Спосіб одержання біологічно активних речовин елеутерококу колючого eleutherococcus senticosus rupr. et maxim.

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа получения культуры ткани элеутерококка колючего, продуцирующей биологически активные вещества - фенольные гликозы (элеутерозиды), используемые в медицине в качестве общестимулирующи х препаратов, обладающих адаптогенным действием. Известны способы получения биологически активных веществ из культивируемых клеток растений. Однако получаемая на искусственных питательных средах клеточная биомасса накапливает, как правило, значительно меньше биологических веществ, чем это свойственно растениям в природе. В большинстве случаев спектр биологически активных веществ, идентифицируемых в культивируемых клетках, также резко отличается от такового в исходных растениях, Существуют различные способы получения продуктивных клеточных культур. Сводятся они чаще всего к подбору оптимальных условий культивирования и подбору оптимальных составов питательных сред. Для элеутерококка такие способы не разработаны. Цель изобретения - разработка способа получения культуры ткани элеутерококка колючего, биомасса которой накапливает фенольные гликозиды (элеутерозиды), свойственные интактному растению. Способ состоит в том, что культур у тканей элеутерококка получают на питательной среде МурасигелеСкуга, дополненной 1 мг/л 2,4-Д и 0,1 мг/л кинейтина, и в дальнейшем выращивают в пересадочной культуре на агаризованной либо жидкой питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 4 мг/л a-НУК и 1 мг/л БАП Пример. Различные части молодых листьев, стеблей или корней после поверхностной стерилизации общепринятыми методами высаживают на питательную среду Мурасиге-Скуга, дополнительно содержащую 1 мг/л 2,4 Д и 0,1 мг/л кинетина. Пробирки или колбы с высаженными в асептических условиях первичными эксплантатами переносят в термостатированное темное помещение (t=24-28°C., относительная влажность 70-80%). Через 30-50 суток на эксплантатах появляется каллус. На средах, содержащих другие концентрации ауксина и цитокинина каллусообразование не происходило (табл. 1). Полученные каллусы характеризуются медленным темпом роста и имеют коричневый цвет. С целью повышения темпа роста каллуса и получения пассируемой продуктивной культуры ее переносят в жидкую или агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную 4 мг/л a-НУК и 1 мг/л БАП. На други х типах питательных сред пассируемая культура характеризуется более медленным темпом роста и темным цветом (табл. 2). Биомассу, полученную указанным способом, на 30-40 сутки роста отделяют от питательной среды, высушивают до воздушно-сухого состояния при t=50-55°C и определяют в ней наличие фенольных гликозидов (элеутерозидов) Результаты хроматографического анализа показывают наличие в полученной биомассе всех главных элеутерозидов, свойственных фармакопейному экстракту (табл. 3). Количественный анализ показал, что в 1 г сухой биомассы культивируемых клеток элеутерококка содержится 10,5 мг фенольных гликозидов и 167 мкг элеутерозида В. Продуктивность культуры тканей элеутерококка по фенольным гликозидам и элеутерозиду В составляет, соответственно, 116 мг и 1,47 мг на 1 л питательной среды на 20-е сутки роста культуры.