Комплексний препарат на основі харчових волокон

Винахід стосується біотехнології, зокрема комплексного препарату на основі харчових волокон, що володіють ферментною та антимікробною активностями. Заявляємий препарат може використовуватися як лікувальнопрофілактичний засіб при лікуванні захворювань, пов'язаних з недостатньою секрецією травних ферментів -амілаз та ліпаз в шлунковокишковому тракті, захворювань гепатобіліарної системи та дисбактеріозу. Для усунення різного роду порушень, пов'язаних з дефіцитом травних ферментів, з метою, заміненої терапії недостатності травлення, використовують різні ферментні препарати: солізим, амілази, нігодазу, оразу та інші. Одним із ефективно застосовуваних при різних кишкових інфекциях лікарських засобів є антибіотик пептидної природи - поліміксин "М"сульфат. Він найбільш активний по відношенню до грамнегативних бактерій, до збудників різних кишкових інфекцій, синьогнійної палички, сальмонел, дизентерійних та чумних бактерій, холерних вібріонів, збудників дифтерії. Практично не всмоктується у шлунково-кишковому тракті, інертний до травної діяльності людини, стійкий до дії протеаз тваринного походження (Лекарственные препараты, применяемые в медицинской практике. - М.: Медицина, 1991. С.46). В хімічному відношенні поліміксини - це сильні основи, до структури яких входять a,gдіаміномасляна кислота, амінокислоти L та D-ряду - треонін, лейцин, фенілаланін та жирна кислота типу 6-метилоктанової. Вільні аміногрупи a,gдіаміномасляної кислоти з жирною кислотою надають їм властивостей катіонних детергентів, здатних утворювати комплекси з фосфоліпідами клітинних мембран мікробних клітин, що й зумовлює їх антимікробну активність при безпосередньому контакті. Недоліком поліміксина "М" є те, що зміна в структурі молекули, наприклад, внутрішньомолекулярнйй аміноліз, призводить до інактивованих форм, що обмежує його використання, оскільки такі форми несприятливо діють на нирки (Антибиотики-полипептиды / Под ред. Н.С. Егорова. - МГУ, 1987. - С.210). Найбільш близьким технічним рішенням до заявляємого є комплексний препарат на основі харчових волокон (Черно Н.К., Севастьянова О.В., Макаринська А.В. Одержання композиції з антимікробними та ферментними активностями на основі харчових волокон // Наукові праці ОДАХТ. 1996. - Вип.16. - С.119 - 126). Препарат містить харчові волокна, фермент, антибіотик, а саме харчові волокна пшеничних висівок, солізим, поліміксин "М", при таких співвідношеннях вказаних компонентів, мас.%: Солізим 0,5 - 5,0 Поліміксин "М" 4,0 - 8,0 Харчові волокна Решта Недоліком прототипу є низька ферментативна активність та сорбційна активність по відношенню до холевих кислот, іонів важких металів. Окрім того, препарат має низьку стабільність по відношенню до кислого середовища шлунка та температури. В основу винаходу покладена задача створити такий комплексний препарат на основі харчових волокон, у якому нове співвідношення компонентів, a-амілази та полівінілпіролідону, у поєднанні з вже відомими, забезпечують, поряд з ліполітичною активністю, ще й амілолітичну активність, а також можливість отримання препарату в таблетованій формі, що підвищує сорбційні характеристики препарату по відношенню до холевих кислот, іонам важких металів. Поставлена задача вирішується тим, що комплексний препарат на основі харчових волокон містить харчові волокна пшеничних висівок, солізим, поліміксин "М"; згідно з винаходом він додатково містить a-амілазу та полівінілпіролідон, при таких співвідношеннях, мас.%: Полівінілпіролідон 3,5 - 5,0 a-Амілаза 2,7 - 5,38 Солізим 0,54 - 2,02 Поліміксин "М" 3,5 - 7,17 Харчові волокна Решта Згідно з винаходом препарат додатково містить фермент - a-амілазу та полівінілпіролідон як допоміжну речовину при таблетуванні, що підвищує сорбційну активність комплексного препарату на основі харчових волокон по відношенню до холевих кислот, іонів важких металів, а також водоутримуючу здатність (табл.2). Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю заявлених ознак та досягаємим технічним результатом можливо пояснити слідуючим. Відома стійкість харчових волокон до дії травних ферментів організму людини, використання їх як регуляторів гомеостазу, які забезпечують зберігання здоров'я та профілактику більшості захворювань (Дудкин М.С. и др. Пищевые волокна. - К.: Урожай, 1988. - С.92 - 121). Відомо також, що при включенні харчових волокон до дієти спостерігається зниження ліполітичної активності сироватки крові (Шаханская Е.К. и др. Сравнительная эффективность различных видов пищевых волокон в диетотерапии больных с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Тезисы докладов республиканской конференции "Химия медикобиологическая оценка и использование пищевых волокон". - Одесса, 1988. - С.6). Відомо, що у складі заявляемого комплексного препарату на основі харчових волокон вказані будуть виконувати роль матриці, стабілізуючої активність ферментів (Крусир Г.В. и др. Иммобилизация ферментов заместительной терапии на пищевых волокнах. Доклады Академии наук Украины. - 1994. - №5. - С.145 - 149), (Крусир Г.В. и др. Иммобилизация ферментов заместительной терапии на пищевых волокнах // Фармаком. - 1995. - №10. - С.45 - 48), а також стабілізацію поліміксина "М" (Черно Н.К. та ін. Одержання композиції з антимікробними та ферментними активностями на харчових волокнах. Наукові праці ОДАХТ. - 1996. - Вип.16. - С.119 126). Технічним результатом даного винаходу є стабілізація та утворення модифікованих форм ферментів та антибіотика за рахунок полівінілпіролідону, а також іонообмінних властивостей харчових волокон, при цьому підвищується ліполітична активність комплексного препарату на основі харчових волокон. Окрім того, заявляємий препарат у таблетованій формі володіє підвищеними детоксикаційними властивостями, зокрема, здатність зв'язувати іони важких металів, сорбувати метаболіти холестерину - холеві кислоти з подальшим виведенням цих шкідливих речовин з організму. Вагове співвідношення знайдено експериментальне. Саме у заявляємому інтервалі інгредієнтів досягається краще зберігання вихідних ліполітичної та амілолітичної активностей, а також стабілізація ферментів. Сказане підтверджується прикладами здійснення винаходу. Комплексний препарат на основі харчових волокон готують таким чином. Харчові волокна просочують 3,5 - 5,0% розчином полівінілпіролідону, з розчиненими в ньому ферментами: солізимом, a-амілазою та антибіотиком - поліміксином "М", при pH 6,0 - 7,0. Отриману суміш перемішують та сушать шаром 0,2 - 0,5мм при температурі 40°C протягом 1 години, з подальшим таблетуванням при температурі 40 ± 2°C, тиску 100кг × с/см2, протягом 10 хвилин. Одержують комплексний препарат на основі харчових волокон, який містить, мас.%: Полівінілпіролідон 3,5 - 5,0 a-Амілаза 2,7 - 5,38 Солізим 0,57 - 2,02 Поліміксин "М" 3,5 - 7,17 Харчові волокна Решта Визначали активність ферментів, які були відповідно рівні: ліполітична активність (ЛА) 1750ЛЕ/мг, амілолітична активність (АА) 6,86ОД/мг. pH стабільність отриманого комплексного препарату на основі харчових волокон перевіряли з використанням шлункового соку (pH = 2). Результати наведені в табл.3. Харчові волокна одержували кислотним методом (Дудкин М.С. и др. Пищевые волокна. - К.: Урожай, 1988. С.13 - 18). Солізим, отриманий згідно Фармакопейній статті ФС 42 - 2605 - 88. a-Амілазу використовували виробництва заводу ферментних препаратів (м.Ладижин), отриману з B.Subtilis CK - 52 та поліміксин "М" - одержаний на Київському заводі медпрепаратів. Ліполітичну активність визначали згідно з ФС 42 - 2605 - 88. Амілолітичну активність визначали згідно з методом, описаним в роботі (Рудюк В.Ф., Корчагина A.M. Оптический метод определения активности оразы // Фармация. - 1982. - Т.31. №3. - С.63 - 64). Амілолітичну активність виражали в мг гідролізованого крохмалю на 1мг білка за годину. Антибіотичну активність поліміксину "М" визначали за методом Дмитриева B.C., Семенова С.М. Микробиологический контроль активности антибиотических препаратов. - М.: Медицина, 1965. - С.58 - 62. Приклад 1. 1г харчових волокон пшеничних висівок просочували водним розчином ферментів та антибіотика у середовищі полівінілпіролідону, який готували таким чином: 0,006г солізиму, 0,03г a-амілази, 0,04г полівінілпіролідону та 0,04г поліміксину "М" розчиняли у 3дм3 дистильованої води. Отриману суміш перемішували, висушували до залишкової вологості 15% та таблетували. Одержаний комплексний препарат на основі харчових волокон містить, мас.%: Полівінілпіролідон 3,5 a-Амілаза 2,7 Солізим 0,6 Поліміксин "М" 3,5 Харчові волокна 98,7 Приклади 2 - 8 виконані у відповідності з прикладом 1, але при інших співвідношеннях компонентів. Результати представлені в табл.1. Як видно з табл.1, при виході за заявляємі межі кількості ферментів відбувається зниження як ліполітичної, так і амілолітичної активностей. Зменшення та підвищення кількості поліміксину не впливає на ферментативні активності (приклад 8). Вихід за заявляємі межі кількості солізиму (приклад 6) викликає зниження ліполітичної та амілолітичної активностей. Проводились порівняльні дослідження комплексного препарату на основі харчових волокон, отриманого за прикладом 1 та препарату, отриманого за прикладом 9 (прототип) шляхом витримування їх у середовищі шлункового соку з pH = 2. Як видно з табл.3, через 3 години % збереження ліполітичної активності у заявляємого препарату більший, ніж у прототипу. Амілолітичної активності препарат за прототипом не має зовсім. Отриманий за пропонуємим способом комплексний препарат на основі харчових волокон пшеничних висівок, ферментів, антибіотиків є промислове застосовуваним. Він може бути виготовлений в умовах будь-якого заводу ферментних препаратів, зокрема на заводі ферментних препаратів "Біостимулятор".