Застосування підсилювача гамк габоксадолу для лікування захворювань, пов’язаних зі зменшеною активністю нейростероїдів

1. Застосування ТНІР (габоксадолу) для приготування лікарського засобу, призначеного для лікування захворювання або розладу, вибраного з передменструального розладу, постнатальної депресії або дисфоричного розладу, пов’язаного з постменопаузою. 2. Застосування за п.1, яке відрізняється тим, що зазначений лікарський засіб призначений для введення у вигляді стандартної дози. 3. Застосування за п.2, яке відрізняється тим, що стандартна доза містить активне начало у кількості від приблизно 10мкг/кг до 10мг/кг маси тіла, переважно від 25мкг/кг/день до 1мг/кг/день. Винаходом пропонується застосування нестероїдних сполук, які являють собою агоністи ГАМК, інгібітори захоплення ГАМК або підсилювачі ГАМКергічної активності при лікуванні захворювань, пов'язаних зі зниженою активністю нейростероїдів. Рецептори основного інгібуючого нейромедіатору, гама-аміномасляної кислоти (ГАМК), поділяються на два основних класи: ГАМКА рецептори, які є членами суперсімейства іонних каналів, що відкривається лігандами; і ГАМКВ рецептори, які є рецепторами, сполученими з білком G. ГАМКА рецептори утворюються у виді пентамерного комплексу різних сімейств рецепторних субодиниць. Комплекс, що у більшості рецепторів включає 2α субодиниці, 2β субодиниці та γ або δ субодиницю, визначає фармакологію функціонального рецептора. Ділянка зв'язування бензодіазепінів розташована на границі розподілу між α і γ субодиницями, в той час як ділянка зв'язування ГАМК і інших агоністів ГАМКА розташована на границі розподілу між α і β субодиницями. Комплекси ГАМКА рецепторів, що існують, включають, серед багатьох інших, α1β2γ2, α1β2/3γ2, α3βγ2/3, α5β3γ2/2, α6βγ2, α6βδ α4βδ та α4β2γ2. Підтипи, що містять субодиницю α1, присутні в більшості ділянок мозку і можуть брати участь у функціональній дії ряду бензодіазепінів. Висувалися гіпотези про те, що при ряді клінічних станів знижена активність ГАМК системи є механізмом, що лежить в основі розглянутої патології. Дані стани включають епілепсію, тривогу, стрес, розлади сну і біль. Однак, незважаючи на те, що позитивні модулятори комплексу ГАМКА рецепторів, такі як бензодіазепіни, при ряді обставин є дуже ефективними, в цілому існує згода в тому, що неселективні бензодіазепіни викликають так багато побічних ефектів, що є необхідність у сполуках, які б заміщали лікарські препарати, що використовуються зараз [Costa and Guidotto Trends Pharmacol. Sci. 1996, 17, 192-200]. Рецептори, що містять α4, існують переважно в таламічній ділянці [Sur et al., 1999]. Останні дослідження [Sassoe-Pognetto et al., J. Comp Neurol 2000, 15,420: 481-98; Mody 2000, Presentation at GABA2000 meeting July 23 to July 29] показали, що деякі з цих рецепторів можуть розташовуватися поза синапсів, роблячи їх потенційно дуже цікавою мішенню лікарських засобів. (19) UA (11) 77403 (13) C2 (21) 2003054188 (22) 20.11.2001 (24) 15.12.2006 (86) PCT/DK01/00773, 20.11.2001 (31) PA 2000 01743 (32) 20.11.2000 (33) DK (46) 15.12.2006, Бюл. № 12, 2006 р. (72) Еберт Бьярке, DK, Хенґор Андерсен Петер, DK (73) Х. ЛУННБЕК А/С, DK (56) WO, A, 98/38988, 11.10.1998 US, A, 5 776 959, 07.07.1998 WO, A, 93/05786, 01.04.1993 WO, A, 0 005 196, 03.02.2000 WO, A, 96/16076, 30.05.1996 3 77403 4 Існують розходження між бензодіазепінами й (ПМДР) вважається наслідком швидкого падіння агоністами ГАМК. Одне розходження полягає в рівнів прогестерону й особливо метаболітів прогетому, що бензодіазепіни не активні у відношенні стерону, що діють як позитивні модулятори ГАМКрецепторів, що містять α4 і δ, у той час як агоністи ергічної активності [Gallo and Smith, 1993 ГАМКA діють незалежно від складу субодиниць Pharmacol. Biochem. Behav. 46, 897-904]. [наприклад, Ebert et al. МоI. Pharmacol. 1997,52, Був досліджений ефект нейроактивних стерої1150-1156]. Інше розходження полягає в тому, що дів із прямим впливом на ГАМКA рецептори. Хоча бензодіазепіни реагують на специфічній ділянці в нейростероїди, подібні алфаксалону і З -5 комплексі ГАМК рецептора, викликаючи за доподигідроксипрогестерону, взаємодіють з усіма тимогою цього алостеричну зміну рецептора ГАМК, пами ГАМК рецепторів, дані у відношенні рецептояка впливає на ефективність ГАМК у стимулюванні рів, що містять α4β3δ, вказують на те, що активвідкриття хлоридних каналів. Модулятори рецепність і ефективність у відношенні даних рецепторів торів ГАМК виявляють істотні побічні ефекти. У вище, ніж у відношенні інших типів ГАМКA рецепвідношенні таких розладів як тривога і передменсторів. Були розроблені нейростероїди для лікувантруальний дисфоричний розлад модуляція таланя ПМДР та інших симптомів, однак побічні ефекти мічних ділянок може відігравати ключову роль. У привели до припинення застосування більшості з зазначених ділянках виявляється великий надлиданих сполук. Крім того, серії досліджень показашок рецепторів, які містять α4β3δ/γ2, роблячи взали, що тривале застосування нейростероїдів в ємодію з даними рецепторами особливо цікавою. якості снотворних засобів, приводить до компенПри великій густоті рецепторів, які містять α4, що саторних механізмів, що у кінцевому рахунку верозташовані поза синапсів [Sur et al. МоI. дуть до залежності [Lancel et al. J. Pharmacol. Exp. Pharmacol. 1999, 56, 110-115; Sassoe-Pognetto et Ther. 1997, 282, 1213-1218]. al., J. Comp Neurol 2000,15, 420: 481-98; Mody Цим винаходом пропонуються нестероїдні 2000, Presentation at GABA2000 meeting July 23 to сполуки, які безпосередньо взаємодіють з ділянJuly 29], лише відносно низький рівень активації в кою розпізнавання в ГАМКA рецепторі, в якості окремих позасинаптичних рецепторах буде підсуагоністів, або інгібіторів захоплення ГАМК, або мовуватися у відношенні значного інгібування засобів, що підсилюють ГАМК-ергічну активність, нейрона, ставлячи питання про можливість того, які усі виявляють сприятливі ефекти при хворобщо для даних рецепторів можуть бути розроблені ливих станах, пов'язаних зі зниженою нейростеровисокофункціональні селективні сполуки. їдною активацією. Було показано, що гормон яєчників прогестеЗахворювання, включаючи передменструальрон і його метаболіти здійснюють глибокі впливи ний синдром, постнатальну депресію і дисфоричні на збудливість мозку. Рівні прогестерону і його розлади, пов'язані з постменопаузою, значно краметаболітів варіюються з фазами менструального ще лікуються агоністами ГАМКA й інгібіторами зациклу. Було доведено, що рівень прогестерону і хоплення ГАМК або підсилювачами ГАМК-ергічної його метаболітів знижується перед початком менактивності, ніж бензодіазепінами і нейростероїдаструації. Добре також доведений щомісячний реми, які викликають толерантність після короткочацидив визначених фізикальних симптомів перед сного лікування. початком менструації. Зазначені симптоми, що Цим винаходом також пропонуються специфібули пов'язані з передменструальним синдромом чні неалостеричні сполуки-агоністи ГАМК, які при(ПМС) або передменструальним дисфоричним датні для лікування розладів, пов'язаних зі знижерозладом (ПМДР), включають стрес, тривогу і мігною нейростероїдною активацією. Відомо, що дані реневі головні болі. У пацієнток, що страждають на сполуки можуть застосовуватися при лікуванні ПМС, мається щомісячний рецидив симптомів, які інших захворювань і розладів. присутні перед менструацією і відсутні після менсЦим винаходом пропонується застосування труації. Аналогічним чином, також відзначена конестероїдної сполуки, яка збільшує активність реляція за часом між зниженням рівня прогестеГАМК у мозку, для виготовлення лікарського засорону і збільшенням частоти судом у жінок, що бу для лікування розладів, які виникають у резульстраждають на епілепсію. Більш пряма кореляція таті зниженої нейростероїдної активації. спостерігалася зі зниженням рівня метаболітів Збільшення активності ГАМК у мозку може бупрогестерону. Крім того, у пацієнток з первинно ти досягнуто введенням агоніста ГАМК. Агоністи генералізованою малою формою епілепсії виявГАМК являють собою такі сполуки, як толгабід, лена кореляція за часом між частотою виникнення фенгабін, габапентин, зонізамід, мусцимол, баксудом і частотою виникнення симптомів ПМС. лофен, β-феніл-ГАМК, AFAA і гомо-бета-пролін. Синдромом, також пов'язаним з низькими рівВведення проліків ГАМК, таких як прогабід, аналонями прогестерону, є постнатальна депресія гічним чином впливає на активність ГАМК у мозку. (ПНД). Безпосередньо після пологів рівні прогесЗбільшення активності ГАМК у мозку може бутерону різко знижуються, приводячи до початку ти також досягнуто інгібітором захоплення ГАМК, ПНД. Симптоми ПНД варіюються у діапазоні від таким як тіагабін, або трансаміновими інгібіторами легкої депресії до психозу, який вимагає госпіталіГАМК, такими як вігабатрин або півагабін. зації. ПНД також пов'язана з важкою тривогою і Винаходом пропонується застосування нестедратівливістю. Депресія, пов'язана з ПНД, піддароїдної сполуки, причому сполука являє собою ється лікуванню класичними антидепресантами, і підсилювач ГАМК-ергічної активності. жінки, які страждають на ПНД, виявляють підвиУ кращому варіанті здійснення винаходу спощений ризик ПМС. лука має спорідненість до комплексів ГАМК, що Передменструальний дисфоричний розлад містять субодиницю α4. 5 77403 6 У варіанті здійснення винаходу нестероїдна такого введення, наприклад, у вигляді таблеток, сполука відповідно до зазначеного вище являє капсул, порошків, сиропів або розчинів або диспесобою неалостеричний рецепторний агоніст. рсій для ін'єкцій. Переважно, і відповідно до мети Винаходом пропонується застосування нестецього винаходу сполука за винаходом вводиться у роїдної сполуки, як зазначено вище, причому сповигляді твердого фармацевтичного засобу, прийнлука являє собою інгібітор захоплення ГАМК. ятно у вигляді таблетки або капсули або у вигляді Винаходом пропонується застосування сполусуспензії, розчину або дисперсії для ін'єкцій. ки, як описано вище, причому нестероїдна сполука Способи одержання твердих фармацевтичних є обраною з групи, яка включає ТНІР (габоксадол), препаратів добре відомі в цій галузі. Так, таблетки циклопропіл-ГАМК, ізогувацин, мусцимол, імідаможуть бути отримані змішуванням активних інгзол-4-оцтову кислоту, габапентин і тіагабін. редієнтів зі звичайними ад'ювантами та/або розріВинаходом також пропонується застосування, джувачами та з наступним пресуванням суміші в як описано вище, причому захворювання або розпридатній таблетувальній машині. Приклади ад'юлад виникає в результаті флуктуацій рівня нейросвантів або розріджувачів включають: кукурудзяний тероїдів. крохмаль, лактозу, тальк, стеарат магнію, желаУ кращому варіанті здійснення винаходу затин, лактозу, смоли і їм подібні. Будь-який інший хворювання або розлад виникає в результаті зниад'ювант або добавка, такі як барвники, ароматиження рівня нейростероїду. затори, консерванти тощо також можуть викорисВ одному специфічному варіанті здійснення товуватися за умови, що вони сумісні з активними винаходу захворювання або розлад виникає в реінгредієнтами. зультаті рецидивного періодичного зниження рівня Сполуку за винаходом найбільш зручно ввонейростероїду. дити перорально в стандартній дозованій лікарсьВ іншому специфічному варіанті здійснення кій формі, такої як таблетки або капсули, що місвинаходу захворювання або розлад виникає в ретять активний початок у кількості від близько зультаті сильного зниження рівня нейростероїду. 10мкг/кг до 10мг/кг маси тіла, переважно від У ще одному специфічному варіанті здійснен25мкг/день/кг до 1,0мг/день/кг. ня винаходу захворювання або розлад виникає в Ефект від сполук тестується на моделі оманрезультаті пов'язаного з віком зниження рівня нейливої вагітності, при якій рівень прогестерону коростероїду. ливається, і, зокрема, вплив на швидке зниження У кращому варіанті здійснення винаходу нейвиміряється, як описано, [наприклад, у публікації ростероїд являє собою прогестерон. Gallo et al. Pharmacol. Biochem. Behav. 1993, 46, У більш кращому варіанті здійснення винаходу 897-904]. нейростероїд являє собою метаболіт проРезультати гестерону. Модель ПМС у гризунів У кращому варіанті здійснення винаходу заОписана модель являє собою пов'язану зі скахворювання або розлад являє собою передменстсуванням гормонів модель ПМС у щурів, засноваруальний розлад, постнатальну депресію або дину на переважній гіпотезі про те, що дисфоричний сфоричний розлад, пов'язаний з постменопаузою. настрій переважно пов'язаний з рівнями гормонів, Винаходом також пропонується застосування, які знижуються (тобто зі "скасуванням гормонів"), у як зазначено вище, причому лікарський препарат жінок із ПМС. Попередня робота [Nature 392: 926призначений для введення у вигляді стандартної 930, 1998; J. Neurosci. 18: 5275-5284, 1998] покадози. зала, що після тритижневого періоду впливу горУ кращому варіанті здійснення винаходу станмонів скасування підвищених рівнів репродуктивдартна доза містить активний початок у кількості ного стероїду прогестерону через 24 години після від близько 10мкг/кг до 10мг/кг маси тіла, перевавидалення заповненого прогестероном імплантату жно від 25мкг/день/кг до 1,0мг/день/кг, найбільш викликає стан підвищеної тривоги і зниженого супереважно від 0,1мг/день/кг до 1,0мг/день/кг маси домного порога у самок щурів. тіла. Додатковий доказ того, що зростає рівень суУ більш кращому варіанті здійснення стандарбодиниці α4 було надано електрофізіологічними тна доза містить активний початок у кількості від даними, які демонструють вражаючу нечутливість 0,1мг/день/кг до 1,0мг/день/кг маси тіла. кліток гіпокампа до ГАМК-потенціювалього впливу В одному варіанті здійснення винаходу актибензодіазепіну (БЗД) лоразепаму (нечутливість до вація нейростероїдів викликана гормонами. БЗД характерна для рецепторів ГАМК, що місУ кращому варіанті здійснення - це прогестетять α4). рон. В іншому кращому варіанті здійснення винаДокладний опис експериментів: ходу - це метаболіти прогестерону. Тварини Відповідно до винаходу, згадані вище сполуки Самок мишей (з лабораторії Charles River) роможуть застосовуватися в якості основи сполуки змістили попарно в умовах циклу 14 годин світла і або у виді їх фармацевтично прийнятної кислотно10 годин темряви з наданням їжі та води без обадитивної солі, або у виді ангідрату або гідрату межень. Усіх тварин тестували протягом світлової такої солі. частини циркадного циклу. У самок мишей цикл Відповідно до винаходу, згадані вище сполуки тічки визначали мікроскопічним дослідженням піхабо їх фармацевтично прийнятна сіль можуть увовового змиву, як було описано раніше [Smith, дитися будь-яким придатним шляхом, наприклад, 1987], і вимірами піхвового імпедансу [Bartlewski, перорально або парентерально, і вони можуть 1999; Bartos, 1977; Koto, 1987; Koto, 1987] протябути представлені в будь-якій придатній формі для гом одного повного циклу перед тестуванням. Як 7 77403 8 суб'єктів використовували тільки самок у період мим освітленням лампами накалювання і з низьдіеструсу. кими рівнями шуму. Лабіринт складається з 2 заУведення лікарських засобів і гормонів критих відгалужень (50 10 40см) і 2 відкритих відУводили прогестерон (Р), а не 3α,5α-ΤΉΡ, тогалужень (50 10см), і його устрій докладно пому що відомо, що підвищені рівні Ρ в циркулюючій пояснюється в публікації (Pellow, 1985). Відкриті крові, такі, що виявляються під час тічки (або менвідгалуження мали невелике огородження зовні струального циклу) або після стресу [Persengiev, першої половини відкритого відгалуження, як опи1996; Barbaccia, 1993; Korneyev, 1997; Wilson, сано в публікації [Fernandes, 1996]. 1997; Elman, 1997; Valee, 2000; Purdy, 1993; Підлога всіх чотирьох відгалужень була познаKorneyev, 1993], легко перетворюються у 3α,5αчена координатними лініями через кожні 25см. У ΤΗΡ у мозку і приводять до рівнів 3α,5α-ΤΗΡ, досдень тестування кожну мишу поміщали в кімнату татніх для потенціювання ГАМК-ергічного інгібутестування на 30-40 хвилин перед тестуванням вання [Schmidt, 1994; Smith, 1987; Seiki, 1975; для пристосування до ситуацій. Під час тестування Bitran, 1995; Karavolas, 1976; Valee, 2000] і модукожну тварину тестували протягом 10 хвилин після ляції експресії субодиниці ГАМК A-R [Weiland, виходу зі стартової коробки в центрі платформи 1995]. лабіринту. Для того щоб вважати, що миша ввійшІмплантати прогестерону були виготовлені із ла в будь-яке відгалуження, миша повинна була силіконової трубки (Nalgene Co, внутрішній діаперейти лінію відкритої платформи усіма чотирма метр 1/16 дюйма зовнішній діаметр 1/8 дюйма), лапами. Тривалість часу (у сек.), проведеного у яку відрізали за розміром, що залежить від маси відкритому відгалуженні, реєстрували, починаючи тіла тварини (трубка 10мм на 100г), заповнили з часу входу у відкрите відгалуження. Зменшений кристалічним прогестероном і герметично закупочас, проведений у відкритому відгалуженні, у цірили силастиковим медичним клеєм (Dow лому вказує на більш високі рівні тривоги [Pellow, Corning). Герметично закупорені капсули витриму1985]. Інші поведінкові показники, які реєструваливали протягом ночі в розчині, що містить 1% желася, включали тривалість часу (у сек.), проведеного тин і 0,9% сольовий розчин, на водяній бані (37°С) за огородженням. Кількість часу, яку тварини пропри обережному струшуванні протягом ночі. Омаводили у відкритій частині лабіринту у відсутності нливі імплантати являють собою порожні герметиогородження, вважається більш чуттєвою до анкчно закупорені трубки тих же розмірів. Потім щурів сіолітичних засобів (тобто, засобів, що збільшують анестезували 2% галотаном (2-бром-2-хлор-1,1,1кількість часу, проведеного у відкритому відгалутрифторетаном) у кисні, і капсули імплантували женні), ніж кількість часу, проведеного у відкритопідшкірно в живіт. Видалення імплантатів через 21 му відгалуженні з огородженням [Fernandes, 1996]. день після підшкірної імплантації в ділянку живота Для виміру загальної рухової активності підрахощурів в умовах анестезії [Smith, 1998; Moran, 1998] вували загальну кількість перетинань координаттакож відбувалося в такому ж режимі галотанової них ліній. Нарешті, також підраховували триваанестезії. Було показано, що даний спосіб приволість часу (у сек.), витраченого тваринами на дить до рівнів 3α,5α-ΤΗΡ у ЦНС у високому фізіодогляд за собою. логічному діапазоні (6-12нг/г тканини гіпокампа) у Експериментатор був позбавлений інформації сполученні з підвищеними рівнями Ρ (40-50нг/мл про всі умови, і тварин тестували методом сліпої плазми, приблизно 130-160 нмоль) у циркулюючій вибірки. крові [Smith, 1998]. Статистичний аналіз Контрольним тваринам точно в такий же споДані, отримані при використанні лабіринту, сіб імплантували порожні (оманливі) силіконові аналізували за допомогою двостороннього диспекапсули. Тварин або забивали, або досліджували рсійного аналізу (ANOVA) (стан з імплантатом через 24 години після видалення імплантату (скастан після ін'єкції) з наступним ретроспективним сування Р). дисперсійним аналізом і ретроспективним визнаУдень дослідження тваринам вводили шляхом ченням t-критерію. Як показано в таблиці 1, миші ін'єкції або ТНІР (1,25мг/кг), або сольовий розчин і PWD (які зазнали скасування прогестерону) проїх досліджували через 40 хвилин після ін'єкції. водили суттєво менше часу у відкритому відгалуПоведінковий тест женні, ніж контрольні тварини. Мишей тестували в лабіринті, піднятому на 50см над підлогою, у приміщенні з низьким непряТаблиця 1 Таблиця середніх величин часу, проведеного у відкритому відгалуженні Ефект: стать/стан Виключення ряду: stvw PWD+M самки/самці D Дані підрахунку (F) С (контрольні) (F) PWD (F) C THIP(1,25) (F) PWD THIP (1,25) 14 13 3 3 Середня величина Стандартне відхилення 79,629 20,968 38,377 157,023 59,231 24,292 48,816 36,838 Стандартна помилка 15,830 6,737 28,184 21.268 9 77403 10 Крім того, ТНІР у дозі 1,25мг/кг цілком усував ефект PWD. Аналогічні результати були отримані, коли підраховували кількість перетинань (таблиця 2). Таблиця 2 Таблиця середніх величин перетинань координатних ліній Ефект: стать/стан Виключення ряду: stvw PWD+M самки/самці D (F)C (F) PWD (F) С ТНІР (1,25) (F) PWD THIP (1,25) Дані підрахунку 14 13 3 3 Середня величина 43,643 33,308 52,000 83,333 Стандартне відхилення Стандартна помилка 18,270 4,883 18,531 5,140 18,028 10,408 16,166 9,333 Визначали час, проведений зовні огорожі (таблиця 3) Таблиця 3 Таблиця середніх величин часу, проведеного зовні огорожі Ефект: стать/стан Виключення ряду: stvw PWD+M самки/самці D (F)C (F) PWD (F) С ТНІР (1,25) (F) PWD THIP (1,25) Дані підрахунку 14 13 3 3 Середня величина Стандартне відхилення Стандартна помилка 6,795 7,041 1,882 2,077 4,699 1,303 10,060 17,424 10,060 29,503 6,699 3,868 Як видно з результатів експериментальних моделей ТНІР був здатний цілком протидіяти PWD. Комп’ютерна верстка Т.Чепелева Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601