Спосіб активізації синтезу резвератролу в листках винограду (vitis vinifera l.) в культурі in vitro

Реферат: Спосіб активізації синтезу резвератролу в листках винограду (Vitis vinifera L.) в культурі in vitro включає додавання комплексу мікроелементів та органічних кислот, що активізує синтез резвератролу. Асептичну культуру винограду вирощують протягом 10 діб в умовах in vitro при 16 годинному фотоперіоді і температурі 26±2 °C на базовому безгормональному живильному середовищі за прописом Мурасиге-Скуга (МС) з додаванням 2 г/л активованого вугілля та 190 мкг/л 3-метокси-4-гідроксикоричної кислоти. UA 115376 U (12) UA 115376 U UA 115376 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до галузі біотехнології рослин, а зокрема нутріцевтики, і може бути використана для отримання похідних дигідростильбену резвератролу та його глікозиду піцеїду. Дані сполуки є особливо цінними поліфенольними антиоксидантами, які мають кардіопротекторну, протизапальну і протипухлинну дії. Найближчим аналогом до корисної моделі є Thu V. Vuong, Chris Franco, Wei Zhang Treatment strategies for high resveratrol induction in Vitis vinifera L. cell suspension culture //Biotechnology Reports. - 2014. - V. 1-2. -Р. 15-21, суть якого полягає у використанні як індуктора синтезу резвератролу еліситорів групи жасмонатів (JA) і саліцилатів (SA), а також (3-глюканів (GLU), що додавали до живильного середовища (ЖС) GC-2 з рН 5,7-5,8. Останнє за складом є живильним середовищем В5 з додаванням 30 г/л сахарози, 250 мг/л гідролізату казеїну, 0,1 мг/л - нафтилоцтової кислоти і 0,2 мг/л кінетину. Суспензію культури клітин cv. Gamay Freaux. Суспензію клітини утримували на вібраційному шейкері зі швидкістю - 100 вібр/хв при 27±1 °C. Суспензію клітин винограду культивували у темряві для запобігання біосинтезу антоціанів. За таких умов культивування при додаванні до середовища 10 μМ JA і 1 мг/мл GLU становила приблизно 2400 мг/л, що є комерційно привабливим. Найближчий аналог має ряд недоліків, зокрема для синтезу резвератролу в задекларованій кількості необхідно використовувати суспензійні культури клітин з специфічним генотипом (cv. Gamay Freaux), також використовують багатокомпонентне живильне середовище, до складу якого входять фітогормони і висококоштовні хімічні реагенти: жасмонова кислота і β-глюкани, що накладає певні обмеження в практичній реалізації біотехнології синтезу резвератролу. В основу корисної моделі поставлена задача активізації синтезу резвератролу і піцеїду в асиміляційних органах винограда 3-метокси-4-гідроксикоричною кислотою в умовах in vitro. За таких умов в листках рослин-регенерантів інтенсивно накопичуються дегідростильбени: резвератрол і піцеїд, які є цінними природними антиоксидантами. Поставлена задача вирішується тим, що 3-метокси-4-гідроксикорична кислота додається до живильного середовища і виконує роль фітоалексину. Молекули оксикоричної кислоти по судинах рослин-регенерантів досягають термінальних ділянок провідної системи листків і звідти потрапляють на сенсорні білки клітинних стінок мезофілу. Внаслідок запуску сигнальних систем і каскадних фізіологічних перетворень в живих клітинах активізуються реакції індукованого неспецифічного імунітету, важливою складовою якої у винограду культурного є синтез дегідростильбенів, зокрема резвератролу і піцеїду. Спосіб виконують наступним чином: Асептичну культуру винограду сорту "Геракл" вирощували в культурі in vitro при 16 годинному фотоперіоді за температури 26±2 °C на базовому безгормональному живильному середовищі за прописом Мурасиге-Скуга (МС) з додаванням активованого вугілля (2 г/л) і 3метокси-4-гідроксикоричної кислоти (190 мкг/л). За даних умов культивування у рослин протягом 10 діб в листках інтенсивно накопичуються дегідростильбени (резвератрол і піцеїд). При здійсненні корисної моделі отримують асептичну рослинну сировину з високим вмістом резвератролу, який є цінним дієтичним продуктом з високою антиоксидантною активністю. Індукція збільшення вмісту дегідростильбенів в листках винограду забезпечує стійкість культури проти грибних інфекцій і підвищує ефективність адаптації рослин-регенерантів винограду до умов закритого ґрунту. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 45 50 Спосіб активізації синтезу резвератролу в листках винограду (Vitis vinifera L.) в культурі in vitro, що включає додавання комплексу мікроелементів та органічних кислот, що активізує синтез резвератролу, який відрізняється тим, що асептичну культуру винограду вирощують протягом 10 діб в умовах in vitro при 16 годинному фотоперіоді і температурі 26±2 °C на базовому безгормональному живильному середовищі за прописом Мурасиге-Скуга (МС) з додаванням 2 г/л активованого вугілля та 190 мкг/л 3-метокси-4-гідроксикоричної кислоти. Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 1