Спосіб одержання поліфенольного комплексу з анаболічною дією

Спосіб одержання поліфенольного комплексу з анаболічною дією шляхом екстракції рослинної сировини водою, з наступною фільтрацією та сушкою, який відрізняється тим, що як рослинну сировину використовують траву сої щетинистої, екстракцію проводять семикратно при температурі 44-46°С протягом 1 години при співвідношенні сировина : екстрагент 1:9 - 1:11 відповідно, об’єднані екстракти відстоюють 1 добу, після чого фільтрують, а сушці піддають відокремлену надосадову рідину. Винахід відноситься до фармації та медицини, а саме до способів одержання комплексів біологічно активних речовин з рослинної сировини, зокрема поліфенольних комплексів з анаболічною дією. Актуальною задачею є розширення арсеналу анаболічних засобів. Це пояснюється тим, що вони широко застосовуються в медичній практиці для посилювання процесів синтезу білка в організмі. Ця група препаратів представлена в основному гормонами, синтетичними гормонально-активними препаратами та препаратами рослинного походження, які мають анаболічну дію. Останні представлені меншою номенклатурою, хоча практично не токсичні, добре переносяться та практично не мають протипоказань. Розширення номенклатури таких препаратів дає можливість здійснювати індивідуальний підхід до лікування хворого. Відомий спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин, що має гепатопротекторну дію, [Пат. 30879, Україна, МПК 7 А61К35/78, А61К9/2, А61Р1/16, з 98063104, заявл. 16.06.98, опубл. 16.06.2003, Бюл.№6] який полягає у екстракції подрібненої трави гороху посівного 10-кратною кількістю 49-51% етанолу протягом 11-12 годин з подальшим упарюванням екстракту до водного залишку, очищенням хлористим метанолом і сушінням. Вихід готового продукту 10-12%. Відомий також спосіб одержання комплексу поліфенольних сполук з протизапальною, кардіопротекторною та антиоксидантною дією [Деклараційний пат. 69626А, Україна, МПК 7 А 61К 35/78, з 2003109473, заявл. 21.10.2003, опубл. 15.09.2004, Бюл.№9], який передбачає екстракцію трави чини весняної 50% етиловим спиртом при співвідношенні сирови-на:екстрагент 1:7 протягом 48 годин, упарювання одержаного екстракту до 1/7 - 1/8 попереднього об'єму з наступною обробкою 96% етиловим спиртом, відокремленням осаду, упарюванням і сушкою. Вихід готового продукту 11,2%. До недоліків обох наведених способів можна віднести багатостадій-ність їх здійснення, використання великих обсягів відносно дорогих реактивів при невисокому ви ході готового продукту. Найближчим до заявленого способу є спосіб одержання комплексу полісахаридів протиалергічної дії [Пат. 24032, Україна, МПК 6 А61К 35/78 з. 95125519, заявл. 28.12.95, опубл. 31.08.98 Бюл.№4]. Зазначений спосіб здійснюють шляхом екстракції листя смородини чорної гарячою водою 90°С при співвідношенні сировина : екстрагент 1:56, упарювання одержаного екстракту до 1/7 попе (19) UA (11) 83529 (13) C2 (21) a200608047 (22) 17.07.2006 (46) 25.07.2008, Бюл.№ 14, 2008 р. (72) ГАВРИШ УЛЯНА ВОЛОДИМИРІВН А, UA, КИСЛИЧЕНКО ВІКТОРІЯ СЕРГІЇВНА, U A, МАЛОШТАН ЛЮДМИЛА МИКОЛАЇВНА, UA, ШАТАЛОВА ОКСАН А МИ ХАЙЛІВНА, U A (73) НАЦІОН АЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) UA 24032 C1, 31.08.1998. UA 69626 A, 15.09.2004. UA 38567 C2, 15.10.2004. UA 30879 A, 15.12.2000. UA 30879 A, 15.12.2000. UA 59681 A, 15.09.2003. 3 83529 реднього об'єму, осадження комплексу біологічно активних речовин (БАР) чотирикратною кількістю етилового спирту, відокремлення осаду з наступною його сушкою і подрібненням. Вихід готового продукту 13-14% від повітряне сухої сировини. Недоліками відомого способу можна вважати додаткове використання спирту етилового для осадження БАР, проведення екстракції при високій температурі, що може призвести до руйнування термолабільних речовин, та невисокій вихід готового продукту. Завданням винаходу є створення нового способу одержання поліфенольного комплексу з анаболічною дією шляхом екстракції трави сої щетинистої водою при заданих параметрах способу, в результаті чого одержують субстанцію з вираженою анаболічною дією, не токсичну, без побічних ефектів, яка може бути використана як активна діюча речовина лікарських засобів аналогічного призначення, виконаних у різних лікарських формах. Поставлене завдання вирішується таким чином, що у способі одержання поліфенольного комплексу з анаболічною дією шляхом екстракції 4 рослинної сировини водою, з наступною фільтрацією та сушкою, згідно з винаходом передбачено, що в якості рослинної сировини використовують траву сої щетинистої, екстракцію проводять при температурі 44-46°С при співвідношенні сировинаекстаргент 1:9-1:11, а сушці піддають відокремлену надо-садову рідини. В якості рослинної сировини вибрана трава сої щетинистої. Ународній медицині традиційно використовують насіння сої щетинистої як важливе джерело рослинного білка та олії, як естрагенний, дієтичний, антисклеротичний, гипоглікемічний засіб. (Бабич А.О. Соя для здоров'я і життя на планеті Земля. - К: Аграрна наука, 1998. - 271 с) Таким чином вибір трави сої щетинистої як джерела поліфенольного комплексу з анаболічною дією, одержаного за заявленим способом, є новим і неочевидним. Вибір екстрагента було здійснено експериментальним шляхом, виходячи з кількості одержаних екстрактивних речовин вартості та безпечності екстрагента. Фрагмент результатів проведених дослідів наведено у таблиці 1. Таблиця 1 Вибір екстрагента Екстрагент Вихід екстрактивних речовин,% вода 44-46°С спирт 30% спирт 50% спирт 70% спирт 96% 25,53±0,39 25,92±0,17 25,59±0,41 23,51±0,27 11,27±0,42 Данні таблиці 1 свідчать, що оптимальним з точки зору виходу екстрактивних речовин, вартості та безпечності експеримента є вода 44-46°С. Температура вибраного екстрагенту запобігає руйнуванню термолабільних БАР. Співвідношення сировини: екстрагент 1:9-1:11 знайдено експериментальне та є оптимальним для данного виду сировини. Менша кількість екстрагенту не дозволяє ефективно провести екстракцію, окрім того, виникають труднощі технологічного характеру при обробці великою кількості сировини. Велика кількість екстрагенту нераціональна тому, що екстракція повністю здійснюється заявленою кількістю екстрагенту. Збільшення останнього веде до зниження концентрації екстракту та, як слідство, до збільшення енергетичних витрат та часу при упарюванні такого екстракту. Заявлений спосіб обумовлює (концентрацію) накопичення поліфенольного комплексу з анаболічною дією у надосадовій частині одержаного екстракту. Заявлений спосіб здійснюють наступним чином. Траву сої щетинистої у стадії повної стиглості висушують, подрібнюють, завантажують у екстрактор, заливають водою 44-46°С при співвідношенні сировини:екстрагент 1:9-1:11. екстракцію проводять протягом 1 години при постійній температурі. Для найбільш повного вилучення біологічно активних речовин з сировини одну і ту ж порцію сировини піддають екстракції 5-7 разів. Отримані екстракти об'єднують. Надосадкову рідину відфільтрують, з використанням бажано мембран ного фільтру і висушують бажано у розпилювальній сушці у псевдо-зрідженому шарі, що дозволяє підвищити чистоту кінцевого продукту та скорочує час сушки. В результаті здійснення заявленого способу одержують субстанцію з вмістом переважно поліфенольного комплексу у вигляді порошку коричневого кольору, легко розчинного у воді, практично нерозчинного у спирті етиловому 96°С. Вихід готового продукту 25-30%. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. 1000г висушеної подрібненої трави сої щетинистої завантажили у екстрактор і залили 10л води при температурі 45°С. Сировину екстрагували на водяній бані протягом 1 години. Одержаний екстракт злили. Ту саму порцію сировини залили новою порцією води і екстрагували аналогічним чином. Процедуру повторили 5 разів. Об'єднані екстракти (45л) відстоювали 24 годин, піддали фільтрації на мембранному фільтрі і висушили у розпилювальній сушці у псевдозрідженому шарі. Одержали 270 г кінцевого продукту, що складає 27% від повітряне сухої сировини. Приклад 2. Анаболічну активність поліфенольного комплексу, одержаного за заявленим способом, вивчали у дослідах на білих нелінійних щурах масою 60±5г. Тварин було поділено на 4 групи: 1 - інтактний контроль, 2 - тварини, що одержували поліфенольний комплекс за заявленим способом (далі новий засіб) у дозі 100мг/кг. 3, 4 тварини, що одержували препарати порівняння, а 5 83529 саме флаванабол та елькар. Дослід тривав 28 днів. В якості критерію анаболічної дії досліджених засобів вибрано: приріст загальної маси тіла та 6 литкового м'язу дослідних тварин по відношенню до інтактного контролю та вміст загального білка у зазначеному м'язі. Результати досліду наведені у таблиці 2. Таблиця 2 Вивчаємий показник Маса тіла ви хідна, г Маса тіла наприкінці експерименту, г Приріст маси по відношенню до вихідної маси (у кілька разів) Приріст маси по відношенню до контролю, % Маса литкового м'язу, мг Кількість загального білка в 1 г м'яза, г% Кількість загального білка у всьому м'язі, г% Умови експерименту Поліфенольний Інтактний контроль екстракт сої щети- Флаванабол нистої 61,4±0,6 61,4±0,9 61±0,6 91±2,5 115±1,9* 95±1,3 Елькар 61,2±0,6 103,4±1,7 33 (1,48) 47 (1,87) 36 (1,55) 41 (1,68) 26,4 4,3 13,2 154±2,1 166±1,9 154±2,6 163±2,3 18,2±1,2 26,1±1,3 19,8±0,5 22,6±0,8 2,8 ±0,14 4,3±0,2 3,1±0,1 3,7±0,14 Примітка: * - відхилення вірогідне по відношенню до контролю. Отримані результати свідчать, що 28-денне застосування одержаного за заявленим способом екстракту сої у дозі 100мг/кг викликає анаболічний ефект, який виявляється у достовірному збільшенні маси тіла, литкового м'яза і змісту рівня білка в тканинах м'яза. За анаболічною дією новий засіб перевищує препарати порівняння Флаванабол та Елькар. Таким чином, заявлено новий спосіб одержання поліфенольного комплексу анаболічної дії трави сої щетинистої. Спосіб є простим у відтворенні, Комп’ютерна в ерстка В. Клюкін економічним та екологічно безпечним. Заявлений спосіб може бути здійснений в умовах хімікофармацевтичного виробництва з використанням стандартного обладнання. Спосіб передбачає використання дешевої, розповсюдженої в Україні сировини. Субстанція, одержана за заявленим способом, має виражену анаболічну дію, яка перевершує дію відомих анаболіків, і є перспективною для створення нових лікарських засобів анаболічного призначення. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601