Кристалічні інгібітори pі3-кінази

Реферат: Запропонований 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1Н-піразоло[3,4-d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N,N-біс(2-метоксіетил)гекс-5-инамід в формі твердого кристалічного гідрату і в твердій кристалічній безводній формі. Запропонована також суха порошкова фармацевтична композиція для інгаляції, що містить вказану тверду форму. UA 113300 C2 (12) UA 113300 C2 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Опис Галузь техніки, до якої належить винахід Даний винахід надає нові кристалічні форми сполуки, яка інгібує фосфоінозитид-3-кінази (PI3-кінази), і їх застосування в терапії, особливо при лікуванні запальних захворювань, таких як ХОЗЛ (хронічна обструктивна хвороба легенів) і астма. Вказані нові кристалічні форми можна використати в сухих порошкових композиціях для інгаляцій. Рівень техніки Ліпідкінази каталізують фосфорилування ліпідів з утворенням сполук, що беруть участь в регуляції широкого кола фізіологічних процесів, включаючи клітинну міграцію і адгезію. PI3кінази являють собою пов'язані з мембранами білки і належать до класу ферментів, які каталізують фосфорилування ліпідів, які самі пов'язані з клітинними мембранами. Взоцим PI3кінази дельта (PI3-кіназа δ) являє собою одну з чотирьох ізоформ типу I PI3-кінази, відповідальну за вироблення різних 3'-фосфорилованих фосфоінозитидів, які опосередковують клітинні сигнальні системи і беруть участь в запаленнях, сигнальних системах факторів росту, злоякісних перетвореннях і в імунітеті [див. огляд Rameh, L. E. and Cantley, L. C. J. Biol. Chem., 1999, 274:8347-8350]. Участь PI3-кінази в контролюванні запалень була підтверджена на деяких моделях з використанням інгібіторів pan-PI3 кінази, таких як LY-294002 і вортманін [Ito, K. et al., J Pharmacol. Exp. Ther., 2007, 321:1-8]. Недавні дослідження були проведені з використанням або селективних інгібіторів PI3-кінази, або з використанням нокаутних мишей, у яких була відсутня специфічна ізоформа ферменту. Вказані дослідження продемонстрували роль шляхів, що контролюються ферментами PI3-кінази, в запальних процесах. Було виявлено, що PI3-кіназа δ є селективним інгібітором IC-87114, який інгібує гіперчутливість дихальних шляхів, виділення IgE, експресію прозапальних цитокінів, накопичення запальних клітин в легенях і судинну проникність в овальбумін-сенсибілізованих, овальбумін-індукованих мишей [Lee, K. S. et al., J. Allergy Clin. Immunol., 2006, 118:403-409 і Lee, K. S. et al., FASEB J., 2006, 20:455-65]. Крім того, IC-87114 знижує накопичення нейтрофілів в легенях мишей і ослабляє функції нейтрофілів, стимульованих TNFα [Sadhu, С. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 2003, 308:764-9]. Ізоформа PI3-кінази δ активується інсуліном і іншими факторами росту, а також сигнальною системою білка, сполученого з G-білком, і запальними цитокінами. Недавно повідомлялося, що подвійний δ/γ інгібітор PI3-кінази TG100-115 інгібує легеневу еозинофілію і накопичення інтерлейкіну-13, а також муцину, і гіперчутливість дихальних шляхів на мишачій моделі, при введенні у вигляді аерозолів. Ті ж автори повідомляли також, що вказана сполука здатна інгібувати легеневу нейтрофілію, викликану або LPS (ліпополісахаридами), або тютюнопаління [Doukas, J. et al., J Pharmacol. Exp. Ther, 2009, 328:758-765]. Оскільки вона також активується оксидативним стресом, мабуть, ізоформа PI3-кінази δ може служити мішенню для терапевтичних втручань у вказані захворювання, при яких спостерігаються високі рівні оксидативного стресу. Нижчележачі медіатори шляху передачі сигналу PI3-кінази включають Akt (серин/треонін-протеїнкіназа) і мішень рапаміцину в клітинах ссавців, фермент mTOR. Останні роботи дозволяють передбачити, що активування PI3-кінази δ, що приводить до фосфорилуванню Akt, здатне спричинити стан стійкості до кортикостероїдів в інших випадках кортикостероїд-чутливих клітин [To, Y. et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2010, 182:897-904]. Вказані спостереження привели до гіпотези, що вказаний сигнальний каскад може бути одним з механізмів, відповідальних за кортикостероїдну несприйнятливість при запаленнях, що спостерігаються у легеневих пацієнтів, страждаючих ХОЗЛ, а також у астматиків, які курять, тим самим, піддаючи свої легені підвищеному оксидативному стресу. Дійсно, передбачають, що теофілін, сполука, яку використовують при лікуванні як ХОЗЛ, так і астми, змінює на зворотне стероїдну несприйнятливість за рахунок механізму, що включає взаємодію з сигнальними шляхами, що контролюються PI3-кіназою δ [To, Y. et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2010, 182:897-904]. У міжнародній патентній заявці WO2011/048111 розкритий ряд сполук, які інгібують PI3кінази, особливо PI3-кіназу δ, включаючи 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1H-піразоло[3,4d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2-хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N, N-біс(2метоксіетил)гекс-5-иламід в формі вільної основи, яка розкрита у вказаній заявці як приклад 83. Ця сполука розкрита також в WO2012/052753. 1 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Приведена вище сполука у вказаній заявці названа "сполукою формули (I)" або "вільною основою сполуки формули (I)". До появи більш раннього винаходу заявників (WO2011/048111), відомі до того часу інгібітори PI3-кінази, призначалися для перорального введення. Однак небажаний наслідок такого підходу полягає в тому, що немішеневі тканини організму, особливо печінка і кишечник, мабуть, зазнають впливу фармакологічно активних концентрацій вказаного лікарського засобу. Альтернативна стратегія полягає в тому, щоб створити такі способи лікування, при яких вказаний лікарський засіб вводився безпосередньо до запаленого органу за допомогою місцевої терапії. У разі контрольованого запалення (або створення іншого терапевтичного ефекту) в легенях, цього можна досягнути шляхом інгаляції вказаного лікарського засобу, яка володіє перевагою збереження вказаного лікарського засобу переважно в легенях, тим самим, мінімізуючи ризик системної токсичності. Для досягнення тривалої дії можна використати відповідну лікарську форму, яка створює "резервуар" активного лікарського засобу. Сполука формули (I) була, відповідно, розкрита як сполука, яку можна застосовувати для місцевого введення в легені (див. WO2011/048111). Лікарський засіб для місцевого введення в легені шляхом інгаляції, який повинний забезпечити афінність відносно органу мішені і тривалу ефективність, також повинен бути приготований таким чином, щоб забезпечити зазделегідь визначену дозу вказаного лікарського засобу, який, в свою чергу, повинний володіти відтворюваними і прогонозованими властивостями. Забезпечення прийнятної і відтворюваної хімічної і фізичної стабільності вказаного лікарського засобу в лікарській формі є ключовою задачею при створенні фармацевтичних продуктів для всіх типів фармацевтичних дозованих форм. Кристалічні форми переважні, оскільки вони являють собою форми, що піддаються мікронізації. Для використання як інгаляції існують 3 основні лікарські форми - сухий порошковий інгалятор (DPI), дозуючий інгалятор (MDI) і небулайзер на водній основі (ручний або настільний). Однак більшу частину пристроїв для інгалцяції, що є в продажу, складають порошкові інгалятори (DPI) і, таким чином, забезпечують загальноприйнятий спосіб доставки лікарських засобів шляхом інгаляції. Існує множина комерційних DPI продуктів, таких як фліксотид (флутиказонпропіонат), адваїр (флутиказонпропіонат/салметерол), симбікорт (будезонід/формотерол), пулмікорт (будезонід), серевент (салметерол) і форадил (формотерол). Сухі порошкові лікарські форми для інгаляцій звичайно складаються з суміші частинок лікарського засобу (розміром менше 10 мікрон і звичайно нижче 5 мікрон) з розріджувачів, звичайно лактозою. Оскільки звичайні дози, що вимагаються для лікування шляхом інгаляцій, знаходяться в межах мікрограмів, розріджувач полегшує обробку і розподіл фармацевтичних засобів в індивідуальні дозовані форми, наприклад, в капсули або блістери, або полегшує процес відмірювання певних доз з об'ємного контейнера для подальшого введення пацієнту. Тому звичайно маса розріджувача (який частіше за все є лактозою) може бути більше маси речовини вказаного лікарського засобу. У такому оточенні можна отримати прийнятні лікарські форми деяких продуктів простим змішуванням вказаного лікарського засобу з лактозою. Інші продукти можуть зажадати додання інших додаткових ексципієнтів або інших стадій обробки для того, щоб вказаний продукт відповідав вимогам контролюючих органів. Так, наприклад, в US7186401 B2 (Jagotec AG et al.) розкрито, що додання стеарату магнію до сухих порошкових лікарських композицій для інгаляцій підвищує їх стійкість до вологи і дозволяє використати 2 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 більш високі дози тонко подрібнених частинок або більш дрібні фракції частинок для зберігання у вологих умовах. У WO00/53157 (Chiesi) розкритий стеарат магнію як лубрикант, призначений для використання в сухих порошкових лікарських композиціях для інгаляції, який ефективний у разі збільшення дози дуже дрібних частинок деяких лікарських засобів. У US2006/0239932 (Monteith) розкрита тверда фармацевтична композиція для інгаляцій, що містить деякі речовини активних інгредієнтів, які схильні до хімічної взаємодії лактозою, лактозу і стеарат магнію. Розкрито, що стеарат магнію інгібує розкладання активного інгредієнта, що викликається лактозою, приблизно за рахунок реакції Майара, яка включає взаємодію аміногрупи активного інгредієнта з лактозою. У US2012/0082727 (Chiesi) розкритий спосіб інгібування або зменшення хімічного розкладання активного інгредієнта, що містить групу, що піддається гідролізу, вибрану з групи, що складається з карбонатної групи, карбаматної групи і складноефірної групи, в порошковій лікарській формі для інгаляцій, що включає частинки носія (такі як частинки лактози), причому вказаний спосіб включає покриття щонайменше частини поверхні вказаних частинок носія стеаратом магнію. Таким чином, зберігається необхідність в створенні лікарських форм селективних інгібіторів PI3-кінази для використання в інгаляційній терапії, які будуть мати потенціал для забезпечення терапевтичної ефективності при астмі, ХОЗЛ і інших запальних захворюваннях легенів. Зокрема, зберігається задача забезпечення сполуки формули (I) в кристалічній формі, яке буде володіти відповідною фізичною і хімічною стабільністю, переважно, буде підходити для мікронізації і буде сумісне з фармацевтичними ексципієнтами для інгаляційної терапії, особливо з лактозою. Суть винаходу У першому аспекті даний винахід надає сполуку формули (I): , тобто, 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1H-піразоло[3,4-d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N, N-біс(2-метоксіетил)гекс-5-инамід в формі твердого кристалогідрату. У другому аспекті даний винахід надає сполуку формули (I): , 3 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 тобто, 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1H-піразоло[3,4-d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N, N-біс(2-метоксіетил)гекс-5-инамід в твердій кристалічній безводній формі. Такі речовини тут і далі називаються "твердими кристалічними формами даного винаходу". Фармацевтичні композиції, які містять тверді кристалічні форми даного винаходу (необов'язкове мікронізовані), тут і далі називаються "композиціями даного винаходу". Як роз'яснюється в розділі "Приклади", тверді кристалічні форми даного винаходу мають високі температури плавлення (близько 183 °C або вище), мабуть, володіють хорошою фізичною стабільністю (за даними порошкової дифракції рентгенівських променів, термогравіметричного аналізу (ТГА), диференціальної скануючої калориметрії (ДСК), динамічної сорбції парів (ДСП) і ІЧ аналізів) і володіють хорошою хімічною стабільністю (за даними ВЕРХ аналізу). Вказані тверді кристалічні форми даного винаходу володіють хорошою фізичною стабільністю при комбінуванні з лактозою. Вказана тверда кристалогідратна форма володіє хорошою хімічною стабільністю при комбінуванні з лактозою. Вказана тверда кристалічна безводна форма володіє хорошою хімічною стабільністю при комбінуванні з лактозою в присутності металевої солі стеаринової кислоти, такої як стеарат магнію. Вказані тверда кристалогідратна форма і тверда кристалічна безводна форма, мабуть, мають родинні (але відмінні) кристалічні структури. Короткий опис фігур На фіг. 1 показана картина порошкової дифракції рентгенівських променів, отримана для зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалогідрату. На фіг. 2 показана картина порошкової дифракції рентгенівських променів, отримана для зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. На фіг. 3 показана ізотермічна крива ДСП зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалогідрату. На фіг. 4 показана зміна ДСП в масовій кривій зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалогідрату. На фіг. 5 показана ізотермічна крива ДСП зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. На фіг. 6 показана зміна ДСП в масовій кривій зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. На фіг. 7 показаний ІЧ спектр зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалогідрату. На фіг. 8 показаний ІЧ спектр зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. На фіг. 9 показаний термічний аналіз зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалічного гідрату з використанням диференціальної скануючої калориметрії. На фіг. 10 показаний термічний аналіз зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі з використанням диференціальної скануючої калориметрії. На фіг. 11 показаний термічний аналіз зразка сполуки формули (I) в формі твердого кристалічного гідрату з використанням ТГА. На фіг. 12 показаний термічний аналіз зразка сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі з використанням ТГА. На фіг. 13 показана ізотермічна крива ДСП зразка мікронізованої сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. На фіг. 14 показаний ІЧ спектр зразка суміші сполуки формули (I) в твердій ® кристалогідратній формі і Lactohale200 . На фіг. 15 показана картина порошкової дифракції рентгенівських променів, отримана для ® зразка суміші сполуки формули (I) в твердій кристалогідратній формі і Lactohale200 . На фіг. 16 показаний ІЧ спектр зразка суміші сполуки формули (I) в твердій кристалічній ® безводній (мікронізованій) формі і Lactohale200 . На фіг. 17 показана картина порошкової дифракції рентгенівських променів, отримана для зразка суміші сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі (мікронізованій) і ® Lactohale200 . На фіг. 18 показаний ІЧ спектр зразка суміші сполуки формули (I) в твердій кристалічній ® безводній формі (мікронізованій), Lactohale200 і стеарату магнію. На фіг. 19 показана картина порошкової дифракції рентгенівських променів, отримана для зразка суміші сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі (мікронізованій), ® Lactohale200 і стеарату магнію. Докладний опис переважного варіанту здійснення даного винаходу Сполука формули (I) як активний інгредієнт 4 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Сполука формули (I) являє собою подвійний інгібітор PI3K дельта/PI3K гамма, де термін інгібітор, як використано в даному описі, стосується сполуки, яка знижує (наприклад, щонайменше на 50 %) або виключає біологічну активність білка-мішені, наприклад, PI3K дельта ізоцима, в in vitro ферментному аналізі. Термін інгібітор дельта/гамма, як використано в даному описі, стосується того факту, що вказана сполука інгібує, до деякої міри, обидві ферментні ізоформи, хоча не обов'язково, до однієї і тієї ж міри. Сполука формули (I) є активною в клітинних системах скринування і, тим самим, демонструє, що володіє відповідними властивостями для проникнення в клітини і, тим самим, викликає внутрішньоклітинні фармакологічні ефекти. Загальні способи синтезу вказаної сполуки формули (I) розкриті в WO2011/048111, зміст якого включений в даний опис за допомогою посилання у всій повноті, і можна використати спосіб, аналогічний способу прикладу Відповідно, сполуку формули (I) захищають від світла під час і після синтезу, шляхом використання, наприклад, лабораторного посуду жовтого кольору або світлонепроникної упаковки (наприклад, упаковки в фользі). Фармацевтична лікарська форма даного винаходу містить сполуку формули (I) як активний інгредієнт в терапевтично ефективній кількості. Терапевтично ефективну кількість сполуки формули (I) визначають як кількість, достатню для даної дози або множини розділених доз, для досягнення терапевтично значущого ефекту у суб'єкта, коли його вводять вказаному суб'єкту згідно зі схемою лікування. Відповідні фармацевтичні композиції даного винаходу являють собою сухі порошкові фармацевтичні композиції для інгаляцій. В одному з варіантів здійснення вказана суха порошкова фармацевтична лікарська форма включає від близько 0,004 % мас. до близько 50 % мас. сполуки формули (I) з розрахунку на масу вказаної сухої порошкової фармацевтичної лікарської форми і з розрахунку на масу сполуки формули (I) в формі вільної основи; наприклад, від близько 0,02 % мас. до близько 50 % мас., від близько 0,02 % мас. до близько 25 % мас., від близько 0,02 % мас. до близько 20 % мас. або від близько 0,02 % мас. до близько 15 % мас. Переважно, вказана суха порошкова фармацевтична лікарська форма включає від близько 0,1 % мас. до близько 20 % мас., наприклад, від близько 0,1 % мас. до близько 5 % мас. сполуки формули (I) з розрахунку на масу вказаної сухої порошкової фармацевтичної лікарської форми. Фармацевтична композиція даного винаходу може містити сполуку формули (I) як єдиний активний інгредієнт. Однак фармацевтична композиція може містити і інші активні інгредієнти. Вказану фармацевтичну композицію можна також вводити спільно з одним або більше іншими активними інгредієнтами (або однією або більше фармацевтичними композиціями, що містять один або більше активних інгредієнтів). Приклади інших активних інгредієнтів приведені нижче. Сполуку формули (I) отримують в подрібненій формі, такій, яка зручна для сухої порошкової інгаляції. Фармацевтична композиція даного винаходу звичайно може містити частинки лікарського засобу зі середнім об'ємним діаметром (D50) від близько 0,5 мкм до близько 10 мкм, особливо від близько 1 мкм до близько 5 мкм. Придатним способом визначення розміру частинок є лазерна дифракція, наприклад, з використанням приладу Mastersizer 2000S від Malvern Instruments. Прилади доступні також від Sympatec. Для визначення розподілу частинок по розмірах середнє значення D50 являє собою розмір в мікронах, що розділяє розподіл частинок по розмірах на значення вище і нижче половини. Основним результатом, що отримується за допомогою лазерної дифракції, є розподіл по об'ємах, тому D50 є актуальним, і Dv50 (середнє для розподілу по об'ємах) і, як використано в описі, стосується розподілу частинок по розмірах, отриманих з використанням лазерної дифракції. Величини D10 і D90 (коли їх використовують в контексті зі способом лазерної дифракції, в застосуванні до значень Dv10 і Dv90) стосуються розмірів частинок, де 10 % розподілу лежить нижче значення D10, і 90 % розподілу лежить нижче значення D90, відповідно. Частинки придатного розміру для використання в сухих порошкових лікарських композиціях для інгаляцій можна отримати будь-яким придатним способом, добре відомим фахівцям в даній галузі. Частинки лікарського засобу придатного для інгаляцій розміру можна отримати різними способами зменшення розмірів частинок, включаючи розмелювання або більш переважно мікронізацію, наприклад, використовуючи прилад мікронізації струминний млин (наприклад, виробництва Hosokawa Alpine). Альтернативно, частинки придатного розміру можна отримати, передусім, шляхом сушіння розпиленням, заморожування розпиленням, контрольованою кристалізацією, наприклад, контрольованим осадженням, супер-критичною кристалізацією рідини, кристалізацією ультразвуком або іншими відповідними методами кристалізації, 5 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 наприклад, в апаратах безперервної кристалізації. Таким чином, в одному аспекті даного винаходу запропонована сполука формули (I) в мікронізованій формі. Сольвати - гідратна форма сполуки формули (I) В одному з варіантів здійснення запропонована сполука формули (I) в формі гідрату. Зокрема, запропонована сполука формули (I) в формі твердого кристалічного гідрату, отриманого кристалізацією сполуки формули (I) з дихлорметану необов'язково в суміші з метанолом (наприклад, що містить аж до 20 % наприклад, аж до 10 %, наприклад, 4,8 % об./об. метанолу) при кімнатній температурі, наприклад, близько 22 °C. Було виявлено, що утворення гідрату не вимагає додання додаткової води до реакційної суміші (тобто будь-яка залишкова вода в розчиннику або привнесена в продукт з попередньої стадії реакції і/або волога в атмосфері є достатньою). Однак воду можна додавати до розчинника, наприклад, можна додавати від 0,1 до 5 % води. Докладний спосіб отримання такого твердого кристалогідрату сполуки формули (I) описаний в прикладі 1. В одному з варіантів здійснення запропонована тверда кристалогідратна форма сполуки формули (I), картина порошкової дифракції рентгенівських променів якої по суті така ж, як подано на фіг. 1. Спосіб отримання даних порошковою дифракцією рентгенівських променів описаний в розділі Загальні методики, і отримані результати обговорені в прикладі 3. Так, запропонована гідратна форма сполуки формули (I) в кристалічній формі, в картині порошкової рентгенівської дифракції якої присутній щонайменше один (наприклад, один, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять або всі чотирнадцять) піків при 5,6, 7,6, 9,6, 11,1, 12,2, 12,6, 13,3, 13,9, 15,9, 17,0, 18,9, 20,3, 21,8, 23,1 (0,2 градуси, 2-тета значення, причому вказані піки є характеристичними піками кристалогідратної форми. Піки при 9,6, 13,3, 13,9, 17,0, 18,9, 20,3 і 23,1 особливо характерні для гідратної форми, і тому, переважно спостерігається щонайменше один (наприклад, один, два, три, чотири, п'ять, шість або всі сім) з вказаних піків. Не обмежуючись якою-небудь теорією, тверда кристалогідратна форма сполуки формули (I) може бути канальною гідратною формою. Альтернативно, вода може бути присутньою в порах кристала або на поверхні кристала. У будь-якому випадку, як представлено в прикладах, вода не становить значної частини кристалічної решітки, і кристалічна форма залишається стабільною при видаленні або доданні води. Досліджували фізичну і хімічну стабільність твердої кристалогідратної форми сполуки формули (I), описаної в описі. Для оцінки фізичної стабільності зразки вказаної гідратної форми сполуки формули (I) зберігали в контейнерах, відкритих для навколишньої атмосфери, при різних температурах і різних значеннях відносної вологості. Фізичну стабільність зразків досліджували, використовуючи термогравіметричний аналіз (ТГА), диференціальну скануючу калориметрію (ДСК), динамічну сорбцію парів (ДСП), інфрачервону спектроскопію (ІЧ) і порошкову дифракцію рентгенівських променів. Докладні експериментальні методики викладені в розділі "Загальні методики", і отримані результати приведені в прикладі 4 (таблиця 3). Як обговорюється в прикладі 4, було виявлено, що вказана гідратна форма сполуки формули (I) володіє хорошою загальною фізичною стабільністю. Однак за даними ДСП аналізу реєструється втрата маси в 2,2 %, і було виявлено, що отриманий сухий продукт є гігроскопічним. Невеликі відмінності в ІЧ спектрах і в результатах порошкової дифракції рентгенівських променів спостерігалися для зразків в більш сухих умовах, однак вказані відмінності були приписані втраті води, що спостерігається в дослідженнях ДСП, причому цілісність кристалічної структури зберігається після втрати води і подальшої регідратації. Для оцінки хімічної стабільності зразки вказаної гідратної форми сполуки формули (I) готували в метанолі і аналізували, використовуючи ВЕРХ. Отримані результати приведені в прикладі 5 (таблиця 6), звідки випливає, що вказана гідратна форма сполуки формули (I) виявляється хімічно стабільною, хоча визначається деяка чутливість до світла. Сухі порошкові фармацевтичні композиції звичайно містять лактозу як стабілізуючий носій для активного інгредієнта. Тому проводили дослідження сумісності вказаної гідратної форми сполуки формули (I) з лактозою. Досліджували як фізичну, так і хімічну сумісність твердої кристалогідратної форми сполуки формули (I) з лактозою. Для оцінки фізичної сумісності готували високі концентрації композицій вказаної гідратної форми сполуки формули (I) і лактози, потім їх аналізували при різних температурах і різних значеннях вологості, як приведено в прикладі 6. Очевідно, що суміші, що тестуються, виявилися фізично сумісними у всіх досліджених умовах. 6 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Для оцінки хімічної сумісності готували більш низькі концентрації (в порівнянні з тими, які використали в дослідженнях фізичної сумісності) композицій вказаної гідратної форми сполуки формули (I) з лактозою в метанолі і аналізували, використовуючи ВЕРХ. Отримані результати приведені в прикладі 7 (Таблиця 9), звідки випливає, що вказана гідратна форма сполуки формули (I) і лактози хімічно сумісні. Внаслідок досліджень авторів даного винаходу, можна зробити висновок, що вказана гідратна форма сполуки формули (I) володіє хорошою фізичною і хімічною стабільністю. Комбінації вказаної гідратної форми сполуки формули (I) з лактозою володіють як хімічною, так і фізичною стабільністю, свідчачи про придатність для використання в фармацевтичних композиціях. Безводна форма сполуки формули (I) В одному з варіантів здійснення запропонована сполука формули (I) в безводній формі. Зокрема, запропонована сполука формули (I) в безводній твердій кристалічній формі, отримана шляхом кристалізації споолуки формули (I) з 1-пропанолу. Придатним є, якщо вказаний 1пропанол є сухим, наприклад, містить максимально близько 0,9 % мас./мас. води. В одному з варіантів здійснення 1-пропанол містить максимально 0,8 %, 0,7 %, 0,6 %, 0,5 %, 0,4 %, 0,3 %, 0,2 % або 0,05 % мас./мас. води. Придатним є, якщо вказаний 1-пропанол містить максимально 0,2 % води. Придатним є, якщо кристалізацію здійснюють в присутності акцептора металів. Придатні акцептори металів являють собою матеріали, які адсорбують метали, причому їх легко відділяти від сполуки, що представляє інтерес (тобто сполуки формули (I)). Наприклад, функціоналізовані діоксиди кремнію особливо придатні як акцептори металів, оскільки після того, як метал адсорбується, вказаний комплекс метал-діоксид кремнію можна потім легко відділити від сполуки, що представляє інтерес. Функціональні групи, які утворюють стабільні комплекси з іонами металів, включають групи, що містять один або більше азотних і/або сірчаних центрів, і добре відомі фахівцям в даній галузі. Прикладом придатного комерційно доступного акцептора металів є SiliaMetS® Thiol (тіольне похідне силікагелю, яке можна використати як акцептор різних металів, включаючи Pd, Pt, Cu, Ag і Pb). Придатним є, якщо акцептор металів присутній в кількості, достатній для забезпечення концентрації іонів металу, що досягається нижче 20 ч./млн, переважно нижче 10 ч./млн. В одному з варіантів здійснення вказаний акцептор металу присутній в кількості 1-10 % мас./мас., наприклад, 2-8 % мас./мас. або 5 % мас./мас. з розрахунку на масу сполуки формули (I). Придатним є, якщо кристалізацію здійснюють, охолоджуючи розчин сполуки формули (I) і розчинника, починаючи з підвищеної температури (наприклад, 80-95 °C), безперервно (тобто безперервне охолоджування) або поетапно (тобто чергуючи охолоджування і витримування розчину при конкретній температурі). Придатні температурні градієнти (безперервні або поетапні) для охолоджування включають інтервали 95-15 °C, 95-20 °C, 90-20 °C, 80-20 °C, 9590 °C, 95-85 °C, 95-80 °C 90-85 °C і 80-20 °C. В одному з варіантів здійснення вказаний розчин охолоджують від близько 80-95 °C до кімнатної температури (наприклад, близько 20-22 °C). Докладне отримання такої твердої кристалічної безводної форми сполуки формули (I) представлене в прикладі 2. В одному з варіантів здійснення запропонована тверда кристалічна безводна форма сполуки формули (I), картина порошкової рентгенівської дифракції якої по суті така ж, як подано на фіг. 1. Спосіб отримання даних порошкової рентгенівської дифракції розкритий в розділі "Загальні методики", і отримані результати обговорюються в прикладі 3. Так, запропонована сполука формули (I) в кристалічній безводній формі, картина рентгенівської порошкової дифракції якої містить щонайменше один (наприклад, один, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або всі десять) піків при 5,6, 7,9, 11,2, 12,3, 15,6, 17,6, 18,4, 21,4, 22,5, 24,2 (0,2 градус, 2-тета величини, причому вказані піки є характеристичними для кристалічної безводної форми. Піки при 17,6, 18,4, 22,5 і 24,2 є особливо характерними для безводної форми, і тому переважно спостерігати щонайменше один (наприклад, один, два, три або всі чотири) з вказаних піків. Досліджували фізичну і хімічну стабільність сполуки формули (I) в твердій кристалічній безводній формі. Для оцінки фізичної стабільності зразки безводної форми сполуки формули (I) в немікронізованій і в мікронізованій формі зберігали у відкритих для навколишньої атмосфери контейнерах при різних температурах і різних значеннях відносної вологості, використовуючи ТГА, ДСК, ДСП, ІЧ і порошкову дифракцію рентгенівських променів, як описано вище для гідратної форми сполуки формули (I). Отримані результати приведені в прикладі 4. Як обговорюється в прикладі 4, було виявлено, що безводна форма сполуки формули (I) (як немікронізована, так і мікронізована) фізично стабільна у всіх досліджених умовах. 7 UA 113300 C2 5 10 15 20 Для оцінки хімічної стабільності зразки безводної форми сполуки формули (I) (немікронізованій і мікронізованій) готували в метанолі і аналізували, використовуючи ВЕРХ. Отримані результати приведені в прикладі 5 (таблиці 7 і 8), на основі яких було виявлено, що безводна форма сполуки формули (I) (як немікронізована, так і мікронізована) хімічно стабільна, хоча відмічається деяка сутливість до світла. Очевидно, що хімічна стабільність безводної форми сполуки формули (I) порівнянна з хімічною стабільністю вказаної гідратної форми сполуки формули (I). Досліджували сумісність твердої кристалічної безводної форми сполуки формули (I) з лактозою. Досліджували як фізичну, так і хімічну сумісність безводної форми сполуки формули (l) з лактозою. Для оцінки фізичної сумісності готували високі концентрації композицій безводної форми (мікронізованої) сполуки формули (I) і лактози, потім їх аналізували при різних температурах і в умовах різної вологості, як приведено в прикладі 6. Очевідно, що суміші, що тестуються, виявилися фізично сумісними у всіх досліджених умовах. Для оцінки хімічної сумісності готували більш низькі концентрації (в порівнянні з тими, які використали в дослідженнях фізичної сумісності) композицій безводної форми (мікронізованої) сполуки формули (I) з лактозою і аналізували, використовуючи ВЕРХ. Отримані результати приведені в прикладі 7 (таблиця 10). з яких випливає, що в деяких умовах композиції безводної форми і лактози зазнають розкладання. Продукти розкладання досліджували, і основний продукт розкладання ідентифікували за допомогою мас-спектроскопії як такий, що є однією або обома речовинами, зображеними як D019328: 25 30 35 Вказаний продукт розкладання, мабуть, є результатом додання води по потрійному зв'язку алкіну і може існувати у вигляді однієї або двох форм з ідентичною масою (або може існувати в обох формах), в залежності від орієнтації додання води по потрійному зв'язку. Той самий продукт розкладання спостерігався під час вимушеного розкладання безводної форми сполуки формули (I) іонами металу. Внаслідок подальших досліджень висунене припущення, що розкладання безводної форми сполуки формули (I) вимагає присутності іонів металу і води, і прискорюється при підвищених температурах. Подальше дослідження, що включає тестування підвищеної стабільності (тобто експонування речовини вказаного лікарського засобу при 80 °C в закритій ампулі, див. приклад 7), привело авторів винаходу до підтвердження того, що щонайменше утвориться продукт розкладання, зображений як D019492 на схемі 1 (нижче). Більш того автори даного винаходу також прийшли до висновку, що подальший продукт розкладання (D019493) може утворюватися внаслідок гідролітичного розщеплення піримідинонового кільця і подальшій внутрішньомолекулярний реакції з групою алкіну. D019349 являє собою приблизно проміжний 8 UA 113300 C2 продукт розкладання, який спостерігався в деяких умовах температури і відносній вологості при тестуванні стабільності (дані не представлені). Схема 1 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Досліджували додання стеарату магнію до комбінації безводної форми сполуки формули (I) і лактози. Було виявлено, що вказана комбінація безводної форми сполуки формули (I) з лактозою і стеаратом магнію є фізично стабільною (приклад 8). Однак несподівано було виявлено, що додання стеарату магнію спричиняє підвищення хімічної стабільності комбінації безводної форми сполуки формули (I) і лактози (приклад 9). Аналогічний стабілізуючий ефект був виявлений і з використанням інших металевих солей стеаринової кислоти, особливо стеарату натрію і стеарату кальцію (приклад 10). Не бажаючи зв'язуватися з якою-небудь теорією, мабуть, металеві солі стеаринової кислоти, такі як стеарат магнію, можуть діяти як захисні агенти проти хімічного розкладання алкінної групи в сполуці формули (I) і проти хімічного розкладання піримідинонового кільця в сполуці формули (I), яке спостерігають, якщо безводна форма сполуки формули (I) знаходиться в суміші з лактозою. У результаті автори даного винаходу виявили, що тверда кристалічна безводна форма сполуки формули (I) володіє більш високою фізичною стабільністю, чим тверда кристалогідратна форма сполуки формули (I) нарізно, але виявили, що безводна форма виявляється менш стабільною з лактозою. Однак автори даного винаходу виявили, що вказану проблему можна подолати доданням металевої солі стеарату, такої як стеарат магнію. Автори екстраполювали ці знахідки з металевими солями стеаринової кислоти до металевих солей стеарилфумарату. Фармацевтичні композиції для інгаляції У даному винаході запропоновані фармацевтичні композиції, що містять тверді кристалічні форми даного винаходу в суміші з одним або більше розріджувачами або носіями. Бажано, щоб композиції містили лактозу як розріджувач або носій. Як використано в даному описі, термін "лактоза" стосується компонента, що містить лактозу, включаючи моногідрат α-лактози, моногідрат β-лактози, безводну α-лактозу, безводну β-лактозу і аморфну лактозу. Лактозні компоненти можна обробляти шляхом мікронізації, просіювання, розмелювання, пресування, агломерації або сушіння розпиленням. Комерційно доступні форми ® лактози в різних формах також включені у винахід, наприклад, Lactohale (лактоза інгаляційної ® міри чистоти; Frieslandfoods), InhaLac 70 (просіяна лактоза для сухих порошкових інгаляторів; ® Meggle) і Respitose (просіяна лактоза інгаляційної міри чистоти; DFE Pharma) продукти. В одному з варіантів здійснення лактозний компонент вибирають з групи, що складається з моногідрата α-лактози, безводної і аморфної лактози. Переважно, якщо лактоза являє собою моногідрат α-лактози. Для проникнення досить глибоко в легені, подрібнений активний інгредієнт (у випадку сполуки (I)) повинен бути придатного розміру, як описано вище. Вказані дрібні частинки будуть мати тенденцію до утворення агломератів. Використання носія, такого як лактоза, запобігає вказаній агломерації і може підвищити текучість. Крім того, використання носія забезпечує правильне і постійне дозування, що досягає легенів. Активний інгредієнт звичайно утворює моношар на більш великих частинках лактози, потім під час інгаляції вказаний активний інгредієнт і вказаний носій розділяються, і вказаний активний інгредієнт інгалюється, тоді як основна частина носія - ні. Як таке, використання подрібненої лактози як носія для активного 9 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 інгредієнта забезпечує те, що кожна доза вказаної сухої порошкової фармацевтичної лікарської форми виділяє одну і ту ж кількість активного інгредієнта. Як правило, для запобігання агломерації дрібних активних частинок використовують носій, такий як лактоза з розміром частинок приблизно або щонайменше в десять разів більше розмірів частинок активного інгредієнта (наприклад, використовують лактозу з D50 приблизно або щонайменше в десять разів більше розмірів активного інгредієнта). В одному з варіантів здійснення суха порошкова лікарська форма даного винаходу включає подрібнену лактозу з D50 в інтервалі 40-150 мкм. Суха порошкова фармацевтична лікарськаформа даного винаходу включає подрібнену лактозу як носій в кількості, достатній для забезпечення правильної і постійної доставки доз активного інгредієнта в легені. В одному з варіантів здійснення суха порошкова фармацевтична лікарська форма включає від близько 40 % мас. до близько 99,88 % мас., наприклад, від близько 50 % мас. до близько 99,88 % мас., наприклад, від близько 65 % мас. до близько 99,88 % мас., наприклад, від близько 75 % мас. до близько 99.99 % мас. подрібненої лактози з розрахунку на масу сухої порошкової фармацевтичної лікарської форми. Переважно, суха порошкова фармацевтична лікарська форма включає від близько 80 % мас. до близько 99,98 % мас. або, наприклад, від близько 80 % мас. до близько 99,9 % мас., наприклад, від близько 85 % мас. до близько 99,98 % мас., наприклад, від близько 95 % мас. до близько 99 % мас. подрібненої лактози з розрахунку на масу сухої порошкової фармацевтичної композиції. Необов'язково (і особливо при використанні твердої кристалічної безводної форми) композиція містить стабілізуючий агент, вибраний з металевих солей стеаринової кислоти, таких як стеарат магнію, і металевих солей стеарилфумарату. Прикладом металевої солі стеаринової кислоти є стеарат магнію. Альтернативні металеві солі стеаринової кислоти, які можна використати, включають солі стеаринової кислоти, утворені з металами Групи I і іншими металами Групи II, такими як стеарат натрію, стеарат кальцію і стеарат літію. Інші металеві солі стеаринової кислоти, які можна привести, включають стеарат цинку і стеарат алюмінію. Металеві солі стеарилфумарату (наприклад, стеарилфумарат натрію), мабуть, володіють такими ж властивостями, як і металеві солі стеаринової кислоти (див. Shah et al, Drug development and Industrial pharmacy 1986, Vol. 12 No. 8-9, 1329-1346). На думку авторів винаходу їх можна використати як альтернативу металевим солям стеаринової кислоти в даному винаході. Як використано в даному описі, термін "стеарат магнію" включає тригідрат стеарату магнію, дигідрат стеарату магнію, моногідрат стеарату магнію і аморфний стеарат магнію. Стеарат магнію, як визначено в описі, включає допущення, в якому будь-який матеріал, визначений як "стеарат магнію", може містити аж до 25 % (наприклад, аж до 10 %, наприклад, аж до 5 %, наприклад, аж до 1 %) пальмітатної солі. Звичайно металеві солі стеаринової кислоти або металеві солі стеарилфумарату можуть бути використані в безводній формі або у вигляді гідратів, і вони можуть містити аж до 25 % (наприклад, аж до 10 %, наприклад, аж до 5 %, наприклад, аж до 1 %) пальмітатної солі. Як використано в даному описі, вираз "стабілізуючий агент, вибраний з металевих солей стеаринової кислоти, таких як стеарат магнію і металевих солей стеарилфумарату", може включати суміш металевих солей стеаринової кислоти і/або стеарилфумарату, хоча переважно використати тільки одну сіль. Металеву сіль стеаринової кислоти, таку як стеарат магнію або металеві солі стеарилфумарату, звичайно отримують у вигляді тонкого порошку, який немає необхідності піддавати мікронізації. Переважно, якщо D50 металевої солі стеаринової кислоти, такої як стеарат магнію, або металевої солі стеарилфумарату більше ніж 5 мкм, наприклад, близько 10 мкм або більше ніж 10 мкм, наприклад, в інтервалі від 5 до 100 мкм, наприклад, від 5 до 50 мкм, наприклад, від 5 до 20 мкм, наприклад, від 10 до 20 мкм. Стеарат магнію можна отримати, наприклад, від Avantor (Hyqual 2257 brand) або Peter Greven. Стеарат натрію і стеарат кальцію можна, наприклад, отримати від Sigma-Aldrich. Стеарилфумарат натрію можна, наприклад, отримати від ScienceLab. Суха порошкова фармацевтична лікарська форма даного винаходу включає подрібнений стабілізуючий агент, вибраний з металевих солей стеаринової кислоти, таких як стеарат магнію, і металевих солей стеарилфумарату в кількості, достатній для забезпечення хімічної стабільності лікарської форми ("стабілізуюча кількість"). Хімічна стабільність, наприклад, демонструється, якщо утворення продукту розкладання D019328 (однієї або обох речовин) знаходиться на рівні менш ніж 0,2 % мас. після зберігання композиції, що містить сполуку формули (I), протягом 4 тижнів при 50 °C. Альтернативно або додатково, хімічна стабільність, 10 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 наприклад, демонструється, якщо утворення продукту розкладання D019493 знаходиться на рівні менш ніж 0,5 % мас. після зберігання композиції, що містить сполуку формули (I), протягом 2 тижнів при 80 °C. Альтернативно або додатково, хімічна стабільність, наприклад, демонструється, якщо утворення продукту розкладання D019492 знаходиться на рівні менш ніж 0,4 % мас. після зберігання композиції, що містить сполуку формули (I), протягом 2 тижнів при 80 °C. В одному з варіантів здійснення суха порошкова фармацевтична лікарська форма містить від близько 0,01 % мас. до близько 15 % мас., наприклад, від близько 0,1 % мас. до близько 10 % мас., 10 % мас., 5 % мас., 2 % мас. або 1 % мас. подрібненого стабілізуючого агента, вибраного з металевої солі стеаринової кислоти, такої як стеарат магнію, і металевої солі стеарилфумарату з розрахунку на масу сухої порошкової фармацевтичної лікарської форми. Переважно, суха порошкова фармацевтична лікарська форма включає від близько 0,5 % мас. до близько 5 % мас., наприклад, 1-2 % мас./мас. подрібненого стабілізуючого агента, вибраного з металевої солі стеаринової кислоти, такої як стеарат магнію, і металевої солі стеарилфумарату з розрахунку на масу сухої порошкової фармацевтичної композиції. Придатним є, якщо стабілізуючий агент, вибраний з металевої солі стеаринової кислоти, такої як стеарат магній, і металевої солі стеарилфумарату присутній в кількості, достатній для забезпечення фізичної стабільності вказаної лікарської форми. Фізична стабільність, наприклад, демонструється, якщо ІЧ спектр і картина порошкової рентгенівської дифракції композиції (особливо відносно характеристичних піків сполуки формули (I)) є постійними і незміненими після зберігання композиції, що містить сполуку формули (I), протягом 4 тижнів при 50 °C. В одному з варіантів здійснення суха порошкова фармацевтична лікарська форма для інгаляцій даного винаходу включає: (i) від близько 0,02 до 50 % мас. 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1H-піразоло[3,4d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2-хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N, N-біс(2метоксіетил)гекс-5-инаміду в кристалічній безводній подрібненій формі як активний інгредієнт; (ii) від близько 40 % мас. до близько 99,88 % мас. подрібненої лактози; і (iii) від близько 0,1 % мас. до близько 10 % мас. подрібненого стабілізуючого агента, вибраного з металевих солей стеаринової кислоти (таких як стеарат магнію) і металевих солей стеарилфумарату. У наступному варіанті здійснення суха порошкова фармацевтична лікарська форма для інгаляцій даного винаходу включає: (i) від близько 0,02 до 50 % мас. 6-(2-((4-аміно-3-(3-гідроксифеніл)-1H-піразоло[3,4d]піримідин-1-іл)метил)-3-(2-хлорбензил)-4-оксо-3,4-дигідрохіназолін-5-іл)-N, N-біс(2метоксіетил)гекс-5-инаміду в формі твердого кристалогідрату в подрібненій формі як активний інгредієнт; (ii) від близько 40 % мас. до близько 99,88 % мас. подрібненої лактози; і (iii) необов'язково від близько 0,1 % мас. до близько 10 % мас. подрібненого стабілізуючого агента, вибраного з металевих солей стеаринової кислоти (таких як стеарат магнію) і металевих солей стеарилфумарату. Фармацевтичні застосування і способи введення Відповідно до одного аспекту даного винаходу запропоноване застосування твердої кристалічної форми даного винаходу як лікарського засобу. В одному з варіантів здійснення запропоноване застосування фармацевтичної лікарської форми даного винаходу для лікування ХОЗЛ і/або астми, зокрема ХОЗЛ або важкої астми, шляхом інгаляції, тобто шляхом місцевого введення в легені. Важливо, що введення в легені забезпечує сприятливі ефекти сполуки, що вводиться, при цьому мінімізуючи побічні ефекти для пацієнтів. В одному з варіантів здійснення фармацевтична лікарська форма даного винаходу підходить для сенсибілізації пацієнтів до лікування кортикостероїдами. Фармацевтичні композиції даного винаходу можуть бути зручно введені в одиничній дозованій формі і можуть бути отримані будь-яким способом, добре відомим фахівцям в даній фармацевтичній галузі, наприклад, як описано в Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985). Місцеве введення в легені здійснюють, використовуючи пристрій для інгаляції. Так, аспект даного винаходу включає пристрій для інгаляції, що включає одну або більше доз фармацевтичної лікарської форми згідно з даним винаходом. Пристрої для інгаляції для сухих порошкових лікарських форм звичайно активуються диханням, так що доза виводиться з пристрою і вводиться суб'єкту за рахунок сили легенів шляхом інгаляції з мундштука. Однак необов'язково можна використати зовнішню енергію для того, щоб сприяти введенню дози. Звичайно пристрої для інгаляції включають множинні дози фармацевтичної лікарської форми 11 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 згідно з даним винаходом, наприклад, 2 або 4, або 8, або 28, або 30, або 60, або більше доз. Так, пристрій для інгаляції може включати місячний запас доз. В одному з варіантів здійснення дозу відмірюють в капсулу для застосування в одному пристрої для інгаляцій, адаптованому для доставки вмісту капсули суб'єкту при інгаляції. Необов'язково дози ділять, наприклад, так, щоб дозу вводити, використовуючи дві (або більше) інгаляції з пристрою для інгаляції. Відповідно до одного варіанту даного винаходу дози лікарської форми заздалегідь відміряють в пристрої для інгаляції. Наприклад, відміряні дози можуть міститися в кишенях блістерних смужок або в дисках або всередині капсул. Відповідно до іншого варіанту даного винаходу дози відмірюють під час використання. Такі пристрої для інгаляції містять резервуар сухого порошку і пристрій для відмірювання дози порошку (звичайно на основі фіксованого об'єму) до або під час введення. Приклади сухих порошкових пристроїв для інгаляції включають SPINHALER, ECLIPSE, ROTAHALER, HANDIHALER, AEROLISER, CYCLOHALER, BREEZHALER/NEOHALER, FLOWCAPS, TWINCAPS, X-CAPS, TURBOSPIN, ELPENHALER, DISKHALER, TURBUHALER, MIATHALER, TWISTHALER, NOVOLIZER, DISKUS, SKYEHALER, ORIEL сухий порошковий інгалятор, MICRODOSE, ACCUHALER, PULVINAL, EASYHALER, ULTRAHALER, TAIFUN, PULMOJET, OMNIHALER, GYROHALER, TAPER, CONIX, XCELOVAIR, PROHALER і CLICKHALER. Іншим прикладом є інгалятор MONODOSE. Необов'язково пристрої для інгаляції можуть бути упаковані для зберігання із захистом від проникнення вологи. Необов'язково може бути використаний осушувач всередині упаковки або всередині пристрою. Переважно, якщо фармацевтична лікарська форма згідно з даним винаходом в пристрої для інгаляції захищена від світла. Фармацевтичні композиції згідно з даним винаходом можна також застосовувати при лікуванні респіраторних порушень, що включають ХОЗЛ, хронічні бронхіти, емфіземи, астму, педіатричну астму, кістозний фіброз, саркоїдоз і ідіопатичний легеневий фіброз, і особливо астми, хронічних бронхітів і ХОЗЛ. Фармацевтичні композиції згідно з даним винаходом можуть містити сполуку формули (I) як єдиний активний інгредієнт або можуть включати додаткові активні інгредієнти, наприклад, активні інгредієнти, які можна використати при лікуванні вищезгаданих станів. Наприклад, можливі комбінації для лікування респіраторних порушень, включають комбінації зі стероїдами (наприклад, будезоніомідом, беклометазоном, дипропионатом, флутиказонпропіонатом, мометазонфуркатом, флутиказонфуроатом, флунізолідом, циклезонідом, триамцинолоном), бета-агоністами (наприклад, тербуталіном, бамбутеролом, салбутамолом, левалбутеролом, салметеролом, формотеролом, клетбутеролом, фенотеролом, броксатеролом, індакатеролом, репротеролом, прокатеролом, вівлантеролом) і/або ксантинами (наприклад, теофіліном), мускариновими антагоністами (наприклад, іпратропієм, тіотропієм, окситропием, глікопіронієм, гликопіролатом, аклідинієм, троспієм), антагоністами лейкотриену (наприклад, зафірлукастом, пранлукастом, зілеутоном, монтелукастом) і/або інгібіторами p38 MAP кінази. Потрібно розуміти, що будь-який з вищеперелічених активних інгредієнтів можна використати в формі фармацевтично прийнятних солей. В одному з варіантів здійснення фармацевтичну лікарську форму даного винаходу вводять в комбінації з противірусним агентом, наприклад, ацикловіром, оселтамівіром (Tamiflu®), занамівіром (Relenza®) або інтерфероном. В одному з варіантів здійснення комбінацію сполуки формули (I) і іншого активного інгредієнта(ів) спільно формулюють в фармацевтичну лікарську форму даного винаходу. В іншому варіанті здійснення інший активний інгредієнт(и) вводять з однією або більше окремими фармацевтичними лікарськими формами. В одному з варіантів здійснення сполуку формули (I) спільно формулюють в фармацевтичну лікарську форму даного винаходу або спільно вводять в окремій лікарській формі з кортикостероїдом, наприклад, для застосування в підтримуючій терапії астми, ХОЗЛ або раку легенів, включаючи профилактику останнього. В одному з варіантів здійснення фармацевтичну лікарську форму даного винаходу вводять шляхом інгаляції і кортикостероїд вводять перорально або шляхом інгаляції, або в комбінації, або окремо. Фармацевтична лікарська форма даного винаходу може також повторно сенсибілізувати стан пацієнтів для лікування з допомогою кортикостероїдів, якщо раніше стан пацієнтів став важко піддаватися лікуванню ними. В одному з варіантів здійснення даного винаходу доза фармацевтичної лікарської форми, що застосовується дорівнює дозі, відповідній для застосування як монотерапія, але її вводять в комбінації з кортикостероїдом. 12 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 В одному з варіантів здійснення застосовують дозу фармацевтичної лікарської форми, яка буде суб-терапевтичною як єдиний агент, і вводять в комбінації з кортикостероїдом, тим самим відновлюючи сприйнятливість пацієнта до останнього, у випадку, якщо пацієнт раніше став несприйнятливим до кортикостероїду. Крім того, фармацевтична лікарська форма даного винаходу може виявляти противірусну активність і забезпечувати корисність при лікуванні вірусних загострень запальних станів, таких як астма і/або ХОЗЛ. Фармацевтична композиція даного винаходу може також корисною при профілактиці, лікуванні або ослабленні симптомів при вірусі грипу, риновірусі і/або респіраторносинтицитіальному вірусі або поліпшення стану при вказаних захворюваннях. В одному з варіантів здійснення розкриті в описі фармацевтичні композиції корисні при лікуванні або профілактиці раку, конкретно раку легенів, і особливо для місцевого введення в легені. Так, в наступному аспекті даним винаходом запропонована фармацевтична композиція, як розкрито в описі, для застосування при лікуванні одного або більше вищеперелічених станів. У наступному аспекті даним винаходом запропонована фармацевтична композиція, як розкрито в описі, для виробництва лікарського засобу для лікування одного або більше вищеперелічених станів. У наступному аспекті даним винаходом запропонований спосіб лікування вищеперелічених станів, що включає введення суб'єкту ефективної кількості фармацевтичної композиції даного винаходу. Фармацевтичні композиції, розкриті в описі, можна також використати для виготовлення лікарських засобів для лікування одного або більше вищеперелічених захворювань. Вираз "лікування" включає профілактику, а також терапевтичне лікування. Якщо не вказане інше, % значення, як використано в даному описі, являє собою значення % по масі (% мас.). Тверді кристалічні форми даного винаходу і фармацевтичні композиції, що їх містять, можуть мати перевагу, оскільки вони мають підвищену кристалічність (наприклад, за даними порошкової дифракції рентгенівських променів), володіють підвищеною фізичною стабільністю (за даними порошкової дифракції рентгенівських променів, ІЧ, ДСП, ДСК або ТГА), володіють підвищеною хімічною стабільністю (наприклад, за даними ВЕРХ), підвищеною фізичною сумісністю з лактозою (необов'язково об'єднаної з іншими ексципієнтами), підвищеної хімічною сумісністю з лактозою (необов'язково об'єднаної з іншими ексципієнтами), поліпшеним розподілом частинок по розмірах при введенні (таким, яке виходить з підвищеної маси дуже дрібних частинок), або можуть володіти іншими сприятливими властивостями в порівнянні з відомими раніше твердими формами сполуки формули (I). Скорочення водн. - водний ХОЗЛ - хронічне обструктивне захворювання легенів д - дублет DCM - дихлорметан DMAP-4-диметиламінопіридин ДМСО - диметилсульфоксид DPI - сухий порошковий інгалятор ДСК - диференціальна скануюча калориметрія ДСП - динамічна сорбція парів EDC.HCl - гідрохлорид 1-етил-3-(3-диметиламінопропіл)карбодііміду + (ES ) - іонізація електророзпилення, режим визначення позитивних іонів EtOAc - етилацетат ВЕРХ - високоефективна рідинна хроматографія ВЕРХ-МС - високоефективна рідинна хроматографія-мас-спектрометрія год. - година(и) ІЧ - інфрачервоний LPS - ліпополісахарид + (M+H) - протонований молекулярний іон MDI - дозуючий інгалятор MeOH - метанол MEK - метилетилкетон МГц - мегагерц хв. - хвилина(и) 13 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 мл - міліметр(и) МС - мас-спектрометрія mTOR - мішень рапаміцину в клітинах ссавців m/z - відношення маса/заряд NH4OAc - ацетат амонію ЯМР - ядерний магнітний резонанс (спектроскопія) Pd(dppf)Cl2-1,1' -біс(дифенілфосфіно)фероцен]дихлорпаладій(II) м.ч. - мільйонна частка ч./млн - частин на мільйон кв - квартет квін. - квінтет відн. вол. - відносна вологість RRT - відносний час втримання Rt - час втримання КТ - кімнатна температура с - синглет т - триплет TBDMSCI - трет-бутилдиметилсилілхлорид ТГА - термогравіметричний аналіз TNFα - альфа фактор некрозу пухлини XRPD - порошкова дифракція рентгенівських променів ПРИКЛАДИ Загальні методики ВЕРХ-МС Здійснювали при використанні системи Agilent HP1200 з колонками Agilent Extend C18, (1,8 -1 мкм, 4,6×30 мм) при 40 °C і швидкості потоку 2,5-4,5 мл.хв , елююючи градієнтом H2O-MeCN, що містить 0,1 % об/об мурашиної кислоти, протягом 4 хв. Інформація про градієнт: 0-3,00 хв., зміна від 95 % H2O-5 % MeCN до 5 % H2O-95 % MeCN; 3,00-3,01 хв., витримують при 5 % H2O-1 95 % MeCN, швидкість потоку підвищують до 4,5 мл.хв ; 3,01-3,50 хв., витримують при 5 % H2O95 % MeCN; 3,50-3,60 хв., повертають до 95 % H2O-5 % MeCN; швидкість потоку знижують до -1 3,50 мл.хв ; 3,60-3,90 хв., витримують при 95 % H2O-5 % MeCN; 3,90-4,00 хв., витримують при -1 95 % H2O-5 % MeCN, швидкість потоку знижують до 2,5 мл.хв . УФ детектування здійснюють при 254 нм, використовуючи детектор із змінною довжиною хвилі Agilent G1314B. Мас-спектри (МС) Отримували при використанні іонізації електророзпиленням (ESI) в інтервалі m/z 60-2000 при частоті відбору зразка 1,6 сек./цикл, використовуючи Agilent G1956B, в інтервалі m/z 150850 при частоті відбору зразка 2 Гц, використовуючи Waters ZMD, або в інтервалі m/z 100-1000 при частоті відбору зразка 2 Гц, використовуючи систему РХ-МС Shimadzu 2010. ЯМР спектри 1 H ЯМР спектри (за винятком отриманих в прикладі 7) отримували на спектрометрі Bruker Avance III з робочою частотою 400 МГц, використовуючи як стандарт залишковий недейтерований розчинник. 1 H ЯМР спектр, наприклад, 7 отримували на спектрометрі Bruker Avance з робочою частотою 600 МГц, з використанням як стандарт залишкового недейтерованого розчинника. Динамічна сорбція парів (ДСП) Отримували при використанні поверхневої вимірювальної системи динамічної сорбції парів моделі DVC-1. Використали близько 19 мг зразка, зміну маси, записаної в залежності від атмосферної вологості при 25 °C, визначали при використанні наступних параметрів: Сушіння: 60 хв. в атмосфері сухого азоту Рівновага: 0,01 %/хв. протягом мінімум: 15 хв. і максимум: 60 хв. Дані проміжку: 0,05 % або 2,0 хв. Відн. вол., виміряна в точках: перший набір: 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5; другий набір: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 0. Порошкова дифракція рентгенівських променів Картини порошкової дифракції рентгенівських променів на дифрактометрі PANalytical (Philips) X'PertPRO MPD, забезпеченому рентгенівською трубкою Cu LFF (45 кВ; 40 мА; BraggBrentano; spinner stage)отримували при використанні Cu Kα випромінювання і наступних умов вимірювань: Тип сканування: безперервний 14 UA 113300 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Інтервал сканування: з 3 до 50° 2θ Розмір кроку: 0,02°/крок Час рахунку імпульсів: 30 сек./крок Час одного обороту спінера: 1 сек. Тип випромінювання: CuKα Програма траєкторії пучків Програмована щілина розхідності: 15 мм Щілина Солера: 0,04 рад Фільтр пучків: 15 мм Антирозсіювальна щілина: 1° Ножовий промінь: + Дифрагована траєкторія пучка Довгий протирозсіювальний екран: + Щілина Солера: 0,04 рад Ni фільтр: + Детектор: X'Celerator Зразки готували нанесенням на тримач зразка з нульовим фоном. Інфрачервона спектрометрія (ІЧ) Використали Мікро ІЧ-спектроскопію порушеного повного внутрішнього відображення (мікроATR) і зразок аналізували, використовуючи відповідні мікроATR аксесуари і наступні умови вимірювання: прилад: спектрометр Thermo Nexus 670 FTIR число сканувань: 32 -1 Розрізнення: 1 см -1 Довжина хвилі: від 4000 до 400 см Детектор: DTGS з вікнами KBr Розщеплювач пучка: Ge на KBr микроATR аксесуари: Harrick Split Pea з кристалом Si Диференціальна скануюча калориметрія (ДСК) Дані ДСК отримували на обладнанні TA-Instruments Q200 MTDSC з RCS охолоджуючим елементом. Звичайно 3 мг кожної сполуки в стандартному алюмінієвому тигелі TA-Instrument для зразків, нагрівали при 10 °C/хв. від 25 °C до 250/300 °C. Очищений азот при 50 мл/хв. підтримували над зразком. Термогравіметричний аналіз (ТГА) Дані ТГА збирали на термогравіметрі TA-Instrument Q500. Звичайно 10 мг кожного зразка вміщували в заздалегідь зважений алюмінієвий тигель і нагрівали при 20 °C/хв. від кімнатної температури до 300 °C або