Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1-еніл)феноксі]етанол, фармацевтична композиція та способи лікування

1 Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)феноксі]етанол або його фармацевтично прийнятний складний ефір 2 Фармацевтична композиція, яка включає Е-2-[4(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 -еніл)феноксі]етанол або його фармацевтично прийнятний ефір як актив ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ ТА ний інгредієнт, разом з фармацевтично прийнятним носієм 3 Спосіб зниження рівня холестерину в сироватці, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4-хлор1,2-дифеніл-бут-1 -еніл)феноксі]етанолу або його фармацевтично прийнятного складного ефіру 4 Спосіб запобігання або лікування атеросклерозу, який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4хлор-1,2-дифеніл-бут-1 -еніл)феноксі]етанолу або його фармацевтично прийнятного складного ефіРУ 5 Спосіб гормонозамісної терапії (HRT), який включає введення пацієнту, що потребує такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4-хлор-1,2дифеніл-бут-1-еніл)феноксі]етанолу або його фармацевтично прийнятного складного ефіру О Даний винахід відноситься до Е-2-[4-(4-хлор1,2-дифеніл-бут-1-еніл)фенокси]етанолу (1), що виявляє здатність знижувати рівень холестерину в сироватці крові, а також до фармацевтичних композицій на його основі Сполука (1) є корисною для зниження рівня холестерину в сироватці крові і для лікування атеросклерозу Вона також потенційно корисна в гормонозамінюючій терапії (HRT) Було показано, що підвищені рівні холестерину в сироватці, пов'язані з ліпопротешами низької ЩІЛЬНОСТІ (LDL), є основним фактором, який сприяє розвитку і прогресуванню атеросклерозу Тому існує потреба в розробці способу зниження рівнів холестерину в сироватці у пацієнтів з пперхолестеринемією або схильних до ризику розвитку пперхолестеринемм У Міжнародній патентній заявці WO 97/32574 описується використання Z-2-[4-(4-xnop-1,2дифеніл-бут-1-еніл)фенокси]етанолу для зниження рівня холестерину в сироватці Сполука не володіє жодними значними естрогенними побічними ефектами в тканині матки і здатна блокувати не сприятливу дію естрогену на матку Тому дана сполука є особливо корисною для зниження рівня холестерину в сироватці ВІДПОВІДНИЙ Е-ізомер не описаний в даній патентній заявці Z-2-[4-(4-xnop-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенокси]етанол є метаболітом відомого антиестрогенного лікарського засобу тореміфену Тореміфен (7-4-хлор-1,2-дифеніл-1-[4-[2-(г\І,г\Ідиметиламшо)етокси]-феніл]-1-бутен) в наш час використовується в КЛІНІЦІ для лікування рака молочної залози, що є позитивним відносно рецепторів естрогену У наш час виявлено, що Е-2-[4-(4-хлор-1,2дифеніл-бут-1-еніл)фенокси]етанол (1) є значно більш сильним препаратом для зниження рівня загального холестерину, але приблизно рівним відносно дії на матку в порівнянні з ВІДПОВІДНИМ Zізомером Це було несподіваним, оскільки Еізомер тореміфену є виключно естрогенним в тканині матки Крім того, було виявлено, що Е-ізомер винаходу здатний безпосередньо інгібувати біосинтез холестерину, в той час як ВІДПОВІДНИЙ Z со Ю 57132 ізомер не надає подібної дії Таким чином, Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут1-еніл)фенокси]етанол (1) є особливо корисним для зниження рівня холестерину в сироватці і для запобігання і лікування атеросклерозу Сполука (1) є також потенційно корисною в гормонозамінюючій терапії (HRT) ВІДПОВІДНО, винахід подає нову сполуку, корисну для зниження рівня холестерину в сироватці, причому вищезгаданою сполукою є Е-2-[4-(4-хлор1,2-дифеніл-бут-1-еніл)фенокси]етанол, що має структуру (1) он (1) Сі або и фармацевтичне прийнятний ефір Фармацевтично прийнятний ефір включає ефір, що отримується з аліфатичними карбоновими кислотами, переважно С-і-Сє кислотами, наприклад, оцтовою кислотою, і що отримуються з ароматичними карбоновими кислотами, наприклад, С7-С12 кислотами, такими, як бензойна кислота Аліфатичні і ароматичні кислоти можуть необов'язково бути заміщені, наприклад, одним або більше С1-С4 алкілами Винахід також подає фармацевтичну композицію, що включає Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1еніл)фенокси]етанол або його фармацевтично прийнятний складний ефір в якості активного інгредієнта разом з фармацевтично прийнятним носієм Винахід також подає спосіб зниження рівня холестерину в сироватці, який включає введення хворому, який потребує такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенокси]етанолу або його фармацевтично прийнятного складного ефіру Винахід подає також спосіб запобігання або лікування атеросклерозу, що передбачає введення пацієнту, який потребує такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенокси]етанолу або його фармацевтично прийнятного складного ефіру Винахід також подає спосіб гормонозамінюючоі терапії (HRT), який передбачає введення пацієнту, потребуючому такого лікування, ефективної КІЛЬКОСТІ Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенокси]етанолу або фармацевтично прийнятного складного ефіру Сполука винаходу може вводитися різними шляхами, включаючи пероральний, парентеральний або трансдермальний, з використанням загальноприйнятих форм препаратів, таких, як капсули, таблетки, гранули, порошки, супозиторії, ін'єкції, пластири, суспензії і сиропи Термін "ефективна КІЛЬКІСТЬ" означає КІЛЬКІСТЬ сполуки винаходу, яка здатна знижувати рівень загального холестерину в сироватці або яка здатна блокувати несприятливу дію естрогену, зокрема, на матку, або інгібувати постклімактеричні симптоми Сполука винаходу може вводитися згідно з способом винаходу 1 раз на місяць, 1 раз на тиждень або 1 раз на день або декілька разів на день в залежності від потреб пацієнта Типова щоденна пероральна доза знаходиться в межах приблизно від 0,5мг до 1000мг, переважне від 10мг до 800мг активної сполуки Однак дозування може ВІДПОВІДНО змінюватися в залежності від віку, ваги тіла і стану хворого, а також способу введення Сполука винаходу може вводитися одна або разом з іншими активними сполуками Композиції згідно з винаходом можуть приготовлятися за допомогою способів, що звичайно використовуються в даній області У доповнення до активної сполуки композиції можуть містити фармацевтичне прийнятні добавки, що звичайно використовуються в даній області, такі, як носи, зв'язуючи речовини, наповнювачі або ексципієнти, змащувальні агенти, суспендуючи агенти і розріджувачі КІЛЬКІСТЬ активної сполуки в композиціях винаходу є достатньою для досягнення бажаного терапевтичного ефекту, наприклад, приблизно від 0,5 до ЮООмг, переважно від 10мг до 800мг в одиничній дозованій формі як для перорального, так і для парентерального введення Наступні приклади ілюструють синтез сполуки винаходу Прийняті скорочення, що використовуються для форм сигналу ЯМР 1 Н NMR - ядерний магнітний резонанс (ЯМР), MHz- мегагерц (МГц), s - син глет, t -триплет, dt - подвійний триплет, m - мультиплет Прийняті скорочення, що використовуються в тексті PEG - поліетиленгліколь, SD - стандартне відхилення, MS - мас-спектр, eV - електронвольт (еВ) ПРИКЛАДИ Приклад 1 Отримання Е-2-[4-(4-хлор-1,2дифеніл-бут-1-еніл)фенокси] етанолу a) Е-4-[4-(2-бензилоксиетокси)феніл]-3,4дифеніл-бут-З-ен-1 -ол Алкілування початкового фенолу бензил-(2брометиловим) ефіром виконували так, як описано в прикладі 1 Міжнародної патентної заявки WO 96/07402 за винятком того, що в даному випадку початковою сполукою був інший геометричний ізомер, Е-4-(4-гидрокси-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенол, який отримувався за способом, описаним в патенті США 4996225 Продукт екстрагували толуолом Толуольні фази об'єднували, промивали водою, сушили і упарювали досуха Залишок перекристалізовували з невеликої КІЛЬКОСТІ толуолу, і осаджений продукт використовували на наступній стадії без подальшого очищення 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) 2,8 (2Н, т, СН2-С=), 3,6 (2Н, дт, СН2ОН), 3,8 (2Н, т, СН2ОВп), 4,2 (2Н, т, СН2ОРп), 4,6 (2Н, с, OCH2Ph), 6,8-7,4 (19Н, м) b) Е-1-[4-(2-бензилоксиетокси)феніл]-4-хлор1,2-дифеніл-бут-1 -єн Галогенування Е-4-[4-(2бензилоксиетокси)феніл]-3,4-дифеніл-бут-3-ен-1олу виконували так, як описано в прикладі 2 Міжнародної патентної заявки WO 96/07402, але в 57132 якості початкової сполуки використовували Е-4-[4(2-бензилоксиетокси)феніл]-3,4-дифеніл-бут-3-ен1-ол 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) 3,0 (2Н, т), 3,4 (2Н, т), 3,8 (2Н, т), 4,2 (2Н, т), 4,6 (2Н, с), 6,9-7,4 (19Н, м) с) Е-2-[4-(4-хлор-1,2-дифеніл-бут-1 еніл)фенокси]етанол 6,9г Е-1 -[4-(2-бензилоксиетокси)феніл]-4-хлор1,2-дифеніл-бут-1-ену розчиняли в суміші етилацетату (60мл) і етанолу (60мл) Додавали паладій на вугіллі (5%, 0,7г) і розчин енергійно перемішували в атмосфері водню при кімнатній температурі доти, поки не залишиться жодної початкової сполуки (тонкошарова хроматографія) Паладій на вугіллі відфільтровували через кремнезем і фільтрат упарювали досуха Залишок кристалізували декілька разів з суміші етанолу і води 1 Н ЯМР (300МГц, CDCI3) 3,0 (2Н, т), 3,4 (2Н, т), 4,0 (2Н, м), 4,1 (2Н, т), 6,8-7,3 (14Н, м) Мас-спектр (+ЕІ, 70еВ, пряме введення) 378 (100%), 342 (8%), 329 (43%), 285 (23%), 284 (28%), 207(32%), 191 (30%) ЕКСПЕРИМЕНТИ Методи Естрогенно/антиестрогенну активність лікарського засобу, що досліджується, випробовували шляхом вимірювання його дії на вагу матки незрілих (вік 18 днів) самиць пацюків Sprague-Dawley Сполуку вводили перорально в розчині ПЕГ протягом 3 днів (п = 5 на групу) У той же самий час вивчали здатність лікарського засобу, що досліджується, інгібувати викликане естрогеном збільшення ваги матки пацюків, яким давали естрадюл в КІЛЬКОСТІ 50мгк/кг підшкірно Результати порівнювали з даними ВІДПОВІДНОГО Z-ізомеру Дію на біосинтез холестерину вивчали in vitro в клітинних культурах Hep G2, використовуючи 14 С-ацетат в якості попередника холестерину Випробувану сполуку додавали в культуральне середовище в концентрації від 0,01 до 10 мікромолярної Після 2-Х ГОДИН культивування припиняли і знову синтезований холестерин вимірювали КІЛЬКІСНО за допомогою тонкошарової хроматографії Отримані дані порівнювали з результатами для Zізомеру Вивчали дію на вагу матки і на рівні холестерину в сироватці в інтактних і оваріектомованих дорослих самиць пацюків Sprague-Dawley Інтактним пацюкам лікарський засіб, що досліджується, давали перорально щодня в дозі 3,17мг/кг протягом двох тижнів і проводили порівняння з еквімолярними дозами Z-ізомеру, Е-ізомеру тореміфену, ралоксифену або естрадюлу При дослідженні з оваріектомією лікарський засіб, що досліджується, давали перорально при щоденній дозі 01, 1 або 10мг/кг протягом 4-х тижнів і порівняння проводили з ВІДПОВІДНИМ Z-ізомером і естрад юлом (100мкг/кг) Вміст холестерину в сироватці визначали ферментативним методом При дослідженні з оваріектомією вміст холестерину і молекули попередника холестерину в сироватці визначали газорідинною хроматографією Результати У незрілих пацюків дія Е-ізомеру винаходу на вагу матки показала приблизно рівний естроген ний і антиестрогенний ефект в порівнянні з ВІДПОВІДНИМ Z-ізомером Результати показані в таблиці 1, де 1271b (E) означає Е-ізомер винаходу, 1271а (Z) означає ВІДПОВІДНИЙ Z-ізомер і Е2 означає естрад і ол Таблиця 1 Доза Середня вага матки (вага після простоЛікарсь- го лікування Е2 була прийнята за 1,00) кого за1271а 1271а 1271b 1271b собу (Z) + Е2 (Е) + Е2 (Е) (Z) (мг/кг) 0 0,25 1,00 0,33 1,00 0,1 0,27 1,18 0,37 0,81 0,5 0,43 1,11 0,45 0,82 1 0,53 0,91 0,44 0,57 10 0,75 0,91 0,75 0,83 У системі клітинної культури in vitro Е-ізомер винаходу злегка інгібував біосинтез холестерину, а Z-ізомер виявляв протилежну дію, як показано в таблиці 2 Таблиця 2 Концентрація лікарського засобу (иМ) 0,01 0,1 1 10 Рівень біосинтезу холестерину (% від контролю) 1271а (Z) 1271b (E) 143 127 129 132 89 90 89 84 У дорослих пацюків 1271b (E), 1271a (Z) і ралоксифен зменшували відносну вагу матки приблизно в однаковій мірі Замість цього, естрадюл і Е-ізомер тореміфену збільшували вагу 3 приведених лікарських засобів 1271b (E) Е-ізомер тореміфену, ралоксифен і естрадюл знижували рівень холестерину в сироватці приблизно з рівною ефективністю (на 50 - 60%) Сполука 1271а (Z) була менш ефективною Результати показані в таблиці З Таблиця З Лікарський засіб 1271b (E) 1271a(Z) Тореміфен (Е) Ралоксифен Естрадюл Відносна вага матки і вміст холестерину у сироватці (контрольний рівень був прийнятий за 1,00, середнє значення ±SD, n = 3) Матка Холестерин 0,85 ± 0,07 0,43 ± 0,05 0,75 ± 0,06 0,65 ±0,10 1,09 ±0,10 0,40 ±0,1 8 0,77 ±0,21 0,48 ± 0,09 1,29 ±0,06 0,48 ± 0,09 У дослідженні з оваріектомією 1271 b (E) злегка збільшував (1,5 - кратно) відносну вагу матки, не більш, ніж ВІДПОВІДНИЙ Z-ізомер Естрадюл збільшував вагу в 3,3 рази 1271b (E) знижував рівень холестерину в сироватці вельми ефективно (на величину аж до 77%), 1271а (Z) був менш ефекти 57132 вним (зниження складало до 34%) показані в таблиці 4 Результати Таблиця 4 Доза лікарського засобу (мг/кг) 0,1 0,5 1 5 10 Відносна вага матки і рівень холестерину в сироватці (контрольний рівень прийнятий за 1,00) 1271b (E) 1271а (Z) Матка Холестерин Матка Холестерин 1,54 0,92 1,22 0,90 1,50 0,62 1,78 0,96 0,89 1,53 0,23 2,04 0,66 Крім того, в дослідженні з оваріектомією було помічено, що 1271b (E), але не 1271а (Z), збільшував злегка рівень молекул попередника холесте Комп'ютерна верстка М Клюкш 8 рину в сироватці, що вказує на пряме інгібування біосинтезу холестерину за допомогою 1271 b (E) Обговорення Представлені вище дані вказують на те, що як 1271а (Z), так і 1271b (E) є еквівалентними за антиестрогенною дією на матку пацюка Це відрізняється від дії тореміфену, оскільки Е ізомер тореміфену є явно естрогенним відносно матки пацюка, а Z-ізомер виявляє антиестрогенні властивості 1271b (E) є більш ефективним в якості пполіпідемічного агента, ніж ВІДПОВІДНИЙ Z-ізомер Це, принаймні, частково пояснюється здатністю 1271b (E) інгібувати безпосередньо біосинтез холестерину 3 вищевикладеного слідує, що випробувана сполука 1271b (E) є антиестрогенним лікарським засобом, який виявляє також благотворні і сильні пполіпідемічні властивості Підписано до друку 05 07 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна