Модифікований галотанін з протимікробними властивостями

Реферат: Модифікований галотанін з протимікробними властивостями отриманий шляхом ацилування бурштиновим ангідридом його структури, при співвідношенні галотанін:бурштиновий ангідрид 1:4. UA 118041 U (12) UA 118041 U UA 118041 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до біотехнології та фармацевтичної галузі, стосується похідних сукцинільованого галотаніну, що проявляє антибактеріальні властивості та може бути використаний для розширення спектру антибактеріальних засобів шляхом модифікації для подальшого використання при розробці фармацевтичних препаратів. Пошук та розробка протимікробних лікарських засобів залишається актуальною задачею сучасної медицини та фармації. При цьому ефективність існуючих на фармацевтичному ринку антибактеріальних засобів знижується пропорційно зростанню обсягів їх використання, що зумовлено поширенням резистентних клінічних. Нами запропоновано речовину з антибактеріальними властивостями - сукцинільований галотанін (СГ). Відомий спосіб синтезу фосфорильованого галотаніну для обробки шкіри та слизових оболонок для косметології та фармації. Модифікований галотанін має помірні антибактеріальні властивості та ефект його пов'язаний з вивільненням галотаніну в шкірі чи слизових [Заявка на Патент США US 2008/0095866 А1, від 24.04.2008 найближчий аналог]. Недоліком найближчого аналога є використання складного та екологічно небезпечного синтезу фосфорильованих похідних з токсичних хлорпохідних фосфорної кислоти. Окрім того, отримане похідне погано розчинялося у воді, нестійке до окислення, а антибактеріальний ефект проявлявся виключно у високих дозах, які перевищували 1 %. В основу корисної моделі поставлена задача модифікувати похідні галотаніну сукцинільований галотанін (СГ). Поставлена задача вирішується тим, що модифікований галотанін з протимікробними властивостями, згідно з корисною моделлю, модифікацію галотаніну проводять шляхом ацилування бурштиновим ангідридом його структури при співвідношенні галотанін:бурштиновий ангідрид 1:4. Нативний галотанін (Фіг. 1- структура галотаніну) не проявляв антибактеріальну активність по відношенню до референтних штамів мікроорганізмів, патогенних для людини. Модифікований галотанін із співвідношенням бурштиновий ангідрид: галотанін менше 1:1 не проявляв антибактеріальної активності, а більше за 1:4 бурштиновий ангідрид не розчинявся у розчині, що свідчило про відсутність доступних акцепторних груп для атаки бурштиновим ангідридом. У зв'язку з тим, що ацилуванню піддається тільки частина фенольних гідроксилів, спостерігається утворення великої кількості комбінаторних похідних молекули галотаніну більше 10 тис. речовин. Вказані речовини не тільки взаємодіють з мішенню, але й здатні утворювати супрамолекулярні комплекси один з одним з індукцією порино-подібних структур у мембрані мікроскопічних грибів. Така реакція комплексоутворення йде тільки у випадку, коли заміщеними є тільки частина доступних для модифікації фенольних груп. Таке комбінаторне похідне проявляє активність у значно менших концентраціях, починаючи від 0,01 % у розчині. Перевищення 0,05 % у розчині недоцільно у зв'язку з реакцією модифікованого таніну з компонентами поживного середовища та шкіри (при місцевому застосуванні). Корисна модель пропонує високо розчинний СГ (Фіг. 2- Приблизна структура комбінаторного 4-х заміщеного похідного сукцинільованого галотаніну, що проявляє антибактеріальну активність) зі ступенем хімічної модифікації 1:4 з антибактеріальною властивістю. Отримані засоби можуть бути використані в фармації для розробки високоефективних протимікробних засобів, які можуть використовуватись при лікуванні гнійно-запальних захворювань. Приклад 1. Синтез СГ здійснюється таким чином: 1,0 г галотаніну розчиняють у 40 мл дистильованої води (t=70-80 °C), додають 1,0-4,0 бурштинового ангідриду, розчин перемішують до повного розчинення останнього. При охолодженні до +5С випадає осадок СГ, який перекристалізовували аналогічним чином з дистильованої води. Приклад 2. Дослідження антибактеріальних властивостей отриманого комплексу, здійснювалося методом серійних розведень. Також вивчали протимікробні властивості МГ при модифікації 1:1та 1:2. Дані, наведені у прикладах та таблиці. В дослід брали стандартні штами Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Bacillus subtilis ATCC 6633, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, які регламентовані ВОЗ для вивчення протимікробної дії препаратів та клінічні штами: Staphylococcus aureus 1/239-1, Escherichia coli 1/254-1, Pseudomonas aeruginosa 2/116-1. Для визначення антибактеріальної дії дослідної речовини мікроорганізми вирощували на поживному агарі при t=37C°. Термін культивування мікроорганізмів складав 24 години. Мінімальна інгібуюча концентрація (МІК) встановлювалась за найменшою концентрацією досліджуваної речовини, яка пригнічувала видимий ріст культури. Для визначення мінімальної 1 UA 118041 U бактерицидної концентрації (МБЦК) виконували дозовані висіви на тверде поживне середовище (агар Мюллер-Хінтона) культуральної рідини з усіх пробірок, у яких не спостерігали росту мікроорганізму. За МБЦК вважали найнижчу концентрацію, яка викликала загибель не менше 99,9 % бактерій. Облік результатів проводили через 24-48 годин. Дані наведені в таблиці 1. 5 Таблиця 1 Антибактеріальна активність похідного сукцинільованого галотаніну Мікроорганізми S. aurens А ТСС 25923 Е. соlі АТСС 25922 P. vulgaris ATCC 4636 P. aeruginosa ATCC 27853 В. subtilis ATCC 6633 S. aureus 1/239-1 E. coli 1/254-1 P.aeruginosa 2/116-1 Сукциніл-галотанін (1:1) MIK МБцК 62,5 125,0 31,25 62,5 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 125,0 250,0 250,0 500,0 250,0 500,0 Мкг/мл Сукциніл-галотанін (1:2) МІК МБцК 31,25 62,5 31,25 62,5 125,0 250,0 125,0 250,0 62,5 125,0 125,0 250,0 125,0 250,0 125,0 250,0 Сукциніл-галотанін (1:4) МІК МБцК 15,6 31,25 15,6 31,25 62,5 125,0 62,5 125,0 31,25 62,5 62,5 125,0 62,5 125,0 62,5 125,0 В результаті проведенного дослідження антимікробної активності було встановлено, що активним за протимікробними властивостями виявились частково сукцинільований галотанін в модифікації 1:4. 10 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 Модифікований галотанін з протимікробними властивостями, який відрізняється тим, що модифікацію галотаніну проводять шляхом ацилування бурштиновим ангідридом його структури, при співвідношенні галотанін:бурштиновий ангідрид 1:4. 2 UA 118041 U 3 UA 118041 U Комп’ютерна верстка Г. Паяльніков Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4