Спосіб одержання інгібітора ліпази

Спосіб одержання інгібітора ліпази, що передбачає подрібнення насіння рапсу, екстракцію органічним розчинником і наступне видалення розчинника під вакуумом 480 мм рт.ст. при температурі 3 26209 4 сті у насінні рапсу, є полярні ліпіди і сполуки фенують і видаляють розчинник. нольної природи. Відомо, що неполярними розНовим у способі, що заявляється, є: чинниками, такими як хлороформ, вилучаються - проведення процесу у дві стадії, на першій з нейтральні, тобто вільні ліпіди. За умови викорисних одержують рапсову муку, а на другій стадії тання полярного розчинника, яким є етанол, вилуінгібітор ліпази одержують з рапсової муки шляхом чаються присутні в сировині фенольні сполуки, шестикратної екстракції етанолом; внаслідок чого отримуємо високий вихід інгібітору, - тривалість екстрагування подрібненого наякий має значну інгібіторну активність стосовно сіння рапсу гексаном на І стадії; панкреатичних ліпаз. - гідромодуль співвідношення рапсового боБіологічна цінність цільового продукту підвирошна і етанолу на II стадії; щується внаслідок того, що вилучені фенольні - використання на І стадії як органічного розсполуки мають не лише інгібіторну активність по чинника гексана, а на І стадії – етанолу. відношенню до ліпази, а також антиоксидантні Підвищення біологічної цінності цільового властивості, вищі, ніж багатьох штучних антиоксипродукту пояснюється наступним. дантів, антибактеріальну дія, здатність інгібувати У способі за прототипом продукт – інгібітор ліклітини меланоми, ракові клітини. пази отримують в результаті екстракції подрібнеОтриманий продукт може бути використаний в ного насіння рапсу неполярним органічним розскладі біологічно активних добавок, що знижують чинником хлороформом. активність ліпази, для профілактики захворювань У корисній моделі, що заявляється, викориспідшлункової залози та боротьби з надлишковою тано полярний розчинник 95%-й етанол, внаслідок вагою. чого змінюється якісний склад та фізико-хімічні Режими екстракції підібрані експериментальвластивості кінцевого продукту – інгібітору панкрено. Дані наведені в таблицях 1, 2. атичної ліпази. Компонентами, що мають інгібіторні властивоТаблиця 1 Вилучення ліпідної компоненти гексаном в екстракції залежності від тривалості Час екстракції, год Вилучення ліпідів, % 4.0 28.6 4.5 35.2 5.0 44.0 5.5 45.3 6.0 45.5 6.5 45.6 7.0 45.6 Таблиця 2 Співвідношення екстрагент-мука Співвідношення етанол-рапсова мука Вилучення, мг/г Як видно з наведених даних, що екстракція повинна тривати від 5.5 до 6.5 годин. Такий термін екстракції забезпечить максимально повне вилучення вільних ліпідів з сировини. Збільшення тривалості екстракції не є доцільним, оскільки відсоток вилучення ліпідів не змінюється. Максимальне вилучення фенольних сполук забезпечується при масовому співвідношенні екстрагент-мука 10:1. При збільшенні співвідношення вилучення не змінюється, а при подальшому збільшенні вилучення фенольних сполук зменшується. Спосіб здійснюється таким чином. Насіння рапсу (Brassica napus var. Oleifera D.C.), подрібнене на вальцевому млині до частинок діаметром 0,7-0,9мм, знежирюють гексаном для вилучення жиру в апараті Сокслета протягом 6.5год. Отриману муку висушують при 40±2°С під вакуумом 480мм.рт.ст. до повного вилучення розчинника. Муку з насіння рапсу шестикратно екстрагують 95%-м етанолом у об'ємному співвідношенні 10:1 та кімнатній температурі з використанням гомогенізатора (60с, 5000об/хв). 3:1 0.80 5:1 1.00 10:1 1.12 15:1 1.12 20:1 1.08 Центрифугують (10хв, 6000xg), супернатанти збирають, об'єднують, випарюють при 40±2°С під вакуумом 480мм.рт.ст. до повного вилучення розчинника. Отримують густий жовтий розчин з зеленуватим відтінком – неочищені фенольні сполуки. Вихід інгібітору становить 11.2мг/г. Активність отриманих фенольних сполук з рапсової муки становить 8875IO/г. Вивчення впливу інгібітору ліпази на ліполітичну активність панкреатичної ліпази проводили у дослідах in vitro. При цьому використовували панкреатичну ліпазу свині. Ліполітичну активність визначали по відношенню до емульсії оливкової олії і оцінювали за об'ємом лугу, необхідного для нейтралізації неетерифікованих жирних кислот, що утворились при гідролізі оливкової олії. Ступінь інгібування оцінювали за зниженням ліполітичної активності панкреатичної ліпази під дією інгібітору ліпази. Встановлено, що інгібіторна активність фенольних сполук із рапсової муки складає 8875Од/г. 5 Комп’ютерна верстка В. Мацело 26209 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601