Спосіб одержання лікувально-профілактичної композиції

Реферат: Винахід належить до галузі біотехнології, а точніше до засобів отримання з морських молюсків композиції лікувально-профілактичної дії, яка може бути використана в геронтологічній практиці для профілактики початкових форм церебрального атеросклерозу у пацієнтів похилого віку. Спосіб одержання композиції полягає в одержанні кислотного гідролізату із м'яса рапани, а лужного – мідії, отримані лужний і кислотний гідролізати об'єднують в об'ємному співвідношенні 10:1, при постійному перемішуванні доводять рН до 6,4-6,6 і суміш гідролізатів концентрують 2 упарюванням під вакуумом 0,65 кг·с/см при температурі 95-97 °C до 20-25% по сухій речовині. UA 102291 C2 (12) UA 102291 C2 UA 102291 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Запропонований винахід належить до галузі біотехнології, а точніше до засобів отримання з морських молюсків харчових домішок лікувально-профілактичної дії, які можуть бути використані в геронтологічній практиці для профілактики початкових форм церебрального атеросклерозу у пацієнтів похилого віку. Відомо, що однією з основних причин атеросклерозу є порушення природної збалансованості складових компонентів їжі, викликаної порушенням балансу мікроелементів внаслідок виснаження ґрунтів. У тварин і риби, що вирощуються з використанням штучних кормів, також виникає порушення балансу амінокислот та ліпідів, зокрема співвідношення омега 3 і омега 6 жирних кислот. Населення країн, в яких традиційно широко використовують у харчуванні морепродукти (Японія, Франція), має нижчий рівень захворювань атеросклерозом, ніж в країнах з іншими традиціями в харчуванні. Відомо використання БАД морського генезу для профілактики і лікування атеросклерозу і в Україні [1, 2, 3]. Основним недоліком зазначених БАД є те, що вони виготовляються з одного виду морських організмів - мідій, що не дозволяє отримати препарат, збалансований за основними компонентами, наприклад, амінокислотами. Є відомим Спосіб отримання поживної основи мікробіологічних середовищ (див. Пат. 31080 U UA. МПК C12N1/20), в якому для приготування мікробіологічних поживних середовищ змішують гідролізати з мідійної і рибної сировини [4]. Недоліком є те, що спосіб був розроблений для задач технічної мікробіології, що пов'язані з приготуванням поживних середовищ для мікроорганізмів, тому він є неприйнятним для отримання харчових продуктів. Крім того, сировина, що використовується (чорноморська риба - кілька і хамса, а також відходи рибопереробки), містить до 14 % і більше жиру, що не дозволяє отримати дієтичний харчовий продукт без доробки технологічного процесу, пов'язаного із зменшенням кількості (або видаленням) жиру в сировині. Відомо, що риб'ячий жир швидко окислюється і псує смакові якості продукту без спеціальної стабілізації окислення. В основу винаходу Спосіб одержання лікувально-профілактичної композиції «Церебромід» поставлена задача шляхом використання вітчизняної поновлюваної сировини забезпечити створення композиції, що збалансована по амінокислотах та інших компонентах. Поставлена задача досягається тим, що в способі отримання лікувально-профілактичної композиції «Церебромід», що включає отримання кислотного гідролізату і гідролізату лужного з подрібненої мідії, у якості сировини для кислотного гідролізату використовують м'ясо рапани. Отримані лужний і кислотний гідролізати об'єднують в об'ємному співвідношенні 10:1 і при постійному перемішуванні доводять рН до 6,4-6,6. При створенні лікувально-профілактичної композиції «Церебромід», що заявляється, в першу чергу брали до уваги наявність в Україні стійких сировинних ресурсів. Як сировинні об'єкти були вибрані культивовані чорноморські молюски мідії та рапани, видобуток яких у даний час не обмежують. Оскільки технологія переробки рапани передбачає вилучення м'яса з раковин, то для одержання гідролізату з рапани можна застосувати кислотний гідроліз. Гідролізат мідійний є продуктом м'якого лужного гідролізу культивованих мідій, яких попередньо подрібнюють. При цьому автори виходили з того, що, з одного боку, процес відділення м'яса від раковини значно підвищує собівартість продукту, а, з іншого боку, подрібнена стулка мідій практично не вступає в реакцію з гідроксидом натрію. При об'єднанні зазначених гідролізатів і їх взаємної нейтралізації значно (до 3-4%) знижується вміст кухонної солі NaCl, яка утворюється в результаті нейтралізації продукту в готовому препараті. Авторами експериментально встановлено, що для досягнення поставленої задачі необхідно, щоб: - для гідролізу використовувалися чорноморські молюски (мідії та рапани); - композиція складалася з лужного гідролізату з мідій і кислотного, отриманого з рапани; - лужний і кислотний гідролізат об'єднувалися в об'ємному співвідношенні 10:1. Спосіб пояснюється ілюстраціями. На фіг. 1 представлені порівняльні дані амінокислотного скора мідійного лужного гідролізату («Аміномід») і композиції «Церебромід» по відношенню до еталонних показників для яєчного білка; на фіг. 2 - порівняльні дані амінокислотного скора у вихідній сировині і композиції «Церебромід» по відношенню до еталонних показників для яєчного білка. Приклад одержання композиції «ЦЕРЕБРОМІД». 217 кг мороженої мідії в стулці подрібнювали, наприклад, на молотковому подрібнювачі. Фарш засипали в реактор з нагрітою водою в кількості 200 л. Після досягнення сумішшю температури 80 °C у реактор додавали 2,23 кг лугу, розчиненого в 20 л води, до кінцевої концентрації в об'ємі 0,5%. Гідроліз проводили протягом 3 год. при температурі 80 °C. Після закінчення гідролізу рідку частину відокремлювали від фрагментів стулок раковин і 1 UA 102291 C2 5 10 15 20 25 відфільтровували через поліпропіленовий фільтр з діаметром пор 20 мкм для відділення механічних домішок. Об'єм гідролізату 330 л. М'ясо рапани заморожене подрібнювали, пропускаючи через електром'ясорубку. Отриманий фарш масою 21,3 кг переносили у реактор, додавали 15 л 6%-го розчину соляної кислоти і нагрівали до 80 °C і при цій температурі, при постійному перемішуванні проводили гідроліз протягом 20 год. Отриманий на першій стадії гідролізат об'ємом 10 л відокремлювали від густого негідролізованого залишку, який повторно піддавали гідролізу в 8%-й соляній кислоті при температурі кипіння суміші протягом 24 год. Отриманий гідролізат об'ємом 20 л поєднували з гідролізатом, отриманим на першій стадії гідролізу, і охолоджували. Лужний і кислотний гідролізати об'єднували в об'ємному співвідношенні 10:1 і доводили рН суміші до 6,4-6,6, після 2 чого сумарну суміш гідролізатів концентрували упарюванням під вакуумом 0,65 кг·с/см при температурі 95-97 °C до 20-25% по сухій речовині, що визначається рефрактометричним способом. Об'єм отриманого продукту становив 65 л. Після відділення осаду, що утворився при упарюванні, об'єм кінцевого продукту склав 45 л. Отримана композиція мала специфічний для гідролізатів з морепродуктів смак і запах, а також знижений до 3-4% вміст кухонної солі NaCl. Лікувально-профілактичну композицію «ЦЕРЕБРОМІД», що заявлена, створювали і випробовували в рамках інноваційного проекту «Впровадження нової технології виробництва біопрепарату з морської сировини для профілактики і лікування церебрального атеросклерозу у людей похилого віку» в ІнБПМ ім. О. О. Ковалевського НАН України, НВФ "Мерікон" (м. Севастополь) і в Інституті геронтології АМН України (м. Київ). Дослідження показали, що діючий початок отриманої лікувально-профілактичної композиції представлений повним набором амінокислот, у тому числі всіма ессенціальними (незамінними). Порівняльні дані амінокислотного скора мідійного лужного гідролізату («Аміномід») і композиції «Церебромід» по відношенню до еталонних показників для яєчного білка показали, що «Церебромід» досить добре збалансований за амінокислотним скором і перевищує еталонні показники для яєчного білка (див. фіг. 1 і фіг. 2). Скори вихідних гідролізатів також вказують на різний вміст окремих амінокислот, що дозволяє скласти необхідний баланс, що й було реалізовано в композиції «Церебромід» (див. фіг. 2, Таблиця 1). Таблиця 1 Вміст амінокислот в досліджених зразках сировини, напівфабрикатах і композиції «Церебромід» (мг на 100 г) Амінокислоти Лізин Гістидин Аргінін Орнітин Аспарагінова Треонін Серін Глутамінова Пролін Гліцин Аланін Цистин Валін Метіонін Ізолейцин Лейцин Тирозин Фенілаланін Таурин Сума 1 36,50 12,11 62,14 2,02 171,98 24,06 39,18 106,17 31,94 93,01 77,68 6,25 21,74 19,96 8,90 37,31 30,41 28,72 13,02 827,08 Досліджені зразки 3 4 5,48 16,43 0,81 3,36 0,31 0,26 2,91 4,04 15,05 14,33 3,94 16,41 8,23 1,47 12,25 4,08 3,35 2,40 18,97 18,23 9,78 15,82 0,60 1,25 2,96 15,81 2,00 7,48 3,20 11,57 4,35 18,66 4,38 17,64 1,96 7,83 3,32 6,51 106,95 185,17 2 20,81 6,46 1,24 0,49 19,78 0,98 0,59 51,45 9,58 15,18 1,73 0,83 3,56 2,00 1,07 1,24 19,71 2,74 4,69 172,45 5 43,25 8,07 31,85 7,28 90,29 28,22 48,19 111,48 31,15 94,64 82,86 1,13 23,72 16,96 16,02 49,75 30,29 25,06 14,06 757,12 6 45,63 2,69 2,59 6,47 91,72 39,38 60,73 87,79 23,96 122,02 109,33 2,50 45,46 13,30 32,04 41,46 27,98 22,19 27,34 812,52 30 Примітка: Досліджені зразки: 1 - М'ясо рапани; 2 - Гонади рапани; 3 - Гідролізат мідій неупарений; 4 - «Церебромід» до упарювання; 5 - «Церебромід» упарений; 6 - «Аміномід». 2 UA 102291 C2 5 У складі композиції «Церебромід» ідентифіковано 38 жирних кислот, з них 21 насичені і 17 ненасичені, в тому числі ті, що входять до складу груп 3 і 6 жирних кислот. Співвідношення насичених і не насичених жирних кислот становить 1,1:1. Співвідношення 6 до 3 становить 1:1,6. Таблиця 2 Вміст жирних кислот у вихідній сировині і композиції «Церебромід» (у % від загальної кількості ліпідів) № пп. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. Назва кислоти: Масляна Капронова Каприлова Пеларгонова Капрінова Ундецилова Ізолауринова Лауринова Лауроолеінова Трідеканова Ізоміристинова Міристинова Ейкозатрієнова Пентадеканова Ізопальмітинова Пентадеценова Пальмітинова Пальмітолеінова Гексадекадієнова Маргаринова Гептадеценова Стеаринова Олеїнова Лінолева Ліноленова Арахінова Гондова Ейкозадієнова Генейкозанова Ейкозатрієнова Арахідонова Бегенова Докозатрієнова Ерукова Трікозанова Докозатетраєнова Докозапентаєнова Докозагексаєнова Насичені-21 Ненасичені-17 Досліджені зразки Рапана Церебромід м'ясо гонади 0,01 0,28 0,20 0,01 0,28 0,06 0,37 0,02 0,90 0,04 0,92 0,13 0,02 0,37 0,06 0,03 1,05 0,18 0,11 7,21 3,99 0,08 0,05 1,77 0,09 0,05 1,13 0,07 4,65 6,01 3,94 0,22 0,93 0,28 0,93 1,15 0,53 0,47 25,53 7,25 1,26 2,30 1,89 6,21 3,48 1,69 2,64 2,18 7,56 2,68 0,55 0,06 3,49 7,49 1,57 17,10 2,10 0,71 0,58 0,89 11,92 9,13 7,33 0,90 0,87 4,90 1,20 5,67 1,15 0,32 0,08 8,38 51,87 46,67 0,80 0,52 0,10 10,06 2,99 0,51 0,26 57,02 39,90 0,35 15,96 6,79 0,96 1,37 1,73 3,54 4,70 1,59 1,54 1,46 1,63 7,99 0,50 0,79 6,49 11,09 5,80 1,36 0,26 0,51 8,65 44,82 49,72 Мідія 0,15 0,04 0,2 0,06 0,41 0,08 0,23 2,69 0,94 0,75 0,58 33,84 6,56 1,7 1,78 0,8 5,11 4,35 5,27 3,05 1,22 4,5 2,33 0,6 8,23 5,22 1,33 0,37 0,82 6,37 52,88 46,70 У таблиці 2 наведені дані по вмісту жирних кислот у вихідній сировині і композиції «Церебромід» (у % від загальної кількості ліпідів). До складу композиції входить більш ніж 30 3 UA 102291 C2 5 10 15 мікро- та макроелементів (Са, К, Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Co, J, Ni та ін.), що також сприяє нормалізації обміну і відновленню порушених функцій організму. Джерела інформації: 1. Пат. 10463 A UA, МПК A23L1/333 Радіозахисний біопрепарат із молюсків "Біполан" / Губанова А. Г., Симонова Л. І., Яшина Л. О., Абрамова Л. П., Пушкар С. М., Левітон Ж. Б., Бітютська О. С, Поліщук Л. Я., Христоферзен Г. С., Фещенко Ю. І. (UA); заявник Губанова А. Г., Симонова Л. І., Яшина Л .О., Абрамова Л. П., Пушкар С. М., Левітон Ж. Б., Бітютська О. С, Поліщук Л. Я., Христоферзен Г. С, Фещенко Ю. І. (UA); - № 95031072; заявл. 07.03.1995; опубл. 25.12.1996. 2. Ерохин В. Е. Биологически активные вещества черноморских мидий. 1. Некоторые данные о химическом составе. // Морські біотехнічні системи. Зб. наукових статей. НДЦ ЗС України «Державний океанаріум», вип. 3, с. 37 - 46., 2005 г. 3. Ерохин В. Ε. Биологически активные вещества черноморских мидий. 2. Продукты комплексной переработки мидий. // Морські биотехнічні системи. 36. наукових статей. НДЦ ЗС України «Державний океанаріум», вип. 3, с. 47 - 69, 2005 г.). 4. Пат. 31080 U UA, МПК C12N1/20 Спосіб отримання поживної основи мікробіологічних середовищ / Рябушко В. І., Голуб М. О., Єрохін В. Є., Пархоменко Н. А., Кисельова Т. Ф. (UA); заявник Інститут біології південних морів ім О. О. Ковалевського НАН України, ТОВ "МЕРІКОН" (UA); - № u200713089; заявл. 26.11.2007; опубл. 25.03.2008, Бюл. № 6. 20 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 25 Спосіб одержання лікувально-профілактичної композиції з чорноморських молюсків, що включає отримання кислотного гідролізату і лужного гідролізату з подрібненої мідії та їх об'єднання, який відрізняється тим, що як сировину для кислотного гідролізату використовують м'ясо рапани, а отримані лужний і кислотний гідролізати об'єднують в об'ємному співвідношенні 10:1, при постійному перемішуванні доводять рН до 6,4-6,6 і суміш 2 гідролізатів концентрують упарюванням під вакуумом 0,65 кг·с/см при температурі 95-97 °C до 20-25 % по сухій речовині. 4 UA 102291 C2 Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5