Спосіб одержання комплексного бактерійного препарату

Способ получения комплексного бактерийного препарата аутохтоиного штамма путем соединения микроорганизма с основой, отличающийся тем, что в качестве основы используют активированный уголь, поверхность частиц которого соединяют с микробными клетками в концентрации на 1 мм2 2,1 • 10 - 1,0- 105, при этом активированный уголь используют в виде порошка с размером частиц менее 30 мкм. С > Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в медицине и ветеринарии. Прототипом является способ получения комплексного бактерийного препарата аутохтонного штамма путем соединения микроорганизма с основой [V]. Однако при рекомендуемом способе применения и дозировке в качестве лечебного средства он не обеспечивает в достаточной степени антагонистическую противоинфекционную активность, уровень приживляемости микроорганизмов на тканях, обладает сравнительно низкой биодоступностью (попадание в место, где препарат оказывает лечебный эффект). Задачей настоящего изобретения явля-. ется повышение качества препарата за счет улучшения антиинфекционной и эубиотиче-ской активности (биодоступности, приживляемости на тканях, антагонистического действия). Указанная задача решена за счет того, что в известном способе получения комп лексного бактерийного препарата аутохтонного штамма путем соединения микроорганизма с основой, согласно настоящему изобретению, в качестве основы ИСПОЛЬЗУЮТ активированный уголь, поверхность частиц которого соединяют с микробными клетками в концентрации на 1 мм2 2,1 • 103 1,0* 105, при этом активированный уголь используют в виде порошка с размером частиц менее 30 мкм. Согласно совокупности признаков разложения и закрепление микроорганизмов на поверхности слизистых может осуществляться только при достижении их поверхностной концентрации 2,1 -103 -1,0 • 10 на 1 мм2 тканей или объемной концентрации 108 10 и выше микробных клеток на 1 Мл. Учитывая, что создание необходимой минимальной объемной концентрации для размножения микроорганизмов на слизистых практически достичь не представляется возможным, авторы разработали способ создания локальной (точечной) концентрации микробных клеток, позволяющий обес о 4 w о 9043 печить на отдельных участках слизистой необходимую поверхностную концентрацию. Для этого в качестве основы использован активированный уголь с размером частиц менее 30 мкм. Частица угля указанных размеров способны конгломерировать микробные клерки между собой или образовывать комплексы клеток, закрепленных на поверхности частиц. При их максимальном насыщении микробными клетками и введении в организм в местах взаимодействия частиц угля со слизистой обеспечивается достаточная поверхностная локальная концентрация. Частицы угл я бол ее 30 мкм на слизистых не задерживаются и во взаимодействие с ней не вступают. Создание поверхностной локальной концентрации микроопг«зчизмов на угольных частицах 2,1 • 103 - 1,0 *105 микробных клеток на 1 мм может быть достигнуто путем взаимодействия определенного количегтва угля, имеющего соответствующую поверхность, которая зависит от размера часшц, количества микробных клеток, способных покрыть поверхность угля с заданн о й п о в е рх н о с т но й к он ц е н т ра ц ии . Превышение дозы микробных клеток не снижает ка* зство комплекс його биопрепарата, ио является экономически пе выгодным. Способ осуществляется следующим образом. Порошковидный уголь, состоящий из частиц размером до 30 мкм смешивают с микробными клетками аутохтонных или вакцинных штаммов микрооргатізмов в соотношении о, угля и 1,0 • t О9 - 3,0 '109 клеток. Полученную смегч выдерживают при температуре 4-10°Г в іение 20-40 минут при постоянной виб; зЦии. Далее смесь разбавляют физиоло? ичзским раствором хлористого натрия t ,9%) в соотношении 1:1, перенося в емкости, в которых полученный биопрепарат подвергают лиофильной сушке, соответствующей режиму сушки бактерийных прзпзрптов. Изобретение иллюстрируется следую1 щими приме "'" •* Пример 1. Обоснование антиинфекционной активмости. У белых крыс воспроизводят сальмонелезную инфекцию путем одноразового 5 введения сальмонелл. На третий день после заражения и о течение двух последующих дней четырем группам животных вводят комплексные и коммерческие биопрепараты, содержащие пограничные значения по-10 аврхностных концентраций (2,1 -103 и 1,0х хЮ5) микробных клеток на 1 мм2 угля. Одна группа зараженных жи ютных является контрольной. Проводят высев гомогенате слизистых 16 на питательные среды и подсчитывают количество выросших сальмонелл. Результаты приведены о таблице 1. Пример 2. Обоснование уровня приживляемости. 20 Определяют уровень приживляемости аутохтонных микроорганизмов в кишечнике у здоровых людей при введении комплексных биопрепаратов, включающих уголь с частицами менее 30 мкм и более 30 мкм (30-50) 25 и микробные клетки с пограничным значением поверхностных концентраций (2,1 -103 и 1,0* 105). В качестве контроля используют коммерческие бактерийные препараты, вводимые а аналогичных объемных концен-30 трациях(1,0 -109иЗ,0 -109). На протяжении 5 суток двукратно проводят посев кала для выявления количества вводимых микроорганизмов. Предварительно у всех волонтер о в п р о в од я т и ссл ед о в а ни е кал а н а 35 содержание нормальной микрофлоры кишечника. Результаты приведены в таблице 2. Использование изобретения позволит 40 повысить эффективность коррекции дисбиоза. Как видно из п риведенных данных табл.1 и 2 настоящее изобретение дает возможность получить препарат с высокой антиинфекционной и эубиотической 45 активностью. Таблица 1 Антиинфекционная активность коммерческих и комплексных биопрепаратов в отношении сальмонелл Группы животных, которым вводили комплексные і Показатель 5 5 3 3 после трехкратного введения концент. 1,0-10 2 микр. кл./мм и концент. 2,1-Ю микр. кл./мм и концент. 1,0-10 микр. кл./мм и активир. уголь типа АУВМ шечника крыс биопрепараты Биопрепарат, со- Биопрепарат, со- Биопрепарат, со- Биопрепарат, содерж. лактобак- держ. лактобакдерж. кишечн. держ. кишечн. Коммерч. лакто- Коммерч. коли9 9 терии (повер. терии (повер. палочки повыш. палочки повыш. бактерин 3,0'10 бактерин 1,010 концент. 1,0-10 2 микр. кл./мм и Высеваемость сальмонелл из слизистой ки дли коммерческие активир. уголь типа КАУ 0 0 активир. уголь типа АУВМ 0,3 10* активир. уголь типа КАУ 1,0-10* 3 3 Контрольная группа заражен микр. кл. в 1 см микр. кл. в 1 см ных животных 4,2-10-* 1,8ІО* 2,3-10* 9043 Таблица 2 Высеваемость кишечных палочек и мктобактерий и* фекалий человека в зависимости от вида примененного препарата и акспоэмции (микробные клетки/1 г фекалий) Вид препарата содержащего в каче До введения препарата Время после введения препаоата • сутках 2 стве основы активированный уголь 5 типа КАУ Препарат, содержащий лактобакте 3 рии 2,1 10 микр кл /мм TO 1010™-6010 2 Лактобактерин коммерч 1 010* микр 7 910 1 0 10*-9,010* 3 кл /см Препарат, содерж кишечн 5 т 710 З.ОЇО* 2 палочки 1 10 микр кл /мм е 710 9 Колибактерин коммерч 3,010 микр кл/с м я 8.0 1^-9,0 10 в е 5.