Гідрохлорид 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5н-імідазо[1,2-a] азепін-3-їл)фенолу, що має протипухлинні властивості

Реферат: Гідрохлорид 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5H-імідазо[1,2-а]азепін-3-їл)фенолу N HCl N CH3 CH3 CH3 OH H3C H3C CH3 що має протипухлинні властивості. , АЗЕПІН-3 UA 116314 U (12) UA 116314 U UA 116314 U Корисна модель належить до органічної, фармацевтичної хімії та медицини, а саме до одержання біологічно активного гідрохлориду 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5Hімідазо[1,2-а]азепін-3-їл)фенолу, що має формулу: N HCl N CH3 CH3 CH3 OH H3C H3C 5 10 15 CH3 . Зазначена сполука проявляє протипухлинну активність та може бути використана при лікуванні меланоми. Перелік сучасних фармацевтичних субстанцій, що призводить до досягнення паліативного ефекту та зменшення пухлини і відповідно до клінічної ремісії, досить широкий і налічує понад 40 протипухлинних препаратів, активних при різних формах злоякісних утворень. Відомі протипухлинні препарати мають різний механізм дії і застосовуються у відповідних схемах лікування. При цьому виражений клінічний ефект складає від 20 % до 80 %. В окремих випадках ремісія складає до 2 років, а понад 10 % хворих мають ремісію понад 3 роки. Широке застосування набули детіцен, метатрексат, вінкристин, адріабластин. Лікарські засоби, що перелічені, мають необхідні лікувальні властивості, але проявляють значні побічні ефекти, що супроводжується розвитком патологічних процесів в організмі. Так, лікарський засіб детіцен є похідним імідазолу, а саме: 5-диметиламіноазо-3Н-імідазол4-карбоксамідом формули: NH2 N O N N N N CH3 H3C 20 25 30 35 . Він виявляє активність проти меланоми, лімфогранулематозу, саркоми матки, раку легенів та щитовидної залози. [1] Застосування детіцену може супроводжуватися розладами травної системи, а саме: зниженням апетиту, стоматитом, тошнотою, блювотою, діареєю. В окремих випадках він викликає гепатонекроз, що обумовлений оклюзією внутрішньопечінкових вен; можливі, навіть, летальні випадки. Крім вищезазначених побічних проявів, застосування препарату може викликати анемію, гранулоцитопенію, тромбоцитопенію, лейкопенію, головний біль, порушення зору, судороги, астенію тощо. При тривалому застосуванні збільшується ризик виникнення новоутворень. Цей препарат стає активним після метаболізму в печінці внаслідок вивільнення діазометану, який ковалентно зв'язується з SH-групами біомолекул. За рахунок утворення комплексів з карбонієвими йонами він блокує синтез РНК та ДНК, що, в свою чергу, призводить до зупинки мітозу клітин. В основу корисної моделі поставлена задача пошуку нової речовини, що проявляє високу протипухлинну активність - здатність пригнічувати ріст клітин меланоми LOX IMVI, MALME-3M, М14б MDA-MB-435, SK-MEL-28, SK-MeL-5, UACC-257 та UACC-62. Поставлена задача вирішується тим, що синтез нової хімічної речовини - гідрохлориду 2,6дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5H-імідазо[1,2-а]азепін-3-їл)фенолу. Заявлену сполуку одержують з високими виходами шляхом конденсації 7-метокси-3,4,5,6тетрагідро-2Н-азепіну 1 [2] з гідрохлоридом α-аміно-(3,5-дитрет-бутил-4-гідроксифеніл)ацетофенону 2 [3] та подальшої циклізації проміжної солі 3 кип'ятінням останньої в водному розчині (схема): 1 UA 116314 U Схема HCl OMe N + H3C O O CH3 H2N CH3 H N CH3 CH3 N OH HCl OH H3C H3C CH3 CH3 CH3 CH3 3 2 1 CH3 HCl N N CH3 CH3 CH3 OH H3C H3C CH3 4 5 10 15 20 25 30 35 Приклади конкретного виконання. Приклад 1. Гідрохлорид 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-гстрагідро-5H-імідазо[1,2-а]азепін-3їл)фенолу: Суміш 6.0 г (0,02 моля) гідрохлориду α-аміно-(3,5-дитретбутил-4-гідроксифеніл)ацетофенону та 6.0 мл 7-метокси-3,4,5,6-тетрагідро-2Н-азепіну ретельно перемішують та витримують 24 години при температурі 20 °C. Після цього реакційну суміш розтирають з етером та відфільтровують. Осад, що утворився без додаткового очищення, розчиняють в 100 мл води, додають 3 мл концентрованої хлоридної кислоти і кип'ятять із зворотним холодильником протягом 2 годин. Після чого суміш упарюють досуха і кристалізують із пропанолу-2. Вихід 5.58 г (74 %), т.пл.=211-2 °C. Знайдено, %: N=7.31 Сl=9.59 C22H33ClN2O. Вирахувано, %: N=7.43 Сl=9.42. Спектр ПМР (ДМСО-d6, ТМС): 1.44 (м, 18Н, 2С(СН3)3), 1.85 (м, 4Н, СН2СН2), 2.00 (м, 2Н, СН2), 3.33 (м, 2H, 7-СН2), 4.20 (м, 2Н, 5-СН2), 7.09 (с, 2Н, С6Н2), 7.13 (с, 1Н, ОН), 7.30 (с, 2Н, 2СН), 15.9 (уш.с, 1Н, НСl). Приклад 2. Для визначення протипухлинної активності гідрохлориду 2,6-дитретбутил-4(6,7,8,9-тетрагідро-5H-імідазо[1,2-а]азепін-3-їл)фенолу дослідження проведено in vitro на лініях -5 ракових клітин меланоми при дії речовини в концентрації 10 моль/л за стандартною процедурою [4] оцінки мітотичної активності нових потенційних біологічно активних сполук методом флуоресцентного зафарбування (барвник - сульфородамін Б), виконаних у Національному інституті раку США (National Cancer Institute of Health, USA) в рамках Development Therapeutic Program. Результат проведених досліджень виражали у відсотках росту клітин раку у порівнянні з контролем - 5-флуорурацилом. Наведені у таблиці значення показують на скільки досліджувана сполука є більш ефективною у пригніченні росту ракових клітин у порівнянні з 5-фторурацилом. Визначення проводили високочутливим флюорометричним методом, кількісно оцінюючи інтенсивність кольору флуоресцентного випромінювання (барвник - сульфородамін Б) через 48 год. опромінення клітини зі сполукою, що тестується. Результат проведених досліджень виражали у відсотках росту клітин раку до контролю. Використана система відбору та вивчення сполук з потенційною протипухлинною активністю in vitro основана на визначенні відсотку росту клітин пухлини (PG) під впливом тестуємої сполуки, який обчислюється за однією із наступних формул: Якщо (середня ODтест - середня ODtzero) > 0, тоді PG=100 × (середнє ODtest - середнє ODtzero) / (середнє ODctrl - середнє ODtzero); Якщо (середнє ODtest - середнє ODtzero) < 0, тоді PG=100 × (середнє ODtest - середнє ODtzero) / середнє ODtzero де: 2 UA 116314 U 5 10 середнє ODtzero = середня величина оптичних вимірювань густини SRB-похідних кольорів безпосередньо перед дією на клітини тестованої сполуки; середнє ODtest = середня величина оптичних вимірювань густини SRB-похідних кольорів після 48 год. опромінення клітини тестованої сполуки; середнє ODctrl = середня величина оптичних вимірювань густини SRB-похідних кольорів після 48 год. без будь-якої дії на клітини тестованої сполуки. В умовах експерименту заявлений гідрохлорид 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5Hімідазо [1,2-а]азепін-3-їл)фенолу виявив здатність пригнічувати ріст ракових клітин меланоми у -5 концентрації 10 моль/л: LOX IMVI, MALME-3M, М14, MDA-MB-435, SK-MEL-28, SK-MEL-5, UACC-257 та UACC-62. Таблиця Протипухлинна активність гідрохлориду 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5H-імідазо [1,2а]азепін-3-їл)фенолу in vitro на лініях ракових клітин меланоми при дії речовин в концентрації -5 10 моль/л Лінії ракових клітин LOX IMVI MALME-3M М14 MDA-MB-435 SK-MEL-28 SK-MEL-5 UACC-257 UACC-62 Меланома % росту 41.44 23.68 51.06 34.55 80.35 -84.60 -4.34 46.95 -5 15 20 25 В умовах експерименту заявлена сполука у концентрації 10 моль/л виявила здатність пригнічувати ріст клітин всіх досліджуваних видів меланоми. Але найбільш ефективною вона є по відношенню до клітин меланоми SK-MeL-5 (значення складає - 84,60 %). Від'ємні значення свідчать не лише про пригнічення росту і поділу клітин, а й про їх знищення. Таким чином, запропонована нова біологічно активна сполука, яка може бути потенційним протипухлинним засобом для лікування меланоми. Джерела інформації: 1. Serrone L, Zeuli M, Sega F M et al: Dacarbazine-bazed chemotherapy for metastatic melanoma: Thirty year experience overview. J Exp Clin Cancer Res 19: 21-34, 2000. 2. Граник В.Г., Жидкова A.M., Курятов Н.С. и др. Ацетали лактамов. VII. Исследование алкилирования N-метиллактамов и лактимных эфиров диметилсульфатом//ХГС - 1973. - № 11. - С. 1532-1535. 3. Isomura, Yasuo; Sakamoto, Shuichi; Ito, Noriki; Homma, Hiroshige; Abe, Tetsushi; Kubo, Kazuo Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 1984, vol.32, # 1 p. 152-165. 4. Beverly A. Teicher, Paul A. Andrews. Anticancer drug development guide: preclinical screening, clinical. - Medical. - 2004. - V. 1. - 450 p. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 30 Гідрохлорид 2,6-дитретбутил-4-(6,7,8,9-тетрагідро-5H-імідазо[1,2-а]азепін-3-їл) фенолу N HCl N CH3 CH3 CH3 OH H3C H3C CH3 , 3 UA 116314 U що має протипухлинні властивості. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4