Спосіб діагностики медикаментозної та харчової алергії

1. Спосіб діагностики медикаментозної та харчової алергії, що включає дослідження швидкості осідання еритроцитів крові пацієнта, який відрізняється тим, що, спостерігаючи динаміку швидко 3 Причому для спостереження динаміки швидкості осідання еритроцитів беруть скляні капіляри діаметром 0,5 мм та довжиною 50 мм. Сукупність суттєвих ознак способу, що заявляється, дозволяє підвищити інформативність та достовірність виявлення медикаментозної та харчової алергії. Спосіб діагностики медикаментозної та харчової алергії виконують наступним чином. Після забору крові у пацієнта, за допомогою антикоагулянту, готують контроль (без додавання зразку речовини, що діагностують) та досліджувану (з додаванням зразку речовини, що діагностують) пробу розчину крові, які розміщують до капілярів та спостерігають динаміку осідання еритроцитів для контролю та досліджуваної проби, визначають терміни досягнення найбільшої швидкості осідання еритроцитів, а потім, за наявністю відхилення показника терміну досягнення найбільшої швидкості осідання еритроцитів для досліджуваній проби від показника терміну досягнення найбільшої швидкості осідання еритроцитів для контролю більше ніж на 10 % діагностують алергію на медикаменти або їжу, що містять в собі досліджувану речовину. Також рекомендовано проводити діагностику у мікрокапілярах (трубках діаметром 0,5 мм та довжиною 50 мм), використовуючи менші об'єми крові, ніж у звичайних трубках. При практичному застосуванні запропонованого способу діагностики медикаментозної та харчової алергії досліджували кров жінки (44 роки), яка мала алергічне захворювання. Було окремо відібрано кров для контролю, а інша частина була розподілена на порції, до яких додавали різні фармацевтичні препарати (веропаміла, бісептол, гінатардиферон та ін.). Для проведення діагностування підготовили 5 %-ний розчин цитрату натрію, промили капіляри 5 %-ним розчином цитрату натрію, змішали кров з цитратом натрію, розділили кров на декілька частин. Одну із них взяли за контроль. До інших зразків крові додали водний розчин досліджуваних речовин та помістили в капіляри (по 3 капіляри на кожну речовину). Встановили капіляри у штатив. Запустили таймер для кожного капіляра окремо. Через кожні 10-15 хвилин визначали висоту стовпця чистої плазми h. Побудували криві динаміки осідання еритроцитів у вигляді залежності стовпця чистої плазми від часу h(t). По оцифрованим кривим h(t) побудували криві динаміки швидкості осідання еритроцитів h'(t), 57165 4 Визначали термін досягнення максимальної швидкості осідання еритроцитів Tmах для кожної проби, що задовольняє формулі: Tmax  1 H0 0,6    5H0 f H0    1  1.  31   H 1  H 2   0 0      (1) де H0 - початкова концентрація агрегатів,  - швидкість формування агрегатів. За порівнянням показників терміну досягнення максимальної швидкості осідання еритроцитів Тmax для кожної проби оцінювали досліджуваний зразок крові на наявність алергії до певної речовини. Якщо значення показника для досліджуваної речовини відрізняється від показника контролю більш ніж на 10 % діагностували алергію. Також були проведені експериментальні дослідження кривих осідання еритроцитів крові здорових людей та пацієнтів із різними типами алергії у трубках різної довжини (табл.), де наведені розрахунки значень  за результатами всіх проведених експериментів з кров'ю. Дослідження проводились на базі Харківського інституту дерматології. Результати показали, що показники осідання, які стандартно використовуються в медицині, залежать від початкової концентрації еритроцитів, довжини трубки та типу алергії і, таким чином, є малоінформативними. Біомеханічна інтерпретація показників кривих проводилась на основі математичної моделі крові як двохфазної суспензії частинок, що агрегують. Під час експериментів будували динамічні криві осідання із різною початковою концентрацією клітин у трубках з довжиною L, що дорівнює 4; 5; 6, 8; 10 та 20 см. Результати вимірювань також наведені в ілюстративному матеріалі (Фіг.1 - Фіг.6). На Фіг.1 зображена залежність висоти стовпця чистої плазми від часу для контрольного зразку без додавання досліджуваних речовин. На Фіг.2 зображена динаміка ШОЕ того ж зразку. На Фіг.3 зображена залежність висоти стовпця чистої плазми від часу для зразку крові з додаванням бісептолу. На Фіг.4 зображена динаміка ШОЕ зразку з додаванням бісептолу. На Фіг.5 зображена динаміка осідання всіх проб крові. На Фіг.6 зображена динаміка ШОЕ всіх проб крові. 5 57165 6 Таблиця № досліду 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 L, мм 40 60 80 100 40 60 80 100 40 60 80 100 40 60 80 100 40 60 80 100 40 60 80 100 H0(t) 38 38 38 38 35 35 35 35 33 33 33 33 34 34 34 34 39 39 39 39 35 35 35 35 Роблячи аналіз кривих (Фіг.1 - Фіг.6), нами було замічено, що вид кривих, число локальних екстремумів на них та значення швидкості у різні моменти часу сильно варіюють навіть для крові одного пацієнта при одночасній постанові експерименту. Показник терміну досягнення максимальної швидкості осідання Tmаx для всіх досліджуваних кривих практично не відрізняється. Таким чином, показник Tmаx можна використовувати у ролі діагностичного показника. Підставивши знайдені при обробці експериментальних кривих значення показника Tmаx у рівняння (1), визначили величину  для проби крові даного пацієнта. Розрахували швидкості формування агрегатів . Результати проведених експериментів наведені в (табл. 1). Аналізуючи результати вимірювань показника Tmаx, можна прийти до висновку, що на показник Tmаx мало впливає нестійкість осідання та флуктуації, а також індивідуальні властивості крові (наприклад, початкова концентрація еритроцитів у пробі крові H0) та сильно – швидкість формування агрегатів . Приклад реалізації: досліджувалась кров жінки (44 роки), яка мала лікарську хворобу. Було окремо відібрано кров для контрольного зразку, а інша частина була розподілена на порції, до яких додавались різні фармацевтичні препарати (веропаміла, бісептол, гінатардиферон та ін.). Проводилось дослідження на наявність алергії за раніше вказаним методом. Значення терміну досягнення максимуму швидкості осідання у більшості кривих збігаються. Але термін досягнення максимуму швидкості для зразку крові з додаванням веропаміли значно менший. Це свідчить про те, що у жін Тmax, c 8,4 8,6 8,7 9,3 5,3 7,6 7,7 8 17,4 21,8 22,2 21,9 6,4 6,3 6,3 6,5 18,1 17,5 18 19,2 22,3 п,з 10,2 10 , м-3с-1 46231.91 44628.58 43861.34 39685.91 81429.45 47421.46 46500.67 43909.69 12752.78 9093.774 8849.106 9031.559 59155.96 60570.01 60570.01 57796.09 15310.74 16104.86 15438.5 14014 9434.915 26156.38 30499.66 31419.21 ки алергія на такий фармацевтичний препарат як веропаміла. Таким чином, із всіх проведених експериментів слідує, що час досягнення максимуму швидкості осідання є тією характерною величиною, яка відносно мало залежить від умов проведення експерименту, тобто довжини та діаметру трубки і від початкової концентрації еритроцитів. Дослідження кривих осідання в динаміці дозволяє отримати достовірний діагностичний параметр для оцінки стану організму пацієнта. Цей показник пропонується використовувати у клінічній діагностиці. Таким чином, пропонується новий діагностичний показник. Замість стандартного часового показника ШОЕ використовувати термін досягнення максимальної швидкості осідання, який мало залежить від умов експерименту та початкової концентрації еритроцитів у пробі крові, а істотно залежить від швидкості агрегації еритроцитів. Пропонується новий спосіб виявлення медикаментозної та харчової алергії - порівнювальний аналіз проб крові до та після додавання досліджуваних речовин. А також пропонується проводити діагностику у мікрокапілярах (трубках діаметром 0.5 мм та довжиною 50 мм), викоростовуючи менші об'єми крові, ніж у трубках Панченкова, оскільки динаміка кривих осідання та значення пропонованого показника - терміну досягнення максимальної швидкості осідання - збігаються при проведенні тесту в мікрокапілярах та трубках Панченкова. Отже, запропонований спосіб забезпечує оперативне і достовірне виявлення алергічної реакції організму пацієнта на різноманітні медикаменти та їжу. Джерела інформації: 7 1. Патент РФ 2065165, від 10.08.1996, по кл. G01N33/48. 2. Патент РФ 2079137, від 10.05.1997, по кл. G01N33/536. 57165 8 3. Pawlotsky Y. An Erythrocyte Sedimentation Rate Adjusted for the Hematocrit and Hemoglobin Concentration. - 2004. - P.802-810. 9 Комп’ютерна верстка Л. Купенко 57165 Підписне 10 Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601