Спосіб індикації мікроорганізмів роду salmonella в сировині тваринного походження, птиці та водної фауни

Реферат: Спосіб індикації мікроорганізмів роду Salmonella в сировині тваринного походження, птиці та водної фауни включає збагачення мікроорганізмів в рідкому селективному середовищі з подальшим визначенням бактерій роду Salmonella на автоматичному аналізаторі. Прямий висів дослідного матеріалу проводять в селективному середовищ, як таке використовують цистеїновий бульйон з селенітом натрію. UA 90668 U (54) СПОСІБ ІНДИКАЦІЇ МІКРООРГАНІЗМІВ РОДУ SALMONELLA В СИРОВИНІ ТВАРИННОГО ПОХОДЖЕННЯ, ПТИЦІ ТА ВОДНОЇ ФАУНИ UA 90668 U UA 90668 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Корисна модель належить до ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної бактеріології і може використовуватись при контролі сировини в харчовій промисловості та санітарноепідеміологічних службах. Значна кількість збудників сальмонельозу значно ускладнює їх діагностику і потребує багато часу, тоді як в умовах виробництва і при закупівлі сировини необхідно провести експертизу якнайшвидше. В зв'язку з цим є необхідність розробки прискорення методів визначення збудників сальмонельозу. Досягнутий рівень в даній галузі характеризується наступними прикладами. Відомий "Спосіб виявлення бактерій роду Salmonella у продуктах харчування, патологічному матеріалі та об'єктах зовнішнього середовища за допомогою полімеразної ланцюгової реакції" по патенту України №8997, опубл. 15.09.2005 р., Бюл. №9. Спосіб полягає в виявлені специфічних фрагментів ділянок ДНК інфекційних агентів сальмонельозу. Недоліком способу є необхідність рідких реагентів для виділення ДНК, спеціальне обладнання для проведення експертизи, що значно удорожчує дослідження. Відомий спосіб виявлення бактерій згідно методичних рекомендацій "Методи детекції бактерій роду Salmonella, Listeria (L. Monocytogenes) із харчових продуктів, продовольчої сировини та кормів для тварин з використанням автоматичних аналізаторів VIDAS" Т.О. Гаркавенко, В.О. Загребельний та ін. -К, ДНДІЛДВСЕ, 2012.-29с. (найближчий аналог), який полягає в автоматичному визначенні сальмонел в наборі VIDAS після попереднього неселективного збагачення у забуферній лептонній воді з подальшим накопиченням бактерій в рідких селективних середовищах. Недоліками відомого способу є значний час підготовчого періоду (неселективне середовище попереднього збагачення, а саме забуферна лептонна вода, культивують протягом 24 год.) та значні матеріальні витрати на виготовлення лептонної води. Задача корисної моделі є прискорення та здешевлення процесу виявлення бактерій роду Salmonella, що дасть можливість проводити аналіз не тільки в спеціалізованих лабораторіях, айв умовах виробництва. Поставлена задача вирішується у способі індикації мікроорганізмів роду Salmonella в сировині тваринного походження, птиці та водної фауни, який полягає в збагаченні мікроорганізмів в рідкому селективному середовищі з подальшим визначенням бактерій роду Salmonella на автоматичному аналізаторі, згідно з корисною моделлю, проводять прямий висів дослідного матеріалу в селективному середовищі, як таке використовують цистеїновий бульйон з селенітом натрію. При цьому не застосовують бульйон Рапаппорта Васіліадіса та інкубацію протягом 18±2 год. Здійснюється спосіб наступним чином. Наважку продукту, в масі якої передбачається відсутність бактерій роду Salmonella, згідно з нормативно-технічною документацією, на дослідний зразок (наприклад 25г.), вносять до стерильного пакета, який призначений для гомогенізації або подрібнюють її стерильними 3 ножицями та вносять до стерильної колби. До наважки вносять 100,0 CМ селективного бульйону цистеїнового з селенітом натрію. Колбу помішують повільними коливальними рухами, а вміст пакета - гомогенізують. Посів поміщають до термостата і інкубують за температури 37±1 °C протягом 18±2 год. 3 Після інкубування переносять по 1,0 см культури з селективного бульйону в пробірку з 10,0 3 CМ М-бульйону. Культивують протягом 18 годин за температури 42±1 °C. Далі проводять процедуру відповідно до методичних рекомендацій (найближчого аналогу). Експериментальні дослідження запропонованого способу були проведені в біотехнологічному науково-навчальному центрі ОНУ імені 1.1. Мечникова. Результати досліджень наведені в таблиці 1. 50 Таблиця 1 Дослід за № проб 3 позитивним найближчим результатом аналогом / по способу Найближчий аналог 16 М'ясо свіже охолоджене яловиче Спосіб 16 Найближчий аналог 0 М'ясо свіже охолоджене свиняче Спосіб 0 М'ясо свіже охолоджене птиці Найближчий аналог 3,9, 14, 18,26 Вид дослідного матеріалу 1 Час аналізу 48-5050 41-43 48-50 41-43 48-50 UA 90668 U М'ясо морожене яловиче М'ясо морожене свиняче М'ясо морожене птиці Риба свіжа Риба морожена Молюски морожені Ковбаси варені та напівкопчені, сирокопчені Корм для тварин та риб Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб Найближчий аналог Спосіб 3,9, 14, 16, 26 0 0 0 0 4, 7, 8, 13, 17,21 4, 5, 8, 13, 17,21 16, 27 16, 27 7, 13, 15 7, 13, 15 5, 9, 12 5, 9, 12 0 1 0 2. 9 41-43 49-50 42-43 50 42-43 49-50 42-43 48-50 41-43 49-50 42-43 49-50 42-43 48-50 41-43 49-50 42-43 Як видно з наведених результатів запропонований спосіб забезпечує виділення та підтвердження сальмонел значно скоротивши час на дослідження та втрати на матеріали для приготування пептонно-буферної води. 5 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 Спосіб індикації мікроорганізмів роду Salmonella в сировині тваринного походження, птиці та водної фауни, який полягає в збагаченні мікроорганізмів в рідкому селективному середовищі з подальшим визначенням бактерій роду Salmonella на автоматичному аналізаторі, який відрізняється тим, що проводять прямий висів дослідного матеріалу в селективному середовищі, як таке використовують цистеїновий бульйон з селенітом натрію. Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2