Спосіб прогнозування запальних процесів при захворюванні печінки та жовчовивідних шляхів

Спосіб прогнозування запальних процесів при захворюванні печінки і жовчовивідних шляхів, що передбачає визначення жирних кислот сироватки крові, який відрізняється тим, що у сироватці крові та жовчі методом газорідинної хроматографії визначають суму ненасичених жирних кислот, та склад олеїнової (С18 1), лінолевої (С18 2) та де Кі, Кг, Кз - коефіцієнт співвідношення жирних кислот, С18 1 - олеїнова кислота, С18 2 - лінолева кислота, С 20 4 - арахідонова кислота, Хненас - сума ненасичених жирних кислот, і при різниці отриманих показників відносно до контролю прогнозують запальний процес у печінці Корисна модель, що заявляється, відноситься до медицини, а саме до ГІГІЄНИ харчування, точніше, до ліпідологм і може використовуватися для покращення результатів прогнозування запальних процесів печінки та жовчовивідних шляхів Гепатобіліарна система у організмі людини є основним місцем, яке бере участь в обміні ЛІПІДІВ [І], тому будь-який патологічний процес, що зумовлює порушення функції печінки і жовчовивідних шляхів (ЖВШ), супроводжується змінами показників ЛІПІДНОГО обміну [2] Різноманітність функції гепатоцитів призводить до того, що при їх патології відбувається порушення багатьох біохімічних констант, однак, що перебігають у клітинах печінки, зміни далеко не всіх із них мають діагностичне значення [3] Таким чином важливою частиною прогнозування і лікування запальних процесів печінки та жовчовивідних шляхів є визначення ЛІПІДНИХ порушень Найбільш близьким за технічним вирішенням до способу, що заявляється, є аналітичний спосіб [4], який виступає в якості найближчого аналога Цим способом визначають жирнокислотний склад ЛІПІДІВ ліпопротеїнів (низької та високої ЩІЛЬНОСТІ) сироватки крові хворих з хронічними захворюван нями печінки (хронічні холецистит і гепатит, жовчнокам'яна хвороба та цироз) Однак, цей спосіб має деякі недоліки складність виділення ліпопротеїнів з сироватки крові, тривалість їх підготовки до аналізу (120 хв), ускладнення обчислення Він характеризує порушення ЛІПІДНОГО обміну у печінці, але не дозволяє прогнозувати запальні процеси при захворюваннях печінки і жовчовивідних шляхів Корисна модель, що заявляється вирішує задачу покращення результатів прогнозування при запальних процесах печінки і жовчовивідних шляхів з метою підвищення ефективності лікування ЛІПІДНИХ порушень у хворих Технічний результат, який досягається, полягає в можливості підвищення ефективності діагностики, своєчасній профілактиці, прогнозу та призначення коректної терапії, що дає можливість знизити захворюваність та строки лікування Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі який передбачає визначення жирних кислот сироватки крові, згідно корисної моделі, у сироватці крові та жовчі методом газорідинної хроматографії, визначають суму ненасичених жирних кислот, та склад олеїнової (СІ 8 1), лінолевої (СІ 8 2) та арахідонової (С20 4), розраховують їх співвідношення за формулою 2^ненас 2]ненас І ЖОВЧОВИВІДНИХ ШЛЯХІВ 0) in 5907 к , =• С18 1 К2 = С20 4 £ненас С18 2 £ненас де Кі, Кг Кз - коефіцієнт співвідношення жирних кислот, С 18 1 - олеїнова кислота С 18 2 - лінолева кислота С 20 4 - арахідонова кислота, ^ ненас ЖК - сума ненасичених жирних кислот і при різниці отриманих показників відносно до контролю прогнозують запальний процес у печінки і жовчовивідних шляхів Назва ЖК ( £ ненас) Сума ненас ЖК (S ненас) С 18 1 С182 С20 4 Сироватка контроль 41,5 ±1,5 25,3 ±1,8 15,2 ±1,0 1,0 ±0,05 С18 1 2] ненас Перевага цього метода швидкість аналізу, висока інформативність, що дозволяє покращити контроль та прогнозування запального процесу печінки і жовчовивідних шляхів За допомогою цього метода можна перевірити ЛІПІДНІ порушення в динаміці, прогнозувати подальший перебіг захворювань, постійно контролювати загальний стан, правильність призначення ЛІКІВ та ефективність лікування Результати запропонованого способу представлені у таблиці п=29 хворі 43,6 ±1,5 16,3 ±0,6* 22,8 ±1,6* 4,5 ± 0,48* Жовч п=25 контроль хворі 67,5 ± 0,3 53,5 ±2,0 6,6 ±0,2 12,4 ±0,6* 56,6 ±0,9 34,5 ±2,1* 3,2 ±0,05 6,4 ± 0,7* 0,60 0,40 0,10 0,23 0,35 0,50 0,84 0,64 0,02 0,10 0,05 0,12 С18 2 1Ч.О — ї = і 2_,ненас у С20 4 2] ненас *) р < 0,05 порівняно з контролем Як видно з таблиці, для кількісної оцінки запальних процесів у ліпідах сироватки і жовчі визначали коефіцієнти, де Кі і Кг - характеризують інтенсивність процесу ПОЛ і порушення метаболізму ессенціальних ЖК, Кз - свідчить про запальний процес Визначення цих коефіцієнтів дозволяє встановити, що зміни у ліпідах сироватки крові можуть свідчити про зміни у ліпідах жовчі, як/ обумовлюють запальний процес печінки та жовчовивідних шляхів Спосіб здійснювався таким чином у хворих натще із вени беруть кров, виділяють сироватку Сироватку в КІЛЬКОСТІ 0,5-1,0 мл та пробу жовчі (порцію В) в КІЛЬКОСТІ 3-5 мл поміщають в пробірки з притертою пробкою ємністю 10 мл , додають 5-7 мл хлороформ-метанольної суміші (у співвідношенні 2 1) і тримають ЗО хвилин у холодильнику Для кращого розділення фаз додають Імл дистильованої води Для аналізу відбирають хлороформну нижню фазу, яка містить ліпіди Хлороформні екстракти як із сироватки, так із проби жовчі (порцію В) випарюють досуху в потоці азоту при температурі 40° на водяній бані Сухий осад ЛІПІДІВ з'єднують з 5 мл розчину 1 % сірчаної кислоти (H2SO4) у метанолі \ вміщують в ампули, які запаюють Потім проводять гідроліз і метилірування в термостаті при температурі 85° напротязі 20 хвилин Екстракцію метиліруваних ЖК проводять ДВІЧІ гексан-ефірною сумішю (співвідношення 11) в кількості 5 мл Об'єднані екстракти випарюють в потоці азоту при 40С на водяній бані і сухий осад розчиняють в 40,0-50,0 мкл чистого гексану і вводять у випарювач хроматографа в КІЛЬКОСТІ 5 мкл Потім проводять газорідинний аналіз жирнокислотного складу ЛІПІДІВ на газовому хроматографі "Цвет-500" в ізотермічному режимі з полум'яюнізаційним детектором при наступних умовах для визначення спектру жирних кислот ЛІПІДІВ використовують скляну колонку (розміром 2м х 0,3см), яка заповнена фазою 5% ПЕГС на хроматоні N-AW-HMDS (зерніння 0,125-0,160 мм), температура колонки 180°С, температура випаровувача 240°С, розходження азоту і водню 35 мл/хв , повітря-200мл/хв, швидкість діаграмної стрічки 240 мм/год, чутливість шкали 10 7А, об'єм проби, що вводиться, 3-5 мкл, тривалість аналізу-20 хвилин Кількісну оцінку спектра жирних кислот ЛІПІДІВ проводять за методом нормування площин і визначають долі кислот в процентах (%) [5] 5907 На базі кафедри основи ГІГІЄНИ харчування НМУ та лабораторії газової хроматографії НДЛЦ НМУ запропонованим способом було обстежено 29 хворих з захворюванням печінки і ЖВШ У всіх хворих було виявлено порушення ЛІПІДНОГО обміну Таким чином, даний спосіб досить точний для прогнозування запальних процесів при захворюванні печінки і жовчовивідних шляхів і може бути рекомендованим для впровадження в практичну медицину Список літератури 1 А Н Климов, Н Г Никульева Липиды, липопротеиды и атеросклероз -С Пб -1995 -303с Комп ютерна верстка М Клююн 2 А Ф Блюгер, А Я Майоре Роль нарушений функции мембран в патологии печени // Биомембраны -Рига, 1981 -С 185-195 3 В Н Титов Патофизиологические основы лабораторной диагностики заболеваний печени //Клин лаб диагностика-1996-№1 -С 3-9 4 Т С Брюзгина, Е Н Амосова, О И Лыховский и др Жирнокислотный состав липидов липопротеинов сыворотки крови при хронических заболеваниях печени // Клин лаб диагностика -1999,№7 -С 5-6 5 С Г Гичка, Т С Брюзгина, Г М Вретик Газохроматографический метод определения липидных показателей крови при ИБС // Укр кард журнал-1998-№7-8-С 50-52 Підписне Тираж 28 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності вул Урицького 45 м Київ, МСП 03680 Україна ДП Український інститут промислової власності вул Глазунова 1 м К и ї в - 4 2 01601