAPLATIN®), ліпосомальний даунорубіцин, цитарабін, доксетаксол, паклітаксел, вінбластин, IL-2, GM-CSF, дакарбазин, вінорелбін, золедронову кислоту, палмітронат, біаксин, бусульфан, преднізон, бісфосфонат, триокис миш'яку, вінкристин, доксорубіцин (DOXIL®), паклітаксел (TAXOL®), ганцикловір, адріаміцин, естрамустину фосфат натрію (EMCYT®), суліндак і етопозид. У певних варіантах здійснення винаходу другою активною речовиною є етопозид, дауноміцин, актиноміцин D, мітоміцин С, цисплатин, карбоплатин, преметрексед, метотрексат, Ara-C, 5-Fu, вортманін, гемцитабін, гелданаміцин або їхня комбінація. 6.5 Комбінована терапія з другою активною речовиною У певних варіантах здійснення винаходу способи, наведені в даному документі, включають застосування CRF у комбінації з однією або декількома другими активними речовинами, і додатково в комбінації з променевою терапією або хірургічною операцією. CRF і другі активні речовини можуть застосовуватися пацієнтом одночасно або послідовно по однакових чи різних схемах введення лікарського препарату. Придатність певної схеми введення, застосовуваної для певної активної речовини, буде залежати від самої активної речовини (наприклад, чи може вона застосовуватися перорально без розпаду на складові до потрапляння в кровотік) і захворювання, що підлягає лікуванню. Рекомендовані схеми введення других активних речовин відомі фахівцям у даній галузі техніки. Див., наприклад, Physicians' Desk Reference, 1755-1760 th (56 ed., 2002). В одному варіанті здійснення винаходу другу активну речовину вводять внутрішньовенно або підшкірно й один або два рази на день у кількості, що знаходиться в діапазоні приблизно від 1 до приблизно 1000 мг, приблизно від 5 до приблизно 500 мг, приблизно від 10 до приблизно 12 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 375 мг, або приблизно від 50 до приблизно 200 мг. У певних варіантах здійснення винаходу другою активною речовиною є ритуксимаб, облімерсен (GENASENSE®), GM-CSF, G-CSF, ЕРО, таксотер, іринотекан, дакарбазин, трансретиноєва кислота, топотекан, пентоксифілін, ципрофлоксацин, дексаметазон, вінкристин, доксорубіцин, інгібітор СОХ-2, IL2, IL8, IL18, IFN, Ara-С, вінорелбін або їхня комбінація. У певних варіантах здійснення винаходу другою активною речовиною є етопозид, дауноміцин, актиноміцин D, мітоміцин С, цисплатин, карбоплатин, преметрексед, метотрексат, Ara-C, 5-Fu, вортманін, гелданаміцин, гемцитабін або їхня комбінація. В іншому варіанті здійснення винаходу в даному документі наведені способи лікування або менеджменту гемобластозів, що включають введення CRF в комбінації з (наприклад, до, під час або після) традиційними способами лікування, включаючи, без обмеження, хірургічну операцію, імунотерапію, біологічну терапію, променеву терапію або інші немедикаментозні способи лікування, використовувані в даний час для лікування або менеджменту раку. Не обмежуючись теорією, вважається, що CRF може чинити адитивну або синергічну дію при застосуванні з традиційними способами лікування. У певних варіантах здійснення винаходу друга активна речовина вводиться разом з CRF або вводиться з затримкою в 1-50 годин. У певних варіантах здійснення винаходу CRF вводиться першим з наступним застосуванням другої активної речовини з затримкою в 1-50 годин. У певних варіантах здійснення винаходу друга активна речовина вводиться першою з наступним застосуванням CRF із затримкою в 1-50 годин. У певних варіантах здійснення винаходу затримка складає 24 години. У певних варіантах здійснення винаходу CRF являє собою пегільований CRF. В одному варіанті здійснення винаходу CRF вводиться в кількості, що дорівнює від 1 мкг/кг до 1000 мкг/кг, від 1 мкг/кг до 100 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 80 мкг/кг, від 2 мкг/кг до 50 мкг/кг, від 4 мкг/кг до 40 мкг/кг, або від 5 мкг/кг до 20 мкг/кг, у вигляді єдиного препарату або в комбінації з другою активною речовиною, розглянутою у даному документі, до, під час або після використання традиційних способів лікування. У певних варіантах здійснення винаходу другою активною речовиною є темозоломід. У певних варіантах здійснення винаходу CRF являє собою пегільований CRF, і другою активною речовиною є темозоломід. У певних варіантах здійснення винаходу добова доза темозоломіду складає приблизно від 1 до приблизно 5000 мг, приблизно від 1 до приблизно 1000 мг, або приблизно від 10 до 500 мг на день. У певних варіантах здійснення винаходу добова доза темозоломіду складає приблизно 10 мг, приблизно 25 мг, приблизно 50 мг, приблизно 75 мг, приблизно 83 мг, приблизно 90 мг, приблизно 98 мг, приблизно 105 мг, приблизно 112 мг, приблизно 120 мг, приблизно 128 мг, приблизно 135 мг, приблизно 143 мг, приблизно 150 мг, приблизно 158 мг, приблизно 165 мг, приблизно 173 мг, приблизно 180 мг, приблизно 188 мг, приблизно 195 мг, приблизно 200 мг, приблизно 210 мг, приблизно 220 мг, приблизно 225 мг, приблизно 240 мг, приблизно 255 мг, приблизно 260 мг, приблизно 270 мг, приблизно 280 мг, приблизно 285 мг, приблизно 300 мг, приблизно 315 мг, приблизно 320 мг, приблизно 330 мг, приблизно 340 мг, приблизно 345 мг, приблизно 360 мг, приблизно 375 мг, приблизно 380 мг, приблизно 400 мг, приблизно 420 мг, приблизно 440 мг, приблизно 460 мг, приблизно 480 мг, або приблизно 500 мг. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід вводиться в кількості в діапазоні 2 2 приблизно від 10 до приблизно 500 мг/м /день, приблизно від 50 до приблизно 250 мг/м /день, 2 або приблизно від 75 до приблизно 200 мг/м /день. У певних варіантах здійснення винаходу 2 темозоломід вводиться в кількості, що дорівнює приблизно 10 мг/м /день, приблизно 20 2 2 2 2 мг/м /день, приблизно 30 мг/м /день, приблизно 40 мг/м /день, приблизно 50 мг/м /день, 2 2 2 приблизно 75 мг/м /день, приблизно 100 мг/м /день, приблизно 125 мг/м /день, приблизно 150 2 2 2 мг/м /день, приблизно 175 мг/м /день, або приблизно 200 мг/м /день. Доза, що вводиться, може також бути виражена в одиницях, що відрізняються від 2 мг/м /день. Наприклад, дози для парентерального застосування можуть бути виражені у вигляді 2 мг/кг/день. Будь-який фахівець у даній галузі техніки без труднощів перерахує дози з мг/м /день у мг/кг/день, з огляду на або зріст, або вагу суб'єкта, або те й інше (див., www, fda. gov/cder/cancer/animalframe.htm). У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід вводиться циклічно. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід застосовують щодня однократно або роздільними дозами протягом п'яти днів, одного тижня, двох тижнів, трьох тижнів, чотирьох тижнів, п'яти тижнів, шести тижнів, восьми тижнів, десяти тижнів, п'ятнадцяти тижнів або двадцяти тижнів з наступною перервою приблизно від 1 дня до приблизно десяти тижнів. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід застосовують щодня однократно або роздільними дозами 13 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 протягом п'яти днів, одного тижня, двох тижнів, трьох тижнів, чотирьох тижнів, п'яти тижнів, шести тижнів або восьми тижнів з перервою в 1, 3, 5, 7, 9, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 23, 24, 25, 26, 28, 29 або 30 днів. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату складає 7 днів. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату складає 14 днів. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату складає 23 дні. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату являє собою період часу, достатній для відновлення клітинного складу кісткового мозку. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату являє собою період часу, достатній для відновлення нейтрофілів. У певних варіантах здійснення винаходу перерва у вживанні лікарського препарату являє собою період часу, достатній для відновлення тромбоцитів. Частота, кількість і тривалість циклів дозування можуть бути збільшені або зменшені. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід застосовують щодня протягом чотирьох тижнів з наступними шістьма циклами підтримуючого лікування. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід у 1 циклі застосовують один раз на день протягом п'яти днів з наступною перервою в двадцять три (23) дні. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід у кожному з циклів з 2 по 6 застосовують один раз на день протягом п'яти днів з наступною перервою, достатньою для відновлення нейтрофілів і тромбоцитів. У певних варіантах здійснення винаходу кожний з циклів з 2 по 6 починається, коли абсолютне число 9 9 нейтрофілів (ANC) перевищує 1,5х10 /л і кількість тромбоцитів перевищує 100х10 /л. У певних варіантах здійснення винаходу застосування темозоломіду під час циклів з 1 по 6 може бути 9 9 перерване, якщо ANC нижче 1x10 /л або число тромбоцитів нижче 50x10 /л. Дозування в кожному циклі може бути збільшене або зменшене. У певних варіантах здійснення винаходу темозоломід застосовують перорально в кількості 2 75 мг/м щодня протягом 42 днів одночасно з 400 фокальною променевою терапією (60 Гр, що призначаються у вигляді 30 фракцій) з наступним підтримуючим лікуванням. Через чотири тижні після завершення лікування темозоломідом і променевої терапії темозоломід застосовують протягом додаткових 6 циклів підтримуючого лікування. У 1 циклі темозоломід застосовують у 2 кількості 150 мг/м один раз на день протягом 5 днів, за якими ідуть 23 дні без лікування. На 2 початку 2 циклу дозу підвищують до 200 мг/м , якщо загальний критерій токсичності (СТС) негематологічної токсичності за 1 цикл не вище 2 ступеня (за винятком алопеції, нудоти і 9 блювання), абсолютне число нейтрофілів (ANC) не менше 1,5х10 /л і число тромбоцитів не 9 2 менше 100х10 /л. Доза залишається в кількості 200 мг/м на день протягом перших 5 днів кожного наступного циклу за винятком випадків, коли має місце токсичність. Якщо доза не була підвищена в 2 циклі, не слід піднімати дозу в наступних циклах. У певних варіантах здійснення винаходу добову дозу темозоломіду коректують в залежності від числа нейтрофілів і тромбоцитів. В іншому варіанті здійснення винаходу способи, наведені в даному документі, включають: а) введення пацієнту, що цього потребує, дози в кількості приблизно від 1мг до 20 мг CRF і b) введення терапевтично ефективної кількості препарату симптоматичної терапії. Термін «препарат симптоматичної терапії» стосується будь-якої речовини, що чинить лікувальний вплив, запобігає або контролює побічну дію від терапії CRF. Препарат симптоматичної терапії являє собою будь-яку речовину, що чинить лікувальний вплив, запобігає або контролює побічну дію від терапії CRF, і його вводять згідно з придатною схемою дозування для цієї речовини. Наприклад, різні препарати симптоматичної терапії для лікування нудоти мають різні схеми дозування. Хоча деякі з них вводять профілактично, інші вводять разом з CRF, a треті вводять після застосування CRF. Наочні приклади препаратів симптоматичної терапії, їхньої дози і схеми дозування можна знайти в настільній довідковій літературі лікаря. 6.6 Фармацевтичні композиції і лікарські форми У способах, наведених у даному документі, використовують фармацевтичні композиції, що містять CRF і фармацевтично прийнятні носії, такі як розріджувачі або ад'юванти, або в комбінації з іншими активними інгредієнтами, такими як інший протираковий засіб. У клінічній практиці CRF можна застосовувати будь-яким загальноприйнятим способом, включаючи, без обмеження, пероральний, парентеральний, ректальний або інгаляційний (наприклад, у формі аерозолів) способи. В одному варіанті здійснення винаходу CRF вводять у вигляді підшкірної ін'єкції. В іншому варіанті здійснення винаходу CRF вводять у вигляді в/в ін'єкції. В одному варіанті здійснення винаходу в способах, наведених у даному документі, використовують фармацевтичні композиції, що містять кортикореліну ацетат як активний інгредієнт, що підлягає застосуванню згідно зі способами, описаними в даному документі. 14 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Кортикореліну ацетат може бути в складі композиції разом з фармацевтично прийнятним носієм. Фармацевтичні композиції даного опису винаходу можуть набувати форми розчинів, суспензій, емульсій, що включають кортикореліну ацетат і фармацевтично прийнятний розріджувач, ад'ювант або носій. У певних варіантах здійснення фармацевтичні композиції даного винаходу складені для підшкірної болюсної ін'єкції. В іншому варіанті здійснення винаходу в способах, наведених у даному документі, використовують фармацевтичні композиції, що містять кортикореліну ацетат, складені для підшкірної ін'єкції, призначеної для лікування пухлин. У певних варіантах здійснення винаходу застосування підшкірних композицій кортикореліну ацетату може забезпечувати менш часте введення кортикореліну ацетату, ніж застосування інших, таких, що відрізняються від підшкірних, композицій кортикореліну ацетату. Менш часте введення кортикореліну ацетату може забезпечувати більшу прихильність пацієнта. Крім того, в інших варіантах здійснення винаходу застосування підшкірних композицій кортикореліну ацетату може забезпечувати меншу кількість побічних ефектів, зв'язаних із застосуванням композицій кортикореліну ацетату, що відрізняються від підшкірних. У певних варіантах здійснення винаходу в даному документі наведені способи запобігання прогресування пухлини в пацієнта шляхом введення фармацевтичних композицій, що містять кон'югат CRF як активний інгредієнт. Кон'югат CRF може входити до складу композиції разом з фармацевтично прийнятним носієм. Завдяки збільшеному часу напівжиття кон'югату CRF, фармацевтичні композиції можуть містити більш низькі дози CRF. Фармацевтичні композиції даного опису винаходу можуть набувати форми розчинів, суспензій, емульсій, що включають кон'югат CRF, такий як хімічно модифікований поліетиленгліколем CRF, і фармацевтично прийнятний розріджувач, ад'ювант або носій в залежності від способу застосування. Композиції для парентерального застосування можуть бути емульсіями або стерильними розчинами. Застосування можна здійснювати у вигляді розчинника або наповнювача з пропіленгліколю, поліетиленгліколю, рослинних олій, зокрема, маслинової олії, або органічних складних ефірів, що вводять ін'єкцією, наприклад, етилолеату. Ці композиції можуть також містити ад'юванти, зокрема, зволожувальні, ізотонуючі, емульгуючі, диспергуючі і стабілізуючі речовини. Стерилізація може бути виконана декількома способами, наприклад, використовуючи бактеріологічний фільтр, за допомогою опромінення або нагрівання. Вони також можуть бути приготовлені у формі стерильних твердих композицій, що можуть бути розчинені безпосередньо перед застосуванням у стерильній воді або будь-якому іншому стерильному середовищі, що вводиться ін'єкцією. Композиції також можуть являти собою аерозолі. Для використання у формі рідких аерозолів композиції можуть являти собою стабільні стерильні розчини або тверді композиції, що розчиняються безпосередньо перед застосуванням в апірогенній стерильній воді, у сольовому розчині або будь-якому іншому фармацевтично прийнятному наповнювачі. Для використання у формі сухих аерозолів, призначених для безпосередніх інгаляцій, активний компонент тонко подрібнюють і поєднують з водорозчинним твердим розріджувачем або наповнювачем, наприклад, декстраном, манітом або лактозою. Фармацевтичні композиції можуть бути використані в приготуванні індивідуальних дозованих лікарських форм для однократного введення. Фармацевтичні композиції і лікарські форми включають CRF і один або декілька ексципієнтів. Фармацевтичні композиції і лікарські форми можуть також включати один або декілька додаткових активних інгредієнтів. Приклади необов'язкових другорядних, або додаткових, активних інгредієнтів розглянуті в даному документі. У певних варіантах здійснення винаходу композиція, наведена у даному документі, являє собою фармацевтичну композицію або дозовану лікарську форму для однократного введення. Фармацевтичні композиції і дозовані лікарські форми для однократного введення, наведені в даному документі, включають профілактично або терапевтично ефективну кількість CRF і, як правило, один або декілька фармацевтично прийнятних носіїв або ексципієнтів. Термін «носій» стосується розріджувача, ад'юванта (наприклад, ад'юванта Фрейнда (повного і неповного)), ексципієнта або наповнювача, з яким вводиться терапевтичний засіб. Такі фармацевтичні носії можуть бути стерильними рідинами, такими як вода й олії, у тому числі нафтового, тваринного, рослинного або штучного походження, такі як арахісова олія, соєва олія, мінеральна олія, кунжутна олія і т. п. У певних варіантах здійснення винаходу вода є носієм у випадку, коли фармацевтичну композицію вводять внутрішньовенно. Сольові розчини і водні розчини декстрози і гліцерину можуть також бути використані як рідкі носії, зокрема для розчинів, що вводяться ін'єкцією. Приклади придатних фармацевтичних носіїв описані в "ReMington's Pharmaceutical Sciences" у E.W. Martin. 15 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Стандартні фармацевтичні композиції і лікарські форми включають один або декілька ексципієнтів. Придатні ексципієнти добре відомі фахівцям в галузі фармацевтики, а необмежувальні приклади придатних ексципієнтів включають крохмаль, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, борошно, крейду, силікагель, стеарат натрію, моностеарат гліцерину, тальк, хлорид натрію, сухе знежирене молоко, гліцерин, пропілен, гліколь, воду, етанол і т. п. Чи підходить конкретний ексципієнт для включення у фармацевтичну композицію або лікарську форму, залежить від безлічі факторів, добре відомих у даній галузі техніки, включаючи, без обмеження, спосіб застосування лікарської форми суб'єктом і специфічні активні інгредієнти в лікарській формі. При бажанні, композиція або дозована лікарська форма для однократного введення, можуть також містити незначні кількості зволожувальних або емульгуючих речовин або буферуючих рН речовин. Додатково в даному документі наводяться фармацевтичні композиції і лікарські форми, що включають одну або декілька сполук, що знижують швидкість, з якою активний інгредієнт руйнується. Такі сполуки, що позначені в даному документі як "стабілізатори", включають, без обмеження, антиоксиданти, такі як аскорбінова кислота, рН-буфери або сольові буфери. Фармацевтичні композиції і дозована лікарська форма для однократного введення можуть набувати форми розчинів, суспензій, емульсій, порошків і т. п. Такі композиції і лікарські форми містять профілактично або терапевтично ефективну кількість профілактичного або терапевтичного засобу, у певних варіантах здійснення винаходу в очищеній формі, разом із придатною кількістю носія, щоб забезпечити форму для належного введення суб'єкту. Композиція повинна відповідати способу застосування. В одному варіанті здійснення винаходу фармацевтичні композиції або дозовані лікарські форми для однократного введення є стерильними і знаходяться в придатній формі для застосування суб'єктом, таким як тварина, або ссавець, і таким як людина. Фармацевтичну композицію, наведену в даному документі, створюють так, щоб бути сумісною з призначеним способом застосування. Приклади способів застосування включають, без обмеження, парентеральне, наприклад, внутрішньовенне, внутрішньошкірне, підшкірне, внутрішньом'язове, інгаляційне, інтраназальне, трансдермальне, місцеве, трансмукозальне, внутрішньопухлинне, внутрішньосиновіальне і ректальне застосування. У конкретному варіанті здійснення винаходу композицію створюють у відповідності зі стандартними процедурами, щоб фармацевтична композиція була адаптована для внутрішньовенного, підшкірного, внутрішньом'язового, інтраназального або місцевого застосування людьми. У варіанті здійснення винаходу фармацевтичну композицію створюють у відповідності зі стандартними процедурами для підшкірного застосування людьми. Як правило, композиції для внутрішньовенного застосування являють собою розчини в стерильному ізотонічному водному буфері. Коли необхідно, композиція може також включати розчинник і місцевий анестетик, такий як лігнокаїн для зменшення болю в ділянці ін'єкції. Приклади лікарських форм включають, без обмеження: рідкі лікарські форми, придатні для парентерального застосування суб'єктом; і стерильні тверді речовини (наприклад, кристалічні або аморфні тверді речовини), що можуть бути ресуспендовані для одержання рідких лікарських форм, придатних для парентерального застосування суб'єктом. Композиція, форма і тип лікарських форм, наведених у даному документі, як правило, варіює в залежності від їхнього застосування. Наприклад, лікарська форма, застосовувана при стартовому лікуванні захворювання, може містити більші кількості одного або декількох активних інгредієнтів, що містяться в ній, ніж лікарська форма, застосовувана при підтримуючому лікуванні тієї ж інфекції. Подібним чином, парентеральна лікарська форма може містити менші кількості одного або декількох активних інгредієнтів, що містяться в ній, ніж пероральна лікарська форма, застосовувана для лікування того ж захворювання або порушення. Ці й інші особливості, по яких конкретні лікарські форми, розглянуті в даному документі, відрізняються один від іншого, легко зрозумілі фахівцям у даній галузі техніки. Див., наприклад, ReMington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing, Easton PA (2000). Як правило, інгредієнти композицій, наведені в даному документі, поставляють або окремо, або змішаними разом у дозованій лікарській формі для однократного введення, наприклад, у вигляді сухого ліофілізованого порошку або безводного концентрату в герметично закритому контейнері, такому як ампула або саше, із вказівкою кількості активної речовини. У випадку, коли композиція підлягає застосуванню за допомогою інфузії, її можна помістити у флакон для інфузій, що містить фармацевтичної якості стерильну воду або сольовий розчин. У випадку, коли композиція підлягає застосуванню за допомогою ін'єкції, може бути надана ампула зі стерильною водою для ін'єкції або сольовим розчином так, щоб інгредієнти можна було змішати до застосування. 16 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Фармацевтичні композиції CRF можуть бути складені для забезпечення терапевтичною дозою кортикореліну ацетату· У певних варіантах здійснення винаходу доза кортикореліну ацетату, що міститься у фармацевтичній композиції, може знаходитися в діапазоні від 1 мг до 20 мг. В іншому варіанті здійснення винаходу доза CRF, що міститься у фармацевтичній композиції, може знаходитися в діапазоні від 1 мкг до 10 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRF може знаходитися в діапазоні від 0,1 мг до 5 мг або від 0,3 мг до 2 мг. У певних варіантах здійснення винаходу доза CRF може складати приблизно 0,3 мг, приблизно 0,5 мг, приблизно 1 мг, приблизно 2,5 мг, приблизно 4 мг або приблизно 5 мг. У певних варіантах здійснення винаходу загальна добова доза CRF може складати від 4 мг до 10 мг. Наприклад, загальна добова доза CRF може складати приблизно 1 мг, приблизно 2 мг, приблизно 4 мг, приблизно 6 мг, приблизно 8 мг, приблизно 10 мг, приблизно 12 мг, приблизно 15 мг, приблизно 17 мг або приблизно 20 мг. Дози можуть бути визначені методами, відомими в даній галузі техніки, і фармацевтичні композиції даного опису винаходи можуть бути введені окремо або в комбінації для запобігання прогресування пухлини. 6.6.1 Парентеральні лікарські форми Парентеральні лікарські форми можуть застосовуватися пацієнтами різними способами, включаючи, без обмеження, підшкірні, внутрішньовенні (включаючи болюсні ін'єкції), внутрішньом'язові і внутрішньоартеріальні. Оскільки їхнє застосування, як правило, минає природний захист пацієнта від забруднюючих речовин, парентеральні лікарські форми переважно є стерильними або такими, що підлягають стерилізації до введення пацієнту. Приклади парентеральних лікарських форм включають, без обмеження, готові для ін'єкції розчини, сухі продукти, готові до розчинення або суспендування у фармацевтично прийнятному наповнювачі для ін'єкції, готові для ін'єкції суспензії й емульсії. Придатні наповнювачі, що можуть бути використані для одержання парентеральних лікарських форм, добре відомі фахівцям у даній галузі техніки. Приклади включають, без обмеження: воду для ін'єкцій USP; водні наповнювачі, такі як, без обмеження, фізіологічний розчин для ін'єкцій, розчин Рінгера для ін'єкцій, декстроза для ін'єкцій, декстроза і фізіологічний розчин для ін'єкцій, і розчин Рінгера з лактатом для ін'єкцій; наповнювачі, що змішуються з водою, такі як, без обмеження, етиловий спирт, поліетиленгліколь і поліпропіленгліколь; і неводні наповнювачі, такі як, без обмеження, кукурудзяна олія, бавовняна олія, арахісова олія, кунжутна олія, етил олеат, ізопропілміристат і бензилбензоат. Сполуки, що збільшують розчинність одного або декількох активних інгредієнтів, розглянутих у даному документі, також можуть бути включені в парентеральні лікарські форми. Наприклад, циклодекстрин і його похідні можуть бути використані для збільшення розчинності активних інгредієнтів. Див., наприклад, патент США № 5134127, включений у даний документ як посилання. 6.6.2 Лікарські форми для застосування місцево, трансдермально і через слизову оболонку У певних варіантах здійснення винаходу в даному документі наведені лікарські форми для застосування місцево, трансдермально і через слизову оболонку. Лікарські форми для застосування місцево, трансдермально і через слизову оболонку, наведені в даному документі, включають, без обмеження, офтальмологічні розчини, спреї, аерозолі, креми, лосьйони, мазі, гелі, розчини, емульсії, суспензії або інші форми, відомі фахівцю в даній галузі техніки. Див., наприклад, ReMington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing, Easton PA (2000) і Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th ed., Lea & Febiger, Philadelphia (1985). Лікарські форми, придатні для лікування слизових тканин у межах ротової порожнини, можуть бути створені у вигляді рідин для полоскання рота або у вигляді пероральних гелів. Крім того, лікарські форми для трансдермального застосування включають пластири "резервуарного типу" або "матричного типу", які можна прикладати до шкіри і носити протягом певного періоду часу для забезпечення проникнення бажаної кількості активних інгредієнтів. Придатні ексципієнти (наприклад, носії і розріджувачі) і інші речовини, які можна використовувати для одержання лікарських форм для застосування місцево і через слизову оболонку, розглянутих у даному документі, добре відомі фахівцям у фармацевтичній галузі, і залежать від конкретної тканини, для якої застосовують дану фармацевтичну композицію або лікарську форму. Маючи на увазі цей факт, типові ексципієнти включають, без обмеження, воду, ацетон, етанол, етиленгліколь, пропіленгліколь, бутан-1,3-діол, ізопропілміристат, ізопропілпальмітат, мінеральне масло і їхні суміші для одержання розчинів, емульсій або гелів, що є нетоксичними і фармацевтично прийнятними. При бажанні у фармацевтичні композиції і лікарські форми також можна додавати зволожувачі або змочувальні. Приклади таких додаткових інгредієнтів добре відомі в даній галузі техніки. Див., наприклад, ReMington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing, Easton PA (2000). 17 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 З метою поліпшення доставки одного або декількох активних інгредієнтів можна регулювати рН фармацевтичної композиції або лікарської форми. Подібним чином, для поліпшення доставки можна регулювати полярність носія розчинника, його іонну силу або тонічність. Сполуки, такі як стеарати, можуть бути також додані у фармацевтичні композиції або лікарські форми для кращої зміни гідрофільності або ліпофільності одного або декількох активних інгредієнтів з метою поліпшення доставки. У цьому відношенні стеарати можуть служити як ліпідний наповнювач для композиції, як емульгуючий засіб або поверхнево-активна речовина і як засіб, що поліпшує доставку або поліпшує всмоктування засобу. Для додаткового регулювання властивостей створюваної композиції можна використовувати різні солі, гідрати або сольвати активних інгредієнтів. 6.1 Способи моніторингу пухлин У певних варіантах здійснення винаходу можна здійснювати моніторинг/оцінку пухлин і прогресування пухлини, використовуючи стандартні методи, відомі фахівцю в даній галузі техніки. У певних варіантах здійснення терапевтично ефективних схем лікування відповідно до винаходу схеми лікування приводять до стабілізації розміру/об'єму пухлини або зменшенню прогресування пухлини. В одному варіанті здійснення винаходу здійснюють спостереження за суб'єктом, що проходить схему лікування, з метою визначення, чи привела дана схема лікування до стабілізації розміру/об'єму пухлини або зменшенню прогресування пухлини. У деяких варіантах здійснення винаходу проводять моніторинг прогресування пухлини до, під час або після початку лікування CRF. У певних варіантах здійснення винаходу прогресування пухлини оцінюється в суб'єкта або в зразку, узятому в суб'єкта щонайменше через 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 15, 16, 18, 20 або 30, 60, 90 днів, 6 місяців, 9 місяців, 12 місяців, >12 місяців після початку виконання схеми лікування суб'єкта. У певних варіантах здійснення винаходу прогресування пухлини оцінюється після одержання суб'єктом декількох доз терапії (наприклад, після 1, 2, 5, 10, 20, 30 або більше доз терапії). В інших варіантах здійснення винаходу прогресування пухлини оцінюється через 2 тижні, 1 місяць, 2 місяці, 1 рік, 2 роки, 3 роки, 4 роки або більше після проходження одного або декількох лікувань. Прогресування пухлини може бути виміряне для оцінки ефективності схеми лікування. В одному варіанті здійснення винаходу зразком порівняння є зразок, узятий у суб'єкта, що проходить лікування, у більш ранню часову точку (наприклад, до виконання схеми лікування як вихідний зразок порівняння, або в більш ранню часову точку при одержанні терапії). У цьому варіанті здійснення винаходу терапія, як очікується, приводить до зменшення прогресування пухлини в аналізованому зразку при порівнянні зі зразком порівняння. В іншому варіанті здійснення винаходу зразок порівняння одержують у здорового суб'єкта, у якого не виявляють рак, або в пацієнта, що знаходиться в стадії ремісії з таким же типом раку. Можна здійснювати моніторинг/оцінку прогресування пухлини, використовуючи стандартні методи, відомі фахівцю в даній галузі техніки. Кілька відомих методів може бути використане для оцінки об'ємного розміру пухлини. Необмежувальні приклади таких методів включають методи побудови зображень (наприклад, комп'ютерну томографію (КТ), магнітно-резонансну томографію (МРТ), зображення, отримані при позитронно-емісійній томографії (ПЕТ), пальпітацію, пряме вимірювання (наприклад, за допомогою лінійки), ультразвук, рентгенографію, мамографію, остеосцинтиграфію і сцинтиграфічне дослідження), методи візуалізації (наприклад, колоноскопію, бронхоскопію і ендоскопію), фізикальне обстеження (наприклад, дослідження простати, дослідження молочних залоз, дослідження лімфатичних вузлів, дослідження органів черевної порожнини, загальну пальпацію), аналізи крові (наприклад, аналіз на специфічний антиген простати (PSA), аналіз на карциноембріональний антиген (СЕА), аналіз на раковий антиген (СА)-125, аналіз на альфа-фетопротеїн (AFP)), аналізи кісткового мозку (наприклад, у випадку гемобластозів), гістопатологію, цитологію і проточну цитометрію. У деяких варіантах здійснення винаходу об'ємний розмір пухлини може бути виміряний за допомогою оцінки, заснованої на розмірі пухлинних вогнищ, установленого методами побудови зображень. У конкретних варіантах здійснення винаходу оцінка виконується відповідно до посібників із критеріїв оцінки відповіді солідних пухлин на терапію (RECIST), що викладені в Therasse et al. (J. Nat. Cane. Inst. 2000, 92(3), 205-216). Наприклад, у конкретних варіантах здійснення винаходу пухлинні вогнища в суб'єкта, що є репрезентативними для об'ємного розміру пухлини, вибираються таким чином, щоб вони мали щонайменше 20 мм у своєму найдовшому діаметрі на вихідному рівні (до лікування) при використанні стандартних методів побудови зображення (наприклад, стандартної КТ, МРТ або рентгенограми), і варто вибирати пухлинні вогнища, що мають щонайменше 10 мм у своєму найдовшому діаметрі на вихідному рівні при використанні спірального КТ-сканування. 18 UA 102098 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Приклад Доклінічні дослідження Цей приклад демонструє, що миші, що мають пухлину головного мозку, і яким уводили високу дозу CRF, тобто 100 мкг/кг підшкірно двічі на день, живуть довше, ніж неліковані контрольні миші або миші, що одержували лікування хіміотерапевтичним засобом або, яким уводили дексаметазон. Результати були отримані на мишах SCID, що мають пухлини головного мозку, утворені шляхом ін'єкції клітинної лінії U87 Flue гліобластоми людини. Клітинна лінія U87 Flue була отримана шляхом стабільної трансдукції клітин U87 лентівірусним конструктом, що містить ген luc. Усі миші, що мають пухлину головного мозку, яким була уведена висока доза CRF, вижили протягом усього 80-денного періоду дослідження і здавалися здоровими за весь період часу. Подібним чином, миші, що одержували низьку дозу CRF, жили довше, ніж миші, яких не лікували або яким був уведений дексаметазон або хіміотерапевтичні засоби (BiCNU або TMZ). До кінця 80-денного періоду дослідження 60% мишей, яких лікували низькою дозою CRF, усе ще залишалися живі, у той час як миші, що одержували лікування дексаметазоном, померли (фіг. 1). Усі миші, що не одержували ніякого лікування, і більшість мишей, яким були введені хіміотерапевтичні засоби, підлягали евтаназії перед закінченням 80-денного періоду дослідження (фіг. 2). Наприклад, тільки 40% мишей, що лікувалися TMZ, залишалися живими до кінця 80-денного періоду дослідження. Миші, яким була введена низька доза CRF, мали середній час виживання, що займає проміжне значення між таким у мишей, яким була введена висока доза CRF, і в мишей, що не одержували ніякого лікування або яким був уведений дексаметазон. Пухлини головного мозку в мишей, яким була уведена висока доза CRF, не прогресували протягом 80-денного періоду дослідження, і розмір пухлини, як виявилося, залишався відносно сталим відповідно до результатів зображення люмінесценції (фіг.3). Подібним чином, пухлини головного мозку в мишей, яким була введена низька доза CRF, не прогресували або прогресували більш повільно (фіг.4). Навпроти, пухлини головного мозку в мишей, що одержував високі дози дексаметазону, безупинно прогресували з часом (фіг.5). Пухлини головного мозку в мишей, яким був введений BiCNU, також продовжували рости, і пухлини, як виявилося, не відповідали бажаним чином на лікування BiCNU (фіг.6). Пухлини головного мозку у всіх мишей, крім однієї, котрим був уведений TMZ, відповідали на лікування (фіг.7). Однак пухлини, як виявилося, періодично збільшувалися в розмірі на противагу результатам спостережень за мишами з пухлиною головного мозку, що лікувалися високими дозами CRF, де розмір пухлини залишався відносно сталим (фіг.3). Відповідь на хіміотерапію прямо корелювала з пухлинним ростом, визначеним фотонним випромінюванням. Миші, що лікувалися TMZ, мали більше значення середнього часу виживання, ніж таке в мишей, що лікувалися BiCNU (фіг.2). Подібним чином, у мишей, яким була уведена висока доза CRF, не було виявлене прогресування пухлини за даними фотонного випромінювання, і вони залишалися здоровими протягом 80-денного періоду дослідження. Клінічні дослідження Цей приклад демонструє, що в хворих раком, які лікувалися CRF протягом 3-6 місяців або довше, спостерігаються значні поліпшення в припиненні прогресування пухлини й у виживаності. Пацієнти, що мають злоякісну пухлину головного мозку, проходили лікування 2 мг на день (доза в 1 мг, два рази на день) людським CRF підшкірно. У пацієнтів, що одержували CRF, або зберігався розмір пухлини, або спостерігалося зменшення розміру пухлини при порівнянні з контрольними пацієнтами (фіг.8). Зокрема, з 20 пацієнтів, що одержують CRP, дані по яких представлені на фігурі 8, у 6 пацієнтів спостерігалося зменшення розміру пухлини, у той час як у 5 пацієнтів розмір пухлини не змінювався. Важливо відзначити, що в 3 з 20 пацієнтів, дані по яких представлені на фігурі, спостерігали зменшення розміру пухлини більш, ніж на 50% після 9 місяців лікування CRF. При цьому з 10 пацієнтів, що одержували CRF, дані по яких представлені на фігурі 9, у 8 спостерігалося зменшення розміру пухлини в останній точці вимірювання. Важливо, що з усіх пацієнтів у двох спостерігалося зменшення розміру пухлини приблизно на 90%. Крім того, з 30 пацієнтів, хто одержували лікування протягом щонайменше 6 місяців, у 10 спостерігали зменшення розміру пухлини. Більш того, пацієнти, що одержували CRF, мали пролонговану виживаність. Як правило, не передбачається, що в пацієнтів, включених у ці дослідження, виживаність складе більше 3-6 місяців. Як показано на фігурах 8 і 9, у переважної більшості пацієнтів, що одержують CRF, 19 UA 102098 C2 5 10 15 20 немає проблем зі здоров'ям протягом періоду часу, що перевищує 3-6 місяців, де навіть у деяких виживаність складає 1-2 роки після лікування CRF. Зокрема, у пацієнтів з метастазуючою пухлиною відзначалася дуже позитивна відповідь на лікування CRF. З 3 пацієнтів з метастазуючою пухлиною, що одержували CRF, дані по яких представлені на фігурі 10, у 2 спостерігали зменшення розміру пухлини в останній точці вимірювання, і у всіх 3 виживаність склала вище передбачуваних 3-6 місяців. 8. Еквіваленти Даний опис винаходу не підлягає обмеженню в об'ємі описаними конкретними варіантами здійснення винаходу, що розглядаються як узяті окремо ілюстрації індивідуальних аспектів опису винаходу, і функціонально еквівалентні способи і компоненти знаходяться в рамках опису винаходу. Дійсно, різні модифікації опису винаходу на додаток до тих, що показані й описані в даному документі, будуть зрозумілі фахівцям у даній галузі техніки з вищевикладеного опису винаходу і прикладених фігур, використовуючи не більш, ніж стандартне проведення експериментів. Передбачається, що такі модифікації й еквіваленти підпадають під дію прикладеної формули винаходу. Усі публікації, патенти і патентні заявки, що цитуються в даному описі, включені при цьому як посилання так, ніби кожна окрема публікація, патент або патентна заявка були конкретно й індивідуально зазначені для включення в даний документ як посилання. Цитування або обговорення посилання при цьому не повинне тлумачитися як визнання того, що таке є рівнем техніки, що передує даному опису винаходу. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ TM 25 30 35 40 1. Застосування комбінації кортикотропін-рилізинг фактора (CRF) з бевацизумабом (AVASTIN ) для запобігання прогресуванню пухлини в людини, де комбінацію, яка включає CRF, вводять більше трьох днів у дозі, ефективній для інгібування прогресуваня пухлини, людині, що потенційно має пухлину, де пухлина являє собою рак молочної залози, рак товстої кишки або рак головного мозку. 2. Застосування за п. 1, де пухлина являє собою пухлину головного мозку, вибрану з метастатичної пухлини головного мозку, гліобластоми, гліоми, епендимоми, астроцитоми, медулобластоми, нейрогліоми, олігодендрогліоми і менінгіоми. 3. Застосування за п. 1, яке додатково включає моніторинг прогресування пухлини в людини. 4. Застосування за п. 1, де CRF являє собою CRF людини. 5. Застосування за п. 1, де CRF вводять підшкірно або внутрішньовенно. TM 6. Застосування за п. 1, де бевацизумаб (AVASTIN ) вводять внутрішньовенно або підшкірно один або два рази на день в кількості від 1 до 1000 мг. 7. Застосування за п. 1, де доза CRF становить від 1 мкг/кг до 100 мкг/кг. 8. Застосування за п. 1, де загальна добова доза CRF становить від 0,1 мг до 5 мг, така як приблизно 1 мг. TM 9. Застосування за п. 1, де вказаний CRF і вказаний бевацизумаб (AVASTIN ) вводять одночасно, паралельно або послідовно без визначених часових обмежень. 10. Застосування за п. 1, де CRF вводять два рази на день. 11. Застосування за п. 1, де CRF вводять людині протягом одного місяця або більше. 20 UA 102098 C2 21 UA 102098 C2 22 UA 102098 C2 23 UA 102098 C2 24 UA 102098 C2 25 UA 102098 C2 26 UA 102098 C2 Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 27