Біологічно активна добавка

Біологічно активна добавка, що містить біорегулятор, водорозчинні харчові волокна полісаха 3 63015 гомогенізоване насіння люцерни попередньо знежирюють 10-ма об'ємами петролейного ефіру в апараті Сокслета. До 5 г насіння додають 500 мл 0,1 М боратного буферу, рН = 7,6, який містить 0,5 М NaCl. Екстракцію проводять при постійному перемішуванні на магнітній мішалці (число обертів 5000 об/хв.) при кімнатній температурі впродовж 1 години. Осад відокремлюють за допомогою центрифугування при швидкості 8000 об/хв. впродовж 20 хвилин. Супернатант (500 мл) нагрівають до температури 70 °С впродовж 15 хвилин. В гарячий супернатант вводять 1 г полісахариду цитрусового пектину, перемішують впродовж 1 години (500 об/хв.). Осад відділяють центрифугуванням (5000 об/хв. впродовж 10 хвилин) та висушують шаром 0,2...0,5 мм при t=(40 ± 2) °С протягом 3 годин. Прототип і корисна модель, що заявляється, мають такі спільні ознаки: - водорозчинні харчові волокна полісахариду; - біорегулятор; - компоненти насіння. Але, біологічно активна добавка за прототипом має такий недолік: як джерело інгібітору трипсину використовують насіння люцерни, яке використовується для вирощування кормової люцерни та основна частина його використовується саме для цієї мети, тоді як соя є більш поширеною та використовується не тільки у сільському господарстві, що визначає її низьку собівартість. В основу корисної моделі поставлено задачу розробити біологічно активну добавку, в якій шляхом заміни біорегулятора, водорозчинних харчових волокон полісахариду і компонентів насіння забезпечити розширення асортименту біологічно активних добавок та покращення стану здоров'я людей за допомогою регулювання білкового обміну в організмі. Поставлена задача вирішена складом біологічно активної добавки, що містить біорегулятор, водорозчинні харчові волокна полісахариду і компоненти насіння, тим що як біорегулятор вона містить інгібітор протеаз Баумана-Бірк, як водорозчинні харчові волокна полісахариду - цитрусовий пектин, а як компоненти насіння - компоненти бобів сої, за наступним співвідношенням вказаних інгредієнтів, мас. %: водорозчинні харчові волокна цитрусового пектину інгібітор протеаз Баумана-Бірк компоненти бобів сої 75-90 3,0-5,0 решта. В прототипі як джерело інгібітору трипсину використовували насіння люцерни, яке не перероблюється у харчовій промисловості, лише невелика кількість його використовується у сільському господарстві при вирощуванні рослин на корм великої рогатої худоби. В заявленій біологічно активній добавці як джерело інгібітору протеаз Баумана-Бірк використовуються боби сої, вирощування якої в останній час набуло широкого поширення завдяки високим споживним властивостям цих бобів, що пояснює 4 низьку вартість такої сировини. Джерелом водорозчинних харчових волокон є водорозчинний полісахарид цитрусовий пектин, який є продуктом промислового багатотоннажного виробництва. Найефективніший екстрагент для вилучення інгібіторів та масове співвідношення водорозчинних харчових волокон та інгібітору протеаз бобів сої підібрано експериментально. Зміна екстрагуючого агента впливає на ступінь вилучення інгібітору протеаз у екстракт, а відповідно і на його активність (див. табл. № 1, 2). Зменшення або збільшення концентрації водорозчинних харчових волокон призводить до зниження активності соєвого інгібітору протеаз (див. табл. № 3). Було проведено вивчення впливу різних полісахаридів на активність БАД. Проведені дослідження показали, що найкращий результат досягається при використанні цитрусового пектину (див. табл. № 4). Біологічно активну добавку на основі цитрусового пектину та соєвого інгібітору протеаз Баумана-Бірк готують наступним чином: гомогенізовані боби сої попередньо знежирюють 10-ма об'ємами петролейного ефіру в апараті Сокслета. Екстракцію інгібітору Баумана-Бірк проводять екстрагуючими агентами, рН 4,5 - 7,4 (гідромодуль 20), при постійному перемішуванні на магнітній мішалці (20 об/хв.) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин. Осад відокремлюють від супернатанту за допомогою центрифугування при швидкості 6000 обертів за хвилину впродовж 20 хвилин. Супернатант та розчин цитрусового пектину концентраціями 0,5-5,0 % зливають у об'ємному співвідношенні 4:1. Після поступового вливання розчину цитрусового пектину у супернатант при постійному перемішуванні (20 об/хв.) вимірюють рН середовища реакційної суміші, та при необхідності доводять значення рН до величини ізоелектричної точки інгібітору Баумана-Бірк, яка складає 4,0, невеликою кількістю 0,01 М розчину НСl для осадження залишку незв'язаного інгібітору Баумана-Бірк. Осад відокремлюють від супернатанту за допомогою центрифугування при швидкості 6000 обертів за хвилину впродовж 20 хвилин. Приклад 1. Гомогенізовані боби сої попередньо знежирюють 10-ма об'ємами петролейного ефіру в апараті Сокслета. До 5 г бобів додають 100 мл NaCl концентрацією 0,5 М у 0,1 М ацетатному буфері, рН 7,4 (гідромодуль 20), при постійному перемішуванні на магнітній мішалці (20 об/хв.) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин. Осад відокремлюють від супернатанту за допомогою центрифугування при швидкості 6000 обертів за хвилину впродовж 20 хвилин. Супернатант та розчин цитрусового пектину концентрацією 0,5 % зливають у об'ємному співвідношенні 4:1. Після поступового вливання розчину цитрусового пектину у супернатант при постійному перемішуванні (20 об/хв.) вимірюють рН середовища реакційної суміші, та при необхідності доводять значення рН до величини ізоелектричної точки інгібітору Баумана-Бірк, яка складає 4,0, невеликою кількістю 0,01 М розчину НСl для осадження залишку незв'язаного інгібітору Баумана-Бірк. Осад відокремлюють від супернатанту за допомогою центрифугування при швидко 5 63015 сті 6000 обертів за хвилину впродовж 20 хвилин. Маса осаду: 1,01 г. Одержана таким чином біологічно активна добавка містила наступні компоненти, мас. % : водорозчинні харчові волокна цитрусового пектину інгібітор протеаз Баумана-Бірк компоненти бобів сої 85,41 4,57 10,02. 6 водорозчинні харчові волокна цитрусового пектину інгібітор протеаз Баумана-Бірк компоненти бобів сої 75,0 3,0 22,0. Приклад 3. Отримали БАД аналогічно прикладу 1 з наступним співвідношенням компонентів, мас. %: водорозчинні харчові волокна цитрусового пектину інгібітор протеаз Баумана-Бірк компоненти бобів сої Приклад 2. Отримали БАД аналогічно прикладу 1 з наступним співвідношенням компонентів, мас. %: 90,0 5,0 5,0. Таблиця 1 Вплив рН буферної системи на інгібіторну активність №№ п/п 1 2 3 Екстрагуючий агент Ацетатний буфер, 0,1 М рН 4,5 6,0 7,4 Питома інгібіторна активність, IO/мг білка 0,173 0,163 0,220 Таблиця 2 Вплив природи екстрагуючих речовин на інгібіторну активність №№ п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Екстрагуючий агент Дистильована вода 0,1 М розчин NaCl 0,15 М розчин NaCl 0,5 М розчин NaCl 1 М розчин NaCl 1 М розчин сечовини 0,1 М ацетатний буфер, рН 7,4 + NaCl концентрацією 0,1 М 0,1 М ацетатний буфер, рН 7,4 + NaCl концентрацією 0,15 М 0,1 М ацетатний буфер, рН 7,4 + NaCl концентрацією 0,5 М 0,1 М ацетатний буфер, рН 7,4 + сахароза концентрацією 0,5 М 0,1 М ацетатний буфер, рН 7,4 + гліцерин концентрацією 0,5 М Питома інгібіторна активність, IO/мг білка 0,005 0,006 0,007 0,007 0,012 0,266 0,269 0,279 0,290 0,224 0,210 Таблиця 3 Вплив концентрації полісахариду на активність БАД №№ п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Концентрація полісахаридів в розчині, мас. % 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 Інгібіторна активність БАД, % від макс. 84,4 90,6 88,1 82,4 79,2 71,3 68,8 64,9 60,5 57,4 7 63015 8 Таблиця 4 Вплив природи полісахариду на активність БАД №№ п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Полісахариди Цитрусовий пектин Буряковий пектин Яблучний пектин Агар -Карагінан Альгінат натрію -Карагінан Гуміарабік Карбоксиметилцелюлоза Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Інгібіторна активність БАД % від макс. 91,8 85,6 80,3 34,2 21,5 18,0 13,6 5,7 0,8 Підписне Тираж 23 прим. Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601